Este documento describe un estudio sobre la producción de pigmentos de la cianobacteria Arthrospira maxima cultivada en fotobiorreactores. Se compararon dos tipos de fotobiorreactores y diferentes métodos de extracción de pigmentos. Los resultados mostraron que un fotobiorreactor helicoidal produjo mayor cantidad de pigmentos liposolubles mientras que un fotobiorreactor cilíndrico produjo más ficobiliproteínas cuando se cosechó en la fase estacionaria usando extracción con regulador de fosfato y hielo seco.
Producción de pigmentos procedentes de Arthrospira maxima cultivada en fotobiorreactores
1. “AÑO DE LA UNIVERSALIZACIÓN DE LA SALUD”
CURSO: Biotecnología
DOCENTE: Dr. Hebert Soto Gonzales
ESTUDIANTE: Karesly Rojas Talavera
CICLO: VII
“PRODUCCIÓN DE PIGMENTOS PROCEDENTES
DE ARTHROSPIRA MÁXIMA CULTIVADA EN
FOTOBIORREACTORES”
Lolymar Romer, Miguel Guevara Bladimir Gómez, Bertha Arredondo-Vega,
Roraisy Cortez, Berenice Licet.
26 de Mayo del 2017
ILO, 24 DE JULIO DEL 2020.
2. Materiales
Métodos 2
Métodos 1
PASO 1 Determinación del contenido de
pigmentos.-
Se determinó Clorofila a, â-
caroteno y zeaxantina.
- 20 mg de biomasa húmeda
- papel de fibra de vidrio Advantec GC50 (1,2 μm)
- Equipo Millipore
- 10 mL de acetona al 90%
- Centrifugadora (3500 r.p.m., 5 min)
- Secador con nitrógeno gaseoso y se mantuvo a -20
ºC.
- Agilent Hypersil MOS (4,6 x 100 mm, 5 μm de tamaño
de partícula)
- Cromatógrafo (HPLC)
- Detector de arreglo de diodos.
Extracción de pigmentos
ficobiliproteinicos
1er Método -
Extracción
Regulador de Fosfatos y
Enzima.
2do Método -
Extracción con
Solución Alcalina
- 20 mg de cianobacteria
- 8 ml de CaCl2
- 4 mL de solu-ción alcalina
(pH = 10; NaHCO3-
Na2CO3)
- 4 mL de C6H14
- Filtrador
3er Método -
Extracción con
regulador de
fosfato tratado
con hielo seco.
- 20 mg de la biomasa de la
cianobacteria.
- 4mL de regulador de
fosfato
- Congelador con hielo
seco.
- Centrifugadora (3500
r.p.m., 5 min)
-Medición de Absorbancia.
4to Método -
Extracción con
agua a baja
temperatura.
- Triturador Vortex
- 20 mg de la biomasa de la
cianobacteria.
- 4 mL agua destilada fría
(4°C)
• Llamada Spirulina
• Factores: T, Tasa de
Aireación, CO2, Fuentes de
C, P y N, y la Fase de
Crecimiento.
ARTHOSPIRINA
MAXIMA
• Usadas en la
biorremediación de
ambientes contaminados.
• Productora de Energía.
• Fertilizantes
• Metabolitos secundarios de
interés farmacológicos.
• Alimento para el consumo
humano y animal.
Aplicación
• Solventes Orgánicos
(acetona, metanol, etanol,
etc)
• Soluciones Salinas (Nitrato
de Na, Cloruro de Ca, etc)
ANTECEDES
(métodos de
Extracción)
• Sistemas abiertos: Cultivos
expuestos a la atmosfera.
• Sistema cerrado:
Comúnmente denominados
fotobiorreactores. (mejor
rendimiento)
Método de
Cultivo
PROCEDIMIENTO
3. Materiales
Métodos
PASO 2 Análisis Estadísticos
Los resulta-dos de pigmentos
liposolubles (clorofila a, β-caroteno y
zeaxantina) se analizaron.
ANOVA (fases de crecimeinto y sistema de
cultivo)Detector de arreglo de diodos.
Los contenidos de ficobiliproteínas
se analizaron.
ANOVA (fases de
crecimiento,sistema de
cultivo y metodologíade
extracción
Se constrastaron
las diferencias
significativas:
Método de
comparaciones
múltiples de Scheffé.
Statgraphics
Los valores de pH
registrados en los
cultivos de A. maxima en
ambos fotobiorreactores
variaron entre 9,81 y
10,32 unidades de pH.
Contenidos de clorofila
a, zeaxantina y β-
caroteno. El análisis de
varianza reveló
diferencias significativas
(P<0,05) en el contenido
de estos pigmentos tanto
en los tipos de
fotobiorreactores.
Mayores contenidos de
ficobiliproteínas en el
fotobiorreactor
cilíndrico, en la fase de
crecimiento estacionario
(24 días) y cuando la
extracción fue realizada
con regulador de fosfato
tratado con hielo seco.
El pigmento en mayor
proporción fue la
ficocianina (78,51±0,778
mg L-1; 8,72% con
respecto a la masa seca)
El tratamiento de la
biomasa de A. maxima
con buffer de fosfato
más hielo seco permitió
extraer un contenido
considerable de
ficocianina.
Se corroboró que Arth-
rospira maxima es una
cianobacteria con
potencial biotecnológico
por el contenido de
pigmentos
• Para mayor cantidad de pigmentos
liposolubles se recomienda utilizar un
fotobiorreactor helicoidal y cosecha en
fase exponencial.
• Para mayor cantidad de ficobiliproteínas se
recomienda utilizar fotobiorreactor
cilíndrico y cosecha en fase estacionaria
con extracción con regulador de fosfato
tratado con hielo seco.
• Es importante seguir desarrollando nuevos
diseños de fotobiorreactores que permitan
obtener biomasa de Arthrospira rica en
compuestos de interés biotecnológico.
CONCLUSIONES
RESULTADOS