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© VII Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo (2010), Sevilla. Spain.

Asociación Científica Grupo Bioindicación de Sevilla




Estudio integrado del proceso de fangos activos I. Análisis descriptivo
de factores físico-químicos y biológicos implicados en su dinámica.


Andrés Zornoza1,2, José L. Alonso3, Susana Serrano4, Vicente Fajardo1, Francisco Zorrilla1,
Ignacio Bernácer5, José J. Morenilla5

1Grupo   Aguas de Valencia, 46014 Valencia, Spain.
2Aula  de Bioindicación y Control de Proceso en EDAR. Grupo Bioindicación de Sevilla, Spain. (E-mail: anzorzor@upv.es).
3Instituto Universitario de Investigación de Ingeniería del Agua y Medio Ambiente. Universitat Politècnica de València. Camino de

 Vera, s/n, 46022 Valencia, Spain. (E-mail: jalonso@ihdr.upv.es).
4Departamento  de Microbiología III, Facultad de Biología, Universidad Complutense, 28040 Madrid, Spain.
(E-mail: suserra@bio.ucm.es).
5Entidad   Pública de Saneamiento de Aguas Residuales de la Comunidad Valenciana (EPSAR), 46010 Valencia, Spain.



                                                                                 elevada actividad metabólica incide en la
1.         INTRODUCCIÓN                                                          capacidad asimilatoria de la materia orgánica
                                                                                 por las poblaciones microbianas, por lo que es
Muchos estudios coinciden en la importancia                                      indispensable para un buen funcionamiento de
de los protistas en las estaciones depuradoras                                   la EDAR. Así pues, dicha comunidad debe
de aguas residuales urbanas (EDAR) (Curds,                                       mantenerse en crecimiento activo durante el
1982; Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni et                                       proceso para optimizar el rendimiento en el
al., 1993; Madoni, 1994; Salvado et al., 1995).                                  tratamiento secundario.
Las poblaciones de protistas juegan un papel                                         A pesar de que los protistas pueden estar
fundamental en el proceso de eliminación de                                      involucrados en la eliminación de la materia
contaminantes por su participación en las                                        orgánica en los procesos de tratamiento
cadenas tróficas y por su contribución a la                                      (Curds y Cockburn, 1970a,b; Curds, 1973),
biofloculación (Curds, 1963; Arregui et al.,                                     una de sus funciones fundamentales es la
2007, 2008). Además, los protistas tienen                                        depredación sobre las poblaciones de
gran relevancia en el control del proceso                                        bacterias libres. La actividad bacterívora de los
debido a que son utilizados como indicadores                                     protistas contribuye a la clarificación del
biológicos del mismo (Curds y Cockburn,                                          efluente (Curds y Hawkes, 1983), así como a
1970a, b; Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni                                      la eliminación de bacterias patógenas de
et al., 1993; Salvado, 1994; Salvado et al.,                                     transmisión fecal. Curds (1992) demostró que
1995).                                                                           en presencia de protozoos se llega a eliminar
    Diversos autores han demostrado que la                                       el 95 % de E. coli, mientras que en ausencia
presencia de los protistas en el sistema                                         de estos organismos el porcentaje disminuye
proporciona una mejora en la calidad del                                         hasta un 50 %.
efluente (Curds y Cockburn, 1970b; Curds y                                           Con respecto a la determinación de las
Hawkes, 1983; Esteban et al., 1991; Al                                           especies de protistas bioindicadoras de control
Shahwani y Horan, 1991; Madoni et al., 1993;                                     del proceso, se han llevado a cabo diversos
Salvado et al., 1995). El mantenimiento de una                                   estudios utilizando análisis multivariante para
2                                Estudio integrado del proceso de fangos activos



determinar la relación existente entre diversas                más extendido para el tratamiento de las
especies de ciliados con parámetros físico-                    aguas residuales urbanas, aportando nuevos
químicos y operacionales en plantas piloto o                   datos      para       su     optimización     y
en estaciones depuradoras particulares                         biomonitorización. Para ello, se ha realizado
(Esteban et al., 1991; Sangjin et al., 2004) y a               en distintas estaciones depuradoras un
partir de los datos obtenidos en varias                        seguimiento de la comunidad de protistas,
plantas (Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni                     metazoos y bacterias mediante técnicas
et al., 1993; Martín-Cereceda et al., 1996).                   convencionales y de epifluoerescencia,
Madoni en 1994 propuso el “Índice Biótico de                   estructura flocular, sedimentabilidad del fango
Fango” (Sludge biotic index-SBI), un índice                    activo, macroscopía de la V30, parámetros
biológico de control de la marcha del proceso                  operacionales y fraccionamiento de los
basado en la determinación de la abundancia                    parámetros físico-químicos del licor mezcla,
de ciertos grupos de protistas como los                        afluente al reactor y efluente del decantador
flagelados, las amebas testáceas o desnudas                    secundario.
y ciertas especies de ciliados sésiles,                            El objetivo de este artículo es la
reptantes o nadadores; este índice biológico                   presentación, desde un punto de vista
es en la actualidad uno de los más utilizados                  descriptivo, de los resultados obtenidos hasta
en el control rutinario de las EDAR.                           el momento que muestran algunos factores
    Recientemente los estudios sobre la                        físico-químicos y biológicos implicados en la
comunidad bacteriana del fango activo han                      dinámica del proceso de fangos activos.
ido encaminados sobretodo en una línea
claramente taxonómica y fisiológica. Las
investigaciones sobre su ecología en fangos                    2.         MATERIAL Y MÉTODOS
activos son menos numerosas que en el
caso de los protistas. Estas se encuentran                     2.1.       Toma de muestras
principalmente recogidas en Jenkins et al.,
2004, Eikelboom (2000, 2006) y Seviour et                      Se han estudiado cuatro EDAR localizadas
al., (2010). Ambas comunidades, que                            en la Comunidad Valenciana. Estas
constituyen mayoritariamente la fracción                       comprenden un total de 6 líneas de
biótica del licor mezcla, han sido estudiadas de               tratamiento independientes, las cuales se
forma independiente, junto con una cantidad                    han nombrado en el presente estudio a
limitada de parámetros operacionales, físico-                  través de las siguientes abreviaturas: QB,
químicos y variables de planta. La calidad de                  CT1, CT2, DE, CX1 y CX2. Todas tratan
estos datos hace interesante la aplicación de                  afluentes urbanos, si bien las líneas QB, CX1
técnicas estadísticas de análisis multivariante                y CX2 reciben además aguas industriales. Se
para conocer la relación entre los distintos                   han llevado a cabo campañas de muestreo
componentes del sistema.                                       en cada línea durante 1 año con una
    El proyecto ESTUDIO INTEGRADO DEL                          frecuencia quincenal desde diciembre de
PROCESO DE FANGOS ACTIVOS tiene                                2008 hasta diciembre de 2009. En la figura 1
como objetivo general, desde una visión                        se representa un esquema de cada campaña
integrada del sistema y tomando como base la                   indicándose la duración, origen y tipo de
metodología de los estudios realizados en                      muestra. La campaña ha tenido una duración
bioindicación, avanzar en el conocimiento del                  de 4 días repartidos de la siguiente forma: en
proceso de fangos activos, que es el sistema                   los tres primeros días se muestreó afluente
Zornoza et al.                                                              3



al reactor, y en el tercer día se muestreó,                           Tabla 1. Nº de muestras tomadas por punto de muestreo
                                                                      y EDAR.
además, efluente del decantador secundario.
Las      muestras      fueron     compuestas,                         EDAR                    Nº de muestras

obteniéndose a partir de la mezcla de                                            Afluente
                                                                                             Licor mezcla
                                                                                                                 Efluente dec.
                                                                                 reactor                          Secundario
muestras simples horarias en relación al                                QB          75           25                   25
caudal. En el cuarto día se tomó una muestra                           CT1          69           23                   23
de licor mezcla en el reactor biológico, siendo                        CT2          69           23                   23
                                                                        DN          69           23                   23
esta de tipo simple y de carácter puntual a la                         CX1          69           23                   23
salida del mismo.                                                      CX2          69           23                   23
   En la tabla 1 se indica el número de                                Total        420          140                 140
muestras por punto de muestreo y EDAR
tomadas a lo largo del estudio.

               Día             1                2                         3                            4

                                                           Afluente al reactor y efluente
             Muestra           Afluente al reactor                                                Licor mezcla
                                                              decantador secundario

          Tipo de muestra                      Compuesta (horaria)                              Simple (puntual)

                                       Fig. 1- Esquema campaña de muestreo.




2.2.   Parámetros físico-químicos y biológicos                   2.3.   Identificación y recuento de protozoos y
                                                                 metazoos
En la tabla 2 se detallan los parámetros
físico-químicos y biológicos determinados en                     El análisis microscópico de las muestras se
las muestras. Los días 1 y 2 se analizaron                       realizó en un intervalo de tiempo máximo de
en el afluente al reactor DQO total, DQO                         24 horas después de la toma de muestras,
soluble y DBO 5 , mientras que el día 3 se llevó                 utilizando un microscopio de contraste de
a cabo un análisis físico-químico completo                       fases Zeiss (modelo Axiostar). Para la
del afluente y efluente. El objetivo del primer                  estimación de la densidad de protistas
análisis es estudiar la influencia de la carga                   ciliados y metazoos se llevó a cabo por
orgánica y del segundo establecer el                             recuento directo dos alícuotas de 25 µl
rendimiento del proceso biológico. El día 4 se                   (Madoni, 1988); para el recuento de ciliados
procedió al análisis del licor mezcla. Los                       sésiles coloniales se realizaron cuatro
parámetros se han determinado siguiendo los                      réplicas adicionales. La abundancia se ha
procedimientos normalizados (APHA 1998). La                      expresado en relación a los SSLM (ind/mg
fracción filtrada se ha obtenido a través de un                  SSLM). Para la estimación de la densidad de
filtro de lana de vidrio (Whatman GF/C) con un                   pequeños flagelados se examinan dos
tamaño de poro de 1.2 μm, la fracción soluble                    réplicas, tomando un volumen de 25 µl, en la
se obtuvo a través de un filtro de 0.45 μm                       diagonal de la cámara Fuchs Rosenthal
(Grady, 1989). El Índice Volumétrico de Fango                    (Madoni, 1988). Los organismos fueron
(IVF) y su forma diluida (IVFD) se han                           identificados en vivo usando las claves de
calculado según el procedimiento descrito en                     Foissner et al., (1991, 1992, 1994, 1995,
Jenkins et al., 2004.                                            1996), Rodríguez et al., (2008) y Serrano et
4                                          Estudio integrado del proceso de fangos activos



al., (2008). Cuando fue necesario se utilizó                              al., 2003). Se consideraron dos grupos de
para la identificación la técnica de                                      amebas desnudas según el tamaño celular:
impregnación argéntica (Fernández-Galiano                                 amebas grandes (>50 µm) y pequeñas (<50
1976, 1994) y tinción con Flutax-2 (Arregui et                            µm).


       Tabla 2. Parámetros físico-químicos y biológicos afluente, efluente y licor mezcla.

                                       Afluente al            Efl. dec.
       Parámetros                                                                              Licor mezcla
                                         reactor             secundario

                                    Día 1,2     Día 3           Día 3          Parámetros                            Dia 4

       pH                              -          x               -            pH                                     x
       Conductividad                   -          x               -            Conductividad                          x
       V60                             -          x               -            SSLM                                   x
       SST                             -          x               x            SSVLM                                  x
       SSTV                            -          x               x            SS recirculación                       x
       DQO total                      x           x               x            SSV recirculación                      x
       DQO filtrada                    -          x               x            V1                                     x
       DQO soluble                    x           x               x            V2                                     x
       DBO 5                          x           x               x            V5                                     x
       DBO 5 filtrada                  -          x               x            V10                                    x
       Nitrógeno total                 -          x               x            V15                                    x
       Nitrógeno total soluble         -          x               x            V 20                                   x
       Nitrógeno amoniacal             -          x               x            V 30                                   x
       Nitrógeno nitroso               -          -               x            Nitrógeno total                        x
       Nitrógeno nítrico               -          -               x            Nitrógeno total clarificado            x
       Fósforo total                   -          x               x            Fósforo total                          x
       Fósforo total soluble           -          x               x            Fósforo total clarificado              x
       Ortofosfato                     -          x               x            DQO total                              x
       Sulfuros                        -          x               -            DQO total clarificado                  x
       Sulfatos                        -          x               x            Turbidez total clarificado             x
       Tensioactivos aniónicos         -          x               x            Absorbancia UV total clarificado       x
       Proteínas                       -          x               -            Turbidez filtrada clarificado          x
       Carbohidratos                   -          x               -            Absorbancia UV filtrada clarificado    x
       Grasas                          -          x               -
       Ácidos grasos volátiles         -          x               -
       Coliformes fecales              -          x               x
       E.coli                          -          x               x




2.4.    Identificación y recuento de bacterias                            densidad según el criterio subjetivo
filamentosas                                                              propuesto por Eikelboom, que establece el
                                                                          Índice de Filamentos (IF) dentro de una
El análisis de morfotipos filamentosos se                                 escala del 0-5 (tabla 3). Se ha empleado un
realizó antes de las 48 horas posteriores a la                            código numérico por línea de cada una de las
toma      de    muestras,      siguiendo       las                        bacterias identificadas, de esta forma se
recomendaciones        para      su     correcta                          pretende llevar un mejor seguimiento y
manipulación y conservación de Rodríguez et                               estudiar el polimorfismo para posteriormente
al., (2005). Para su identificación se utilizaron                         asociarlo a los resultados obtenidos
las claves propuestas por Eikelboom (2000,                                mediante la técnica de Hibridación in situ con
2006) y Jenkins et al., (2004) estimándose su                             sondas marcadas con fluorocromos (FISH).
Zornoza et al.                                                                 5



Debido a la dificultad que en determinadas                               una escala arbitraria      para poder ser
condiciones plantea la estimación de la                                  representados frente a otras variables (tabla
densidad, estructura flocular abierta y                                  5).
elevada población de filamentos, se utilizaron
valores intermedios de la escala. Se                                          Tabla 5. Escala criterio subjetivo macroscópico.
identificó y estimó la densidad de bacterias                                  Aspecto                    Valor     Explicación
filamentosas sobre muestras en vivo y fijadas
                                                                              Turbidez                             1 = bajo, 2 = medio, 3
                                                                                                         1, 2, 3
en tinciones Gram y Neisser, utilizando para                                  Flóculos en suspensión               = alto
ello microscopía de contraste de fases y                                      Capa cérea
                                                                                                                   0 = ausencia, 1 =
                                                                              Decantación en bloque      0, 1
campo claro (tabla 4).                                                        Esponjamiento
                                                                                                                   presencia

                                                                              Tamaño macroflóculo        1,2       1 < 0,5 cm, 2 > 0,5 cm
 Tabla 3. Escala criterio subjetivo de Eikelboom.

  IF    Abundancia          Explicación                                       Tabla 6. Parámetros operacionales.
   0    Ninguno             No se observan                                    Variable                                  Unidades
   1    Pocos               Se observa en un flóculo
                            ocasional
   2    Algunos             Comunes pero no presentes en                      DEC. PRIMARIA/SECUNDARIA
                            todos los flóculos                                Carga hidráulica superficial               m3/m2.h
   3    Común               En todos los flóculos con una                     Carga hidráulica sobre vertedero           m3/m.h
                            densidad 1-5/floc.                                Carga de sólidos por superficie          Kg SS/m2. h
   4    Muy común           En todos los flóculos con una                     Carga de sólidos sobre vertedero         Kg SS/m. h
                            densidad 5-20/flor                                Tiempo retención hidráulico                 horas
   5    Abundante           En todos los flóculos con una
                            densidad > 20 fil/floc.
                                                                              REACTOR BIOLÓGICO
                                                                              Carga másica                         kg DBO 5 /kg SSVLM.d
                                                                              Carga volúmica                           Kg DBO 5 /m
 Tabla 4. Estimación de la densidad de morfotipos                             Edad del fango                              Días
 filamentosos.                                                                Tasa de recirculación                         %
 Morfotipos            Estimación de la densidad                              Temperatura                                  ºC
                                                                              Oxígeno                                      %
 Beggiatoa                                                                    (< 0.8, 0.8-2 >2 ppm)
 Tipo 1863
 Tipo 0411

                                                                         2.6.           Variables operacionales
 Tipo 1701
                       Sobre muestras en vivo.
 Thiothrix
                       Microscopia de contraste de fases
 Tipo 021N
 Tipo 0914/0803
 Tipo 0041/0675                                                          Se solicitaron a las distintas estaciones
 H.hydrossis
                                                                         depuradoras los datos relativos a los días de
 M. parvicella         Sobre muestras fijadas en tinción
 Nocardioformes        Gram. Microscopía de campo claro                  la campaña de muestreo (días 1,2 y 3) para
                       Sobre muestras fijadas en tinción                 el cálculo de los parámetros operacionales
 Nostocoida limícola   Gram y
                       Neisser. Microscopía de campo claro               de la decantación primaria, secundaria y
                       Sobre muestras fijadas en tinción                 reactor biológico (tabla 6), de acuerdo con
 Tipo 0581
                       Gram. Microscopía de campo claro
                       Sobre muestras fijadas en tinción
                                                                         Metcalf & Eddy (1991).
 Tipo 0092
                       Neisser. Microscopía de campo claro                  Debido a la inercia en el proceso biológico
                                                                         de algunos parámetros operacionales, como
2.5.     Análisis macroscópico de la V30                                 la carga orgánica afluente al reactor biológico
                                                                         (Salvadó et al., 1993), se ha realizado un
Durante el ensayo de la V30 se procedió a                                promedio por campaña de muestreo de cada
realizar un análisis macroscópico cualitativo                            uno de ellos a excepción de la edad del
de     aspectos      relacionados   con       la                         fango. Esta se ha calculado en todas las
sedimentabilidad del fango activo. Se utilizó                            líneas con el sumatorio de las variables
6                                 Estudio integrado del proceso de fangos activos



correspondientes a los tres días anteriores al                  más alto. Respecto al tiempo de retención
análisis del licor mezcla (EF3), con excepción                  hidráulico, las líneas QB, DN operan con
de la EDAR DE en la que, debido al régimen                      valor más elevado que el resto. A excepción
de purga de fangos en exceso, se utilizaron                     de CT1 y CT2, se aprecian diferencias entre
los siete días anteriores (EF7).                                líneas respecto a los valores de oxígeno
    Los valores de oxígeno disuelto en el                       disuelto en el reactor. En general, existe una
reactor han sido distribuidos en tres                           gran variabilidad en cuanto a los valores de
intervalos (0.8, 0.8-2 y >2 ppm) y expresados                   los parámetros operacionales del reactor,
en porcentaje de tiempo (%). En el caso de                      como factores a tener en cuenta en el
QB, CX1 y CX2 los datos corresponden a                          rendimiento de depuración.
medidores on line situados en la parte final                       En decantación secundaria se observan
del reactor biológico, en CT1 y CT2 a tres                      escasas diferencias entre los valores de
puntos (entrada, parte media y salida) y DE a                   carga hidráulica. Sin embargo, la carga de
nueve puntos equidistantes a lo largo del                       sólidos es mayor en CT1, CT2 y DE. A
reactor.                                                        resaltar el elevado tiempo de retención
                                                                hidráulico de CX1 y CX2 y menor tasa de
                                                                recirculación respecto al resto de líneas.
3.     RESULTADOS Y DISCUSIÓN                                      Con referencia a la edad del fango y la
                                                                carga másica, está muy extendido en el
3.1.   Parámetros operacionales                                 campo de la explotación que ambas
                                                                variables están inversamente relacionadas.
En la tabla 7 se muestran los valores                           Este hecho tiene su origen en el concepto
promedio (media aritmética), máximo y                           contrapuesto de las fórmulas aplicadas para
mínimo de cada uno de los parámetros                            su cálculo, es decir, al reducir las purgas de
operacionales. Se observa como los valores                      fangos en exceso se eleva la edad del fango
de los parámetros de la decantación primaria                    y la concentración de SSLM, disminuyendo
pertenecientes a QB, CT1, CT2 y DE son                          así la carga másica al incrementarse el valor
más bajos que CX1 y CX2. El tiempo de                           del denominador en su fórmula. Por lo tanto,
retención hidráulico es un factor importante a                  se espera una evolución inversa y
tener en cuenta, ya que puede influir sobre la                  proporcional de ambos parámetros bajo un
calidad del afluente al reactor y por tanto en                  eje de simetría imaginario, pues esta
el proceso biológico.                                           hipótesis supone que la carga contaminante
   Dentro de los parámetros del reactor                         y la temperatura a la cual se produce la
biológico, se aprecia mayor diferencia entre                    degradación son constantes a lo largo del
líneas de tratamiento que en decantación                        tiempo. Estas condiciones no suelen darse
primaria. En el caso de la carga másica en                      en plantas de tratamiento a escala real, pues
QB, CX1 y CX2 hay diferencias en los                            el sustrato puede variar en un espacio corto
valores de la media y mayores intervalos que                    (días) o largo de tiempo (meses) y la
CT1 y DN. Esta última ha operado con carga                      temperatura puede fluctuar en mayor o
más baja y rango ms estrecho. En lo que                         menor grado a lo largo del año en función de
respecta a la edad del fango, se observa                        la situación geográfica de la EDAR.
valores promedio e intervalos diferentes
entre las distintas estaciones depuradoras,
siendo DN la que opera con valor promedio
Zornoza et al.                                                          7



Tabla 7. Valores medios, máximos y mínimos de las variables operacionales.
PARÁMETROS                                                QB                         CT1                   CT2                             DN                     CX1                     CX2
                                                   Med.     Mín.-Máx.        Med.     Mín.-Máx.    Med.     Mín.-Máx.               Med.    Mín.-Máx.     Med.     Mín.-Máx.     Med.      Mín.-Máx.

DECANTACION PRIMARIA                                      Si                         Si                    Si                              No                          Si (misma línea)
 Carga hidráulica superficial (m 3/m.h)            0.72    0.53-0.93         0.63     0.32-0.77    0.76     0.41-0.89                 -            -      0.89     0.83-1.10        -             -
 Carga hidráulica sobre vertedero (m 3/m2.h)        4.9        3.6-6.2        4.6          4-5.4    5.4          4.7-6                -            -       6.2      5.8-7.7        -              -
 Tiempo retención hidráulico (horas)                5.1        3.9-6.5        4.4          3.7-5    4.4      3.8-5.2                  -            -       3.5      2.9-3.7        -              -
REACTOR BIOLÓGICO
 Caudal (m 3)                                     35023           -          19481           -     21837           -               19089           -      15784          -       23677            -
 Carga másica (Kg DBO 5 /kg SSVLM.d)               0.20     0.08-0.47        0.31     0.21-0.43    0.29     0.16-0.60               0.12    0.06-0.21     0.30     0.12-0.45      0.31     0.14-0.49
 Carga volumétrica (Kg DBO 5 /m 3)                 0.36     0.13-0.73        0.80     0.48-1.27    0.79     0.50-1.35               0.18    0.08-0.38     0.48     0.25-0.91      0.48     0.25-0.91
 Edad del fango (días)                              11          4-23           6           3-11      7           3-14                17         10-31       7           3-21       7            3-22
 Tiempo retención hidráulico (horas)                17         14-22          5.5      4.7-6.3      5.4      4.9-6.2                 15         12-19      6.4      5-3-6.9       6.4       5.3-6.8
 Oxígeno < 0.8 ppm (%)                              33          5-69          15        0-34        22        0-50                   55         37-64       1        0-10         11         0-63
 Oxígeno 0.8-2 ppm (%)                              61         12-95          41           14-63    38           21-49               30         21-38       4           0-23       25           1-74
 Oxígeno > 2 ppm (%)                                5           0-40          44           10-86    39           13-73               14          8-42      96       66-100         64           19-97
DECANTACION SECUNDARIA
 Carga hidráulica superficial (m 3/m.h)            0.49     0.36-0.65        0.62     0.53-0.71    0.77     0.68-0.86               0.54    0.42-0.65     0.44     0.40-0.54      0.54     0.51-0.67
 Carga hidráulica sobre vertedero (m 3/m2.h)        3.7        0.9-5.4        4.5      3.9-5.2      5.4          4.7-6               3.4        2.6-4.1    3.4      3.1-4.2       4.6       4.3-5.7
 Carga de sólidos por superficie (Kg SS/m2.h)       1.1        0.7-1.5        2.3      1.4-3.5      3.1      1.4-4.1                 2.2        0.5-6.5    0.9      0.6-1.3       1.1       0.8-1.6
 Carga de sólidos sobre vertedero (Kg SS/m.h)       9           6-13          16           10-25    21           10-29               14          3-41       7           5-10       9            7-13
 Tiempo retención hidráulico (horas)               6.8          5-9.2         4.9       4.2-5.6     5.3      4.7-6.3                 6.6        5.5-8.4    9.2      7.6-9.9        8        6.6-8.6
 Tasa de recirculación (%)                         134         94-179         126      103-159      99       91-139                  89         66-120     61       50-66          -           -
8                               Estudio integrado del proceso de fangos activos



   En la figura 2 se representa la evolución                  interpretación y cálculo en determinadas
de ambos parámetros en la línea QB, donde                     situaciones sigue siendo, hoy por hoy, una
el intervalo de temperatura en el reactor                     asignatura pendiente para una gran mayoría
biológico ha sido de 14 – 29 ºC (tabla 8). Se                 de los responsables de explotación.
observa una evolución inversa proporcional                    Actualmente tiene más utilidad para el diseño
de la carga másica y edad del fango hasta el                  de estaciones depuradoras que para el
muestreo 4. A partir de ahí ambos                             control rutinario en la EDAR, determinando al
evolucionan de forma independiente.                           final que la estrategia principal sea
   Con referencia a la edad del fango y la                    establecer un régimen de purgas de fangos
carga másica, está muy extendido en el                        en exceso hasta mantener la concentración
campo de la explotación que ambas                             deseada de SSLM. El problema aparece en
variables están inversamente relacionadas.                    el momento en que no se purgan fangos
Este hecho tiene su origen en el concepto                     durante un día: si tenemos en cuenta para su
contrapuesto de las fórmulas aplicadas para                   cálculo la concentración de SST del efluente
su cálculo, es decir, al reducir las purgas de                de decantación secundaria obtendremos
fangos en exceso se eleva la edad del fango                   valores de edad de fango muy elevados e
y la concentración de SSLM, disminuyendo                      incongruentes. Algunos responsables de
así la carga másica al incrementarse el valor                 explotación      optan    erróneamente    por
del denominador en su fórmula. Por lo tanto,                  solucionar el problema sumando días
se espera una evolución inversa y                             naturales sin purga a la última edad de fango
proporcional de ambos parámetros bajo un                      calculada en condiciones normales, o realizar
eje de simetría imaginario, pues esta                         un promedio de las edades de fango diarias
hipótesis supone que la carga contaminante                    de los días previos. Una solución práctica
y la temperatura a la cual se produce la                      podría ser su cálculo a partir de la suma de
degradación son constantes a lo largo del                     las variables de un cierto número de días,
tiempo. Estas condiciones no suelen darse                     que dependerá del régimen de purgas de la
en plantas de tratamiento a escala real, pues                 EDAR (p.e; EF3 = 3 días, EF7 = 7 días). En
el sustrato puede variar en un espacio corto                  la figura 3 se representa la EF3 frente a la
(días) o largo de tiempo (meses) y la                         EF7 de la línea DN, la cual tiene la
temperatura puede fluctuar en mayor o                         particularidad de centralizar las purgas de
menor grado a lo largo del año en función de                  fangos en exceso de forma aleatoria en
la situación geográfica de la EDAR. En la                     determinados días. Para una mejor
figura 2 se representa la evolución de ambos                  visualización de los datos se ha optado por
parámetros en la línea QB, donde el intervalo                 dar un valor de 40 días a los muestreos 1, 3
de temperatura en el reactor biológico ha                     y 12      en la EF3, siendo sus valores
sido de 14 – 29 ºC (tabla 8). Se observa una                  calculados más elevados (128, 48, 307). En
evolución inversa proporcional de la carga                    la figura se observa como aproximadamente
másica y edad del fango hasta el muestreo 4.                  en la mitad de los muestreos la EF3 muestra
A partir de ahí ambos evolucionan de forma                    una desviación considerable respecto a la
independiente.                                                EF7.
   Aunque la fórmula para el cálculo de la
edad del fango es bien conocida, su
Zornoza et al.                                                                              9




                                          QB                                                                   EF3           Carga másica
                             25                                                                                                                   0,5




                                                                                                                                                        (Kg DBO5/Kg SSVLM.d)
                             20                                                                                                                   0,4
        EF3 (dias)




                                                                                                                                                              C. másica
                             15                                                                                                                   0,3

                             10                                                                                                                   0,2

                                  5                                                                                                               0,1

                                  0                                                                                                               0,0
                                      1        3       5       7        9     11       13      15        17        19        21    23        25
                                                                                   Muestreos

                                                   Fig. 2- Evolución de la carga másica frente a la edad del fango (EF3) en QB.


                                              DN                                                                                       EF3         EF7
                                  40
               EF3 - EF7 (días)




                                  30


                                  20


                                  10


                                      0
                                          1        3       5        7         9        11           13        15        17        19         21            23
                                                                                        Muestreos


                                                               Fig. 3 – Representación de EF3 frente a EF7 en DN.




3.2.   Parámetros físico-químicos

En la figura 4 se ha representado el                                                           macroflóculo, denominando este como la
promedio en porcentaje (%) de las distintas                                                    unión de numerosos flóculos, y la segunda a
fracciones de la DQO y DBO 5 en el afluente.                                                   través de procesos de adsorción. Esta última
Se puede observar como aproximadamente                                                         tiene un bajo porcentaje (8 %) del total de
la mitad de la DQO total es soluble y por                                                      DQO. Con un tiempo adecuado de retención
tanto fácilmente disponible para los procesos                                                  celular la fracción particulada puede llegar a
de oxidación y síntesis de la biomasa en un                                                    ser degradada dentro del reactor biológico,
espacio corto de tiempo. El resto es la                                                        principalmente a través de mecanismos
denominada fracción particulada, relativa a                                                    exoenzimáticos, o ser eliminada con la purga
los sólidos en suspensión y a partículas                                                       de fangos en exceso. Los valores de la
coloidales con un tamaño comprendido entre                                                     fracción en suspensión de la DBO 5 (38 %) y
0.45-1,2 μm. La primera se elimina del agua                                                    la      DQO        (39       %)     coinciden.
residual    por    “atrapamiento”     en   el
10                                     Estudio integrado del proceso de fangos activos




                                    DQO soluble   DQO part. susp.    DQO col. (1,2-0,45 micras)



                                                      8%




                                39%                                                         53%




                                                  DBO filtrada   DBO part. susp.




                                 38%




                                                                                           62%




                 Fig. 4 – Porcentaje de las distintas fracciones de la DQO y DBO 5 en el afluente al reactor.



    El fraccionamiento de los parámetros                              1.- El porcentaje de la fracción suspendida y
físico-químicos del efluente tratado es                               soluble es muy elevada. Se corresponde con
fundamental para poder discernir entre un                             un episodio de mala separación, escape de
episodio de una deficiente separación del                             sólidos (biomasa), y mala depuración.
fango en el clarificador secundario y una                             2.- En este episodio el porcentaje de la
mala depuración, entendiendo esta última                              fracción suspendida es menor que el anterior
como un escaso rendimiento de eliminación                             pero todavía significativa. La fracción soluble
del sustrato (materia orgánica y/o nutrientes).                       sigue siendo elevada. Se corresponde con
A pesar de ello, continúan utilizándose                               un episodio de deficiente depuración y
parámetros como la DQO, DBO 5 , nitrógeno y                           moderada separación.
fósforo en su forma total. Este hecho dificulta                       3.- El porcentaje de la fracción suspendida es
el análisis y seguimiento de la calidad del                           elevado y el valor de la DQO soluble media-
fango activo y agua tratada. En la figura 5 se                        baja. Se corresponde con un episodio de
ha representado el fraccionamiento de la                              mala separación y buena depuración.
DQO del efluente tomado a partir de datos                             4.- El porcentaje de la fracción suspendida es
experimentales. En el diagrama de barras se                           nula y el valor de la fracción soluble es bajo.
representan cuatro posibles situaciones,                              Se corresponde con un episodio de buena
donde se muestra el porcentaje de cada una                            separación y depuración.
de fracciones y dentro de cada una el valor                              Hay que destacar en todos los casos el
de la DQO (mg O 2 /L):                                                valor prácticamente despreciable de la
                                                                      fracción coloidal.
Zornoza et al.                                               11




                      DQO soluble        DQO part. susp.               DQO col. (0.45 - 1.2 micras)



            4                                             37


            3                44                                                 68


            2                              70                                            29


            1           96                                                252

             0%              20%                40%                60%               80%              100%


                      Fig. 5 – Fraccionamiento de la DQO en el efluente del decantador secundario.



3.3.   Licor mezcla                                                    ha decantado con estas características. El
                                                                       cálculo del IVF a partir de una sedimentación
En la tabla 8 se representa el valor medio,                            en bloque y valor elevado de V30 origina un
máximo y mínimo de los parámetros físico-                              sesgo en el mismo. Este se aprecia en la
químicos y características macroscópicas del                           diferencia entre el IVF (n=0), en el que no se
licor mezcla. Se observa como se ha                                    ha practicado ninguna dilución sobre la V30,
operado     con      niveles    distintos   de                         y el IVF donde no ha sido necesario o se ha
concentración de SSLM, siendo en CT y DN                               tenido que proceder a diluir; n=1, 2… (1:1,
donde se ha encontrado el porcentaje de                                1:2…). Los intervalos de nitrógeno total
fracción volátil más bajo. La temperatura en                           (NTLM) fueron similares en todas las líneas
el reactor biológico es uno de los factores                            menos en DN, siendo la media mas elevada
ambientales más importantes implicados en                              la registrada en CX1 y CX2. El intervalo de
la dinámica de los fangos activos, ya que                              concentración de fósforo total (PTLM) fue
influye en la velocidad de las reacciones                              similar en las líneas QB, CX1, CX2 y DN, en
bioquímicas de los microorganismos. Los                                esta última ligeramente mas estrecho,
valores más elevados (29 ºC) se registraron                            mientras que en CT1 y CT2 el intervalo ha
en QB y CT y el más bajo (11 ºC) en DN,                                sido más amplio y con una concentración
produciéndose una variación total de 11-15                             más alta. Los valores de la biomasa (SSV)
ºC a lo largo del muestreo en los diferentes                           expresada como DQO total analizada en
reactores. Todas las líneas registraron                                todas las líneas (1.15-1.67 gDQO/gSSV) se
valores elevados de la V30 a excepción de                              corresponden        con      los     obtenidos
CX1.     Este     hecho    esta    relacionado                         experimentalmente por otros autores (Bullock
directamente con la decantación que se                                 et al., 1996). Dentro de las características
produce lentamente y en bloque debido a                                macroscópicas, el valor promedio más alto
una elevada concentración de SSLM y/o                                  respecto a la turbidez se ha observado en
esponjamiento. CT y DN han sido las líneas                             CT1 y CT2 y respecto a sólidos en
donde con mayor frecuencia el licor mezcla                             suspensión en QB y CT1.
12                                        Estudio integrado del proceso de fangos activos



     Tabla 8. Valores medios, máximos y mínimos de parámetros físico-químicos y características macroscópicas del licor mezcla.

     PARÁMETROS                                              QB                         CT1                    CT2                  DE                  CX1                 CX2
                                   Ud.              Med.      Mín.-Max.         Med.        Mín.-Max.   Med.    Mín.-Max.    Med.   Mín.-Max.    Med.    Mín.-Max.   Med.    Mín.-Max.

     pH                                              7,4        7-7.8            7.2         6.7-7.5    7.20     6.9-7.6     7.4         6.9-8   7.4       7-7.9     7.5      7.1-7.8
     Conductividad                mS/cm              2.0       1.3-2.7           3.0         1.9-4.9     2.9     1.9-4.8     2.8         1-5.4   1.6       1.2.5     1.6       1-2.2
     SSLM                          g/L               2.5       1.8-3.1           4.1         2.6-6.2    4.1      2.5-6.8     3.2     2.5-3.8     1.9       1.1-3     1.8      1.1-2.8
     SSVLM                          %                 79          68-87          72          64-78      72       61-86       69          62-75   83       70-91      83       73-88
     SS recirulación              mg/L               3.8       2.7-4.9           5.5          3-11      5.9      2.8-8.7     5.6     2.4-10.3    2.7      1.6-5.7     -            -
     Relación recirculación                          1,6          1-2.2          1.4          0.7-2     1.4          0.9-2   1.8     0.7-3.5     1.4      0.9-2.3     -            -
     Temperatura                    ºC                21          14-29          22          16-29      22       15-29       18          11-26   20       15-27      20       15-26
     V30 (n=0)                    mL/L               339       140-720           579        300-920     587     160-950      461     330-740     222     110-440     280     120-800
     IVF (n=0)                    mL/g               136       59-245            142         92-201     136      64-228      143     103-234     117      74-228     154      76-464
     IVF (n=0,1,2…)               mL/g               119       59-167            109         81-161     109      64-106      109     85-140      112      74-200     131      76-286
     NTLM                      mg/gSSVLM              71       41-108            54          30-96      52       31-109      57          31-78   96       72-140     96       67-138
     PTLM                      mg/gSSVLM              29          19-40          60          42-75      57       27-76       35          28-43   24       19-39      26       20-40
     DQO total                  g/gSSVLM             1.42     1.25-1.63         1.41        1.26-1.60   1.42    1.30-1.53    1,45   1,28-1,61    1-38    1.21-1.54   1.39    1.15-1.67
     Turbidez                     1,2,3              1.5           1-3           2.7          1.5-3     2.7          1-3     1.2          1-2     2           1-3     2           1-3
     Flóculos en suspensión       1,2,3               2            1-3            2          1.5-2.5    1.8          1-2     1.7         1-2.5   1.7       1-2.5     1.8          1-3
     Capa cérea                    0,1               0.5           0-1            1             -        1             -     0.8          0-1    0.4          0-1    0.3       0-0.5
     Decantación en bloque         0,1               0.3           0-1           0.9           0-1      0.7          0-1     0.9         0.5-1   0.1          0-1    0.2          0-1
     Esponjamiento                 0,1                0             -             0             -        0            -       0            -      0            -      0            -
     Tamaño macroflóculo           1,2                2            1-2           1.7           1-2      1.8          1-2      2            -     1.8          1-2    1.8          1-2
Zornoza et al.                                                                            13



    Se ha llevado a cabo un análisis del                                                                     gráficos se puede observar como a medida
nitrógeno total del flóculo (NTLM) para                                                                      que aumenta la Tª a partir de 20-22 ºC
realizar un seguimiento indirecto de las                                                                     disminuye el nitrógeno. Estos resultados
sustancias poliméricas extracelulares (SPE),                                                                 concuerdan con los de otros autores sobre la
ya que las proteínas son unos de sus                                                                         disminución de EPS que tiene lugar en las
componentes mayoritarios. En la figura 6 se                                                                  épocas del año donde la Tª del reactor
representa el contenido en nitrógeno de las                                                                  biológico es alta.
líneas QB y DN frente a la Tª. En ambos

                                                          QB                                                                  NTLM            Temperatura
                                                140                                                                                                          30
                            NTLM (mg/g SSVLM)




                                                                                                                                                                   Temperatura (ºC)
                                                110


                                                 80                                                                                                          20


                                                 50


                                                 20                                                                                                          10
                                                      1          3     5      7       9      11      13        15        17        19    21      23     25
                                                                                                  Muestreos



                                                      CX1
                                  150                                                                                                                        30
        NTLM (mg/g SSVLM)




                                                                                                                                                                  Temperatura (ºC)
                                  125


                                  100                                                                                                                        20


                                            75


                                            50                                                                                                               10
                                                 1           3        5        7       9       11         13        15        17        19      21      23
                                                                                                Muestreos

                                                          Fig. 6 – Representación del nitrógeno orgánico del licor mezcla (NTLM) frente a la Tª.




    El incremento del IVF en el fango activo                                                                 se observa un incremento importante del IVF
no está solamente asociado con un                                                                            que no está asociado directamente con la
incremento de la población de bacterias                                                                      población filamentosa dominante (Microthrix
filamentosas (Tandoi et al., 2005). Un                                                                       parvicella) ya que en los muestreos 2-4 y 9-
aumento del contenido en EPS con                                                                             11 el IF de esta alcanzó el mismo valor (5) y
disminución del núcleo flocular (anóxico) es                                                                 sin embargo se observan diferencias
un factor que favorece el incremento del IVF.                                                                considerables del IVF. Una posible
En la figura 7 se representa la concentración                                                                explicación sería que el nivel bajo de SSLM
de SSLM frente al IVF. Del muestreo 9 al 11                                                                  para una misma carga másica y temperatura
14                                                        Estudio integrado del proceso de fangos activos



sea un factor que potencie la disminución del                                           puede apreciar las diferencias existentes
tamaño de los núcleos floculares (residuo                                               entre ambos, sobre todo importantes en
celular), y por tanto una disminución del peso                                          determinados muestreos (5, 6, 7 y 9). No
específico y velocidad de sedimentación (la                                             realizar la dilución correcta en el ensayo de
significación estadística de esta relación                                              la V30 cuando nos encontramos ante un
deberá ser comprobada). La concentración                                                episodio de bulking o elevada concentración
de SSLM en el periodo 2-4 fue más alta que                                              de SSLM, ocasiona un sesgo en el resultado
en el 9-11.                                                                             del IVF y por tanto una interpretación
   En la figura 8 se representa el IVF frente                                           incorrecta de la calidad del fango activo.
al IVFD (diluido) en DN. En el gráfico se

                                                                                                                 SSLM            IVF
                                      CX2
                           3000                                                                                                         300


                           2500
        SSLM (mg/L)




                                                                                                                                              IVF (mL/g)
                           2000                                                                                                         150


                           1500


                           1000                                                                                                         0
                                  1         3      5        7       9        11        13        15        17    19        21      23
                                                                             Muestreos


                                                Fig. 7 – Representación de la concentración de SSLM frente al IVF.



                                                                                                                     IVF (n=0)         IVFD (n=1)
                                      DN
                           250


                           200
              IVF (mL/g)




                           150


                           100


                            50
                                  1         3        5          7       9         11        13        15        17        19       21          23
                                                                                  Muestreos


                                                          Fig. 8 – Representación del IVF frente al IVFD.




3.4.   Bacterias filamentosas                                                           filamentosas repartidas de forma similar
                                                                                        entre todas las líneas (tabla 8). Nostocoida
Al final del estudio se han identificado y                                              limícola ha sido la bacteria que mayor
codificado un total de 116 bacterias                                                    polimorfismo ha presentado con un máximo
Zornoza et al.                                                15



en QB (8 códigos) y un mínimo en DN, CX1 y                  morfotipos tienen capacidad exoenzimática,
CX2 (5 códigos). En la tabla además se                      por lo que en determinadas condiciones
representa el valor promedio del IF de                      pueden ser más competitivos que otros. Se
aquellas bacterias que han aparecido como                   ha representado para poder observar este
secundarias (3.5-4.5) y dominantes (4.5-5)                  hecho de forma aproximada e indirecta
siendo en QB donde mayor número total de                    morfotipos dominantes/secundarias del tipo
ambas (12) y secundarias (7) se ha                          N. limícola, M. parvicella y nocardioformes
identificado. CT1 ha sido la línea donde                    frente al nitrógeno total (NTLM) (figura 9). Se
mayor número de bacterias dominantes se                     observa generalmente como en los periodos
ha encontrado (7).                                          de muestreo en los que el NTLM es bajo el IF
   En color rojo se muestra aquellas                        decrece pasando de ser dominantes y
bacterias filamentosas en las que en                        secundarios a ser principalmente escasos.
ocasiones ha sido imposible estimar el IF a                    Algunos estudios señalan que la Tª es un
través del procedimiento convencional. A                    factor que influye en el crecimiento de
continuación se indican los motivos:                        algunas bacterias filamentosas, como por
                                                            ejemplo del tipo nocardioformes y Microthrix
   -   CX1-23, CX2-23 y QB-21: por ser un                   parvicella. La primera con un crecimiento
       filamento Gram negativo similar a                    óptimo a partir de 15 ºC y la segunda con un
       Microthrix parvicella (tipo 0581).                   crecimiento óptimo en torno a 22 ºC,
   -   CT1-21 y CT2-21: en ocasiones ha                     pudiendo llegar hasta 7 ºC, y desfavorable a
       mostrado una reacción negativa a la                  partir de 25 ºC (Eikelboom, 2006). En la
       tinción de Gram.                                     figura 10 se ha representado el IF de ambas
   -   DN-19 y CX1-20: por ser filamentos                   respecto a la Tª en el reactor, observándose
       muy        cortos,      estrechos     e              que se cumple el rango óptimo según lo
       intrafloculares del tipo Nostocoida                  indicado anteriormente.
       limícola.                                               El morfotipo 0581 es uno de los grandes
   -   CT1-09, CT2-09, DN-07, CT1-06,                       desconocidos (Zornoza et al., 2006) del que
       CT2-06 y DN-08: por ser filamentos                   apenas existen datos a nivel fisiológico. En la
       muy estrechos, cortos y Gram                         figura 11 se ha representado este morfotipo
       negativos en flóculos abiertos y                     (Gram negativo) junto a M. parvicella (Gram
       disgregados        con       abundantes              positivo) frente a la Tª. A partir de 25 ºC
       filamentos.                                          (muestreo 14) se observa la desaparición
                                                            prácticamente Microthrix parvicella para dar
   Algunos    autores    mencionan      que                 paso al morfotipo 0581.
determinados morfotipos filamentosos de
crecimiento   principalmente   intraflocular
tienen una dependencia directa del sustrato
presente en la microestructura, como por
ejemplo las SPE. Algunos de estos
16                                          Estudio integrado del proceso de fangos activos



Tabla 8. Codificación de bacterias filamentosas (COD.). Valor promedio de Índice de Filamentos (IF) y abundancia (Ab.) de morfotipos dominantes y secundarios.
MORFOTIPO                            QB                            CT1                        CT2                         DN                            CX1                     CX2
                            COD.      IF      Ab.        COD.        IF      Ab.      COD.     IF    Ab.         COD.       IF     Ab.         COD.       IF     Ab.   COD.       IF   Ab.
Beggiatoa                     -        -       -            -         -       -         -       -      -         DN-14      -       -            -         -      -    CX2-22     -     -
Tipo 1863                  QB-16       -       -        CT1-16        -       -      CT2-16     -      -         DN-16      -       -         CX1-16       -      -    CX2-16     -     -
Tipo 0411                     -        -       -        CT1-17        -       -      CT2-17     -      -           -        -       -         CX1-08       -      -    CX2-08     -     -
Tipo 1701                  QB-08      2.8    Sec        CT1-12        -       -      CT2-12    0.5   Sec         DN-20      -       -         CX1-10      1.7    Sec   CX2-10    1.5   Sec
Thiothrix                  QB-09      2.1    Dom        CT1-19        -       -      CT2-19     -      -         DN-03      -       -           -          -      -      -        -     -
Tipo 021N                  QB-12      1.1    Sec        CT1-08        -       -      CT2-08     -      -         DN-13      -       -         CX1-01      3.0    Dom   CX2-01    3.0   Dom
                           QB-06                        CT1-13        -       -      CT2-13    1.9   Sec         DN-09      -       -         CX1-17       -      -    CX2-17     -     -
M. parvicella              QB-07      2.0    Dom        CT1-02      2.8     Dom      CT2-02    2.2   sec         DN-11     4.2    Dom         CX1-12      2.6    Dom   CX2-12    3.0   Dom
                           QB-20      0.7    Dom          -          -       -         -        -     -            -        -      -            -          -      -      -        -     -
Tipo 0581                  QB-21       -       -            -         -       -         -       -      -           -        -       -         CX1-23      1.6    Dom   CX2-23    1.6   Dom
Nocardioformes             QB-01      2.7    Dom        CT1-01      4.7     Dom      CT2-01    4.7   Dom         DN-10      -       -         CX1-15       -      -    CX2-15     -     -
Nostocoida limícola        QB-19       -       -        CT1-15        -       -      CT2-15     -      -         DN-01      -       -         CX1-21       -      -    CX2-21     -     -
                           QB-02      2.9    Dom        CT1-14        -       -      CT1-14     -      -         DN-04      -       -         CX1-06      1.6    Sec   CX2-06     -     -
                           QB-15       -       -        CT1-11        -       -      CT2-11     -      -         DN-15      -       -         CX1-18       -      -    CX2-18     -     -
                           QB-04       -       -        CT1-18        -       -      CT2-18     -      -         DN-17     1.7    Dom         CX1-19       -      -    CX2-19     -     -
                           QB-13       -       -        CT1-21        -       -      CT2-21     -      -         DN-19      -       -         CX1-20      2.1    Sec   CX2-20    2.0   Sec
                           QB-17       -       -        CT1-20      1.9     Dom      CT2-20    1.8   Dom           -        -       -            -         -      -      -        -     -
                           QB-22      0.3    Sec            -         -       -         -       -      -           -        -       -            -         -      -      -        -     -
                           QB-18      0.3    Sec            -         -       -         -       -      -           -        -       -            -         -      -      -        -     -
Tipo 0914/0803             QB-14      2.9    Sec        CT1-07      3.9     Dom      CT2-07    3.9   Dom         DN-05     3.8    Dom         CX1-09      2.3    Sec   CX2-09    2.3   Sec
Tipo 0041/0675             QB-05      2.9    Sec        CT1-04      2.5     Sec      CT2-04     -      -         DN-06      -       -         CX1-04      2.4    Sec   CX2-04     -     -
Tipo 0092                  QB-10       -       -        CT1-03      4.0     Dom      CT2-03    3.8   Dom         DN-12     4.7    Dom         CX1-24      1.4    Dom   CX2-24    1.8   Dom
H. hydrossis               QB-11      2.8    Sec        CT1-09      2.7     Dom      CT2-09    2.5   Sec         DN-07     4.1    Dom         CX1-11      3.3    Dom   CX2-11    3.2   Dom
Desconocido                   -        -       -        CT1-06      4.1     Dom      CT2-06    3.8   Dom         DN-08     4.3    Dom         CX1-03       -      -    CX2-03     -     -
                              -        -       -          -          -       -         -        -     -            -        -      -          CX1-02       -      -    CX2-02     -     -
TOTAL                        21               12           19                 8        19             9           18                6            19              10     20              8
Zornoza et al.                                                                                           17




                           QB                                               QB-02               QB-07           QB-01            NTLM
                   6                                                                                                                       120




                                                                                                                                                          NTLM /mg/g SSVLM)
                   4                                                                                                                       80
    IF (0-5)




                   2                                                                                                                       40



                   0                                                                                                                       0
                       1        3       5       7       9       11        13          15        17        19      21       23         25
                                                                      Muestreos


                                                                                           CX1-06              CX1-12          NTLM
                           CX1
                   6                                                                                                                    160




                                                                                                                                                 NTLM (mg/g SSVLM)
                   4                                                                                                                    120
        IF (0-5)




                   2                                                                                                                    80



                   0                                                                                                                    40
                       1            3       5       7       9        11         13         15        17         19        21       23
                                                                     Muestreos

Fig. 9 – Representación de bacterias del tipo Nostocoida limícola, Nocardiofrmes y Microthrix parvicella frente al NTLM


                           QB                                                         QB-07             QB-01           Temperatura
                   6                                                                                                                       30
                                                                                                                                                 Temperatura (ºC)



                                                                                                                                           25
       IF (0-5)




                   3                                                                                                                       20


                                                                                                                                           15


                   0                                                                                                                       10
                       1         3      5       7       9       11         13         15        17        19      21        23        25
                                                                      Muestreos
18                                                 Estudio integrado del proceso de fangos activos



                                                                                   DN-11         DN-10        Temperatura
                        DN
                6                                                                                                             30




                                                                                                                                   Temperatura (ºC)
                                                                                                                              25
     IF (0-5)




                3                                                                                                             20


                                                                                                                              15


                0                                                                                                             10
                    1         3          5        7        9        11       13       15        17       19         21   23
                                                                    Muestreos


                        CT2                                                       CT2-01        CT2-02        Temperatura
                6                                                                                                             30




                                                                                                                                   Temperatura (ºC)
                                                                                                                              25
     IF (0-5)




                3                                                                                                             20


                                                                                                                              15


                0                                                                                                             10
                    1         3          5        7        9        11       13       15        17       19         21   23
                                                                    Muestreos

                                  Fig. 10 – Representación de nocardiofrmes y Microthrix parvicella frente a la Tª.


                                                                                  CX1-12        CX1-23        Temperatura
                        CX1
                6                                                                                                             30
                                                                                                                                    Temperatura (ºC)



                                                                                                                              25
     IF (0-5)




                3                                                                                                             20


                                                                                                                              15


                0                                                                                                             10
                    1         3          5        7        9        11       13        15       17       19         21   23
                                                                    Muestreos

                                    Fig. 11 – Representación de Microthrix parvicella y tipo 0581 frente a la Tª.
Zornoza et al.                                                19



3.5.   Protistas y metazoos                                  primero con una frecuencia mucho mayor
                                                             que el segundo en QB.
En la tabla 9 se muestra la media en los                         En la figura 12 se ha representado el valor
porcentajes de abundancia de cada uno de                     promedio (%) de abundancia de los grupos
los taxones de ciliados, sarcodinos y                        taxonómicos en ambas líneas. En DN el
metazoos en QB y DN; en función de estos                     grupo de peritricos y filofaringeos, con
valores se ha atribuido, en la columna                       valores bastante similares, son los más
siguiente, una posición dentro del rango de                  abundantes. Sin embargo, el grupo de los
abundancia promedio; por último se muestra                   filofaríngeos     en    QB       se   encuentra
en la tercera columna el valor máximo del                    prácticamente ausente (< 5%), siendo los
porcentaje de abundancia para cada taxón.                    peritrícos el grupo más representativo (52
Se recogen únicamente aquellas especies                      %).
que han alcanzado un porcentaje máximo de                        En la figura 11 se ha representado la
abundancia superior al 5%, con un total de                   distribución de la densidad total de ciliados
30 y 25 taxones en QB y DN                                   en ambas líneas. Como se observa la
respectivamente.                                             comunidad         de      ciliados     presentó
   En ambas líneas los mayores porcentajes                   generalmente una mayor densidad en QB.
de abundancia corresponden a ciliados                            Los datos que se han expuesto y
asociados al flóculo (reptantes y sésiles). En               representado referente a la estructura de la
la línea QB los ciliados sésiles presentan una               comunidad de protistas y metazoos muestran
mayor abundancia total, siendo la especie                    diferencias     destacables.      Probablemente
dominante el peritrico colonial Epistylis                    estas sean debidas a las diferencias
balatónica; en contraste en la línea DN son                  existentes       entre       los     parámetros
más representativos los ciliados reptantes,                  operacionales de ambas líneas (tabla 7),
siendo las especies Trochilia minuta y                       principalmente en la carga másica y edad de
Acineria uncinata las que acumulan un 49 %                   fango. La línea QB ha operado con mayor
del porcentaje de abundancia promedio. Los                   intervalo y valor promedio más alto de carga
ciliados nadadores presentan valores más                     másica, así como una edad de fango más
altos de densidad en la línea QB,                            baja. Esto ocasiona un incremento del
especialmente la especie Uronema nigricans.                  metabolismo bacteriano y por consiguiente
Dentro del grupo de los sarcodinos también                   un incremento en el fango activo de la
se aprecian algunas diferencias importantes,                 densidad de las especies bacterívoras, como
en      QB      la      comunidad       estaría              por ejemplo los ciliados sésiles peritricos.
fundamentalmente constituida por amebas
desnudas, principalmente amebas desnudas
(>50 μm), mientras que en DN dominan las
especies del género Arcella sp. Con respecto
a los flagelados no se aprecian grandes
diferencias entre ambas líneas. En el grupo
de los metazoos los dos géneros más
frecuentes fueron Lecane sp. y Rotaria sp.,
ambos con una frecuencia similar en DN y el
20                                                     Estudio integrado del proceso de fangos activos



                                       Hipotricos     Pleurostomatidos      Filofaringeos   Peritricos    G. taxonómicos >5%

                                       DN
                                                                         6%                     13%

                                             28%
                                                                                                                 22%




                                                                                31%




                                    Hipotricos       Pleurostomatidos    Escuticociliados    Peritricos    G. taxonómicos >5%

                                   QB
                                                                         8%                        17%




                                                                                                                 17%

                                                     52%
                                                                                                           6%




                                Fig. 12 – Valor promedio de abundancia de los grupos taxonómicos en QB y DN.



                                                                                                                Ciliados DN         Ciliados QB
                    10000

                    8000
     Ind./mg SSLM




                    6000

                    4000

                    2000

                       0
                            1      3             5          7           9          11         13          15       17          19     21      23
                                                                                   Muestreos


                                             Fig. 11 – Evolución de la densidad de ciliados en DN y QB.
Zornoza et al.                                              21



Tabla 9. Promedio de la abundancia y valor máximo (%) de protistas y metazoos identificados en QB y
DN.
Taxones                                                    QB                        DN

                                            Med.                Máx.       Med.              Máx.
                                                      Rango                        Rango
                                            (%)                 (%)        (%)               (%)

Ciliados nadadores libres
  Amphileptus punctatus                      1.1           -     12         0         -        0
  Holophrya sp.                              1.0           -     12         0         -        0
  Uronema nigricans                          3.6           7     29         0.9       -       5.6
  Pseudocohnilembus .pusillus                1.9           -     29         1.4       -       14
Ciliados reptantes
  Aspidisca cicada                           15            3     63         13        3       28
  Acineria uncinata                          16            2     76         22        2       76
  Euplotes affinis                           1.2           -     15         0                  0
  Pseudochilodonopsis fluviatilis            1.1           -     5          3.1       8       15
  Trochilia minuta                           2.9           9     27         27        1       56
  Gastronauta membranaceus                   0.7           -     11         0         -        0
Ciliados sésiles
  Opercularia articulata                     3,3           8     22         12        4       55
  Epistylis plicatilis                       11            5     54         0         -        0
  Epistylis Chrysemidis                      2.0           -     17         0         -        0
  Epistylis balatonica                       17            1     52         1.9      10       25
  Vorticella aquadulcis                      11            4     45         6.4       5       64
  Vorticella convallaria                     3,9           6     35         3.1       7       36
  Vorticella microstoma                      2.3           10    15         1.2       -       8.9
  Pseudovorticella sp.                        0            -     0          2.4       9       17
  Carchesium polypinum                       2.0           -     25         0         -        0
  Opercularia Asymmetrica                    0.3           -     7          0         -        0
  Acineta tuberosa                           0.6           -     6          3.5       6       8.4
Sarcodinos
 Arcella sp                                   9            3     60         35        2       97
  Euglypha sp.                                1            -     12         0         -        0
  Pyxidicula operculata                       1            -     26         1.7       -       30
  Amebas desnudas (> 0.50 µm)                36            2     88         3.2       3       16
  Amebas desnudas (< 0.50 µm)                53            1     97         61        1       97
Grandes flagelados
 Peranema trichophorum                       60            1    100         48        -       100
 Entosiphon sp.                              40            -     91         51        1       100
  Euglena sp.                                 0            -     0          0.7       -       13
Pequeños flagelados (diagonal FR)            20            -    >100        10        -       45
Metazoos
 Rotaria sp.                                 17            2    100         44        2       90
 Lecane sp.                                  74            1    100         48        1       100
 Nematodo                                     0            -     0          7.6       -       33
 Gastrotricos                                 0            -     0          0,7       -       17
22                              Estudio integrado del proceso de fangos activos



4.     CONCLUSIONES                                               un seguimiento indirecto y aproximado de
                                                                  la presencia de EPS, pues estos influyen
Las primeras conclusiones sobre los                               en la sedimentabilidad del fango activo.
resultados descriptivos obtenidos hasta el
momento que muestran algunos factores                        4. Nostocoida limícola ha sido el tipo
implicados en la dinámica del proceso de                        filamentoso que mayor polimorfismo ha
fangos activos son:                                             presentado.     En   estos     casos     la
                                                                identificación mediante la técnica FISH
1. Existe una importante variabilidad                           ofrecería una alternativa interesante y
   referente a los valores de los parámetros                    efectiva para el seguimiento de este. En
   operacionales de planta. La         carga                    determinadas      condiciones,    flóculos
   másica y la edad del fango evolucionan                       abiertos con una abundante población
   de forma independiente la mayor parte                        filamentosa, está técnica podría ser de
   del tiempo. Las diferencias del régimen                      gran ayuda para la estimación de la
   de purga de fangos en exceso en las                          abundancia de bacterias Gram y Neisser
   EDAR hacen necesario el establecer                           negativas. La temperatura en el reactor
   criterios    unificados     de    cálculo,                   biológico es un factor importante en la
   principalmente enfocados a obtener                           dinámica de las bacterias filamentosas,
   valores representativos de la dinámica                       sobre todo en el grupo de las
   del proceso.                                                 nocardioformes y Microthrix parvicella.

2. El seguimiento rutinario de la DQO                        5. La estructura de la comunidad de
   soluble del afluente al reactor es más                       protistas y metazoos así como su
   interesante que la DQO total, ya que la                      densidad varían en función de una serie
   DQO particulada se presenta en                               de factores; siendo los más importantes
   ocasiones como una fracción importante                       la carga másica, la edad del fango y la
   dentro de esta última. El fraccionamiento                    temperatura.
   de los parámetros físico-químicos del
   efluente tratado es fundamental para
   poder discernir entre un episodio de una                                   AGRADECIMIENTOS
   deficiente separación del fango en el
   clarificador secundario y una mala                        Este proyecto de investigación ha sido
   depuración.                                               financiado por la Entidad Publica de
                                                             Saneamiento de Aguas Residuales de la
3. La decantación lenta y en bloque con                      Generalitat Valenciana (EPSAR) y el
   valor alto de V30 que se produce en                       proyecto CGL2008-02310 del Ministerio de
   condiciones de elevada concentración de                   Ciencia e Innovación. Queremos agradecer
   SSLM y/o esponjamiento origina un                         la colaboración de cada una de las empresas
   sesgo en el valor del IVF, siendo                         explotadoras (FACSA, OMS-SACEDE, DAM
   necesario     realizar     la     dilución                y AVSA-EGEVASA).
   correspondiente para poder conocer la
   calidad del fango. El nitrógeno total del
   flóculo (NTLM) podría ser un parámetro
   interesante de rutina para llevar a cabo
Zornoza et al.                                                 23



REFERENCIAS
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2010 - Estudio integrado del proceso de fangos activos I.  Análisis descriptivo de factores físico-químicos y biológicos implicados en su dinámica.
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2010 - Estudio integrado del proceso de fangos activos I. Análisis descriptivo de factores físico-químicos y biológicos implicados en su dinámica.

  • 1. © VII Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo (2010), Sevilla. Spain. Asociación Científica Grupo Bioindicación de Sevilla Estudio integrado del proceso de fangos activos I. Análisis descriptivo de factores físico-químicos y biológicos implicados en su dinámica. Andrés Zornoza1,2, José L. Alonso3, Susana Serrano4, Vicente Fajardo1, Francisco Zorrilla1, Ignacio Bernácer5, José J. Morenilla5 1Grupo Aguas de Valencia, 46014 Valencia, Spain. 2Aula de Bioindicación y Control de Proceso en EDAR. Grupo Bioindicación de Sevilla, Spain. (E-mail: anzorzor@upv.es). 3Instituto Universitario de Investigación de Ingeniería del Agua y Medio Ambiente. Universitat Politècnica de València. Camino de Vera, s/n, 46022 Valencia, Spain. (E-mail: jalonso@ihdr.upv.es). 4Departamento de Microbiología III, Facultad de Biología, Universidad Complutense, 28040 Madrid, Spain. (E-mail: suserra@bio.ucm.es). 5Entidad Pública de Saneamiento de Aguas Residuales de la Comunidad Valenciana (EPSAR), 46010 Valencia, Spain. elevada actividad metabólica incide en la 1. INTRODUCCIÓN capacidad asimilatoria de la materia orgánica por las poblaciones microbianas, por lo que es Muchos estudios coinciden en la importancia indispensable para un buen funcionamiento de de los protistas en las estaciones depuradoras la EDAR. Así pues, dicha comunidad debe de aguas residuales urbanas (EDAR) (Curds, mantenerse en crecimiento activo durante el 1982; Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni et proceso para optimizar el rendimiento en el al., 1993; Madoni, 1994; Salvado et al., 1995). tratamiento secundario. Las poblaciones de protistas juegan un papel A pesar de que los protistas pueden estar fundamental en el proceso de eliminación de involucrados en la eliminación de la materia contaminantes por su participación en las orgánica en los procesos de tratamiento cadenas tróficas y por su contribución a la (Curds y Cockburn, 1970a,b; Curds, 1973), biofloculación (Curds, 1963; Arregui et al., una de sus funciones fundamentales es la 2007, 2008). Además, los protistas tienen depredación sobre las poblaciones de gran relevancia en el control del proceso bacterias libres. La actividad bacterívora de los debido a que son utilizados como indicadores protistas contribuye a la clarificación del biológicos del mismo (Curds y Cockburn, efluente (Curds y Hawkes, 1983), así como a 1970a, b; Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni la eliminación de bacterias patógenas de et al., 1993; Salvado, 1994; Salvado et al., transmisión fecal. Curds (1992) demostró que 1995). en presencia de protozoos se llega a eliminar Diversos autores han demostrado que la el 95 % de E. coli, mientras que en ausencia presencia de los protistas en el sistema de estos organismos el porcentaje disminuye proporciona una mejora en la calidad del hasta un 50 %. efluente (Curds y Cockburn, 1970b; Curds y Con respecto a la determinación de las Hawkes, 1983; Esteban et al., 1991; Al especies de protistas bioindicadoras de control Shahwani y Horan, 1991; Madoni et al., 1993; del proceso, se han llevado a cabo diversos Salvado et al., 1995). El mantenimiento de una estudios utilizando análisis multivariante para
  • 2. 2 Estudio integrado del proceso de fangos activos determinar la relación existente entre diversas más extendido para el tratamiento de las especies de ciliados con parámetros físico- aguas residuales urbanas, aportando nuevos químicos y operacionales en plantas piloto o datos para su optimización y en estaciones depuradoras particulares biomonitorización. Para ello, se ha realizado (Esteban et al., 1991; Sangjin et al., 2004) y a en distintas estaciones depuradoras un partir de los datos obtenidos en varias seguimiento de la comunidad de protistas, plantas (Al-Shahwani y Horan, 1991; Madoni metazoos y bacterias mediante técnicas et al., 1993; Martín-Cereceda et al., 1996). convencionales y de epifluoerescencia, Madoni en 1994 propuso el “Índice Biótico de estructura flocular, sedimentabilidad del fango Fango” (Sludge biotic index-SBI), un índice activo, macroscopía de la V30, parámetros biológico de control de la marcha del proceso operacionales y fraccionamiento de los basado en la determinación de la abundancia parámetros físico-químicos del licor mezcla, de ciertos grupos de protistas como los afluente al reactor y efluente del decantador flagelados, las amebas testáceas o desnudas secundario. y ciertas especies de ciliados sésiles, El objetivo de este artículo es la reptantes o nadadores; este índice biológico presentación, desde un punto de vista es en la actualidad uno de los más utilizados descriptivo, de los resultados obtenidos hasta en el control rutinario de las EDAR. el momento que muestran algunos factores Recientemente los estudios sobre la físico-químicos y biológicos implicados en la comunidad bacteriana del fango activo han dinámica del proceso de fangos activos. ido encaminados sobretodo en una línea claramente taxonómica y fisiológica. Las investigaciones sobre su ecología en fangos 2. MATERIAL Y MÉTODOS activos son menos numerosas que en el caso de los protistas. Estas se encuentran 2.1. Toma de muestras principalmente recogidas en Jenkins et al., 2004, Eikelboom (2000, 2006) y Seviour et Se han estudiado cuatro EDAR localizadas al., (2010). Ambas comunidades, que en la Comunidad Valenciana. Estas constituyen mayoritariamente la fracción comprenden un total de 6 líneas de biótica del licor mezcla, han sido estudiadas de tratamiento independientes, las cuales se forma independiente, junto con una cantidad han nombrado en el presente estudio a limitada de parámetros operacionales, físico- través de las siguientes abreviaturas: QB, químicos y variables de planta. La calidad de CT1, CT2, DE, CX1 y CX2. Todas tratan estos datos hace interesante la aplicación de afluentes urbanos, si bien las líneas QB, CX1 técnicas estadísticas de análisis multivariante y CX2 reciben además aguas industriales. Se para conocer la relación entre los distintos han llevado a cabo campañas de muestreo componentes del sistema. en cada línea durante 1 año con una El proyecto ESTUDIO INTEGRADO DEL frecuencia quincenal desde diciembre de PROCESO DE FANGOS ACTIVOS tiene 2008 hasta diciembre de 2009. En la figura 1 como objetivo general, desde una visión se representa un esquema de cada campaña integrada del sistema y tomando como base la indicándose la duración, origen y tipo de metodología de los estudios realizados en muestra. La campaña ha tenido una duración bioindicación, avanzar en el conocimiento del de 4 días repartidos de la siguiente forma: en proceso de fangos activos, que es el sistema los tres primeros días se muestreó afluente
  • 3. Zornoza et al. 3 al reactor, y en el tercer día se muestreó, Tabla 1. Nº de muestras tomadas por punto de muestreo y EDAR. además, efluente del decantador secundario. Las muestras fueron compuestas, EDAR Nº de muestras obteniéndose a partir de la mezcla de Afluente Licor mezcla Efluente dec. reactor Secundario muestras simples horarias en relación al QB 75 25 25 caudal. En el cuarto día se tomó una muestra CT1 69 23 23 de licor mezcla en el reactor biológico, siendo CT2 69 23 23 DN 69 23 23 esta de tipo simple y de carácter puntual a la CX1 69 23 23 salida del mismo. CX2 69 23 23 En la tabla 1 se indica el número de Total 420 140 140 muestras por punto de muestreo y EDAR tomadas a lo largo del estudio. Día 1 2 3 4 Afluente al reactor y efluente Muestra Afluente al reactor Licor mezcla decantador secundario Tipo de muestra Compuesta (horaria) Simple (puntual) Fig. 1- Esquema campaña de muestreo. 2.2. Parámetros físico-químicos y biológicos 2.3. Identificación y recuento de protozoos y metazoos En la tabla 2 se detallan los parámetros físico-químicos y biológicos determinados en El análisis microscópico de las muestras se las muestras. Los días 1 y 2 se analizaron realizó en un intervalo de tiempo máximo de en el afluente al reactor DQO total, DQO 24 horas después de la toma de muestras, soluble y DBO 5 , mientras que el día 3 se llevó utilizando un microscopio de contraste de a cabo un análisis físico-químico completo fases Zeiss (modelo Axiostar). Para la del afluente y efluente. El objetivo del primer estimación de la densidad de protistas análisis es estudiar la influencia de la carga ciliados y metazoos se llevó a cabo por orgánica y del segundo establecer el recuento directo dos alícuotas de 25 µl rendimiento del proceso biológico. El día 4 se (Madoni, 1988); para el recuento de ciliados procedió al análisis del licor mezcla. Los sésiles coloniales se realizaron cuatro parámetros se han determinado siguiendo los réplicas adicionales. La abundancia se ha procedimientos normalizados (APHA 1998). La expresado en relación a los SSLM (ind/mg fracción filtrada se ha obtenido a través de un SSLM). Para la estimación de la densidad de filtro de lana de vidrio (Whatman GF/C) con un pequeños flagelados se examinan dos tamaño de poro de 1.2 μm, la fracción soluble réplicas, tomando un volumen de 25 µl, en la se obtuvo a través de un filtro de 0.45 μm diagonal de la cámara Fuchs Rosenthal (Grady, 1989). El Índice Volumétrico de Fango (Madoni, 1988). Los organismos fueron (IVF) y su forma diluida (IVFD) se han identificados en vivo usando las claves de calculado según el procedimiento descrito en Foissner et al., (1991, 1992, 1994, 1995, Jenkins et al., 2004. 1996), Rodríguez et al., (2008) y Serrano et
  • 4. 4 Estudio integrado del proceso de fangos activos al., (2008). Cuando fue necesario se utilizó al., 2003). Se consideraron dos grupos de para la identificación la técnica de amebas desnudas según el tamaño celular: impregnación argéntica (Fernández-Galiano amebas grandes (>50 µm) y pequeñas (<50 1976, 1994) y tinción con Flutax-2 (Arregui et µm). Tabla 2. Parámetros físico-químicos y biológicos afluente, efluente y licor mezcla. Afluente al Efl. dec. Parámetros Licor mezcla reactor secundario Día 1,2 Día 3 Día 3 Parámetros Dia 4 pH - x - pH x Conductividad - x - Conductividad x V60 - x - SSLM x SST - x x SSVLM x SSTV - x x SS recirculación x DQO total x x x SSV recirculación x DQO filtrada - x x V1 x DQO soluble x x x V2 x DBO 5 x x x V5 x DBO 5 filtrada - x x V10 x Nitrógeno total - x x V15 x Nitrógeno total soluble - x x V 20 x Nitrógeno amoniacal - x x V 30 x Nitrógeno nitroso - - x Nitrógeno total x Nitrógeno nítrico - - x Nitrógeno total clarificado x Fósforo total - x x Fósforo total x Fósforo total soluble - x x Fósforo total clarificado x Ortofosfato - x x DQO total x Sulfuros - x - DQO total clarificado x Sulfatos - x x Turbidez total clarificado x Tensioactivos aniónicos - x x Absorbancia UV total clarificado x Proteínas - x - Turbidez filtrada clarificado x Carbohidratos - x - Absorbancia UV filtrada clarificado x Grasas - x - Ácidos grasos volátiles - x - Coliformes fecales - x x E.coli - x x 2.4. Identificación y recuento de bacterias densidad según el criterio subjetivo filamentosas propuesto por Eikelboom, que establece el Índice de Filamentos (IF) dentro de una El análisis de morfotipos filamentosos se escala del 0-5 (tabla 3). Se ha empleado un realizó antes de las 48 horas posteriores a la código numérico por línea de cada una de las toma de muestras, siguiendo las bacterias identificadas, de esta forma se recomendaciones para su correcta pretende llevar un mejor seguimiento y manipulación y conservación de Rodríguez et estudiar el polimorfismo para posteriormente al., (2005). Para su identificación se utilizaron asociarlo a los resultados obtenidos las claves propuestas por Eikelboom (2000, mediante la técnica de Hibridación in situ con 2006) y Jenkins et al., (2004) estimándose su sondas marcadas con fluorocromos (FISH).
  • 5. Zornoza et al. 5 Debido a la dificultad que en determinadas una escala arbitraria para poder ser condiciones plantea la estimación de la representados frente a otras variables (tabla densidad, estructura flocular abierta y 5). elevada población de filamentos, se utilizaron valores intermedios de la escala. Se Tabla 5. Escala criterio subjetivo macroscópico. identificó y estimó la densidad de bacterias Aspecto Valor Explicación filamentosas sobre muestras en vivo y fijadas Turbidez 1 = bajo, 2 = medio, 3 1, 2, 3 en tinciones Gram y Neisser, utilizando para Flóculos en suspensión = alto ello microscopía de contraste de fases y Capa cérea 0 = ausencia, 1 = Decantación en bloque 0, 1 campo claro (tabla 4). Esponjamiento presencia Tamaño macroflóculo 1,2 1 < 0,5 cm, 2 > 0,5 cm Tabla 3. Escala criterio subjetivo de Eikelboom. IF Abundancia Explicación Tabla 6. Parámetros operacionales. 0 Ninguno No se observan Variable Unidades 1 Pocos Se observa en un flóculo ocasional 2 Algunos Comunes pero no presentes en DEC. PRIMARIA/SECUNDARIA todos los flóculos Carga hidráulica superficial m3/m2.h 3 Común En todos los flóculos con una Carga hidráulica sobre vertedero m3/m.h densidad 1-5/floc. Carga de sólidos por superficie Kg SS/m2. h 4 Muy común En todos los flóculos con una Carga de sólidos sobre vertedero Kg SS/m. h densidad 5-20/flor Tiempo retención hidráulico horas 5 Abundante En todos los flóculos con una densidad > 20 fil/floc. REACTOR BIOLÓGICO Carga másica kg DBO 5 /kg SSVLM.d Carga volúmica Kg DBO 5 /m Tabla 4. Estimación de la densidad de morfotipos Edad del fango Días filamentosos. Tasa de recirculación % Morfotipos Estimación de la densidad Temperatura ºC Oxígeno % Beggiatoa (< 0.8, 0.8-2 >2 ppm) Tipo 1863 Tipo 0411 2.6. Variables operacionales Tipo 1701 Sobre muestras en vivo. Thiothrix Microscopia de contraste de fases Tipo 021N Tipo 0914/0803 Tipo 0041/0675 Se solicitaron a las distintas estaciones H.hydrossis depuradoras los datos relativos a los días de M. parvicella Sobre muestras fijadas en tinción Nocardioformes Gram. Microscopía de campo claro la campaña de muestreo (días 1,2 y 3) para Sobre muestras fijadas en tinción el cálculo de los parámetros operacionales Nostocoida limícola Gram y Neisser. Microscopía de campo claro de la decantación primaria, secundaria y Sobre muestras fijadas en tinción reactor biológico (tabla 6), de acuerdo con Tipo 0581 Gram. Microscopía de campo claro Sobre muestras fijadas en tinción Metcalf & Eddy (1991). Tipo 0092 Neisser. Microscopía de campo claro Debido a la inercia en el proceso biológico de algunos parámetros operacionales, como 2.5. Análisis macroscópico de la V30 la carga orgánica afluente al reactor biológico (Salvadó et al., 1993), se ha realizado un Durante el ensayo de la V30 se procedió a promedio por campaña de muestreo de cada realizar un análisis macroscópico cualitativo uno de ellos a excepción de la edad del de aspectos relacionados con la fango. Esta se ha calculado en todas las sedimentabilidad del fango activo. Se utilizó líneas con el sumatorio de las variables
  • 6. 6 Estudio integrado del proceso de fangos activos correspondientes a los tres días anteriores al más alto. Respecto al tiempo de retención análisis del licor mezcla (EF3), con excepción hidráulico, las líneas QB, DN operan con de la EDAR DE en la que, debido al régimen valor más elevado que el resto. A excepción de purga de fangos en exceso, se utilizaron de CT1 y CT2, se aprecian diferencias entre los siete días anteriores (EF7). líneas respecto a los valores de oxígeno Los valores de oxígeno disuelto en el disuelto en el reactor. En general, existe una reactor han sido distribuidos en tres gran variabilidad en cuanto a los valores de intervalos (0.8, 0.8-2 y >2 ppm) y expresados los parámetros operacionales del reactor, en porcentaje de tiempo (%). En el caso de como factores a tener en cuenta en el QB, CX1 y CX2 los datos corresponden a rendimiento de depuración. medidores on line situados en la parte final En decantación secundaria se observan del reactor biológico, en CT1 y CT2 a tres escasas diferencias entre los valores de puntos (entrada, parte media y salida) y DE a carga hidráulica. Sin embargo, la carga de nueve puntos equidistantes a lo largo del sólidos es mayor en CT1, CT2 y DE. A reactor. resaltar el elevado tiempo de retención hidráulico de CX1 y CX2 y menor tasa de recirculación respecto al resto de líneas. 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Con referencia a la edad del fango y la carga másica, está muy extendido en el 3.1. Parámetros operacionales campo de la explotación que ambas variables están inversamente relacionadas. En la tabla 7 se muestran los valores Este hecho tiene su origen en el concepto promedio (media aritmética), máximo y contrapuesto de las fórmulas aplicadas para mínimo de cada uno de los parámetros su cálculo, es decir, al reducir las purgas de operacionales. Se observa como los valores fangos en exceso se eleva la edad del fango de los parámetros de la decantación primaria y la concentración de SSLM, disminuyendo pertenecientes a QB, CT1, CT2 y DE son así la carga másica al incrementarse el valor más bajos que CX1 y CX2. El tiempo de del denominador en su fórmula. Por lo tanto, retención hidráulico es un factor importante a se espera una evolución inversa y tener en cuenta, ya que puede influir sobre la proporcional de ambos parámetros bajo un calidad del afluente al reactor y por tanto en eje de simetría imaginario, pues esta el proceso biológico. hipótesis supone que la carga contaminante Dentro de los parámetros del reactor y la temperatura a la cual se produce la biológico, se aprecia mayor diferencia entre degradación son constantes a lo largo del líneas de tratamiento que en decantación tiempo. Estas condiciones no suelen darse primaria. En el caso de la carga másica en en plantas de tratamiento a escala real, pues QB, CX1 y CX2 hay diferencias en los el sustrato puede variar en un espacio corto valores de la media y mayores intervalos que (días) o largo de tiempo (meses) y la CT1 y DN. Esta última ha operado con carga temperatura puede fluctuar en mayor o más baja y rango ms estrecho. En lo que menor grado a lo largo del año en función de respecta a la edad del fango, se observa la situación geográfica de la EDAR. valores promedio e intervalos diferentes entre las distintas estaciones depuradoras, siendo DN la que opera con valor promedio
  • 7. Zornoza et al. 7 Tabla 7. Valores medios, máximos y mínimos de las variables operacionales. PARÁMETROS QB CT1 CT2 DN CX1 CX2 Med. Mín.-Máx. Med. Mín.-Máx. Med. Mín.-Máx. Med. Mín.-Máx. Med. Mín.-Máx. Med. Mín.-Máx. DECANTACION PRIMARIA Si Si Si No Si (misma línea) Carga hidráulica superficial (m 3/m.h) 0.72 0.53-0.93 0.63 0.32-0.77 0.76 0.41-0.89 - - 0.89 0.83-1.10 - - Carga hidráulica sobre vertedero (m 3/m2.h) 4.9 3.6-6.2 4.6 4-5.4 5.4 4.7-6 - - 6.2 5.8-7.7 - - Tiempo retención hidráulico (horas) 5.1 3.9-6.5 4.4 3.7-5 4.4 3.8-5.2 - - 3.5 2.9-3.7 - - REACTOR BIOLÓGICO Caudal (m 3) 35023 - 19481 - 21837 - 19089 - 15784 - 23677 - Carga másica (Kg DBO 5 /kg SSVLM.d) 0.20 0.08-0.47 0.31 0.21-0.43 0.29 0.16-0.60 0.12 0.06-0.21 0.30 0.12-0.45 0.31 0.14-0.49 Carga volumétrica (Kg DBO 5 /m 3) 0.36 0.13-0.73 0.80 0.48-1.27 0.79 0.50-1.35 0.18 0.08-0.38 0.48 0.25-0.91 0.48 0.25-0.91 Edad del fango (días) 11 4-23 6 3-11 7 3-14 17 10-31 7 3-21 7 3-22 Tiempo retención hidráulico (horas) 17 14-22 5.5 4.7-6.3 5.4 4.9-6.2 15 12-19 6.4 5-3-6.9 6.4 5.3-6.8 Oxígeno < 0.8 ppm (%) 33 5-69 15 0-34 22 0-50 55 37-64 1 0-10 11 0-63 Oxígeno 0.8-2 ppm (%) 61 12-95 41 14-63 38 21-49 30 21-38 4 0-23 25 1-74 Oxígeno > 2 ppm (%) 5 0-40 44 10-86 39 13-73 14 8-42 96 66-100 64 19-97 DECANTACION SECUNDARIA Carga hidráulica superficial (m 3/m.h) 0.49 0.36-0.65 0.62 0.53-0.71 0.77 0.68-0.86 0.54 0.42-0.65 0.44 0.40-0.54 0.54 0.51-0.67 Carga hidráulica sobre vertedero (m 3/m2.h) 3.7 0.9-5.4 4.5 3.9-5.2 5.4 4.7-6 3.4 2.6-4.1 3.4 3.1-4.2 4.6 4.3-5.7 Carga de sólidos por superficie (Kg SS/m2.h) 1.1 0.7-1.5 2.3 1.4-3.5 3.1 1.4-4.1 2.2 0.5-6.5 0.9 0.6-1.3 1.1 0.8-1.6 Carga de sólidos sobre vertedero (Kg SS/m.h) 9 6-13 16 10-25 21 10-29 14 3-41 7 5-10 9 7-13 Tiempo retención hidráulico (horas) 6.8 5-9.2 4.9 4.2-5.6 5.3 4.7-6.3 6.6 5.5-8.4 9.2 7.6-9.9 8 6.6-8.6 Tasa de recirculación (%) 134 94-179 126 103-159 99 91-139 89 66-120 61 50-66 - -
  • 8. 8 Estudio integrado del proceso de fangos activos En la figura 2 se representa la evolución interpretación y cálculo en determinadas de ambos parámetros en la línea QB, donde situaciones sigue siendo, hoy por hoy, una el intervalo de temperatura en el reactor asignatura pendiente para una gran mayoría biológico ha sido de 14 – 29 ºC (tabla 8). Se de los responsables de explotación. observa una evolución inversa proporcional Actualmente tiene más utilidad para el diseño de la carga másica y edad del fango hasta el de estaciones depuradoras que para el muestreo 4. A partir de ahí ambos control rutinario en la EDAR, determinando al evolucionan de forma independiente. final que la estrategia principal sea Con referencia a la edad del fango y la establecer un régimen de purgas de fangos carga másica, está muy extendido en el en exceso hasta mantener la concentración campo de la explotación que ambas deseada de SSLM. El problema aparece en variables están inversamente relacionadas. el momento en que no se purgan fangos Este hecho tiene su origen en el concepto durante un día: si tenemos en cuenta para su contrapuesto de las fórmulas aplicadas para cálculo la concentración de SST del efluente su cálculo, es decir, al reducir las purgas de de decantación secundaria obtendremos fangos en exceso se eleva la edad del fango valores de edad de fango muy elevados e y la concentración de SSLM, disminuyendo incongruentes. Algunos responsables de así la carga másica al incrementarse el valor explotación optan erróneamente por del denominador en su fórmula. Por lo tanto, solucionar el problema sumando días se espera una evolución inversa y naturales sin purga a la última edad de fango proporcional de ambos parámetros bajo un calculada en condiciones normales, o realizar eje de simetría imaginario, pues esta un promedio de las edades de fango diarias hipótesis supone que la carga contaminante de los días previos. Una solución práctica y la temperatura a la cual se produce la podría ser su cálculo a partir de la suma de degradación son constantes a lo largo del las variables de un cierto número de días, tiempo. Estas condiciones no suelen darse que dependerá del régimen de purgas de la en plantas de tratamiento a escala real, pues EDAR (p.e; EF3 = 3 días, EF7 = 7 días). En el sustrato puede variar en un espacio corto la figura 3 se representa la EF3 frente a la (días) o largo de tiempo (meses) y la EF7 de la línea DN, la cual tiene la temperatura puede fluctuar en mayor o particularidad de centralizar las purgas de menor grado a lo largo del año en función de fangos en exceso de forma aleatoria en la situación geográfica de la EDAR. En la determinados días. Para una mejor figura 2 se representa la evolución de ambos visualización de los datos se ha optado por parámetros en la línea QB, donde el intervalo dar un valor de 40 días a los muestreos 1, 3 de temperatura en el reactor biológico ha y 12 en la EF3, siendo sus valores sido de 14 – 29 ºC (tabla 8). Se observa una calculados más elevados (128, 48, 307). En evolución inversa proporcional de la carga la figura se observa como aproximadamente másica y edad del fango hasta el muestreo 4. en la mitad de los muestreos la EF3 muestra A partir de ahí ambos evolucionan de forma una desviación considerable respecto a la independiente. EF7. Aunque la fórmula para el cálculo de la edad del fango es bien conocida, su
  • 9. Zornoza et al. 9 QB EF3 Carga másica 25 0,5 (Kg DBO5/Kg SSVLM.d) 20 0,4 EF3 (dias) C. másica 15 0,3 10 0,2 5 0,1 0 0,0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Muestreos Fig. 2- Evolución de la carga másica frente a la edad del fango (EF3) en QB. DN EF3 EF7 40 EF3 - EF7 (días) 30 20 10 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 3 – Representación de EF3 frente a EF7 en DN. 3.2. Parámetros físico-químicos En la figura 4 se ha representado el macroflóculo, denominando este como la promedio en porcentaje (%) de las distintas unión de numerosos flóculos, y la segunda a fracciones de la DQO y DBO 5 en el afluente. través de procesos de adsorción. Esta última Se puede observar como aproximadamente tiene un bajo porcentaje (8 %) del total de la mitad de la DQO total es soluble y por DQO. Con un tiempo adecuado de retención tanto fácilmente disponible para los procesos celular la fracción particulada puede llegar a de oxidación y síntesis de la biomasa en un ser degradada dentro del reactor biológico, espacio corto de tiempo. El resto es la principalmente a través de mecanismos denominada fracción particulada, relativa a exoenzimáticos, o ser eliminada con la purga los sólidos en suspensión y a partículas de fangos en exceso. Los valores de la coloidales con un tamaño comprendido entre fracción en suspensión de la DBO 5 (38 %) y 0.45-1,2 μm. La primera se elimina del agua la DQO (39 %) coinciden. residual por “atrapamiento” en el
  • 10. 10 Estudio integrado del proceso de fangos activos DQO soluble DQO part. susp. DQO col. (1,2-0,45 micras) 8% 39% 53% DBO filtrada DBO part. susp. 38% 62% Fig. 4 – Porcentaje de las distintas fracciones de la DQO y DBO 5 en el afluente al reactor. El fraccionamiento de los parámetros 1.- El porcentaje de la fracción suspendida y físico-químicos del efluente tratado es soluble es muy elevada. Se corresponde con fundamental para poder discernir entre un un episodio de mala separación, escape de episodio de una deficiente separación del sólidos (biomasa), y mala depuración. fango en el clarificador secundario y una 2.- En este episodio el porcentaje de la mala depuración, entendiendo esta última fracción suspendida es menor que el anterior como un escaso rendimiento de eliminación pero todavía significativa. La fracción soluble del sustrato (materia orgánica y/o nutrientes). sigue siendo elevada. Se corresponde con A pesar de ello, continúan utilizándose un episodio de deficiente depuración y parámetros como la DQO, DBO 5 , nitrógeno y moderada separación. fósforo en su forma total. Este hecho dificulta 3.- El porcentaje de la fracción suspendida es el análisis y seguimiento de la calidad del elevado y el valor de la DQO soluble media- fango activo y agua tratada. En la figura 5 se baja. Se corresponde con un episodio de ha representado el fraccionamiento de la mala separación y buena depuración. DQO del efluente tomado a partir de datos 4.- El porcentaje de la fracción suspendida es experimentales. En el diagrama de barras se nula y el valor de la fracción soluble es bajo. representan cuatro posibles situaciones, Se corresponde con un episodio de buena donde se muestra el porcentaje de cada una separación y depuración. de fracciones y dentro de cada una el valor Hay que destacar en todos los casos el de la DQO (mg O 2 /L): valor prácticamente despreciable de la fracción coloidal.
  • 11. Zornoza et al. 11 DQO soluble DQO part. susp. DQO col. (0.45 - 1.2 micras) 4 37 3 44 68 2 70 29 1 96 252 0% 20% 40% 60% 80% 100% Fig. 5 – Fraccionamiento de la DQO en el efluente del decantador secundario. 3.3. Licor mezcla ha decantado con estas características. El cálculo del IVF a partir de una sedimentación En la tabla 8 se representa el valor medio, en bloque y valor elevado de V30 origina un máximo y mínimo de los parámetros físico- sesgo en el mismo. Este se aprecia en la químicos y características macroscópicas del diferencia entre el IVF (n=0), en el que no se licor mezcla. Se observa como se ha ha practicado ninguna dilución sobre la V30, operado con niveles distintos de y el IVF donde no ha sido necesario o se ha concentración de SSLM, siendo en CT y DN tenido que proceder a diluir; n=1, 2… (1:1, donde se ha encontrado el porcentaje de 1:2…). Los intervalos de nitrógeno total fracción volátil más bajo. La temperatura en (NTLM) fueron similares en todas las líneas el reactor biológico es uno de los factores menos en DN, siendo la media mas elevada ambientales más importantes implicados en la registrada en CX1 y CX2. El intervalo de la dinámica de los fangos activos, ya que concentración de fósforo total (PTLM) fue influye en la velocidad de las reacciones similar en las líneas QB, CX1, CX2 y DN, en bioquímicas de los microorganismos. Los esta última ligeramente mas estrecho, valores más elevados (29 ºC) se registraron mientras que en CT1 y CT2 el intervalo ha en QB y CT y el más bajo (11 ºC) en DN, sido más amplio y con una concentración produciéndose una variación total de 11-15 más alta. Los valores de la biomasa (SSV) ºC a lo largo del muestreo en los diferentes expresada como DQO total analizada en reactores. Todas las líneas registraron todas las líneas (1.15-1.67 gDQO/gSSV) se valores elevados de la V30 a excepción de corresponden con los obtenidos CX1. Este hecho esta relacionado experimentalmente por otros autores (Bullock directamente con la decantación que se et al., 1996). Dentro de las características produce lentamente y en bloque debido a macroscópicas, el valor promedio más alto una elevada concentración de SSLM y/o respecto a la turbidez se ha observado en esponjamiento. CT y DN han sido las líneas CT1 y CT2 y respecto a sólidos en donde con mayor frecuencia el licor mezcla suspensión en QB y CT1.
  • 12. 12 Estudio integrado del proceso de fangos activos Tabla 8. Valores medios, máximos y mínimos de parámetros físico-químicos y características macroscópicas del licor mezcla. PARÁMETROS QB CT1 CT2 DE CX1 CX2 Ud. Med. Mín.-Max. Med. Mín.-Max. Med. Mín.-Max. Med. Mín.-Max. Med. Mín.-Max. Med. Mín.-Max. pH 7,4 7-7.8 7.2 6.7-7.5 7.20 6.9-7.6 7.4 6.9-8 7.4 7-7.9 7.5 7.1-7.8 Conductividad mS/cm 2.0 1.3-2.7 3.0 1.9-4.9 2.9 1.9-4.8 2.8 1-5.4 1.6 1.2.5 1.6 1-2.2 SSLM g/L 2.5 1.8-3.1 4.1 2.6-6.2 4.1 2.5-6.8 3.2 2.5-3.8 1.9 1.1-3 1.8 1.1-2.8 SSVLM % 79 68-87 72 64-78 72 61-86 69 62-75 83 70-91 83 73-88 SS recirulación mg/L 3.8 2.7-4.9 5.5 3-11 5.9 2.8-8.7 5.6 2.4-10.3 2.7 1.6-5.7 - - Relación recirculación 1,6 1-2.2 1.4 0.7-2 1.4 0.9-2 1.8 0.7-3.5 1.4 0.9-2.3 - - Temperatura ºC 21 14-29 22 16-29 22 15-29 18 11-26 20 15-27 20 15-26 V30 (n=0) mL/L 339 140-720 579 300-920 587 160-950 461 330-740 222 110-440 280 120-800 IVF (n=0) mL/g 136 59-245 142 92-201 136 64-228 143 103-234 117 74-228 154 76-464 IVF (n=0,1,2…) mL/g 119 59-167 109 81-161 109 64-106 109 85-140 112 74-200 131 76-286 NTLM mg/gSSVLM 71 41-108 54 30-96 52 31-109 57 31-78 96 72-140 96 67-138 PTLM mg/gSSVLM 29 19-40 60 42-75 57 27-76 35 28-43 24 19-39 26 20-40 DQO total g/gSSVLM 1.42 1.25-1.63 1.41 1.26-1.60 1.42 1.30-1.53 1,45 1,28-1,61 1-38 1.21-1.54 1.39 1.15-1.67 Turbidez 1,2,3 1.5 1-3 2.7 1.5-3 2.7 1-3 1.2 1-2 2 1-3 2 1-3 Flóculos en suspensión 1,2,3 2 1-3 2 1.5-2.5 1.8 1-2 1.7 1-2.5 1.7 1-2.5 1.8 1-3 Capa cérea 0,1 0.5 0-1 1 - 1 - 0.8 0-1 0.4 0-1 0.3 0-0.5 Decantación en bloque 0,1 0.3 0-1 0.9 0-1 0.7 0-1 0.9 0.5-1 0.1 0-1 0.2 0-1 Esponjamiento 0,1 0 - 0 - 0 - 0 - 0 - 0 - Tamaño macroflóculo 1,2 2 1-2 1.7 1-2 1.8 1-2 2 - 1.8 1-2 1.8 1-2
  • 13. Zornoza et al. 13 Se ha llevado a cabo un análisis del gráficos se puede observar como a medida nitrógeno total del flóculo (NTLM) para que aumenta la Tª a partir de 20-22 ºC realizar un seguimiento indirecto de las disminuye el nitrógeno. Estos resultados sustancias poliméricas extracelulares (SPE), concuerdan con los de otros autores sobre la ya que las proteínas son unos de sus disminución de EPS que tiene lugar en las componentes mayoritarios. En la figura 6 se épocas del año donde la Tª del reactor representa el contenido en nitrógeno de las biológico es alta. líneas QB y DN frente a la Tª. En ambos QB NTLM Temperatura 140 30 NTLM (mg/g SSVLM) Temperatura (ºC) 110 80 20 50 20 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Muestreos CX1 150 30 NTLM (mg/g SSVLM) Temperatura (ºC) 125 100 20 75 50 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 6 – Representación del nitrógeno orgánico del licor mezcla (NTLM) frente a la Tª. El incremento del IVF en el fango activo se observa un incremento importante del IVF no está solamente asociado con un que no está asociado directamente con la incremento de la población de bacterias población filamentosa dominante (Microthrix filamentosas (Tandoi et al., 2005). Un parvicella) ya que en los muestreos 2-4 y 9- aumento del contenido en EPS con 11 el IF de esta alcanzó el mismo valor (5) y disminución del núcleo flocular (anóxico) es sin embargo se observan diferencias un factor que favorece el incremento del IVF. considerables del IVF. Una posible En la figura 7 se representa la concentración explicación sería que el nivel bajo de SSLM de SSLM frente al IVF. Del muestreo 9 al 11 para una misma carga másica y temperatura
  • 14. 14 Estudio integrado del proceso de fangos activos sea un factor que potencie la disminución del puede apreciar las diferencias existentes tamaño de los núcleos floculares (residuo entre ambos, sobre todo importantes en celular), y por tanto una disminución del peso determinados muestreos (5, 6, 7 y 9). No específico y velocidad de sedimentación (la realizar la dilución correcta en el ensayo de significación estadística de esta relación la V30 cuando nos encontramos ante un deberá ser comprobada). La concentración episodio de bulking o elevada concentración de SSLM en el periodo 2-4 fue más alta que de SSLM, ocasiona un sesgo en el resultado en el 9-11. del IVF y por tanto una interpretación En la figura 8 se representa el IVF frente incorrecta de la calidad del fango activo. al IVFD (diluido) en DN. En el gráfico se SSLM IVF CX2 3000 300 2500 SSLM (mg/L) IVF (mL/g) 2000 150 1500 1000 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 7 – Representación de la concentración de SSLM frente al IVF. IVF (n=0) IVFD (n=1) DN 250 200 IVF (mL/g) 150 100 50 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 8 – Representación del IVF frente al IVFD. 3.4. Bacterias filamentosas filamentosas repartidas de forma similar entre todas las líneas (tabla 8). Nostocoida Al final del estudio se han identificado y limícola ha sido la bacteria que mayor codificado un total de 116 bacterias polimorfismo ha presentado con un máximo
  • 15. Zornoza et al. 15 en QB (8 códigos) y un mínimo en DN, CX1 y morfotipos tienen capacidad exoenzimática, CX2 (5 códigos). En la tabla además se por lo que en determinadas condiciones representa el valor promedio del IF de pueden ser más competitivos que otros. Se aquellas bacterias que han aparecido como ha representado para poder observar este secundarias (3.5-4.5) y dominantes (4.5-5) hecho de forma aproximada e indirecta siendo en QB donde mayor número total de morfotipos dominantes/secundarias del tipo ambas (12) y secundarias (7) se ha N. limícola, M. parvicella y nocardioformes identificado. CT1 ha sido la línea donde frente al nitrógeno total (NTLM) (figura 9). Se mayor número de bacterias dominantes se observa generalmente como en los periodos ha encontrado (7). de muestreo en los que el NTLM es bajo el IF En color rojo se muestra aquellas decrece pasando de ser dominantes y bacterias filamentosas en las que en secundarios a ser principalmente escasos. ocasiones ha sido imposible estimar el IF a Algunos estudios señalan que la Tª es un través del procedimiento convencional. A factor que influye en el crecimiento de continuación se indican los motivos: algunas bacterias filamentosas, como por ejemplo del tipo nocardioformes y Microthrix - CX1-23, CX2-23 y QB-21: por ser un parvicella. La primera con un crecimiento filamento Gram negativo similar a óptimo a partir de 15 ºC y la segunda con un Microthrix parvicella (tipo 0581). crecimiento óptimo en torno a 22 ºC, - CT1-21 y CT2-21: en ocasiones ha pudiendo llegar hasta 7 ºC, y desfavorable a mostrado una reacción negativa a la partir de 25 ºC (Eikelboom, 2006). En la tinción de Gram. figura 10 se ha representado el IF de ambas - DN-19 y CX1-20: por ser filamentos respecto a la Tª en el reactor, observándose muy cortos, estrechos e que se cumple el rango óptimo según lo intrafloculares del tipo Nostocoida indicado anteriormente. limícola. El morfotipo 0581 es uno de los grandes - CT1-09, CT2-09, DN-07, CT1-06, desconocidos (Zornoza et al., 2006) del que CT2-06 y DN-08: por ser filamentos apenas existen datos a nivel fisiológico. En la muy estrechos, cortos y Gram figura 11 se ha representado este morfotipo negativos en flóculos abiertos y (Gram negativo) junto a M. parvicella (Gram disgregados con abundantes positivo) frente a la Tª. A partir de 25 ºC filamentos. (muestreo 14) se observa la desaparición prácticamente Microthrix parvicella para dar Algunos autores mencionan que paso al morfotipo 0581. determinados morfotipos filamentosos de crecimiento principalmente intraflocular tienen una dependencia directa del sustrato presente en la microestructura, como por ejemplo las SPE. Algunos de estos
  • 16. 16 Estudio integrado del proceso de fangos activos Tabla 8. Codificación de bacterias filamentosas (COD.). Valor promedio de Índice de Filamentos (IF) y abundancia (Ab.) de morfotipos dominantes y secundarios. MORFOTIPO QB CT1 CT2 DN CX1 CX2 COD. IF Ab. COD. IF Ab. COD. IF Ab. COD. IF Ab. COD. IF Ab. COD. IF Ab. Beggiatoa - - - - - - - - - DN-14 - - - - - CX2-22 - - Tipo 1863 QB-16 - - CT1-16 - - CT2-16 - - DN-16 - - CX1-16 - - CX2-16 - - Tipo 0411 - - - CT1-17 - - CT2-17 - - - - - CX1-08 - - CX2-08 - - Tipo 1701 QB-08 2.8 Sec CT1-12 - - CT2-12 0.5 Sec DN-20 - - CX1-10 1.7 Sec CX2-10 1.5 Sec Thiothrix QB-09 2.1 Dom CT1-19 - - CT2-19 - - DN-03 - - - - - - - - Tipo 021N QB-12 1.1 Sec CT1-08 - - CT2-08 - - DN-13 - - CX1-01 3.0 Dom CX2-01 3.0 Dom QB-06 CT1-13 - - CT2-13 1.9 Sec DN-09 - - CX1-17 - - CX2-17 - - M. parvicella QB-07 2.0 Dom CT1-02 2.8 Dom CT2-02 2.2 sec DN-11 4.2 Dom CX1-12 2.6 Dom CX2-12 3.0 Dom QB-20 0.7 Dom - - - - - - - - - - - - - - - Tipo 0581 QB-21 - - - - - - - - - - - CX1-23 1.6 Dom CX2-23 1.6 Dom Nocardioformes QB-01 2.7 Dom CT1-01 4.7 Dom CT2-01 4.7 Dom DN-10 - - CX1-15 - - CX2-15 - - Nostocoida limícola QB-19 - - CT1-15 - - CT2-15 - - DN-01 - - CX1-21 - - CX2-21 - - QB-02 2.9 Dom CT1-14 - - CT1-14 - - DN-04 - - CX1-06 1.6 Sec CX2-06 - - QB-15 - - CT1-11 - - CT2-11 - - DN-15 - - CX1-18 - - CX2-18 - - QB-04 - - CT1-18 - - CT2-18 - - DN-17 1.7 Dom CX1-19 - - CX2-19 - - QB-13 - - CT1-21 - - CT2-21 - - DN-19 - - CX1-20 2.1 Sec CX2-20 2.0 Sec QB-17 - - CT1-20 1.9 Dom CT2-20 1.8 Dom - - - - - - - - - QB-22 0.3 Sec - - - - - - - - - - - - - - - QB-18 0.3 Sec - - - - - - - - - - - - - - - Tipo 0914/0803 QB-14 2.9 Sec CT1-07 3.9 Dom CT2-07 3.9 Dom DN-05 3.8 Dom CX1-09 2.3 Sec CX2-09 2.3 Sec Tipo 0041/0675 QB-05 2.9 Sec CT1-04 2.5 Sec CT2-04 - - DN-06 - - CX1-04 2.4 Sec CX2-04 - - Tipo 0092 QB-10 - - CT1-03 4.0 Dom CT2-03 3.8 Dom DN-12 4.7 Dom CX1-24 1.4 Dom CX2-24 1.8 Dom H. hydrossis QB-11 2.8 Sec CT1-09 2.7 Dom CT2-09 2.5 Sec DN-07 4.1 Dom CX1-11 3.3 Dom CX2-11 3.2 Dom Desconocido - - - CT1-06 4.1 Dom CT2-06 3.8 Dom DN-08 4.3 Dom CX1-03 - - CX2-03 - - - - - - - - - - - - - - CX1-02 - - CX2-02 - - TOTAL 21 12 19 8 19 9 18 6 19 10 20 8
  • 17. Zornoza et al. 17 QB QB-02 QB-07 QB-01 NTLM 6 120 NTLM /mg/g SSVLM) 4 80 IF (0-5) 2 40 0 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Muestreos CX1-06 CX1-12 NTLM CX1 6 160 NTLM (mg/g SSVLM) 4 120 IF (0-5) 2 80 0 40 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 9 – Representación de bacterias del tipo Nostocoida limícola, Nocardiofrmes y Microthrix parvicella frente al NTLM QB QB-07 QB-01 Temperatura 6 30 Temperatura (ºC) 25 IF (0-5) 3 20 15 0 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Muestreos
  • 18. 18 Estudio integrado del proceso de fangos activos DN-11 DN-10 Temperatura DN 6 30 Temperatura (ºC) 25 IF (0-5) 3 20 15 0 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos CT2 CT2-01 CT2-02 Temperatura 6 30 Temperatura (ºC) 25 IF (0-5) 3 20 15 0 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 10 – Representación de nocardiofrmes y Microthrix parvicella frente a la Tª. CX1-12 CX1-23 Temperatura CX1 6 30 Temperatura (ºC) 25 IF (0-5) 3 20 15 0 10 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 11 – Representación de Microthrix parvicella y tipo 0581 frente a la Tª.
  • 19. Zornoza et al. 19 3.5. Protistas y metazoos primero con una frecuencia mucho mayor que el segundo en QB. En la tabla 9 se muestra la media en los En la figura 12 se ha representado el valor porcentajes de abundancia de cada uno de promedio (%) de abundancia de los grupos los taxones de ciliados, sarcodinos y taxonómicos en ambas líneas. En DN el metazoos en QB y DN; en función de estos grupo de peritricos y filofaringeos, con valores se ha atribuido, en la columna valores bastante similares, son los más siguiente, una posición dentro del rango de abundantes. Sin embargo, el grupo de los abundancia promedio; por último se muestra filofaríngeos en QB se encuentra en la tercera columna el valor máximo del prácticamente ausente (< 5%), siendo los porcentaje de abundancia para cada taxón. peritrícos el grupo más representativo (52 Se recogen únicamente aquellas especies %). que han alcanzado un porcentaje máximo de En la figura 11 se ha representado la abundancia superior al 5%, con un total de distribución de la densidad total de ciliados 30 y 25 taxones en QB y DN en ambas líneas. Como se observa la respectivamente. comunidad de ciliados presentó En ambas líneas los mayores porcentajes generalmente una mayor densidad en QB. de abundancia corresponden a ciliados Los datos que se han expuesto y asociados al flóculo (reptantes y sésiles). En representado referente a la estructura de la la línea QB los ciliados sésiles presentan una comunidad de protistas y metazoos muestran mayor abundancia total, siendo la especie diferencias destacables. Probablemente dominante el peritrico colonial Epistylis estas sean debidas a las diferencias balatónica; en contraste en la línea DN son existentes entre los parámetros más representativos los ciliados reptantes, operacionales de ambas líneas (tabla 7), siendo las especies Trochilia minuta y principalmente en la carga másica y edad de Acineria uncinata las que acumulan un 49 % fango. La línea QB ha operado con mayor del porcentaje de abundancia promedio. Los intervalo y valor promedio más alto de carga ciliados nadadores presentan valores más másica, así como una edad de fango más altos de densidad en la línea QB, baja. Esto ocasiona un incremento del especialmente la especie Uronema nigricans. metabolismo bacteriano y por consiguiente Dentro del grupo de los sarcodinos también un incremento en el fango activo de la se aprecian algunas diferencias importantes, densidad de las especies bacterívoras, como en QB la comunidad estaría por ejemplo los ciliados sésiles peritricos. fundamentalmente constituida por amebas desnudas, principalmente amebas desnudas (>50 μm), mientras que en DN dominan las especies del género Arcella sp. Con respecto a los flagelados no se aprecian grandes diferencias entre ambas líneas. En el grupo de los metazoos los dos géneros más frecuentes fueron Lecane sp. y Rotaria sp., ambos con una frecuencia similar en DN y el
  • 20. 20 Estudio integrado del proceso de fangos activos Hipotricos Pleurostomatidos Filofaringeos Peritricos G. taxonómicos >5% DN 6% 13% 28% 22% 31% Hipotricos Pleurostomatidos Escuticociliados Peritricos G. taxonómicos >5% QB 8% 17% 17% 52% 6% Fig. 12 – Valor promedio de abundancia de los grupos taxonómicos en QB y DN. Ciliados DN Ciliados QB 10000 8000 Ind./mg SSLM 6000 4000 2000 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 Muestreos Fig. 11 – Evolución de la densidad de ciliados en DN y QB.
  • 21. Zornoza et al. 21 Tabla 9. Promedio de la abundancia y valor máximo (%) de protistas y metazoos identificados en QB y DN. Taxones QB DN Med. Máx. Med. Máx. Rango Rango (%) (%) (%) (%) Ciliados nadadores libres Amphileptus punctatus 1.1 - 12 0 - 0 Holophrya sp. 1.0 - 12 0 - 0 Uronema nigricans 3.6 7 29 0.9 - 5.6 Pseudocohnilembus .pusillus 1.9 - 29 1.4 - 14 Ciliados reptantes Aspidisca cicada 15 3 63 13 3 28 Acineria uncinata 16 2 76 22 2 76 Euplotes affinis 1.2 - 15 0 0 Pseudochilodonopsis fluviatilis 1.1 - 5 3.1 8 15 Trochilia minuta 2.9 9 27 27 1 56 Gastronauta membranaceus 0.7 - 11 0 - 0 Ciliados sésiles Opercularia articulata 3,3 8 22 12 4 55 Epistylis plicatilis 11 5 54 0 - 0 Epistylis Chrysemidis 2.0 - 17 0 - 0 Epistylis balatonica 17 1 52 1.9 10 25 Vorticella aquadulcis 11 4 45 6.4 5 64 Vorticella convallaria 3,9 6 35 3.1 7 36 Vorticella microstoma 2.3 10 15 1.2 - 8.9 Pseudovorticella sp. 0 - 0 2.4 9 17 Carchesium polypinum 2.0 - 25 0 - 0 Opercularia Asymmetrica 0.3 - 7 0 - 0 Acineta tuberosa 0.6 - 6 3.5 6 8.4 Sarcodinos Arcella sp 9 3 60 35 2 97 Euglypha sp. 1 - 12 0 - 0 Pyxidicula operculata 1 - 26 1.7 - 30 Amebas desnudas (> 0.50 µm) 36 2 88 3.2 3 16 Amebas desnudas (< 0.50 µm) 53 1 97 61 1 97 Grandes flagelados Peranema trichophorum 60 1 100 48 - 100 Entosiphon sp. 40 - 91 51 1 100 Euglena sp. 0 - 0 0.7 - 13 Pequeños flagelados (diagonal FR) 20 - >100 10 - 45 Metazoos Rotaria sp. 17 2 100 44 2 90 Lecane sp. 74 1 100 48 1 100 Nematodo 0 - 0 7.6 - 33 Gastrotricos 0 - 0 0,7 - 17
  • 22. 22 Estudio integrado del proceso de fangos activos 4. CONCLUSIONES un seguimiento indirecto y aproximado de la presencia de EPS, pues estos influyen Las primeras conclusiones sobre los en la sedimentabilidad del fango activo. resultados descriptivos obtenidos hasta el momento que muestran algunos factores 4. Nostocoida limícola ha sido el tipo implicados en la dinámica del proceso de filamentoso que mayor polimorfismo ha fangos activos son: presentado. En estos casos la identificación mediante la técnica FISH 1. Existe una importante variabilidad ofrecería una alternativa interesante y referente a los valores de los parámetros efectiva para el seguimiento de este. En operacionales de planta. La carga determinadas condiciones, flóculos másica y la edad del fango evolucionan abiertos con una abundante población de forma independiente la mayor parte filamentosa, está técnica podría ser de del tiempo. Las diferencias del régimen gran ayuda para la estimación de la de purga de fangos en exceso en las abundancia de bacterias Gram y Neisser EDAR hacen necesario el establecer negativas. La temperatura en el reactor criterios unificados de cálculo, biológico es un factor importante en la principalmente enfocados a obtener dinámica de las bacterias filamentosas, valores representativos de la dinámica sobre todo en el grupo de las del proceso. nocardioformes y Microthrix parvicella. 2. El seguimiento rutinario de la DQO 5. La estructura de la comunidad de soluble del afluente al reactor es más protistas y metazoos así como su interesante que la DQO total, ya que la densidad varían en función de una serie DQO particulada se presenta en de factores; siendo los más importantes ocasiones como una fracción importante la carga másica, la edad del fango y la dentro de esta última. El fraccionamiento temperatura. de los parámetros físico-químicos del efluente tratado es fundamental para poder discernir entre un episodio de una AGRADECIMIENTOS deficiente separación del fango en el clarificador secundario y una mala Este proyecto de investigación ha sido depuración. financiado por la Entidad Publica de Saneamiento de Aguas Residuales de la 3. La decantación lenta y en bloque con Generalitat Valenciana (EPSAR) y el valor alto de V30 que se produce en proyecto CGL2008-02310 del Ministerio de condiciones de elevada concentración de Ciencia e Innovación. Queremos agradecer SSLM y/o esponjamiento origina un la colaboración de cada una de las empresas sesgo en el valor del IVF, siendo explotadoras (FACSA, OMS-SACEDE, DAM necesario realizar la dilución y AVSA-EGEVASA). correspondiente para poder conocer la calidad del fango. El nitrógeno total del flóculo (NTLM) podría ser un parámetro interesante de rutina para llevar a cabo
  • 23. Zornoza et al. 23 REFERENCIAS of five sewage treatment plants in Beijing, APHA-AWWA-WEF., 1998. Standard China. European J. Protistol. 40:147–152. Methods for the Examination of Water and Curds, C.R., 1963. The flocculation of Wastewater, 20th ed. American public suspended matter by Paramecium Health Association/American Water Works caudatum. J. Gen. Microbiol. 33, 357-363. Association/Water Environment Curds C. R, Hawkes, H.A., 1983. Biological Federation, Washintong, DC, USA. activities and treatment process. Arregui, L., Muñoz, C., Guinea, A. y Serrano, Ecological Aspects of Used-Water S., 2003. FLUTAX employment simplifies Treatment. Academic Press, London Vol. the visualization of the ciliature of 2. oxytrichid hypotrichs. Eur. J. Protistol. Curds, C. R., Fey, G. J., 1969. The effect of 39:169–172. ciliated protozoa on the fate of Escherichia Arregui, L., Serrano, S., Linares, M., Pe´rez- coli in the activated sludge process. Wat. Uz, B. y Guinea, A., 2007. Ciliate Res. 3:853-867. contributions to bioaggregation: Curds, C. R., Cockburn, A., 1970a. Protozoa laboratory assays with axenic cultures of in biological sewage-treatment processes- Tetrahymena thermophila. International -I. A survey of the protozoan fauna of Microbiology 10, 91-96. British percolating filters and activated- Arregui, L., Linares, M., Pe´rez-Uz, B., sludge plants. Wat. Res. 4: 225-236. Guinea, A., Serrano, S., 2008. Curds, C. R., Cockburn, A., 1970b. Protozoa Involvement of crawling and attached in biological sewage-treatment processes- ciliates in the aggregation of particles in -II. Protozoa as indicators in the activated- wastewater treatment plants. Air, Soil and sludge process. Wat. Res. 4:237-249. Water Research 1, 13-19. Curds, C.R., 1973. The role of protozoa in the Al-shahwani, S.M., Horan, N.J., 1991. The activated-sludge process. Am. Zoologist use of protozoa to indicate changes in the 13:161–169. performance of activated sludge plants. Curds, C.R., 1982. The ecology and role of Water Res. 25:633–638. protozoa in aerobic sewage treatment Alonso, J.L., Cuesta, G., Ramírez, G.W., processes. Annual. Rev. Microbiol. 36:27– Morenilla, J.J., Bernácer, I., Lloret, R.M., 46. 2009. Manual de técnicas avanzadas Curds, C.R., 1992. Protozoa and the Water para la identificación y control de bacterias Industry. Cambridge University Press, filamentosas. EPSAR Generalitat Cambridge, U.K. Valenciana. Eikelboom, D.H., 2000. Process control of Bullock, C.M., Bicho, P., Zhang, Y., Saddle, activated sludge plants by microscopic J.N., 1996. A solid chemical oxygen investigation. IWA Publishing, London. demand (COD) method for determining Eikelboom, D., 2006. CD-ROM Identification biomass in waste waters. Water Res. and Control of Filamentous 30:1280-1284. Microorganisms in Industrial Activated Chena, S., Xua, M., Caoa, H. Zhua, J., Sludge Plants. IWA Publishing, London. Zhoua, K., Ua, J., Yangb, X., Ganb, Y., Esteban, G., Tellez, C., Bautista, L.M., 1991. Liub, W., Zhaib, J., Shaob, Y., 2004. The Dynamics of ciliated protozoa communities activated-sludge fauna and performance