El documento describe un estudio sobre la expresión de la proteína de choque térmico 27 (HSP27) en líneas celulares de cáncer de próstata tratadas y no tratadas con doxazosina. Los resultados mostraron que los niveles de HSP27 fueron más altos en las células más malignas y que la doxazosina indujo la expresión de HSP27 y la apoptosis. Esto sugiere que HSP27 juega un papel en la regulación de la apoptosis y puede ser un objetivo terapéutico para el cáncer de pró
EXPRESSION OF HEAT SHOCK PROTEIN 27 IN PROSTATE CANCER CELL LINES ACCORDING TO THE EXTENT OF MALIGNANCY AND DOXAZOSIN TREATMENT
1. EXPRESSION OF HEAT
SHOCK PROTEIN 27 IN
PROSTATE CANCER CELL
LINES ACCORDING TO
THE EXTENT OF
MALIGNANCY AND
DOXAZOSIN TREATMENT
Seung Wook Lee
Jeong Woo Lee
Jae Hoon Chung
Jung Ki Jo María Isabel Pérez Palacio
Camilo Ruiz Mejía
4. HEAT SHOCK PROTEIN 27
It is important in the control of
apoptosis (anti-apoptic agent) in
tumor and cell protection by
interacting with both mitochondrial
dependent and independent
pathways of apoptosis
5. HSP 27 interacts with caspase 9 pathways ,
interrupting caspase 3 activation and therefore
inhibiting the apoptosis process. `
6. FUNCTIONS
HSP is related to the folding, activation, trafficking, and
transcriptional activity of most steroid receptors including
androgen receptor
7. Prostate cancer is becoming an
increasingly common disease
in men.
PROSTATE CANCER
8. During the normal aging process, the prostate gland grows ,
however in prostate cancer, malignant cells proliferate and cause
adenocarcinoma
PROSTATE CANCER
9. Prostate cancer may
cause
Pain
Difficulty
in urinating,
Problems during
sexual intercourse
Erectile dysfunction
Death
PROSTATE CANCER
10. Many people have been treated
successfully however it is as
dangerous as any other cancer
because of the risk that it may
metastasize
PROSTATE CANCER
12. DOXAZOSIN (CARDURA)
Antitumor
activity
It has a potent
antigrowth effect
against androgen
independent
human prostate
cells
It is an R1 B
adrenoreceptor
antagonist which
confers it an
antiproliferative
property
13.
14. RELATIONSHIP
Prostate
cancer is a
common
disease in
men today
Possible
treatment
: Doxazosin
which is used as an anti
proliferative in
malignant prostate cells
It can be
hindered
by the
expression
of HSP 27
Who's purpose is to play
a role in the regulation
of apoptosis acting as an
anti apoptotic agent.
15. GENERAL OBJECTIVE
The objective of this study was to analyze the
expression of HSP 27 in prostate cancer cells both
treated and not treated with Doxazosin.
20. FRAGMENTACIÓN DNA
Se realizó esta prueba para analizar la
apoptosis en la PC-3 tratada con doxazosina
21. FRAGMENTACIÓN DNA
Esta es una prueba o método cualitativo para la evaluación
de la muerte celular mediante la detección de fragmentos
de ADN.
Se basa en la utilización de electroforesis en gel de agarosa.
260 nm
22. FRAGMENTACIÓN DNA
Una de las características clásicas de la apoptosis es la escisión
del ADN genómico en fragmentos oligonucleosomales
La visualización de estos fragmentos puede ayudar a la
caracterización de un evento apoptótico.
23. RT- PCR
Esta prueba se utilizó con el fin de aislar el RNA total.
Se usa RT-PCR cuantitativa para cuantificar mRNA
específicos, este análisis permite para una prueba más
rápida, con una mayor sensibilidad, es simple y sencilla.
25. TUNEL
En el articulo se utilizó para analizar el efecto de la doxazosina en la apoptosis de PC-3
TUNEL es un método común para la detección de la fragmentación del ADN que resulta
de cascadas de señalización de apoptosis.
26. TRATAMIENTO DOXASOZINA
Todas las células fueron tratadas con una dosis letal
media de doxasozina y 0.25 % DMSO como el control.
27. INMUNOTINCIÓN
Se pretendía observar la tinción de HSP27 en cada cultivo celular.
Se utilizó una inmunotinción directa.
Se comparo la intensidad de la tinción en los cuatro cultivos celulares.
28. INMUNOTINCIÓN
Absorben luz= 200-400 nm (luz
UV).
Emiten= 400-700 nm (luz
visible).
La luz es proporcional a la
cantidad de Ag.
Ag= HSP27.
31. NIVEL DE EXPRESIÓN DE HSP27
•INMUNOFLUORECENSIA.
•La tinción para TSU-Pr1 fue la más intensa.
•El orden fue el siguiente:
•RWPE-1 <LNCaP <PC-3 <TSU-Pr1
32. EXPRESIÓN DE HSP27 EN TRATAMIENTO CON
DOXAZOSINA
RT-PCR:
Control 50 %.
CV (DMSO) 60%.
10 µM 110 %.
25 µM 128%.
33. DOXAZOSIN INDUCE EXPRESIÓN DE HSP27
• INMUNOFLUORESCENCIA DE HSP27:
• Células HSP27 positivas Más intenso 10 µM y 20
µM.
34. DOXAZOSINA INDUCE APOPTOSIS.
• TUNEL:
• La HSP se expresa en células con núcleo condensado y
escaso citoplasma (apoptosis).
• Células que expresan HSP27 TUNEL POSITIVO.
36. 36
AUTHOR THEORY RESULTS
Rochi et al. The increase in HSP27
protected the cells in
the process of CRPC. YES
Miyake et al. The expression of HSP27
is useful to predict
biochemical recurrence
in prostate cancer
YES
37. 37
AUTHOR THEORY RESULTS
Rochi et al. They found that HSP27
played a role as the
apoptosis controller. YES
Teimourian et al. After irradiation, there
was less viability in cells
that reduced the
expression of HSP27,
that in those who didn´t.
YES
39. CONCLUSIONS
It is important to study the expression of HSP27, because it
gives us a chance to look for new therapeutic options.
Prostate cancer is really common disease, and we need to
investigate more about it.
39
40. The study of heat shock proteins might give us a
chance to understand the development of tumoral
processes.
If we find new ways of treatment, we might reduce the
mortality level due to prostate cancer.
43. BIBLIOGRAFIA
1. Xanthoudakis S., & Nicholson D.W. Heat-shock proteins as death
determinants. nature (internet). 2000 (citado marzo 7 de 2014);2:1-9.
Disponible
en:http://www.nature.com/ncb/journal/v2/n9/fig_tab/ncb0900_E163_F1.h
tml
2. Martínez L.M., Vargas N., Toro A.E., Pamplona A.P., Quevedo E. Biologia
Molecular, 7ma edición. Medellín, Colombia: UPB. 2012;31(3): 247-243.
3. Seung W.L.,Jeong W.L., Jae H.C., Jung K.J. Expression of heat shock protein
27 in prostate cancer cell lines according to the extent of malignancy and
doxazosin treatment. World J Mens Health; 2014