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Microbiología 2009


   Dr. Alejandro Dinamarca T.
Microbiología
de los Alimentos
MICROBIOLOGÍA
                    Definición
• Estudio de organismos, normalmente, no
  observables a ojo desnudo, que emplea
  métodos y técnicas que permiten
  observar, aislar, cultivar, propagar y
  manipular estos microorganismos.
Objeto de estudio
• Organismos inferiores a 1 milímetro de
  diámetro.


                                  Bacterias
         Microalgas




            Protozoos
                                              Hongos
Métodos
Esterilidad
                        y
                        técnicas
Medios de cultivo
Aislamiento
Propagación y cultivo


Microscopía
AGRICULTURA                          ALIMENTOS
        Fijación de nitrógeno                  Preservación
        Ciclo de nutrientes                    Fermentación
                                               Aditivos
                     ENFERMEDADES              Calidad
                       Diagnóstico
                       Tratamiento y cura
                       Prevención
                       Detección de nuevas enfermedades

   AMBIENTE/ENERGÍA                        BIOTECNOLOGÍA
Bio combustibles Metano Etanol        Nuevos farmacéuticos
Bioremediación                        Terapia génica
Biominería, lixiviación de metales.   Mos modificados genéticamente
Tipos de daños producidos por
             contaminación microbiológica
                    de los alimentos

Salud                               Biodeterioro

        Directos                             Directos
   Intoxicación                         Extrinsecos

    Infección                           Intrinsecos
        Indirectos                       Indirectos
   Desequilibrio
                                         Economía
    nutricional
Importancia de la Microbiología
        en la sociedad humana
•    Elaboración de alimentos (pan, queso,
     cerveza)
• Salud humana (vitaminas, vacunas,
     antibióticos, enzimas)
• Enfermedades (tuberculosis, cólera, tétanos,
     paludismo, ETS)
• Relación con acontecimientos históricos.
i) Caída del Imperio Romano.
ii) Conquista del Nuevo Mundo
iii) Regulación de la población. Peste negra.
Importancia de la Microbiología
           en la naturaleza.
•      Funcionamiento de los ciclos Biogeoquímicos.
i)     Carbono
ii)    Nitrógeno
iii)   Azufre
iv)    Oxígeno

•      Producción primaria. Esto es generación de biomasa
       a partir de fotosíntesis.
•      Desarrollo de la microbiología ha permitido sentar
       las bases de la revolución de la biomedicina.
•      También permitió el surgimiento de la Biotecnología
       Moderna. Aplicando el conocimiento en áreas como
       la Biotecnología Ambiental, Biotecnología de los
       Alimentos y farmacéutica.
Historia de la microbiología
Descubrimiento de los microorganismos

•Lucrecio (98-55 a C) y Fracastoro (1478-1553)
propusieron que las enfermedades
eran producidas por “Criaturas Invisibles” .




•Antony van Leeuwenhoek (1632-1723),
Observa y describe organismos
microscópicos utilizando microscopios
construidos por él mismo.
Anton van Leeuwenhoek
•   Comerciante Holandés, 1632-1724.
•   Desarrollo del primer microscopio.
•   Primer hombre en observar MO.
•   Principales observaciones:
     –   Bacterias
     –   Protozoos
     –   Capilares sanguíneos
     –   Espermatozoides
Historia de la microbiología
Descubrimiento de los microorganismos
•Leeuwenhoek publicó sus
decubrimientos a través de cartas
dirigidas a la Royal Society de Londres.
Lo detallado de sus descubrimientos,
permiten establecer que Leeuwenhoek,
observó bacterias y protozoos.
Historia de la microbiología
                             La generación espontánea

   •Francisco Redi (1626-1697), a través de experimentos
   con carne putrefacta postula lo incorrecto de esta teoría.

   •Tras el decubrimiento del mundo microscópico realizado
   por Leeuwenhoek, algunos pensadores reanudan la
   controversia acerca de la generación espontánea. Se
   plantéa que los microorganismos se desarrollan por
   generación espontánea.

   •En 1749 Lazzaro Spallanzani, postula que la vida es
   transportada por el aire.


                             TIEMPO


         Agua con semillas            Agua con semillas
Louis Pasteur

• Químico Francés, 1822-
  1895.
• Enantiómeros del ácido
  tartárico.
• Relación Industria-
  Ciencia.
• Algunos descubrimientos:
   – MO eran capaces de llevar a
     cabo fermentación láctica.
Historia de la microbiología
                                                 Pasteur 1861

                                                 Aire




Líquido no estéril   Se tuerce el     Esterilizar el
                      cuello del    líquido por calor
                       Frasco.
Historia de la microbiología
                                                    Pasteur 1861

           El polvo y Mos quedan
           atrapados en la pared                Extremo
                                                 abierto



                      TIEMPO

Medio de cultivo es           Medio de cultivo se
    enfriado.                  Mantiene estéril
                               sin crecimiento.
Historia de la microbiología
                                            Pasteur 1861




                    TIEMPO


   El cultivo aún estéril    El cultivo pierde
se pone en contacto con la    su esterilidad
     pared del frasco.       y se pone turbio
Historia de la microbiología
•John Tyndall (1877), demuestra que
la causa de la contaminación de
cultivos estériles se debe a la
presencia de partículas transportadas
por el aire. Desarrolla el método
conocido actualmente como
Tindalización.

•Tyndall fue el descubridor de
microorganismos resistentes a altas
temperaturas.

•Ferdinand Cohn descubrió la
existencia de endosporas bacterianas
resistentes al calor.
Historia de la microbiología
Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes
causales de enfermedades.            Galeno (129-199), y hasta mediados del
                                           XIX se pensaba que la causa de las
                                           enfermedades se debía a “Miasmas” o al
                                           desequilibrio en lo cuatro humores:
                                           Sangre, Flema, Bilis amarillo, Bilis negra.




 Agostino Bassi (1835). Observa que un
 microorganismo puede ser el agente
 causal de una enfermedad, al demostrar
 su relación entre la enfermedad del
 gusano de seda y una afección micótica
Historia de la microbiología
Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes
causales de enfermedades.




Irlanda, 1845, M. J. Berckeley
Historia de la microbiología
Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes
causales de enfermedades.
                                         Joseph Lister (1827-
                                         1912). De manera
                                         indirecta, demuestra que
                                         son los microorganismos
                                         los agentes causantes de
                                         las infecciones que
                                         aquejaban a los enfermos
                                         luego de sus operaciones.

                                          Desarrolló un método de
                                          cirugía en condiciones
                                          asépticas usando fenol
                                          como agente de
                                          desinfección.
Historia de la microbiología
Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes
causales de enfermedades.
                                         Bacillus antrhacis como agente causal
                                         del carbunco.




                    •Robert Koch (1876), demostró de manera directa la relación
                    entre microorganismos patógenos y cierto tipo de
                    enfermedades.

                    •Koch, desarrolló una metodología especial para determinar
                    esta relación, la que actualmente es conocida como
                    “Postulados de Koch”.
Robert Koch
• Médico alemán, 1843-1910.
• Algunos descubrimientos:
   – MO causantes del carbunco.
   – Contagio de MO.
   – Esporas: Estucturas de resistencia.
   – MO crecen en colonias definidas
     y específicas.
   – BACILO DE LA
     TUBERCULOSIS “BACILO DE
     KOCH”
   – Bacilo que provoca el cólera
Postulados de
Koch.
                                 Animal enfermo        Animal sano



  Postulado 1
  El microorganismo
  patógeno sospechoso debe                   Glóbulo
                                             rojo
  estar presente en todos los Glóbulo
                              rojo
  casos de los individuos
  enfermos y ausente en los
  sanos                         Bacteria
                                patógena
Postulados de
Koch.

 Postulado 2
 El microorganismo
 patógeno sospechoso
 debe ser aislado y
 crecido en cultivo puro
                           Colonias
                           Puras
                                      Inocular animales sanos
                                       con el microorganismo
                                               aislado
Postulados de
Koch.
                                 Infestar animales sanos con las
                                 células del patógeno sospechosos
  Postulado 3
  Las células de un
  cultivo puro del MO
  patógeno sospechoso
  debe causar la
  enfermedad en
  animales sanos.       Animal enfermo
                                   Extraer muestras de sangre o de tejidos
                                   y observar.
Postulados de
Koch.
                           Extraer muestras de sangre o de tejidos
                           y observar.


  Postulado 4
  El microorganismo
                                 Cultivar en
  debe ser re aislado y          laboratorio
  debe ser el mismo que
  el original del primer
  animal.


                                                Cultivo puro
Historia de la microbiología
                                       Descubrimiento de los virus




Charles Chamberland, colaborador
de Pasteur, desarrolló un método
para filtrar partículas más pequeñas
que las bacterias usando un filtro de
porcelana.
De esta forma se descubrió que la
enfermedad del mosaico del tabaco
era causada por un virus.
Historia de la microbiología
                       Desarrollo de las vacunas y de la inmunología.
•Se estudia la resistencia de los animales a determinadas enfermedades.
•Se desarrollan técnicas para proteger a los humanos de agentes patógenos
bacterianos y virales.
•Roux, un colaborador de Pasteur estudiando “el cólera de los pollos” observó
que el cultivo por largos períodos de tiempo del agente causal de la enfermedad,
producía una variedad de bacteria que perdía su capacidad de generar
enfermedad, “capacidad infectiva”. A estos cultivos les llamó Atenuados.
•A su vez observó que al inyectar estos cultivos
atenuados en las aves, éstas desarrollaban la
enfermedad pero eran capaces de resistirla.,
permaneciendo sanas.
•Pasteur, denominó a estos cultivos atenuados,
vacunas en honor a Edward Jenner, quien fue el que
utilizó estos cultivos para proteger a las ordeñadoras
de la viruela.
•En base a estos avances, Pasteur y Chamberland,
desarrollaron una vacuna atenuada contra el carbunco,
y posteriormente, Pasteur haría lo propio para la
rabia.
Historia de la microbiología
                                             Toxinas y antitoxinas.
•La producción de toxinas es un mecanismo de patogenicidad
desarrollado por los microorganismos par invadir al hospedario.
•Entre las enfermedades causadas por toxinas bacterianas están: la
difteria, el botulismo.
•Emil von Behring y Kitazato, usando una
metodología de filtrado de bacterias y
usando el sobrenadante, lograron aislar la
tóxina que causa la difteria.

                          •Posteriormente, la inactivaron mediante
                          calor (por cambio leve en su estructura
                          molecular) y luego la inyectaron en conejos.
                          De esta manera se produjeron los primeros
                          anticuerpos.
Historia de la microbiología
                                    Toxinas y antitoxinas.




 •Usando esta metodología, se desarrolló una
        antitoxina contra el tétanos.

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  • 1. Microbiología 2009 Dr. Alejandro Dinamarca T.
  • 2.
  • 4. MICROBIOLOGÍA Definición • Estudio de organismos, normalmente, no observables a ojo desnudo, que emplea métodos y técnicas que permiten observar, aislar, cultivar, propagar y manipular estos microorganismos.
  • 5. Objeto de estudio • Organismos inferiores a 1 milímetro de diámetro. Bacterias Microalgas Protozoos Hongos
  • 6. Métodos Esterilidad y técnicas Medios de cultivo Aislamiento Propagación y cultivo Microscopía
  • 7.
  • 8. AGRICULTURA ALIMENTOS Fijación de nitrógeno Preservación Ciclo de nutrientes Fermentación Aditivos ENFERMEDADES Calidad Diagnóstico Tratamiento y cura Prevención Detección de nuevas enfermedades AMBIENTE/ENERGÍA BIOTECNOLOGÍA Bio combustibles Metano Etanol Nuevos farmacéuticos Bioremediación Terapia génica Biominería, lixiviación de metales. Mos modificados genéticamente
  • 9. Tipos de daños producidos por contaminación microbiológica de los alimentos Salud Biodeterioro Directos Directos Intoxicación Extrinsecos Infección Intrinsecos Indirectos Indirectos Desequilibrio Economía nutricional
  • 10. Importancia de la Microbiología en la sociedad humana • Elaboración de alimentos (pan, queso, cerveza) • Salud humana (vitaminas, vacunas, antibióticos, enzimas) • Enfermedades (tuberculosis, cólera, tétanos, paludismo, ETS) • Relación con acontecimientos históricos. i) Caída del Imperio Romano. ii) Conquista del Nuevo Mundo iii) Regulación de la población. Peste negra.
  • 11. Importancia de la Microbiología en la naturaleza. • Funcionamiento de los ciclos Biogeoquímicos. i) Carbono ii) Nitrógeno iii) Azufre iv) Oxígeno • Producción primaria. Esto es generación de biomasa a partir de fotosíntesis. • Desarrollo de la microbiología ha permitido sentar las bases de la revolución de la biomedicina. • También permitió el surgimiento de la Biotecnología Moderna. Aplicando el conocimiento en áreas como la Biotecnología Ambiental, Biotecnología de los Alimentos y farmacéutica.
  • 12. Historia de la microbiología Descubrimiento de los microorganismos •Lucrecio (98-55 a C) y Fracastoro (1478-1553) propusieron que las enfermedades eran producidas por “Criaturas Invisibles” . •Antony van Leeuwenhoek (1632-1723), Observa y describe organismos microscópicos utilizando microscopios construidos por él mismo.
  • 13. Anton van Leeuwenhoek • Comerciante Holandés, 1632-1724. • Desarrollo del primer microscopio. • Primer hombre en observar MO. • Principales observaciones: – Bacterias – Protozoos – Capilares sanguíneos – Espermatozoides
  • 14. Historia de la microbiología Descubrimiento de los microorganismos •Leeuwenhoek publicó sus decubrimientos a través de cartas dirigidas a la Royal Society de Londres. Lo detallado de sus descubrimientos, permiten establecer que Leeuwenhoek, observó bacterias y protozoos.
  • 15. Historia de la microbiología La generación espontánea •Francisco Redi (1626-1697), a través de experimentos con carne putrefacta postula lo incorrecto de esta teoría. •Tras el decubrimiento del mundo microscópico realizado por Leeuwenhoek, algunos pensadores reanudan la controversia acerca de la generación espontánea. Se plantéa que los microorganismos se desarrollan por generación espontánea. •En 1749 Lazzaro Spallanzani, postula que la vida es transportada por el aire. TIEMPO Agua con semillas Agua con semillas
  • 16. Louis Pasteur • Químico Francés, 1822- 1895. • Enantiómeros del ácido tartárico. • Relación Industria- Ciencia. • Algunos descubrimientos: – MO eran capaces de llevar a cabo fermentación láctica.
  • 17. Historia de la microbiología Pasteur 1861 Aire Líquido no estéril Se tuerce el Esterilizar el cuello del líquido por calor Frasco.
  • 18. Historia de la microbiología Pasteur 1861 El polvo y Mos quedan atrapados en la pared Extremo abierto TIEMPO Medio de cultivo es Medio de cultivo se enfriado. Mantiene estéril sin crecimiento.
  • 19. Historia de la microbiología Pasteur 1861 TIEMPO El cultivo aún estéril El cultivo pierde se pone en contacto con la su esterilidad pared del frasco. y se pone turbio
  • 20. Historia de la microbiología •John Tyndall (1877), demuestra que la causa de la contaminación de cultivos estériles se debe a la presencia de partículas transportadas por el aire. Desarrolla el método conocido actualmente como Tindalización. •Tyndall fue el descubridor de microorganismos resistentes a altas temperaturas. •Ferdinand Cohn descubrió la existencia de endosporas bacterianas resistentes al calor.
  • 21. Historia de la microbiología Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes causales de enfermedades. Galeno (129-199), y hasta mediados del XIX se pensaba que la causa de las enfermedades se debía a “Miasmas” o al desequilibrio en lo cuatro humores: Sangre, Flema, Bilis amarillo, Bilis negra. Agostino Bassi (1835). Observa que un microorganismo puede ser el agente causal de una enfermedad, al demostrar su relación entre la enfermedad del gusano de seda y una afección micótica
  • 22. Historia de la microbiología Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes causales de enfermedades. Irlanda, 1845, M. J. Berckeley
  • 23. Historia de la microbiología Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes causales de enfermedades. Joseph Lister (1827- 1912). De manera indirecta, demuestra que son los microorganismos los agentes causantes de las infecciones que aquejaban a los enfermos luego de sus operaciones. Desarrolló un método de cirugía en condiciones asépticas usando fenol como agente de desinfección.
  • 24. Historia de la microbiología Descubrimiento del papel de los microorganismos como agentes causales de enfermedades. Bacillus antrhacis como agente causal del carbunco. •Robert Koch (1876), demostró de manera directa la relación entre microorganismos patógenos y cierto tipo de enfermedades. •Koch, desarrolló una metodología especial para determinar esta relación, la que actualmente es conocida como “Postulados de Koch”.
  • 25. Robert Koch • Médico alemán, 1843-1910. • Algunos descubrimientos: – MO causantes del carbunco. – Contagio de MO. – Esporas: Estucturas de resistencia. – MO crecen en colonias definidas y específicas. – BACILO DE LA TUBERCULOSIS “BACILO DE KOCH” – Bacilo que provoca el cólera
  • 26. Postulados de Koch. Animal enfermo Animal sano Postulado 1 El microorganismo patógeno sospechoso debe Glóbulo rojo estar presente en todos los Glóbulo rojo casos de los individuos enfermos y ausente en los sanos Bacteria patógena
  • 27. Postulados de Koch. Postulado 2 El microorganismo patógeno sospechoso debe ser aislado y crecido en cultivo puro Colonias Puras Inocular animales sanos con el microorganismo aislado
  • 28. Postulados de Koch. Infestar animales sanos con las células del patógeno sospechosos Postulado 3 Las células de un cultivo puro del MO patógeno sospechoso debe causar la enfermedad en animales sanos. Animal enfermo Extraer muestras de sangre o de tejidos y observar.
  • 29. Postulados de Koch. Extraer muestras de sangre o de tejidos y observar. Postulado 4 El microorganismo Cultivar en debe ser re aislado y laboratorio debe ser el mismo que el original del primer animal. Cultivo puro
  • 30. Historia de la microbiología Descubrimiento de los virus Charles Chamberland, colaborador de Pasteur, desarrolló un método para filtrar partículas más pequeñas que las bacterias usando un filtro de porcelana. De esta forma se descubrió que la enfermedad del mosaico del tabaco era causada por un virus.
  • 31. Historia de la microbiología Desarrollo de las vacunas y de la inmunología. •Se estudia la resistencia de los animales a determinadas enfermedades. •Se desarrollan técnicas para proteger a los humanos de agentes patógenos bacterianos y virales. •Roux, un colaborador de Pasteur estudiando “el cólera de los pollos” observó que el cultivo por largos períodos de tiempo del agente causal de la enfermedad, producía una variedad de bacteria que perdía su capacidad de generar enfermedad, “capacidad infectiva”. A estos cultivos les llamó Atenuados. •A su vez observó que al inyectar estos cultivos atenuados en las aves, éstas desarrollaban la enfermedad pero eran capaces de resistirla., permaneciendo sanas. •Pasteur, denominó a estos cultivos atenuados, vacunas en honor a Edward Jenner, quien fue el que utilizó estos cultivos para proteger a las ordeñadoras de la viruela. •En base a estos avances, Pasteur y Chamberland, desarrollaron una vacuna atenuada contra el carbunco, y posteriormente, Pasteur haría lo propio para la rabia.
  • 32. Historia de la microbiología Toxinas y antitoxinas. •La producción de toxinas es un mecanismo de patogenicidad desarrollado por los microorganismos par invadir al hospedario. •Entre las enfermedades causadas por toxinas bacterianas están: la difteria, el botulismo. •Emil von Behring y Kitazato, usando una metodología de filtrado de bacterias y usando el sobrenadante, lograron aislar la tóxina que causa la difteria. •Posteriormente, la inactivaron mediante calor (por cambio leve en su estructura molecular) y luego la inyectaron en conejos. De esta manera se produjeron los primeros anticuerpos.
  • 33. Historia de la microbiología Toxinas y antitoxinas. •Usando esta metodología, se desarrolló una antitoxina contra el tétanos.