Procedimiento para realizar un cultivo Faríngeo

1. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-BACTER-065
1.0 Objetivo
Establecer los controles, actividades y materiales que se deben de emplear de forma correcta para la
marcha de cultivos faríngeos.
2.0 Alcance
Aplica a toda aquella persona que en la empresa realice actividades en el área de proceso..
3.0 Función, Responsabilidad y Autoridad
Técnico y/o químico: Tiene la responsabilidad de llevar a cabo el procedimiento de la prueba como está
establecido y solicitar el material requerido.
Jefe de Laboratorio Es su responsabilidad evaluar de forma técnica y funcional que la persona encarga
del área de proceso este llevando a cabo el estudio de manera correcta.
Director General. Tiene la responsabilidad y autoridad para exigir al técnico y jefe de Laboratorio, para
que este procedimiento se cumpla, se mejore y de tomar las acciones pertinentes para hacerlo cumplir
cuando por alguna causa no sea respetado
4.0 Definiciones.
• Exudado:
• Exudado faríngeo
• Estria
• Estria cruzadaç
• Picadura
• Inoculo
• Órgano
• Amígdala
• Uvula
• Mejilla
• Mejilla interna
• Lengua
• Paladar
• Diente
• Agar gelosa sangre
• Agar eosina azul de metileno
• Agar biggy
• Agar saburo
• Agar sal manitol
• Prueba bioquímica
• Identificación
• Bacteria
• Hongo
• Levadura
• Tsi
• Mio
Conformidad
Proveedor Cliente Fecha Revisión Fecha revisión
Laboratorio Proceso 29 de junio de 2013 00 30 de Mayo del 2014
Elaboró Revisó Autorizó
T.L.Q. Oscar Colín Ramírez QBP Omar Armando García Ayala M.C.P. Feliciano García Muñiz

2. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-
• LIA
• Caldo urea
• Citrato de Simmons
• Tinción
• Tinción de gran
• Gram positivo
• Gram negativo
• Antibiograma
• Disco
• Sensidisco
• Agar miuller hinton
• Hemolisis
• Alfa hemolisis
• Beta hemolisis
• Gama hemolisis
• Frotis
5.0 Fundamento.
El sistema respiratorio se divide en vías altas o superiores, que comprenden las áreas anteriores a la
laringe, incluyendo la nasofaringe, orofaringe, laringe, epiglotis, oído externo y medio, y los senos
paranásales, y vías bajas o inferiores que incluyen todas las estructuras posteriores a la laringe.
El tracto respiratorio habitual (la faringe) está formado por distintos microorganismos entre los que
destacan los siguientes grupos y especies: estreptococos, estafilococos, micrococos, neisserias, Moraxella
catarrhalis, corinebacterias, Haemophilus spp, Sin embargo, cuando encontramos una patología en la
faringe, el agente etiológico más frecuentemente aislado es el Streptococcus pyogenes, pero también,
otros microorganismos patógenos que podemos hallar son: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus
beta hemolítico .
Para poder hacer la identificación del agente patológico, se procederá a la siembra de la muestra mismo en
diferentes medios de cultivo, selectivos y diferenciales así como ricos observar si hay o no crecimiento en
cada uno de ellos. Además se procederá a realizar diferentes pruebas, como la tinción de Gram, la
catalasa…
6.0 Desarrollo de actividades
Inicio de diagrama
Temperación de los medios de
cultivo y pruebas bioquímicas
Final de diagrama
Identificación del agente patológico.
Documentar No Conformidades
mejora de proceso
Vista preeliminar Descripción Act.
• Temperación de la muestra
La persona encargada del area de proceso deberá de sacar a que se temperen las muestras referentes a
cultivos faríngeos aproximadamente 20 minutos antes de su procesamiento, de igual forma verificar que
los datos del paciente se encuentren registrados en la bitácora de bacteriología y verificar que los datos de
la muestra concuerden con los datos del expediente, cada caja deberá ser etiquetada con el folio del
Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página
Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 2 de 5

3. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-
paciente y las siglas: “FAR” y sus iniciales.
• Elaboración de un frotis por técnica de Gram mediante la utilización del isopo del cual contiene
la muestra del paciente colocar un pequeño frote en un porta-objetos, dicho frote deberá de ser
delgado con dimensiones aproximadas de 1 cm por 0.1 cm. Una vez realizado el frote se deberá
secar al aire cerca del mechero el cual deberá de estar prendido, para que el frote se seque
será aproximadamente 5 minutos. Una vez que se seque el frotis fijarlo con calor, esto es
pasando el frotis por la llama del mechero tres veces. Una vez que se fijo la preparación con
ayuda de un puente de tinción. El cual se encontrara en una tarja realizar la técnica de Gram
• Inoculación de las muestras en los medios correspondientes: se deberá de colar de forma
circular el inoculo de la muestra en la superficie de los siguientes medios de cultivo, siendo este
no mayor a un centímetro de diámetro.
1.- gelosa sangre: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estría cruzada esto es
con la finalidad de que la muestra se diluya y asi obtener colonias aisladas, al finalizar dicha estracion se
realizara picadura en la estria, dichas picaduras serán de 4 a 6; lo anteriormente mencionado tiene la
finalidad de demostrar una beta hemolisis.
2.- Agar sal maintol: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es
con la finalidad de que la muestrab se diluya y asi obtener colonias aisladas.
3.- Agar EMB: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es con la
finalidad de que la muestrab se diluya y asi obtener colonias aisladas.
4.- Agar Biggy: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es con
la finalidad de que la muestra se diluya y asi obtener colonias aisladas.
• Incubación de los medios de cultivo
Una vez de que se hallan estriado todos los medios de cultivo se introducirán en la incubadora con la tapa
hacia abajo tanto los medios de gelosa sangre, emb y sal manitol se incubaran 24 horas a 37º c en
conciones de aerobiosis; la caja de Biggy se incubara a temperatura ambiente por 72 horas de igual forma
con la tapa hacia abajo en condiciones de aerobiosis
Interpretación de los medios de cultivo y registro en la bitácora de bacteriología :
• Gelosa sangre: una vez transcurrido el tiempo de incubación se deberá de leer dicha caja a
contra luz esto es con la finalidad de observar a los de hemolisis en el medio de cultivo los
cuales se encontraran alrededor de la UFC ( unidad formadora de colonia); al tratarse de un
medio rico y al ser una cavidad no estéril la boca habrá crecimiento bacteriano considerado “
biota normal”. Dichos resultados deberán de registrarse en la bitácora de bacteriología medica
• Sal manitol: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen
bacterias Gram positivas se deberá de verificar si hay mas de 5 UFC de haber menos este
cultivo se considerara contaminación. Si hay mas de 5 UFC se deberá de dar seguimiento al
cultivo ya que este es positivo. Se deberá de interpretar y registrar en la bitácora de
bacteriología medica las colonias manitol positivas, las cuales serán de color amarillo, cuando
las colonias sean rosas serán manitol negativo.
• EMB: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen bacterias
Gram negativas se deberá de interpretar y registrar en la bitácora de bactereologia clínica las
colonias lactosa positivas las cuales son de color rosa y las lactosa negativa son transparentes
ambas son consideradas enterobacterias
• Biggy: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen levaduras en
72 horas cuando se observen colonias pequeñas blanquecinas se sospecha de que el paciente
esta generando una candidiasis. Si presenta colonias pequeñas color café o Marrón será
considerada Candida albicas
Seguimiento de la identificación bacteriana
• Gelosa sangre: si hay presencia de hemolisis y esta es beta se deberá de montar la prueba de
bacitracina ver anexo si esta prueba da como sensible ( sin crecimiento bacteriano) se reporta
como Streptococcu beta hemitico del grupo A sin la bacitracina es resistente ( con crecimiento
bacteriano) se reporta como Streptococcus agalactiae, asi mismo se monta la prueba de
optoquina ver anexo si es sensible, que no hay crecimiento bacteriano se reporta Streptococcu
pneomuniae.
• Sal manitol cuando las colonias son amarillas o manitol positivas se montara la prueba de
coagulasa ver anexo si esta prueba es negativa ( coagulación del plasma) se reporta como
Staphylococcus aureous; si la prueba de coagulasa es negativa se reporta como
Staphylococcus coagulasa negativa o en su defecto Staphylococcus saprophyticus, cuando se
tratata de una colonia manitol negativa se reporta como Staphylococcus epidermidis
Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página
Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 3 de 5

4. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-
• EMB: al tratarse de un medio en donde crecen enterobacterias las cuales son Gram negativas
se deberán de montar las pruebas bioquímicas siguientes para su identificación como son: TSI
LIA MIO UREA Citrato de Simmons Boguer proscaguer oxidasa y catalasa, para ver como se
realizan dichas pruebas bioquímicas ver anexo
1. Almacenamiento de la prueba. .
Parámetros de medición del : estimado en promedio.
ACCIÓN A EJECUTAR TIEMPO DE EJECUCIÓN (ESTÁNDAR)
Elaboración de cultivo faringeo
El “correcto” proceso de cultivo faringeo
• Correcta verificación de datos.
• Correcto registro de datos.
• Elaboración de la prueba como indica presente procedimiento.
• Certera interpretación de resultados.
• Procurar que sea en el tiempo establecido.
En nuestro mantenimiento preventivo debemos realizar:
Mantenimiento diario:
• Portar la bata.
• Limpiar o solicitar la limpieza del área de proceso.
• Mantener el área ordenada.
• Tener a la mano todo el material necesario.
Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página
Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 4 de 5

5. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-
Anexos
7.0 FIRMA DE ENTERADOS.
Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página
Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 5 de 5

6. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación.
ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO
MPNO-PRO-
Anexos
7.0 FIRMA DE ENTERADOS.
Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página
Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 5 de 5