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UROCULTIVO
PROCEDIMIENTO PARA LOGRAR UNA BUENA
IDENTIFICACIÓN
INTRODUCCIÓN
Las infecciones del tracto urinario son frecuentes en la población,
principalmente entre las mujeres debido a la corta distancia ano-vagina
y la corta longitud de la uretra.
Estas infecciones son causadas generalmente por agentes
bacterianos, los cuales pueden ser encontrados en la orina.
El Urocultivo es el método que se utiliza para la identificación de estos
agentes etiológicos y para evaluar su sensibilidad/resistencia frente a
antibióticos
CLÍNICA
• Cistitis
• Disuria, tenesmo vesical, orina de mal olor

• Pielonefritis
• Síntomas anteriores que incluyen síntomas sistémicos y dolores lumbares
MATERIALES
• Muestra de orina obtenida con técnica aséptica
• Placas de Agar sangre, Agar Mc-Conkey y Agar Muëller-Hinton
• Asa calibrada de platino de 10 µL
• Mechero
PROCEDIMIENTO
• Esterilizar el asa calibrada de 10 µL en el mechero y luego enfriarla
introduciéndola en la orina

• Agitar con la misma asa la muestra de orina y tomar una cantidad
para el sembrado
ASA CALIBRADA

Asa calibrada de 10
µL, permite sembrar
las colonias
bacterianas y
obtener un
crecimiento que se
puede cuantificar, en
este caso 1 colonia
equivale a 100
Unidades
Formadoras de
Colonias por mL
PROCEDIMIENTO
• Sembrar la muestra de orina en las lacas de Agar sangre Agar MCConkey

• Para esto, realizar una estria con el asa sobre el diámetro de la placa
y luego pasar el asa perpendicularmente a esta línea, cubriendo el
resto del campo
UROCULTIVO
• En el Urocultivo se utiliza el
agar sangre el cual es un
medio enriquecido que
permite el desarrollo de
múltiples tipos de bacterias
incluyendo las que producen
infecciones del tracto urinario
PROCEDIMIENTO
• Una vez sembrados ambas placas, se incuban a 37 °C durante 18
horas

• A partir de la cantidad de colonia que crecieron se establece el
número de Unidades formadoras de colonias que en este caso por
utilizar una asa calibrada de 10 µL cada colonia equivale a 100
UFC/mL
AGENTES ETIOLÓGICOS MÁS
FRECUENTES
• Escherichia coli
• Klebsiella spp
• Proteus spp
• Pseudomona spp
• Enterobacter spp
• Citrobacter spp
• Staphylococcus aureus
• Acinetobacter sp
PRUEBAS ADICIONAL
• Pruebas
Bioquímicas

• La prueba de Citrato permite evaluar si el
agente bacteriano es capaz de metabolizar
este sustrato.

• En un resultado positivo se observa un
cambio de color de verde a azul
PRUEBAS ADICIONAL
• Pruebas
Bioquímicas

• La prueba de TSI permite evaluar si el
agente bacteriano es capaz de fermentar
tres tipos de azucares, observandose un
cambio de color de amarillo a rojo (o negro)
cuando es un resultado positivo
PRUEBAS ADICIONAL
• Medios especiales
• Cromoagar, permite la identificación del
agente patógeno solo con sembralo en la
placa e incubarlo, ya que posee enzimas
específicas para cada bacteria que
produce un color de acuerdo a la bacteria
de la que se trate
ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A
ANTIBIÓTICOS
Antibiograma

• Luego de identificar al agente etiológico causante de la infección se
realiza el antibiograma

• Se toma una de las colonias aisladas en las placas anteriores con un
asa normal y se siembra en una placa de Agar Muëller-Hinton

• El sembrado de debe realizar en tres direcciones cubriendo la
totalidad del campo de la placa
ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A
ANTIBIÓTICOS
• Luego se posan sobre la placa sembrada los sensidiscos
impregnados con los antibióticos separados a una distancia
razonable

• Luego se incuaba la placa a 37 °C por 18 horas
• Finalmente de miden los halo de inhibición alrededor de los discos y
se compara con las tablas estandarizadas para evaluar y el agente es
sensible o resistente al antibiótico
ANTIBIOGRAMA

El antibiograma además de evaluar la susceptibilidad frente a
antibióticos, también puede hacer sospechar de algunos agentes
bacterianos, como es el caso de la Pseudomona aeruginosa la cual
produce un pigmento verde sobre el Agar Muëller-Hinton (foto
derecha).
FIN.

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Urocultivo

  • 1. UROCULTIVO PROCEDIMIENTO PARA LOGRAR UNA BUENA IDENTIFICACIÓN
  • 2. INTRODUCCIÓN Las infecciones del tracto urinario son frecuentes en la población, principalmente entre las mujeres debido a la corta distancia ano-vagina y la corta longitud de la uretra. Estas infecciones son causadas generalmente por agentes bacterianos, los cuales pueden ser encontrados en la orina. El Urocultivo es el método que se utiliza para la identificación de estos agentes etiológicos y para evaluar su sensibilidad/resistencia frente a antibióticos
  • 3. CLÍNICA • Cistitis • Disuria, tenesmo vesical, orina de mal olor • Pielonefritis • Síntomas anteriores que incluyen síntomas sistémicos y dolores lumbares
  • 4. MATERIALES • Muestra de orina obtenida con técnica aséptica • Placas de Agar sangre, Agar Mc-Conkey y Agar Muëller-Hinton • Asa calibrada de platino de 10 µL • Mechero
  • 5. PROCEDIMIENTO • Esterilizar el asa calibrada de 10 µL en el mechero y luego enfriarla introduciéndola en la orina • Agitar con la misma asa la muestra de orina y tomar una cantidad para el sembrado
  • 6. ASA CALIBRADA Asa calibrada de 10 µL, permite sembrar las colonias bacterianas y obtener un crecimiento que se puede cuantificar, en este caso 1 colonia equivale a 100 Unidades Formadoras de Colonias por mL
  • 7. PROCEDIMIENTO • Sembrar la muestra de orina en las lacas de Agar sangre Agar MCConkey • Para esto, realizar una estria con el asa sobre el diámetro de la placa y luego pasar el asa perpendicularmente a esta línea, cubriendo el resto del campo
  • 8. UROCULTIVO • En el Urocultivo se utiliza el agar sangre el cual es un medio enriquecido que permite el desarrollo de múltiples tipos de bacterias incluyendo las que producen infecciones del tracto urinario
  • 9. PROCEDIMIENTO • Una vez sembrados ambas placas, se incuban a 37 °C durante 18 horas • A partir de la cantidad de colonia que crecieron se establece el número de Unidades formadoras de colonias que en este caso por utilizar una asa calibrada de 10 µL cada colonia equivale a 100 UFC/mL
  • 10. AGENTES ETIOLÓGICOS MÁS FRECUENTES • Escherichia coli • Klebsiella spp • Proteus spp • Pseudomona spp • Enterobacter spp • Citrobacter spp • Staphylococcus aureus • Acinetobacter sp
  • 11. PRUEBAS ADICIONAL • Pruebas Bioquímicas • La prueba de Citrato permite evaluar si el agente bacteriano es capaz de metabolizar este sustrato. • En un resultado positivo se observa un cambio de color de verde a azul
  • 12. PRUEBAS ADICIONAL • Pruebas Bioquímicas • La prueba de TSI permite evaluar si el agente bacteriano es capaz de fermentar tres tipos de azucares, observandose un cambio de color de amarillo a rojo (o negro) cuando es un resultado positivo
  • 13. PRUEBAS ADICIONAL • Medios especiales • Cromoagar, permite la identificación del agente patógeno solo con sembralo en la placa e incubarlo, ya que posee enzimas específicas para cada bacteria que produce un color de acuerdo a la bacteria de la que se trate
  • 14. ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS Antibiograma • Luego de identificar al agente etiológico causante de la infección se realiza el antibiograma • Se toma una de las colonias aisladas en las placas anteriores con un asa normal y se siembra en una placa de Agar Muëller-Hinton • El sembrado de debe realizar en tres direcciones cubriendo la totalidad del campo de la placa
  • 15. ESTUDIOS DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS • Luego se posan sobre la placa sembrada los sensidiscos impregnados con los antibióticos separados a una distancia razonable • Luego se incuaba la placa a 37 °C por 18 horas • Finalmente de miden los halo de inhibición alrededor de los discos y se compara con las tablas estandarizadas para evaluar y el agente es sensible o resistente al antibiótico
  • 16. ANTIBIOGRAMA El antibiograma además de evaluar la susceptibilidad frente a antibióticos, también puede hacer sospechar de algunos agentes bacterianos, como es el caso de la Pseudomona aeruginosa la cual produce un pigmento verde sobre el Agar Muëller-Hinton (foto derecha).
  • 17. FIN.