PRACTICA

1. CULTIVO DE ABCESOS Y
SECRECIONES DE HERIDAS
DR. JORGE RUIZ COTRINA
PATÓLOGO CLÍNICO

2. I. MARCO TEÓRICO
Las bacterias infecciosas se reproducen rápidamente en el organismo y muchas
excretan sustancias químicas llamadas toxinas las cuales pueden dañar los tejidos.
Las infeccionesde piel y tejidos blandos son, junto
con las infecciones de las víasrespiratorias, las
infecciones más frecuentes en clínicahumana
Tipos:
 Agudas
 Crónicas

3. Microbiología de las heridas
El tejido subcutáneo expuesto es un excelente medio de cultivo para la
colonización y proliferación de los microorganismos, que dependen de
las características de la lesión.
Los microorganismos provienen del
entorno ambiental, de la propia
microbiotaflora de la piel y de la flora
bacteriana comensal de mucosas.

4. Potencialmente patógenos:
Estreptococos beta-hemolíticos, Staphylococcus. aureus, Enterococcus
spp., Bacillus anthracis, Pseudomonas aeruginosa y otros bacilos
gramnegativos como las Enterobacteriaceae, tanto en las heridas agudas
como en las crónicas.
Son factores predisponentes de la infección la edad, la diabetes,
la inmunosupresión, la obesidad, la malnutrición y las
alteraciones circulatorias.

5. INFECCIÓN DE LA HERIDA QUIRÚRGICA
La infección posoperatoria de la herida quirúrgica es la mayor causa de
morbilidad infecciosa en el paciente quirúrgico.
Infección que se produce en la herida de una incisión quirúrgica

6. Constituye la segunda causa de infecciónnosocomial y la desarrollan
entre el 2-20%de los enfermos operados, según el tipode cirugía.
Epidemiología
Se ha demostrado que cuando el sitio operatorio se encuentra contaminado con
más de 105 microorganismos por gramo de tejido, el riesgo de infección de la herida
quirúrgica se incrementa significativamente y la cantidad de gérmenes requeridos
para producir infección es mucho menor cuando se encuentran materiales extraños
presentes en el sitio operatorio.

7. En las heridassuciasinfectadases frecuente
encontrar comocolonizadores, microorganismos
comola E. coli, Klebsiella, B. fragilis, Clostridium
speciesy estreptococoanaerobio
En los abscesos e infecciones
intrahospitalarias la microflora del sitio
operatorio es diferente; son gérmenes
multirresistentes, como la Pseudomona sp,
Enterobacter sp y el Enterococo.

8. Microorganismo Número de
aislados (%)
Cirugía limpia Cirugía limpia-
contaminada
Cirugía sucia
Enterobacterias 470 (32,5) 110 187 173
Staphylococcus aureus 240 (16,5) 140 51 49
Enterococcus spp. 212 (14,6) 63 70 79
BGNa no fermentadores 197 (9,1) 44 54 99
Staphylococcus epidermidis 118 (8,1) 59 26 33
Anaerobios 69 (4,8) 9 39 21
Otros 59 (4,0) 12 36 11
Levaduras 49 (3,4) 13 16 20
Otros CGPbCGP 42 (3,0) 17 22 3
Total 1456 467 501 488

9. Infecciones post-parto

10. Las infecciones que ocurren durante el puerperio son
una causa relativamente frecuente de morbilidad, y
raramente incluso de mortalidad.

11. Técnica

12.  Obesidad.
 Nivel económico bajo.
 Anemia.
 Inmunosupresión.
 Enfermedad crónica ( ejm diabetes mellitus).
 Infección vaginal, especialmente vaginosis
bacteriana.
Factores que predisponen a
infecciones post parto

13. Complicaciones
 Infeccion al utero
 Causa mas frecuente de infeccion despues de una cesarea.
 Estas infecciones usualmente se extienden bastante más allá de la
delgada capa endometrial limitando con el miometrio adyacente, los
tejidos blandos fibroareolares que se ubican dentro del parametrio, e
incluso algunas veces más allá, con formación de absceso pélvico.
 Pacientes con mayor riesgo de infección: aquellas que sufren de
desnutricion, obesas, trabajo de parto prolongado, fiebre intraparto,
cirugía laboriosa.
ENDOMETRITIS

14.  Es poco frecuente
 Fiebre acompañada de dolor, sensibilidad, y eritema alrededor de la
incisión se observa más frecuentemente al tercer o cuarto días
después del parto.
 Se debe obtener el cultivo del sitio de incision, luego del cual se
inicia con frecuencia el tratamiento antibiótico de amplio espectro.
 Absceso de la herida operatoria el drenaje del material
purulento y el aseo con antisépticos.
 Fasctores que aumentan el riesgo: DM, malnutricion, duracion de
cirugia, material de cirugia, obesidad, uso de corticoides, anemia
INFECCION DE
HERIDA

15. INCIDENCIA
13,823 cesáreas

16. Organismos comúnmente asociados
con infecciones pélvicas
Staphylococcus
Escherichia coli
Streptococcus
Klebsiella
Clostridium
Proteus

18. Materiales:
 Hisopo de algodón o sintético estéril
 Lámina porta objetos

19. Materiales:
 Tubo con tapa de rosca estéril
conteniendo medio de transporte
 Medios de cultivo: Caldo Thioglicolato
(CTh)
caldo de enriquecimiento
más utilizado en
Microbiología
(Caseina, extractos de
Levadura y Carne,
Vitaminas, etc)

20. Materiales
 Agar Sangre (AS), Agar Mac Conkey
(MC), Medio Hipertónico (MH) y Agar
Sabouraud (SAB)

21. Agar Sangre
usada para ver la
capacidad hemolítica
de los
microorganismos
patógenos

22. Agar Mac Conkey
Este medio se utiliza para el
aislamiento de bacilos Gram
negativos de fácil desarrollo,
aerobios y anaerobios
facultativos. Permite
diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en
muestras clínicas, de agua y
alimentos.
Los organismos no
fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Microorganismos Colonias
Escherichia coli Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium Incoloras, transparentes
Shigella flexneri Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis Diminutas, incoloras, opacas

23. Medio Hipertónico
Es un medio de cultivo
conteniendo 6,5% de
cloruro de sodio. Se
usa para identificar la
tolerancia salina de
las bacterias

24. Agar Sabouraud
Medio utilizado
para el
aislamiento,
identificación y
conservación de
hongos patógenos
y saprófitos.
También es útil
para el cultivo de
levaduras.
Microorganismos Crecimiento
Saccharomyces
cerevisiae
Bueno
Aspergillus niger Bueno
Candida albicans
ATCC 10231
Bueno

26. Obtención de la muestra
 La muestra fue tomada
de una paciente mujer
de 37 años de edad la
cual fue sometida a un
parto por cesárea el 25
de octubre del presente
año, estuvo
hospitalizada durante 5
días debido a la cesárea
y por propias
complicaciones

27. Obtención de la muestra
 La muestra de la herida que fue
obtenida dos días después de su
último día de hospitalización, todavía
presentaba los puntos realizados tras
la operación.
 Se tuvo en cuenta además, que la
paciente no se encontraba en
tratamiento con antibiótico y que la
única recomendación dada por su
doctor para el tratamiento de la herida
fue el de higiene diaria con agua y
jabón.

28. Obtención de la muestra
 Para poder obtener una
muestra de buena calidad se
le pidió a la paciente que no
realizara la limpieza de la
herida 24 horas previas al
examen realizado, para el
cual se empleó un hisopo de
algodón esterilizado, el cual
se humedeció con la
secreción y teniendo el
cuidado necesario para no
tocar superficie de piel
evitando así la
contaminación con la
microbiotaflora normal.
 El hisopo con la muestra se
colocó dentro del tubo con
medio de transporte y se
conservó a 5°C durante 1

29. Coloración Gram
 Con el hisopo se hizo un pequeño
frotis en el portaobjetos, al cual luego
se le aplicó la técnica de coloración
Gram

30. Siembra
 Con el hisopo se hizo un pequeño
frotis en un ángulo de cada medio de
cultivo, y luego con el asa de siembra
se distribuyó la muestra por
agotamiento. Luego se incubaron las
placas a 37°C por 48 horas.

31. Siembra
 Al tubo con el
medio de
transporte se le
añadió +/- 3 ml
de caldo
thioglicolato y
también se
incubó a 37°C.

34. oEn el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para
el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la
mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que
inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
o Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia.
Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la
absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias
incoloras.

35.  Indica:
Fermenta Lactosa o no
Resultado:
Positivo
Posibles bacterias:
Escherichia coli
Klebsiella

36. oSe trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina.
oLos estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las
colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa
negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias
sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles,
posteriormente, la prueba de la coagulasa.

37. oEn el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen
la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales, el manitol es el
hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en
alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la
flora acompañante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
oLas bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y
fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del
medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
oLos estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no
fermentar el manitol.

38.  Indica:
Metaboliza manitol o no
Desarrolla en medio
salado o no
Resultado:
Positivo
Posible bacteria:
Staphylococcus aureus

39. oEs una combinación de un Agar base (Agar nutritivo) con el agregado de 5 %
de sangre ovina, también puede usarse sangre humana, para cultivos en una
placa de Agar.
o El Agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento.
oSe usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos
patógenos (que es un factor de virulencia).
o Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el
tipo de hemólisis que posee:
 alfa: halos verdosos
beta: halos incoloros
 gamma: inexistencia de halos

40.  Indica:
Capacidad hemolítica de
microorganismos patógenos
Resultado:
Gamma hemolíticos
( no hemolíticos)
Posibles bacterias:
Streptococcus fecales

41. oMedio selectivo para el cultivo de hongos patógenos y no
patógenos, en particular de levaduras y dermatofitos.
oEl pH acido (5.6) del medio inhibe muchas especies de bacterias.
oLa adición de cloranfenicol hace el medio más selectivo.
o Diagnóstico características tales como estructuras de esporas y la
pigmentación están bien desarrollados en este medio.

42. 40 g / L de dextrosa
10 g / L de peptona
20 g/L agar
pH 5.6 pH 5,6

43.  Indica:
Presencia de hongos o no
Resultado:
Positivo
Posibles bacterias:
Candida albicans