1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA
UNAN – MANAGUA
INSTITUTO POLITECNICO DE LA SALUD
I.P.S
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA
CARRERA: BIOANALISIS CLINICO
TEMA: EXUDADO OTICO Y FARINGEO
PROFESOR: DIANA SANCHEZ
ELABORADO POR: YURI VLADIMIR VILLALOBOS
MILENA PAOLA VARGAS
JONATHAN ROGELIO SANDINO
23/10/2012
2. Objetivos
Aplicar la técnica de recolecta de exudado faríngeo.
Aplicar la técnica de recolecta de exudado otico.
Identificar los medios de cultivos para los exudados faríngeos y otico.
Interpretar resultados obtenidos.
3. Introducción
El exudado faríngeo es la toma de muestra que se realiza en el fondo de la
garganta (en las amígdalas, generalmente), mediante el uso de un hisopo estéril.
Sirve como herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano.
El hisopo se introduce y se dan vueltas sobre la muestra a fin de que todo éste
quede impregnado. Se prosigue a sembrar en medios de cultivo, tomando como
los más nutritivos agar sangre y agar chocolate, se pueden usar también el Agar
MacConkey, entre otros. Después se procede a incubar a 37ºC y observar
resultados en 48 horas.
El exudado otico es la toma de muestra que realiza atrás del pabellón de la oreja e
introducir un hisopo de algodón estéril rotándolo suavemente. Sirve como
herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano.
4. El cultivo del exudado faríngeo o frotis faríngeo se realiza utilizando un hisopo
especial para detectar la presencia de estreptococo grupo A, que es la causa más
común de la faringitis.
Una muestra tomada de la pared posterior de la garganta se coloca en un plato
especial (cultivo) que permite el crecimiento de las bacterias. El tipo específico de
infección se determina utilizando análisis químicos. Si no hay crecimiento de
bacterias, el cultivo es negativo y la persona no tiene una infección.
La faringitis es una infección bacteriana que afecta la parte posterior de la
garganta y las amígdalas, que se inflaman e irritan, lo cual provoca dolor de
garganta particularmente molesto al tragar. Es posible que la garganta y las
amígdalas presenten manchas o una capa de color amarillo y, quizás, los ganglios
linfáticos del cuello estén inflamados.
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE EXUDADO FARÍNGEO:
Incline ligeramente la cabeza del paciente hacia atrás e ilumine bien la
garganta.
Presione la lengua hacia abajo con depresor de madera de modo que
pueda observarse la parte posterior de la garganta.
Luego frote el hisopo de algodón estéril de arriba abajo contra ambas
amígdalas, contra la parte posterior de la faringe y contra cualquier mancha
blanca que se encuentre alrededor de las amígdalas.
Introduzca el hisopo en el medio de transporte de Stuart.
5. PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA:
Se recomienda la Sangre de Carnero como sangre de elección para detectar
Streptococcus ß-hemolíticos.
No debe utilizarse sangre humana porque ésta puede contener anticuerpos
específicos antiestreptococo, antimicrobianos. Por otro lado, contiene un factor
antiestreptolisina S que puede inhibir la hemólisis. Este factor no tiene relación con
el contacto previo a Streptococcus.
Las bolsas colectoras de sangre humana contienen citrato como anticoagulante, el
cual inhibe el crecimiento bacteriano.
Rotular el plato de Agar Sangre de Carnero (ASC).
Tomar el hisopo que contiene la muestra e inocular cerca de una sexta
parte del plato de forma redonda. Se hace girar el hisopo sobre la superficie
del agar de modo que toda la superficie del hisopo entre en contacto con el
agar.
Deje secar el inóculo durante 5 minutos.
Estríe los medios de la forma convencional.
Utilizando un asa redonda realizar de 3 a 4 estrías a profundidad para
observar la beta hemólisis con mayor facilidad, para ello se introduce el asa
hasta el fondo del plato en forma perpendicular a la superficie.
Incubar de 35-37oC durante 18 a 24 horas en ambiente 5% de CO2
utilizando el método de la jarra con una vela de parafina blanca o
incubadora con CO2.
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:
TOMA DE MUESTRA:
Hisopos estériles.
Depresor de madera.
Lámpara de baterías o de cuello de ganso.
TRANSPORTE DE LA MUESTRA:
Tubos conteniendo medio de transporte de Stuart
3. PROCESAMIENTO:
Equipos:
Incubadora a 35-37oC
Incubadora con CO2
6. Jarra con vela de parafina blanca (si no cuenta con incubadora CO2).
Refrigeradora a 6-8oC
Mechero tipo Bunsen
Reloj de mesa
Microscopio con objetivo de 40X y 100X
Rotador
Materiales:
Palillos de madera
Marcadores indelebles
Asas bacteriológicas rectas y redondas
Guantes descartables y mascarillas
Gradillas
Láminas de vidrio
Pinzas
Contenedores con cloro al 5% para desechar material contaminante.
Reactivos: Ninguno.
Medios de Cultivo:
Agar Sangre de Carnero al 5% (ASC)
7. Exudado otico
TOMA DE LA MUESTRA
Para tomar una muestra de exudado ótico se recomienda no haber recibido
tratamiento local ni sistémico con antimicrobianos 3 días antes de la toma de la
muestra.
1. OTITIS EXTERNA
Hacer una ligera tracción hacia arriba y atrás del pabellón de la oreja e introducir
un hisopo de algodón estéril rotándolo suavemente. Tome dos muestras. Una
muestra servirá para realizar un frotis y posterior tinción de Gram y la otra para el
cultivo. En caso no de sembrar la muestra inmediatamente introduzca el hisopo en
un medio de transporte de Stuart y transpórtela a temperatura ambiente.
Tome una nueva muestra con otro hisopo y realice un frotis en una lámina
portaobjetos.
2. OTITIS MEDIA
El oído medio es estéril. Cuando ocurre una infección a este nivel, la muestra debe
ser tomada por el médico, pues requiere de la punción del tímpano
(miringostomía). Cualquier germen aislado de esta muestra debe ser
completamente identificado y reportado. El tipo de microorganismo varía con la
edad, pero usualmente se encuentran los siguientes:
Streptococcus pneumoniae Causa el 50% de todas las infecciones a
cualquier edad.
Haemophilus influenzae: Es el microorganismo más frecuentemente aislado
en niños: 30% de todas las causas.
Streptococcus pyogenes: 10-15% de todas las causas.
Enterobacterias y Staphylococcus: Principales causas en recién nacidos.
8. PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA
1. OTITIS EXTERNA:
Con uno de los dos hisopos con los cuales tomó la muestra, realice un frotis de 1.5
x 2 cm en una lámina portaobjetos nueva, con un grosor tal que sea posible leer a
través de él. Coloree el frotis con tinción de Gram.
Con el otro hisopo, ya sea que provenga de un medio de transporte o sea
directamente del paciente, siembre la muestra en los medios de Agar Sangre de
Carnero y Agar MacConkey.
2. OTITIS MEDIA:
Del contenido de la jeringa, ponga una pequeña cantidad (menos de una gota) en
el centro de una lámina portaobjetos y realice un frotis como se indica en el
numeral 1 de otitis externa.
2.2. Con el contenido de la jeringa realice un inóculo cerca de la orilla de los platos
de Agar. Sangre de Carnero y Agar MacConkey. Estríe en la forma convencional.
9. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
TOMA DE LA MUESTRA
Otitis media:
Jeringa estéril descartable de 3mL
Otitis externa:
Hisopos estériles
TRANSPORTE
Medio de transporte de Stuart
PROCESAMIENTO
Equipos
Incubadora de CO2 (o jarra con vela en caso de carecer de incubadora de
CO2 )
Microscopio con objetivo de 100x y ocular de 10x
Mechero tipo Bunsen
Reloj de mesa
Materiales y Reactivos
Guantes descartables no estériles
Asas bacteriológicas con punta redonda y recta
Contenedores con cloro al 0.5% para descarte de materiales descartables
Láminas portaobjetos
Solución salina estéril al 0.85%
Colorantes para tinción de Gram: Cristal violeta, lugol, alcohol 70o o
alcohol-acetona (1:1), fucsina acuosa o safranina.
Medios de cultivo
Agar Sangre
Agar MacConkey
Agar Chocolate (*)
Agar Sabouraud con Cloranfenicol (**)
(*) Sólo en caso de cultivo de oído medio.
(**) Sólo si observa levaduras sin seudohifas en el frotis.
11. IMAGEN DEL EXUADO OTICO EN AGAR MacCONKEY.
IMAGEN DE EXUDADO OTICO EN AGAR SANGRE HUMANA.
IMAGEN DEL ST. AUREUS. PRUEBA DE CATALASA.
Resultado positivo se formaron burbujas que evidencian la reaccion
12. Prueba de coagulasa
1ml de3 suero más 4 ml de solución salina
Resultado
Prueba positiva de la coagulasa se formo el coagulo de fibrina.
Pba de Bacitracina
Prueba positiva se formo el halo de inhibición bacteriano alrededor de disco de
Bacitracina
13. CAMP-TEST
La reacción fue negativa porque se sembró en un medio de cultivo no usual el
ASH y era mejor en ASC en la que el resultado hubiera sido positivo.
14. Conclusión
Tras haber realizado este laboratorio concluimos que el estudio de los exudados
otico y faríngeo son de vital importancia para la identificación de bacterias
patógenas que se pueden alojar en estos lugares (oreja y faringe). Con ellos se
hace mas fácil y eficaz el diagnostico de las bacterias que pueden afectar estos
órganos tan importantes.
Bibliografia
MANUAL DE PRCEDIMIENTOS DE BACTEREOLOGIA MEDICA
www.slideshared.com
www.wilkipedia.com
www.buenastareas.com