función del plasmido en la bacteria tumefaciens

1. UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO
VALDIZÁN
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
Escuela Académica Profesional de Agronomía
TEMA:
Plásmido Ti de Agrobacterium tumefaciens
CURSO : BIOTECNOLOGIA
DOCENTE : Dra. Milka Tello Villavicencio
ESTUDIANTE : Justiniano León, Danjun Junior

2. Sistemas de transferencia de ADN basados en
vectores biológicos
- Sistemas basados en Agrobacterium tumefaciens
y Agrobacterium rhizogenes.
Agrobacterium tumefaciens
Bacteria Gram negativa que infecta a las plantas en lugares donde hay
heridas y produce la enfermedad de las agallas (conglomerados de
células indiferenciadas), fundamentalmente en Dicotiledóneas.

3. • El plásmido Ti (tumor-inducing) es el responsable de la inducción
de tumores, durante la infección se transfiere una porción definida
de este plásmido: T-DNA (DNA de transferencia)
• La enfermedad que produce es la consecuencia de la
transferencia, integración y expresión de un segmento
de DNA bacteriano en las células de las plantas.
• La integración y expresión de ciertos genes del T-DNA
hace que las células transformadas se dividan sin
control. Codifican para la síntesis de fitohormonas
(auxinas y citoquininas) y de opinas (fuente de C y N
para la bacteria).
• El plásmido Ti contiene además los denominados
“genes vir”(Codifican factores esenciales para la
transferencia e integración del T-DNA dentro del genoma
de la planta.)

4. octopina y napolina
Se compone de dos secuencias 23
– 25 nucleótidos
Transfiere y protege al t- ADN ( vir d1; vir d2)
Es convertir a la planta en
una productora de opinas,
para satisfacer los
requerimientos energéticos.
Vir A : indica a la bacteria que
se encuentra frente a una
planta susceptible.

5. Proceso en la transferencia de ADN plásmido
Agrobacterium tumefaciens
1. Construir un ADN recombinante en Agrobacterium
tumefaciens .
2. Infectar al organismo con Agrobacterium
tumefaciens.
3. Seleccionar las células transformadas de un medio
selectivo.(Kanamicina – Cefotaxima)
4. Generar las plántulas a partir del explane

7. Cultivo de raíces de tabaco transformadas
por Agrobacterium rhizogenes
Fenotipo Ri en plantas de Brassica napus
Gentileza del Dr. Mark Tepfer
Agrobacterium
rhizogenes
En este caso se
utiliza como vector
de transformación la
bacteria con su
plásmido Ri intacto y
además se introduce
otro plásmido que
contiene los genes
quiméricos dentro del
T-DNA. Puede dar
fenotipos
aberrantes en la
parte aérea de la
planta

8. PROBLEMAS Y VENTAJAS DEL PLÁSMIDO TI
• Problemas:
– Difíciles de manipular desde el punto de vista genético.
– Las células infectadas se transforman en células tumorosas → Es
difícil regenerarlas como plantas completas
Célula infectada
Células Tumorosas
Difícil regenerar

9. • Ventajas:
– Ninguno de los genes incluidos dentro del DNA T son necesarios
para que ocurran la transferencia e integración de ese DNA.
– El material genético de las células animales, bacterianas y vegetales
no emparentadas que se insertan en el DNA T:
Se transfieren al genoma nuclear de la planta.
Los genes solo se expresan cuando la región promotora del gen de la
opina sintetasa se incorpora al gen extraño → Gen Quimérico.
Opina Sintetasa Gen Extraño Gen Quimérico
P P

10. CONCLUSIONES SOBRE EL PLÁSMIDO TI
• El conocimiento sobre él:
– ↑ Conocimiento relacionado a la patología de este agente
fitopatógeno.
– ↑ Capacidad para transferir selectivamente de un planta a otra los
genes que confieran resistencia.
• Obstáculos a los que se enfrenta:
– ¿Dónde se encuentra el gen de resistencia en el genoma de las
células de las plantas resistentes?
– ¿Cómo se expresa en las nuevas plantas?

11. Bibliografía
• En línea: https://www.agro.uba.ar/users/jgori/Clases/IG.pdf
• En línea: http://porquebiotecnologia.com.ar/ind?action=cuaderno&optte=18
• En línea: http://www.fcb.uanl.mx/IDCyTA/files/volume1/1/2/50.pdf
• En línea: https://www.youtube.com/watch?v=JNw5u4NLID4
• En línea: https://www.youtube.com/results?search=plasmido+agrobacterium

13. ¿ALGUNA PREGUNTA?