El cultivo in vitro es una importante herramienta biotecnológica para el establecimiento y propagación de material vegetal que puede ayudar a abordar problemas como la deforestación y el desabasto alimentario. La investigación documental y práctica muestran que el cultivo in vitro permite la propagación masiva de plantas de manera aséptica utilizando técnicas como la micropropagación. Sin embargo, más de la mitad de las personas encuestadas no conocen sobre este tema, por lo que es necesario mejorar la difusión del cultivo in

1. Investigación documental y de campo
Informe final
Tema
Análisis sobre la importancia del cultivo in vitro como
herramienta para el establecimiento y propagación de
material vegetal
Nombre completo
Berenice Ramírez Díaz de León
Fecha junio 2018

2. INDICE
INTRODUCCIÓN........................................................................................................................ 3
METODOLOGIA......................................................................................................................... 4
-Identificación de problemática y establecimiento del tema de investigación y
análisis y abstracción de información ........................................................................... 4
-Búsqueda teórica de información del cultivo in vitro................................................. 4
-Realización de bitácora de campo aplicada al cultivo in vitro y planeación y
aplicación de entrevista a un experto en el tema ......................................................... 4
-Aplicación de encuesta y análisis de resultados........................................................ 5
RESULTADOS ............................................................................................................................ 5
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ..................................................................................... 9
BIBLIOGRAFÍA..........................................................................................................................10
ANEXOS...................................................................................................................................11

3. INTRODUCCIÓN
Debido a los conflictos que conlleva el incremento de la población mundial estimada
actualmente en 6 mil 477 millones de habitantes y estimada en 8 mil y 9 mil 300 millones
para los años 2025 y 2050 respectivamente (Calva y Pérez, 2005), así como, el cambio
climático que enfrentamos hoy en día y la problemática constante de la deforestación, por
el incremento de la población y sus necesidades ha implicado a que la producción de
alimentos sea un importante reto para este siglo. Es por eso que la biotecnología agrícola
ha jugado un papel importante sobre estas problemáticas y una de estas soluciones ha sido
la producción in vitro de plantas de todo tipo: forestales, ornamentales, alimenticias,
medicinales, frutales y hortícolas. Esta propagación puede alcanzarse mediante el uso de
una biotécnica simple denominada genéricamente cultivo de tejidos vegetales o cultivo in
vitro de plantas (Sharry, Adema y Abedini, 2015). En los últimos años, ha adquirido una
importancia considerable en la investigación básica, y su uso se ha expandido rápidamente
en la biotecnología aplicada (Sharry, Adema y Abedini, 2015).Obteniendo a partir de estas
técnicas múltiples ventajas como son: Propagación masiva de plantas, clonación de
individuos, obtención de plantas libres de virus, conservación de germoplasma, producción
de semillas sintéticas, obtención de metabolitos secundarios, producción de nuevos
híbridos, mejora genética de plantas, germinación de semillas, producción de haploides
(Segretín, 2006), entre otras ventajas. Es por eso que esta investigación busca conocer
afondo la importancia del cultivo in vitro, así como, los principales materiales y métodos de
establecimiento y propagación vegetal a partir de una investigación teórica y práctica con
el apoyo de una entrevista realizada al Dr. Carlos Román Castillo Martinez investigador y
especialista en propagación in vitro de recursos forestales, así como, una visita guiada a
las instalaciones del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias
INIFAP, además, de la aplicación de una encuesta a un grupo de individuos sobre el tema
que resultara de suma importancia para esta investigación.

4. METODOLOGIA
-Identificación de problemática y establecimiento del tema de investigación y
análisis y abstracción de información
La identificación de las principales problemáticas se realizó en el periodo comprendido del
9 al 13 de mayo 2018 en donde se identificaron las principales problemáticas de interés
como son: La deforestación, el aumento poblacional junto con el desabasto alimentario y
contaminación ambiental. Se pudo encontrar que existen técnicas que sirven para la
conservación de especies vegetales, así como, establecimiento y propagación masiva de
las mismas a partir del cultivo in vitro y su uso biotecnológico para la resolución de las
problemáticas ya mencionadas.
-Búsqueda teórica de información del cultivo in vitro
Del 14 al 20 de mayo 2018 se buscó información teórica en diversos medios como:
buscadores científicos, revistas de ciencia, artículos científicos y libros con los cuales nos
aproximaran a la información específica para entender la importancia de la conservación
in vitro, así como, sus materiales métodos y técnicas.
-Realización de bitácora de campo aplicada al cultivo in vitro y planeación y
aplicación de entrevista a un experto en el tema
Del 21 al 27 de mayo se realizó la visita al Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales Agrícolas y Pecuarias INIFAP, en donde, se realizó una bitácora de
campo en donde se registraron las principales actividades realizadas en la visita,
como se muestra en la figura 1.
Figura 1. Bitácora de campo.

5. -Aplicación de encuesta y análisis de resultados
Del 30 mayo a 3 de junio como se muestra en la figura 2, se realizó la aplicación de una
encuesta a diez personas sobre el tema de cultivo in vitro, detectando la edad y el grado de
estudios de los encuestados, así como, un cuestionario sencillo de conocimiento del tema,
como se muestra en la Figura 3.
Figura 2. Plan de trabajo
Figura 3. Encuesta sobre la importancia del cultivo in vitro.
RESULTADOS
A partir del establecimiento del tema de investigación, la búsqueda teórica de investigación,
el recorrido realizado en el Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y
Pecuarias INIFAP, así como, la realización de la entrevista con un experto en el tema
pudimos establecer que:
Desde hace más de 130 años, se ha utilizado la técnica de cultivo de tejidos, órganos y
células vegetales. Esta técnica comenzó a finales del siglo XIX debido al interés por
determinar la relación funcional de un tejido con otro y por conocer el desarrollo de las
células aisladas de la planta (Sharry, Adema y Abedini, 2015). Y actualmente darle solución
a las principales problemáticas sobre la demanda de alimentos y las diversas problemáticas
ambientales.
La importancia del cultivo in vitro en la actualidad como lo menciona el Dr. Carlos Román
comose muestraen el Anexo 2, tiene muchos fines, desde la parte comercialpara propagar
masivamente una especie, la parte para conservar recursos genéticos, la parte que
interviene en un proceso previo para mejoramiento genético por mutagénesis o bien por
parte de transformación genética o ingeniería genética o edición genética, para todos ellos
es básico tener un protocolo de investigación in vitro.

6. El término cultivo de tejidos vegetales involucra diferentes técnicas de cultivo de tejidos,
órganos o células vegetales, el cual consiste en regenerar plantas a partir de explantes o
explantos (Sharry, Adema y Abedini, 2015) en un gel especial de forma aséptica y de forma
más rápida.
Las condiciones de un cultivo in vitro son:
Esterilidad: El cultivo de las especies vegetales in vitro debe mantenerse altamente
desinfectado y libre de agentes patógenos.
Temperatura: La temperatura oscilar entre los 25 - 30ºC.
Humedad Relativa: Los cultivos vegetales in vitro necesitan una humedad relativa entre el
50% y el 80 %.
Ciclo De Luz: Usualmente las plántulas crecidas in vitro deben permanecer durante 18
horas en un ciclo de luz constante y 6 horas de oscuridad.
pH: Debe oscilar entre 5.6 y 5.8 para evitar estrés durante su cultivo (Cortes y Pérez, 2017).
Los materiales utilizados son:
Campana de flujo laminar, cajas petri estériles, tubos de ensayo estériles, frascos de vidrio
con tapa , pinzas de diversos tamaños, bisturís ,pinzas, gradillas , medio de cultivo
Murashige and Skoog (MS) Figura 4, balanzas, potenciómetro, autoclave, entre otros
materiales fundamentales para la realización del cultivo in vitro.
Figura 4. Composición de medios de cultivo (Olmos, Luciani y Galdeano, 2006).

7. Organización del laboratorio de cultivo celular
Es importante tener en cuenta la organización que el laboratorio de tejidos vegetales deberá
tener para su correcta operación. Conocer la estructura mínima que se requiere para un
correcto funcionamiento puede garantizar el éxito de estas operaciones. Como se muestra
en la Figura 5.
Técnicas de cultivos in vitro
Embriogénesis somática directa: Se basa en obtener un
nuevo organismo a partir de un embrión vegetal (Cortes
y Pérez, 2017).
Embriogénesis somática indirecta: Se basa en la
siembra de una semilla en el medio elegido para su
posterior propagación (Cortes y Pérez, 2017).
Organogénesis directa: Se obtiene un nuevo individuo a
partir de la siembra de un órgano vegetal (Cortes y
Pérez, 2017).
Figura 5. Croquis de la
estructura de un laboratorio de
cultivo de tejido.
A
B
C

8. Micropropagación:La micropropagación consiste
en la propagación de plantas en un ambiente
artificial controlado, empleando un medio de
cultivo adecuado.
La micropropagación presenta cuatro etapas
principales: establecimiento del cultivo,
desarrollo y multiplicación de vástagos o
embriones, enraizamiento y aclimatación de las
plántulas. (Olmos, Luciani y Galdeano, 2006).
Aplicación de encuesta
A partir de la aplicación de la encuesta sobre el conocimiento de cultivo in vitro se obtuvo
que:
D
F E
Figura 6. Fotografías tomadas en el laboratorio del INIFAP. A:
Establecimiento de embrión de cedro rojo. B: Establecimiento de
semilla de cedro rojo. C: Establecimiento de explante. D:
Biorreactor con explantes de cedro rojo. E: Plántula de cedro rojo.
F: Aclimatación de plántula.
Figura 7. Se puede observar que la mitad de la
población encuestada tiene entre 15 a 25 años,
mientras que le sigue la población de 25 a 35 años
con 3 personas, mientras que, el rango de 35 a 45
años solo fue 1 persona y finalmente la población de
45 a 55 años solo fue encuestada 1 persona.
Figura 8. Se muestra que más de la mitad de la
población tiene estudios de licenciatura, mientras
que, solo 3 personas tienen estudios de bachillerato
y solo 1 estudios de secundaria.
Figura 9. Se puede identificar que el 40% de la
población encuestada no tiene conocimientos del
cultivo in vitro, sin embargo, el 60 % si tiene
conocimientos del cultivo in vitro.

9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
El cultivo in vitro es un avance tecnológico con gran importancia, que ayuda a solucionar
diversos problemáticas como la deforestación, el cambio climático y desabasto de
alimentos, así como, es una parte fundamental en cuestión empresarial como lo menciona
el Dr. Carlos Román, ya que a nivel internacional, tal es el caso de Holanda la producción
de ornamentales se trabaja a partir de la técnica de cultivo de tejidos, y a nivel nacional casi
el 80% de lo que se trabaja de planta de agave para la producción de tequila se realiza a
partir del conocimiento y aplicación de estas técnicas, sin embargo, a partir de la encuesta
realizada más del 60% de la población no conoce sobre este tema y el 90% de la población
encuestada le gustaría aprender y conocer más sobre el cultivo in vitro, por ello es de suma
importancia hacer difusión del tema para que la gente vea que es un tema interesante y
necesario para la conservación y propagación de diversos recursos vegetales, que ayudan
a resolver las problemáticas ya mencionadas.
Figura 10. Se muestra que el 90% de la población
encuestada estaría interesada en aprender sobre el
tema in vitro, mientras que solo el 10% no le
interesaría.

10. BIBLIOGRAFÍA
• Cortes, A., Pérez, C. (2017). Artículo de revisión. Importancia de los cultivos
vegetales In vitro para establecer bancos de germoplasma y su uso en
investigación. Recuperado de
hemeroteca.unad.edu.co/index.php/Biociencias/article/download/2222/2382
• Calva, G., Pérez, J. (2005). Revista Digital Universitaria. Cultivo de células y tejidos
vegetales: Fuente de alimentos para el futuro.6 (11). 1-16. Recuperado de
http://www.revista.unam.mx/vol.6/num11/art104a/nov_art10
• Olmos, S., Luciani G. y Galdeano E. (s.f). Métodos de propagación y
conservación de germoplasma. Recuperado de
http://www.argenbio.org/adc/uploads/Libro_INTA_II/Parte_IV.pdf
• Sharry, S., Adema, M. y Abedini, W. (2015). Plantas de probeta manual para la
propagación de plantas por cultivo de tejidos in vitro. Recuperado de
http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/46738/Documento_co
mpleto__.pdf-PDFA.pdf?sequence=1
• Segretín M. (2006). Los cultivos celulares y sus aplicaciones II (cultivos de células
vegetales). Recuperado de
http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Cultivos%20celulares%20II%20Eug
e.pdf

11. ANEXOS

12. Anexo 1. Bitácora de campo.

15. Anexo 2. Entrevista con el Dr. Carlos Román Castillo Martinez

19. Anexo 3. Encuesta sobre la importancia del cultivo in vitro.