1. 1. Reacción de Mo lisch La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por
la reacción de Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato.
Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono.
En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la muestra y
la deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas).
Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch)
dando un producto coloreado. 2. Reacción de Benedict Una de las reacciones más comunes en la
identificación de carbohidratos es la reacción de Benedict. Esta reacción es específica para
azúcares con grupo reductores libres (C=O).
Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa y lactosa tienen
grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos reductores
de sus componentes cuando ésta es formada.
Se basa en la capacidad del carbohidrato de reducir el + 2 Cu en un medio alcalino. Este + 1 Cu se
oxida y precipita en forma de O Cu2 , lo que proporciona la coloración positiva de la reacción. La
coloración dependerá de la concentración de óxido de cobre y ésta a su vez de la reducción del
cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la coloración.
3. Reacción de Seliwanoff Los carbohidratos se clasifican como cetosas o aldosas. Vale decir, que
las cetosas en el carbono 2 tienen una función cetona, que en presencia de un ácido fuerte
producen rápidamente derivados furfúricos que reaccionan con un difenol llamado resorcina que
está contenido en el reactivo de Seliwanoff. La sacarosa (un disacárido formado por glucosa y
fructosa) y la inulina (un polisacárido de la fructosa) dan positiva la reacción, ya que el HCl del
reactivo provoca en caliente la hidrólisis del compuesto liberando fructosa (responsable de la
reacción positiva).
FUNDAMENTO.- Se fundamenta en el carácter reductor que presentan ciertos carbohidratos al
presentar en sus estructuras grupos reductores como el carbonilo esencialmente en las aldosas.
OB JE TIVOS: - Conocer las diferentes reacciones de identificación para los carbohidratos. - Explicar
en la hidrólisis de la sacarosa porque se produce la reducción del ión cúprico. MA TERI AL ES -
Tubos de ensayo - Pipetas - Recipiente para baño de agua caliente - Pinzas SU ST AN CIAS -
Muestras conocida (Xilosa, galactosa, fructosa, glucosa, sacarosa, lactosa, ribosa). - Muestras
desconocidas. - α naftol - Ácido sulfúrico concentrado.
- Reactivo de Seliwanoff
- Reactivo de Bial
- Reactivo de Barfoed
- Reactivo de Benedict

2. - Sulfato cobaltoso - NaOH 0.1 N
PR OC ED IMI EN TO 1.- IDENTIFICACION GENERAL PARA CARBOHIDRATOS (REACCION DE
MOLISCH) En 8 tubos agregar respectivamente 1 ml de cada muestra conocida, (Xilosa, galactosa,
fructosa, glucosa, sacarosa, lactosa, ribosa) y 1ml de muestra desconocida #3, luego agregar 3
gotas de α naftol, mezclar y por las paredes del tubo agregar ácido sulfúrico concentrado de 1 a 2
ml, observar la interfase, la reacción es positiva si se forma un anillo color púrpura.
2.- REACCION DE CETOSAS En 3 tubos de ensayo agregar 1,5 ml de Reactivo de Seliwanoff y luego
0,5 ml de las muestras conocidas (fructosa en el primer tubo, glucosa en el segundo tubo) y 0,5 ml
de la muestra de desconocida #5 en el último tubo, mezclar, hacer un baño de agua hirviendo de 1
a 5 minutos, eel resultado es positivo para cetosas si se produce un color rojo púrpura.
3.- IDENTIFICACION DE PENTOSAS: REACCION DE BIAL En 4 tubos agregar 1.5 ml del reactivo de
Bial y 0,5 ml de la muestra conocida (Ribosa en el primer tubo. Xilosa en el segundo, galactosa en
el tercero) y 0,5 ml de muestra desconocida #4 en el último tubo, mezclar, luego hacer un baño de
agua hirviendo de 1 a 5 minutos, es positivo si adquiere un color verde azulado.
4.- IDENTIFICACION DE MONOSACARIDOS REDUCTORES En 4 tubos agregar 2 ml de reactivo de
Barfoed y 1 ml de muestra conocida (Galactosa en el tubo 1, ribosa, lactosa sucesivamente en los
otros tunbos) y 1 ml de muestra desconocida #2, mezclar luego hacer un baño de agua hirviendo
durante 5-10 minutos, la reacción es positiva si se produce un precipitado de color rojo ladrillo.
5.- IDENTIFICACION DE AZUCARES REDUCTORES: REACCION DE BENEDICT En 3 tubos agregar 2,5
ml de reactivo de Benedict y 0,5ml de muestra conocida (sacarosa en el tubo 1, glucosa en el tubo
2) y 0,5 ml de la muestra desconocida #5 en el último tubo, la re acción es positiva si el precipitado
es de color amarillo o rojo ladrillo.
6.- DISACARIDOS NO REDUCTORES: REACTIVO DE Co SO4 En 3 tubos agregar 2 ml de muestra
conocida (Sacarosa en el primer tubo, lactosa en el siguiente) y 2 ml de muestra desconocida en el
3 tubo, luego agregar 8 gotas de
Co SO4 , mezclar y agregar 1ml de NaOH 0.1N, la reacción es positiva si da un color violáceo.
7.- HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA 1.- Hacer la reacción de Benedict o guardar el tubo con el que se
hizo la reacción de Benedict para la Sacarosa. 2.- Agregar 3 ml de la Sacarosa luego 2 gotas de
Acido sulfúrico concentrado, mezclar, llevar el tubo a baño de agua hirviendo por 5 minutos,
retirar del baño, enfriar y de este tubo hacerla reacción de Benedict. (Comparar los resultados con
el primer paso, explicar).
RE SU LT AD OS 1.- IDENTIFICACION GENERAL PARA CARBOHIDRATOS MU ES TRA OB SE RV ACION
ES Xilos a + Ga lactos a + Fructos a + Glucos a + Sa caros a + La ctos a + Ribosa + MD #3 - 2.-
REACCION DE CETOSAS MU ES TRA OB SE RV ACION ES Fructos a + Glucos a - MD #5 + 3.-

3. IDENTIFICACION DE PENTOSAS: REACCION DE BIAL MU ES TRA OB SE RV ACION ES Ribosa + Xilos a
+ Ga lactos a - MD #4 + 4.- IDENTIFICACION DE MONOSACARIDOS RE DU CT OR ES MU ES TRA OB
SE RV ACION ES Ga lactos a + Ribosa + La ctos a - MD #2 -
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reductoressacarsa(more tags)bioquimicaBiochemicalidentificacióncarbohidratosmolisch
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