Universidad de Guayaquil
        Virología
 ADENOVIRIDAE

       2011- 2012
               Sidney Calderón Crespo
ADENOVIRIDAE
• Rowe y colaboradores (1953) descubren por accidente
  tratando de encontrar el virus del catarro común.

• Hilleman los responsabiliza de algunos padecimientos
  respiratorios

• Durante los 60 descubren que:
  – algunos virus producen cáncer (en roedores)
  – son capaces de trasformar células al estado maligno (in vitrio)
FAMILIA ADENOVIRIDAE
• Gran numero de especies ampliamente distribuidos en la
  naturaleza, clasificado en 2 géneros:
           MASTADENOVIRUS AVIADENOVIRUS
             Adenovirus: Humanos                Adenovirus: Aviares
                         Simianos                           Anfibios
                         Bovinos
                         Equinos
                         Porcinos
                         Ovinos
                         Caninos
                         Murinos
•   Específicos de especies
•   Presentan gran variabilidad genética
•   Inducen amplia gama de enfermedades
•   Infectan al huésped a través las mucosas ocular, faringea o intestinal
1. ESTRUCTURA DEL VIRIÓN
•   SIMETRIA: Icosaedrica, Isométrica
•   DIAMETRO: 70-80nm
•   ENVOLTURA: no
                        240 Hexones (caras)
•   CAPSOMEROS: 252
                        12 Pentones (vértices)

• ADN: Doble Cadena, lineal                                                            FIBRAS
                                                                        (Estructura que interactúa
               – 30.000 a 45500 (pb)                                      con la superficie celular)
• PESO MOLECULAR: 20-30 millones de Daltons
     – Secuencia nucleotida terminales son repeticiones invertidas
     – Extremo 5’ se encuentra unida covalentemente una proteina de 55 kdaltons


    •ESTABLES A BAJO pH y al CALOR
    •RESITENTE A SECRECIONES GASTRICAS Y BILIARES
REPRESENTACION ESQUEMATICA DE UNA
     PARTICULA DE ADENOVIRUS
2. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

• Los principales antígenos son localizados en los poliéptidos
  que constituyen el hexon y el pentón.

  HEXONES
   – Determinantes antigénicos compartidos (excepto el a. del pollo)
   – Determinantes antígenos específicos (zonas expuestas)


  PENTONES
   – Determinantes antigénicos comunes
3. MULTIPLICACION VIRAL
1)ADSORCION
2)PENETRACION
3)DESCUBRIMIENTO DE CUBIERTA
4)TRASCRIPCION DEL ARNm
5)TRADUCCION DEL ANTIGENO
6)REPLICA DEL ADN VIRAL
7)TRASCRIPCION DEL ANTIGENO
9) ENSAMBLAJE
10)LIBERACION
Células mucoepiteliales del tracto respiratorio, tracto
              Afinidad
                           gastrointestinal y conjuntiva o córnea.
ADSORCION   Receptores       CAR         CPH    CD46           αv Integrina
            Integridad de la envoltura
2. PENETRACIÓN
•Se da por endocitosis en vesículas

•La membrana de la vesícula fagocítica se rompe por
acción tóxica del pentón.

•Se produce entonces la liberación de la partícula viral
dentro del citoplasma, con pérdida de proteínas de la
cápside

•Con la ayuda de los microtúbulos celulares, el virus es
transportado al complejo de poros nucleares en donde la
partícula de adenovirus se desmonta.

•A continuación, el ADN viral es liberado y entra en el
núcleo a través del poro nuclear.
3. REPLICACION DEL ADN
                  •Replicación del ADN
    NUCLEO        •Transcripción
                  •Ensamblaje
                  •Maduración

  CITOPLASMA      •Traducción de Menajeros virales



El ciclo lítico del adenovirus comprende:
  – Fase Temprana
  – Duplicación del ADN
  – Fase Tardía
  – Ensamblaje y Maduración
FASE TEMPRANA
Los genes de la fase inicial son responsables de expresar
principalmente las proteínas reguladoras no-estructurales.

Funciones de estas proteínas:

• Alterar la expresión de las proteínas del huésped que son
  necesarias para la síntesis del ADN.
• Activar los otros genes del virus (tales como la ADN
  polimerasa codificada por el virus).
• Evitar la muerte prematura de la célula infectada por las
  defensas inmunitarias del huésped (bloqueo de la apoptosis,
  bloqueo de la actividad del interferón y bloqueo de la
  translocación y expresión MHC de clase I).
FASE TEMPRANA

En el núcleo celular el genoma viral se transcribe según
un programa complejo.
En ambas cadenas complementarias se han localizado
6 regiones de transcripción temprana:

–   E1a   ( 1,3    -    4,6 )
–   E1b   ( 4,7    -   11,3 )                      R
–   E2a   ( 62,4   -   75,4 )
–   E2b   ( 11.3   -   76,0 )
–   E3    ( 76,8   -   85,9 )                      L
–   E4    ( 91,2   -   99,1 )
PROTEINAS DE LOS ADENOVIRUS
DUPLICACION DEL ADN
• Una proteína terminal de 55kD que se une
  covalentemente al extremo 5' del genoma del
  adenovirus actúa como iniciador (primer) para la
  replicación.

• La duplicación del ADN se realiza a partir de ambas
  cadenas en forma semiconservativa.

• Esta mediada por una polimerasa de ADN de origen
  vírico.
FASE TARDIA
• La última se centra en la producción de cantidades suficientes
  de proteínas estructurales para empaquetar el material
  genético producido por la replicación del ADN.

• Al poco tiempo de comenzada la duplicación del ADN, inicia la
  trascripción de los mensajeros tardíos.

• Estos mensajeros virales tardíos se generan a partir de
  trascriptos primarios largos de la cadena “l” que luego son
  procesados.

• Los ARNm de las 5 regiones de transcripción tardía (L1, L2, L3,
  L4, y L5) codifican todas las proteínas estructurales del virus
  con excepción de los polipéptidos IX y IVa2
ENSAMBLAJE Y MADURACION
• Los polipéptidos estructurales del virus son
  trasportados al núcleo donde comienza el
  ensamblaje.

• En cada célula infectada se ensamblan alrededor
  de 10.000 partículas virales dentro de las 30 horas
  post infección con los serotipos de crecimiento más
  rápido.

• El adenovirus se libera por ruptura de la célula
  infectada, como consecuencia de la lisis celular
  inducida viralmente.
CUERPOS DE INCLUSION INTRANUCLEAR
Los procesos de replicación y ensamblaje tienden a tener
errores.
Solo se elabora 1 unidad infecciosa por cada 11 a 2300
partículas.

La acumulación de estas partículas defectuosas, ADN y
proteínas forman los CUERPOS DE INCLUSION NUCLEAR.


                                                INTRANUCLEAR
                                                CENTRA DENSA
                                                   BASOFILA

Adenoviridae

  • 1.
    Universidad de Guayaquil Virología ADENOVIRIDAE 2011- 2012 Sidney Calderón Crespo
  • 2.
    ADENOVIRIDAE • Rowe ycolaboradores (1953) descubren por accidente tratando de encontrar el virus del catarro común. • Hilleman los responsabiliza de algunos padecimientos respiratorios • Durante los 60 descubren que: – algunos virus producen cáncer (en roedores) – son capaces de trasformar células al estado maligno (in vitrio)
  • 3.
    FAMILIA ADENOVIRIDAE • Grannumero de especies ampliamente distribuidos en la naturaleza, clasificado en 2 géneros: MASTADENOVIRUS AVIADENOVIRUS Adenovirus: Humanos Adenovirus: Aviares Simianos Anfibios Bovinos Equinos Porcinos Ovinos Caninos Murinos • Específicos de especies • Presentan gran variabilidad genética • Inducen amplia gama de enfermedades • Infectan al huésped a través las mucosas ocular, faringea o intestinal
  • 4.
    1. ESTRUCTURA DELVIRIÓN • SIMETRIA: Icosaedrica, Isométrica • DIAMETRO: 70-80nm • ENVOLTURA: no 240 Hexones (caras) • CAPSOMEROS: 252 12 Pentones (vértices) • ADN: Doble Cadena, lineal FIBRAS (Estructura que interactúa – 30.000 a 45500 (pb) con la superficie celular) • PESO MOLECULAR: 20-30 millones de Daltons – Secuencia nucleotida terminales son repeticiones invertidas – Extremo 5’ se encuentra unida covalentemente una proteina de 55 kdaltons •ESTABLES A BAJO pH y al CALOR •RESITENTE A SECRECIONES GASTRICAS Y BILIARES
  • 5.
    REPRESENTACION ESQUEMATICA DEUNA PARTICULA DE ADENOVIRUS
  • 6.
    2. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA •Los principales antígenos son localizados en los poliéptidos que constituyen el hexon y el pentón. HEXONES – Determinantes antigénicos compartidos (excepto el a. del pollo) – Determinantes antígenos específicos (zonas expuestas) PENTONES – Determinantes antigénicos comunes
  • 7.
    3. MULTIPLICACION VIRAL 1)ADSORCION 2)PENETRACION 3)DESCUBRIMIENTODE CUBIERTA 4)TRASCRIPCION DEL ARNm 5)TRADUCCION DEL ANTIGENO 6)REPLICA DEL ADN VIRAL 7)TRASCRIPCION DEL ANTIGENO 9) ENSAMBLAJE 10)LIBERACION
  • 8.
    Células mucoepiteliales deltracto respiratorio, tracto Afinidad gastrointestinal y conjuntiva o córnea. ADSORCION Receptores CAR CPH CD46 αv Integrina Integridad de la envoltura
  • 9.
    2. PENETRACIÓN •Se dapor endocitosis en vesículas •La membrana de la vesícula fagocítica se rompe por acción tóxica del pentón. •Se produce entonces la liberación de la partícula viral dentro del citoplasma, con pérdida de proteínas de la cápside •Con la ayuda de los microtúbulos celulares, el virus es transportado al complejo de poros nucleares en donde la partícula de adenovirus se desmonta. •A continuación, el ADN viral es liberado y entra en el núcleo a través del poro nuclear.
  • 11.
    3. REPLICACION DELADN •Replicación del ADN NUCLEO •Transcripción •Ensamblaje •Maduración CITOPLASMA •Traducción de Menajeros virales El ciclo lítico del adenovirus comprende: – Fase Temprana – Duplicación del ADN – Fase Tardía – Ensamblaje y Maduración
  • 12.
    FASE TEMPRANA Los genesde la fase inicial son responsables de expresar principalmente las proteínas reguladoras no-estructurales. Funciones de estas proteínas: • Alterar la expresión de las proteínas del huésped que son necesarias para la síntesis del ADN. • Activar los otros genes del virus (tales como la ADN polimerasa codificada por el virus). • Evitar la muerte prematura de la célula infectada por las defensas inmunitarias del huésped (bloqueo de la apoptosis, bloqueo de la actividad del interferón y bloqueo de la translocación y expresión MHC de clase I).
  • 13.
    FASE TEMPRANA En elnúcleo celular el genoma viral se transcribe según un programa complejo. En ambas cadenas complementarias se han localizado 6 regiones de transcripción temprana: – E1a ( 1,3 - 4,6 ) – E1b ( 4,7 - 11,3 ) R – E2a ( 62,4 - 75,4 ) – E2b ( 11.3 - 76,0 ) – E3 ( 76,8 - 85,9 ) L – E4 ( 91,2 - 99,1 )
  • 15.
    PROTEINAS DE LOSADENOVIRUS
  • 16.
    DUPLICACION DEL ADN •Una proteína terminal de 55kD que se une covalentemente al extremo 5' del genoma del adenovirus actúa como iniciador (primer) para la replicación. • La duplicación del ADN se realiza a partir de ambas cadenas en forma semiconservativa. • Esta mediada por una polimerasa de ADN de origen vírico.
  • 17.
    FASE TARDIA • Laúltima se centra en la producción de cantidades suficientes de proteínas estructurales para empaquetar el material genético producido por la replicación del ADN. • Al poco tiempo de comenzada la duplicación del ADN, inicia la trascripción de los mensajeros tardíos. • Estos mensajeros virales tardíos se generan a partir de trascriptos primarios largos de la cadena “l” que luego son procesados. • Los ARNm de las 5 regiones de transcripción tardía (L1, L2, L3, L4, y L5) codifican todas las proteínas estructurales del virus con excepción de los polipéptidos IX y IVa2
  • 19.
    ENSAMBLAJE Y MADURACION •Los polipéptidos estructurales del virus son trasportados al núcleo donde comienza el ensamblaje. • En cada célula infectada se ensamblan alrededor de 10.000 partículas virales dentro de las 30 horas post infección con los serotipos de crecimiento más rápido. • El adenovirus se libera por ruptura de la célula infectada, como consecuencia de la lisis celular inducida viralmente.
  • 20.
    CUERPOS DE INCLUSIONINTRANUCLEAR Los procesos de replicación y ensamblaje tienden a tener errores. Solo se elabora 1 unidad infecciosa por cada 11 a 2300 partículas. La acumulación de estas partículas defectuosas, ADN y proteínas forman los CUERPOS DE INCLUSION NUCLEAR. INTRANUCLEAR CENTRA DENSA BASOFILA