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Clasificación de
los
Microorganismos
M. PAZ
UMG-2011
Siglo XIX
 Reino Plantae:
– algas (inmóviles y fotosintéticas)
– hongos (inmóviles y no fotosintéticos),
 Reino Animalia
– Infusorios (microorganismos móviles)
 organismos perfectos: dotados de todos los
sistemas orgánicos presentes en seres superiores.
 Divididos en metazoos, protozoos y bacterias
Cambios históricos
 Haeckel (1866): introdujo reino Protista
– Seres vivos sencillos, fotosintéticos y/o móviles
– Protozoos, algas, hongos y bacterias.
 Copeland (1938): introdujo reino Monera
– Separa a las bacterias.
 Margulis (1969): introdujo reino Fungi y reino
Protoctista (m.o. eucariotas y parientes
macroscópicos: mohos mucosos no hongos).
 Woese (1977): ARQUEOBACTERIAS Y
EUBACTERIAS
Taxonomía molecular
Las bacterias forman el conjunto de los procariotas: ADN libre en el citoplasma y
no incluido en un núcleo. Reino Monera.
Los restantes organismos unicelulares se clasifican como eucariotas: genoma en
el núcleo:
Reino Protista: protozoos y algas unicelulares
Reino Hongos: microscópicos y macromicetos
Los virus constituyen un mundo aparte, ya que no pueden reproducirse por sí
mismos, sino que necesitan parasitar una célula viva para completar su ciclo
vital.
procariotas
Procariotas
 organización celular
 material genético (cromosoma circular de
ADN de doble hebra) inmerso en el
citoplasma
 Replicación: fisión binaria
 carecen de orgánulos rodeados de
membrana
 Ribosomas: coeficiente de sedimentación
de 70S
 Citoplasma envuelto por una membrana
celular
 Pared celular de peptidoglicano, excepto
las arqueas.
TAMAÑO: célula eucariota vrs célula procariota
Tamaños
cocos bacilos espiroquetas
FORMAS DE LAS BACTERIAS
Formas
1. Cocos: (células más o menos esféricas);
2. Bacilos: (en forma de bastón, alargados), que a su vez pueden tener
varios aspectos:
cilíndricos
fusiformes
en forma de maza, etc.
Según los tipos de extremos, éstos pueden ser:
redondeados (lo más frecuente), cuadrados, biselados, afilados.
3. Espirilos: al igual que los bacilos, tienen un eje más largo que otro,
pero dicho eje no es recto, sino que sigue una forma de espiral, con
una o más de una vuelta de hélice.
4. Vibrios: proyectada su imagen sobre el plano tienen forma de coma,
pero en el espacio suelen corresponder a una forma espiral con
menos de una vuelta de hélice.
Otros tipos de formas:
filamentos, ramificados o no anillos casi cerrados formas con
prolongaciones (con prostecas)
Formas
cocos
espiroquetas
bacilos
vibrios
filamentosas
Superficie vs. volumen
• la relación superficie/volumen (S/V) es muy alta.
• En una célula esférica: cuanto menor sea el radio (r) mayor será esta
relación, lo que significa que el pequeño tamaño de las bacterias
condiciona un mayor contacto directo con el medio ambiente
inmediato que las rodea
• reciben las influencias ambientales de forma inmediata.
• condiciona una alta tasa de crecimiento.
• La velocidad de entrada de nutrientes y la de salida de productos de
desecho es inversamente proporcional al tamaño de la célula, y a su
vez, estas tasas de transporte afectan directamente a la tasa
metabólica. Por lo tanto, en general, las bacterias crecen (se
multiplican) de forma rápida.
Superficie vs. volumen
Tamaño pequeño
intercambio más
eficiente, permite
mayor velocidad
metabólica
Agrupaciones
 Las bacterias normalmente se multiplican por
fisión transversal binaria. En muchas especies,
las células hijas resultantes de un evento de
división por fisión tienden a dispersarse por
separado al medio, debido a la actuación de
fuerzas físicas (movimiento browniano).
 Esto hace que al observar al microscopio una
población de estas bacterias veamos
mayoritariamente células aisladas.
 Diplococos y diplobacilos
Agrupaciones
 Si la tendencia a permanecer unidas es mayor y
por más tiempo, nos encontramos con varias
posibilidades, dependiendo del número de planos
de división y de la relación entre ellos:
– Estreptococos o estreptobacilos
 Si existe más de un plano de división, en el caso
de cocos podemos encontrar tres posibilidades:
– dos planos perpendiculares: tétradas o múltiplos
– tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes cúbicos)
– muchos planos de división: estafilococos (racimos
irregulares).
 Bacilos: en empalizada, en V o L, “letras chinas”.
Estructura celular
Pared celular
 Bacteria:
– Gram positivo
– Gram negativo
– Sin pared
 Archaea:
– Diversas estructuras
– Sin pared
Funciones de la pared
 Rigidez (mantener la forma, evitar la lisis).
 Comunicación con el medio exterior.
 Puede estar involucrada en patogenicidad
(LPS)
 Barrera para algunas moléculas.
 Espacio periplásmico (enzimas de
transporte, hidrolíticas, etc.)
Formación de protoplastos
 Mediante procedimientos de laboratorio se
puede lograr eliminar total o parcialmente
la pared celular bacteriana.
 Se denominan protoplastos las células
bacterianas a las que se ha desprovisto
totalmente de pared celular, mientras que
esferoplastos son aquellas células
bacterianas que poseen restos de pared.
Formación de Protoplastos
Alta
concentración
de solutos
Lisozima -- proteína que rompe el enlace
glicosídico 1-4 en el peptidoglicano
Baja concentración
de solutos
Gram + Gram-
Bacteria
Estructura del Peptidoglicano
Pared Celular Gram Positivo
Otros compuestos químicos
característicos de la pared de
Gram+
 Ácidos Teicoicos
– Polímero de alcohol (ribitol
o glicerol)
 Ácidos Teicurónicos
 Ácidos Lipoteicoicos
– Polímero de 16 a 40
unidades de glicerol unido
a un glicolípido
 Ácidos Micólicos
Membrana Externa de Gram Negativos
Porinas - proteínas que permiten el pasaje de moléculas
pequeñas a través de la membrana
- específicas e inespecíficas
Lipopolisacárido (LPS)
• Lípido A (NAG-P + grupos acilos)
• Núcleo del polisacárido
– contiene KDO (cetodesoxioctonato) y otros carbohidratos
(ramnosa, ácido galacturónico)
– usualmente específico de especies
• O-antígeno
– número de repeticiones variables
– también contiene carbohidratos
– específico de cepa
• A menudo tóxico para animales - endotoxina
• Crea superficies densamente hidrofílicas
Funciones del Periplasma
(E. coli)
•Proteínas de periplasma de E. coli
•Proteínas de unión para aminoácidos
• histadina, arginina
•Enzimas de biosíntesis
•Ensamblado de mureína
•Enzimas de degradación de polímeros
•proteasas
•Enzimas detoxificantes
•Beta-lactamasas: penicilinasa
Algunas bacterias no poseen pared
• Mycoplasma
• Membrana celular más gruesa
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• Pleomórficos
Pared celular de Archaea
 No contiene peptidoglicano
 Puede ser de
– pseudopeptidoglicano (pseudomureína) tiñe
G+
– pseudomureína cubierta de proteína, tiñe G+
– monocapa superficial de proteína o
glicoproteína, sin pseudomureína (halófilos,
metanogénicos y termoacidófilos) tiñe G -
 Existen Archaea sin pared
Pseudopeptidoglicano de Archaea
Funciones de la pared
 Rigidez y resistencia osmótica (mantener la
forma, evitar la lisis).
 Comunicación con el medio exterior.
 Puede estar involucrada en patogenicidad (LPS)
 Barrera para algunas moléculas (porinas en
gram negativos).
 Espacio periplásmico (enzimas de transporte,
hidrolíticas, etc.)
Estructura:
 Bicapa fosfolipídica con proteínas embebidas;
puede contener también hopanoides de
estructura similar al colesterol.
 En Archaea, éteres de alcohol isoprenoide,
algunas forman monocapas.
La membrana celular
Estructura de la Membrana
Citoplasmática
Membrana citoplásmica
Los lípidos en Bacteria y Archaea tienen
diferentes enlaces químicos
Ester - Bacteria Eter - Archaea
Isopreno
Funciones de Membrana
Citoplasmática
 Barrera de Permeabilidad
– sólo moléculas pequeñas, sin carga, hidrofóbicas,
pueden atravesar la membrana por difusión.
 Ancla de Proteínas
– transporte, generación de energía, quimiotaxis
 Generación de fuerza proton motriz
 En fotótrofas: Estructuras intracitoplasmáticas, soportan
el aparato fotosintético
(Vesículas y túbulos)
 Síntesis de pared y estructuras extracelulares.
Membrana citoplasmática
de E. coli
Estructura celular procariota - ADN
 No tiene núcleo. El ADN está en el citoplasma
– “nucleoide”: zona que ocupa el ADN
 Es haploide.
– Genoma es una única molécula de ADN de doble cadena,
circular.
 El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp)
– procariotas de vida libre: 1000-5000 genes
 No contiene histonas (proteínas para empaquetamiento de
ADN).
 Puede contener otros elementos genéticos no genómicos:
plásmidos y genomas fágicos.
Procariotas
 No tienen
membrana
nuclear
ADN Cromosómico
–No hay procesamiento del
ARNm
–La transcripción está ligada
a la traducción.
–ADN circular
cerrado
–Superenrrollado.
Citoplasma
 Proteínas (enzimas, complejos
enzimáticos, estructurales)
 Ribosomas (70S: 55 proteínas, rARN 5S, 16S,
23S)- polisomas
 mARN, tARN
 Otras macromoléculas, solutos
 Sin estructura visible al microscopio
 No tienen citoesqueleto.
Estructuras características
 Estructuras con funciones específicas.
 No todos los microorganismos las tienen.
 Son características de género y especie
(taxonomía)
 Ejemplos:
– fimbrias, flagelo, pili, endospora, cápsula, inclusiones
citoplasmáticas
Fimbrias - Pili
 Fimbria - filamento proteico corto,
involucrado en funciones de
adhesión a superficies.
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receptora durante la conjugación.
Flagelos
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La energía la proporciona la fuerza protomotriz
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Flagelos
Barra 0,5 micras
Anaerobaculum mobile sp.
Flagelo insertado lateralmente
Endosporas
 Resistencia al calor, radiación, desecación.
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Clostridium
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nutrientes dispara la germinación y el crecimiento
 La localización de la espora en la célula puede ser usada
para su identificación
Estructura de la espora
Formación de esporas
A- el ADN se duplica y enrolla alrededor del eje central (filamento
axial)
B- Uno de los cromosomas se rodea de membrana plasmática.
C- el protoplasto es rodeado por la célula madre
D- se sintetizan las cubiertas de la espora.
E- se elimina agua, se forma estructura resistente al calor.
F- se libera la espora por lisis de la célula madre.
En B. subtilis 6-7 horas, 50 genes.
Inclusiones citoplasmáticas
 Algunas bacterias tienen estructuras
internas
– gránulos de almacenamiento -
polifosfato,azufre, polihidroxibutirato
(PHBs)
– vesículas de gas – flotación
– Carboxisomas, clorosomas.
Gránulos de polihidroxibutirato (PHBs)
vesículas de gas
flotación
Cubiertas extracelulares
 Glicocálix: Material externo a la pared celular
– Cápsulas - Material en la superficie celular
– Capas mucilaginosas - Material adherido, menos fuertemente
– Capa S: Subunidades proteicas o glicoproteicas.
 G+, G- y Archaea
 Pueden constituir la pared
 Funciones
– Protección contra defensas del huésped (fagocitosis)
– Protección contra desecación
– Protección contra virus, toxinas
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formación de biofilms.
Glicocálix
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Microscopía
electrónica
El árbol filogenético universal
Diferencia entre la estructura celular de
Bacteria, Archaea y Eucarya
Propiedad Bacteria Eucarya Archaea
Membrana
nuclear
NO SI NO
Organelos NO SI NO
Tamaño
ribosoma
70S 80S 70S
Peptidoglicano
en la pared
SI NO NO
Esteroles en
membrana
NO
(hopanoides)
SI SI
Lípidos de
membrana
Ester unidos
a glicerol
Ester unido a
glicerol
Eter,
ramificados
¿Cómo se estudia?
 Microscopía (óptica y electrónica)
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– BIOLOGÍA MOLECULAR
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  • 2. Siglo XIX  Reino Plantae: – algas (inmóviles y fotosintéticas) – hongos (inmóviles y no fotosintéticos),  Reino Animalia – Infusorios (microorganismos móviles)  organismos perfectos: dotados de todos los sistemas orgánicos presentes en seres superiores.  Divididos en metazoos, protozoos y bacterias
  • 3. Cambios históricos  Haeckel (1866): introdujo reino Protista – Seres vivos sencillos, fotosintéticos y/o móviles – Protozoos, algas, hongos y bacterias.  Copeland (1938): introdujo reino Monera – Separa a las bacterias.  Margulis (1969): introdujo reino Fungi y reino Protoctista (m.o. eucariotas y parientes macroscópicos: mohos mucosos no hongos).  Woese (1977): ARQUEOBACTERIAS Y EUBACTERIAS
  • 5. Las bacterias forman el conjunto de los procariotas: ADN libre en el citoplasma y no incluido en un núcleo. Reino Monera. Los restantes organismos unicelulares se clasifican como eucariotas: genoma en el núcleo: Reino Protista: protozoos y algas unicelulares Reino Hongos: microscópicos y macromicetos Los virus constituyen un mundo aparte, ya que no pueden reproducirse por sí mismos, sino que necesitan parasitar una célula viva para completar su ciclo vital. procariotas
  • 6. Procariotas  organización celular  material genético (cromosoma circular de ADN de doble hebra) inmerso en el citoplasma  Replicación: fisión binaria  carecen de orgánulos rodeados de membrana  Ribosomas: coeficiente de sedimentación de 70S  Citoplasma envuelto por una membrana celular  Pared celular de peptidoglicano, excepto las arqueas.
  • 7. TAMAÑO: célula eucariota vrs célula procariota
  • 10. Formas 1. Cocos: (células más o menos esféricas); 2. Bacilos: (en forma de bastón, alargados), que a su vez pueden tener varios aspectos: cilíndricos fusiformes en forma de maza, etc. Según los tipos de extremos, éstos pueden ser: redondeados (lo más frecuente), cuadrados, biselados, afilados. 3. Espirilos: al igual que los bacilos, tienen un eje más largo que otro, pero dicho eje no es recto, sino que sigue una forma de espiral, con una o más de una vuelta de hélice. 4. Vibrios: proyectada su imagen sobre el plano tienen forma de coma, pero en el espacio suelen corresponder a una forma espiral con menos de una vuelta de hélice. Otros tipos de formas: filamentos, ramificados o no anillos casi cerrados formas con prolongaciones (con prostecas)
  • 12. Superficie vs. volumen • la relación superficie/volumen (S/V) es muy alta. • En una célula esférica: cuanto menor sea el radio (r) mayor será esta relación, lo que significa que el pequeño tamaño de las bacterias condiciona un mayor contacto directo con el medio ambiente inmediato que las rodea • reciben las influencias ambientales de forma inmediata. • condiciona una alta tasa de crecimiento. • La velocidad de entrada de nutrientes y la de salida de productos de desecho es inversamente proporcional al tamaño de la célula, y a su vez, estas tasas de transporte afectan directamente a la tasa metabólica. Por lo tanto, en general, las bacterias crecen (se multiplican) de forma rápida.
  • 13. Superficie vs. volumen Tamaño pequeño intercambio más eficiente, permite mayor velocidad metabólica
  • 14. Agrupaciones  Las bacterias normalmente se multiplican por fisión transversal binaria. En muchas especies, las células hijas resultantes de un evento de división por fisión tienden a dispersarse por separado al medio, debido a la actuación de fuerzas físicas (movimiento browniano).  Esto hace que al observar al microscopio una población de estas bacterias veamos mayoritariamente células aisladas.  Diplococos y diplobacilos
  • 15. Agrupaciones  Si la tendencia a permanecer unidas es mayor y por más tiempo, nos encontramos con varias posibilidades, dependiendo del número de planos de división y de la relación entre ellos: – Estreptococos o estreptobacilos  Si existe más de un plano de división, en el caso de cocos podemos encontrar tres posibilidades: – dos planos perpendiculares: tétradas o múltiplos – tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes cúbicos) – muchos planos de división: estafilococos (racimos irregulares).  Bacilos: en empalizada, en V o L, “letras chinas”.
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  • 19. Pared celular  Bacteria: – Gram positivo – Gram negativo – Sin pared  Archaea: – Diversas estructuras – Sin pared
  • 20. Funciones de la pared  Rigidez (mantener la forma, evitar la lisis).  Comunicación con el medio exterior.  Puede estar involucrada en patogenicidad (LPS)  Barrera para algunas moléculas.  Espacio periplásmico (enzimas de transporte, hidrolíticas, etc.)
  • 21. Formación de protoplastos  Mediante procedimientos de laboratorio se puede lograr eliminar total o parcialmente la pared celular bacteriana.  Se denominan protoplastos las células bacterianas a las que se ha desprovisto totalmente de pared celular, mientras que esferoplastos son aquellas células bacterianas que poseen restos de pared.
  • 22. Formación de Protoplastos Alta concentración de solutos Lisozima -- proteína que rompe el enlace glicosídico 1-4 en el peptidoglicano Baja concentración de solutos
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  • 27. Pared Celular Gram Positivo
  • 28. Otros compuestos químicos característicos de la pared de Gram+  Ácidos Teicoicos – Polímero de alcohol (ribitol o glicerol)  Ácidos Teicurónicos  Ácidos Lipoteicoicos – Polímero de 16 a 40 unidades de glicerol unido a un glicolípido  Ácidos Micólicos
  • 29. Membrana Externa de Gram Negativos Porinas - proteínas que permiten el pasaje de moléculas pequeñas a través de la membrana - específicas e inespecíficas
  • 30. Lipopolisacárido (LPS) • Lípido A (NAG-P + grupos acilos) • Núcleo del polisacárido – contiene KDO (cetodesoxioctonato) y otros carbohidratos (ramnosa, ácido galacturónico) – usualmente específico de especies • O-antígeno – número de repeticiones variables – también contiene carbohidratos – específico de cepa • A menudo tóxico para animales - endotoxina • Crea superficies densamente hidrofílicas
  • 31. Funciones del Periplasma (E. coli) •Proteínas de periplasma de E. coli •Proteínas de unión para aminoácidos • histadina, arginina •Enzimas de biosíntesis •Ensamblado de mureína •Enzimas de degradación de polímeros •proteasas •Enzimas detoxificantes •Beta-lactamasas: penicilinasa
  • 32. Algunas bacterias no poseen pared • Mycoplasma • Membrana celular más gruesa • pueden tener esteroles y lipoglicanos. • Pleomórficos
  • 33. Pared celular de Archaea  No contiene peptidoglicano  Puede ser de – pseudopeptidoglicano (pseudomureína) tiñe G+ – pseudomureína cubierta de proteína, tiñe G+ – monocapa superficial de proteína o glicoproteína, sin pseudomureína (halófilos, metanogénicos y termoacidófilos) tiñe G -  Existen Archaea sin pared
  • 35. Funciones de la pared  Rigidez y resistencia osmótica (mantener la forma, evitar la lisis).  Comunicación con el medio exterior.  Puede estar involucrada en patogenicidad (LPS)  Barrera para algunas moléculas (porinas en gram negativos).  Espacio periplásmico (enzimas de transporte, hidrolíticas, etc.)
  • 36. Estructura:  Bicapa fosfolipídica con proteínas embebidas; puede contener también hopanoides de estructura similar al colesterol.  En Archaea, éteres de alcohol isoprenoide, algunas forman monocapas. La membrana celular
  • 37. Estructura de la Membrana Citoplasmática
  • 39. Los lípidos en Bacteria y Archaea tienen diferentes enlaces químicos Ester - Bacteria Eter - Archaea Isopreno
  • 40. Funciones de Membrana Citoplasmática  Barrera de Permeabilidad – sólo moléculas pequeñas, sin carga, hidrofóbicas, pueden atravesar la membrana por difusión.  Ancla de Proteínas – transporte, generación de energía, quimiotaxis  Generación de fuerza proton motriz  En fotótrofas: Estructuras intracitoplasmáticas, soportan el aparato fotosintético (Vesículas y túbulos)  Síntesis de pared y estructuras extracelulares.
  • 42. Estructura celular procariota - ADN  No tiene núcleo. El ADN está en el citoplasma – “nucleoide”: zona que ocupa el ADN  Es haploide. – Genoma es una única molécula de ADN de doble cadena, circular.  El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) – procariotas de vida libre: 1000-5000 genes  No contiene histonas (proteínas para empaquetamiento de ADN).  Puede contener otros elementos genéticos no genómicos: plásmidos y genomas fágicos.
  • 44. ADN Cromosómico –No hay procesamiento del ARNm –La transcripción está ligada a la traducción. –ADN circular cerrado –Superenrrollado.
  • 45. Citoplasma  Proteínas (enzimas, complejos enzimáticos, estructurales)  Ribosomas (70S: 55 proteínas, rARN 5S, 16S, 23S)- polisomas  mARN, tARN  Otras macromoléculas, solutos  Sin estructura visible al microscopio  No tienen citoesqueleto.
  • 46. Estructuras características  Estructuras con funciones específicas.  No todos los microorganismos las tienen.  Son características de género y especie (taxonomía)  Ejemplos: – fimbrias, flagelo, pili, endospora, cápsula, inclusiones citoplasmáticas
  • 47. Fimbrias - Pili  Fimbria - filamento proteico corto, involucrado en funciones de adhesión a superficies.  Pelo sexual - unión a célula receptora durante la conjugación.
  • 48. Flagelos Más de 40 genes involucrados La energía la proporciona la fuerza protomotriz
  • 49. Sólo detectados por técnicas de tinción específicas Flagelos
  • 50. Barra 0,5 micras Anaerobaculum mobile sp. Flagelo insertado lateralmente
  • 51. Endosporas  Resistencia al calor, radiación, desecación.  Producidas principalmente por los géneros Bacillus y Clostridium  Permite la supervivencia en ambientes desfavorables  ADN protegido por ácido dipicolínico y proteínas.  Luego de la activación por stress, la disponibilidad de nutrientes dispara la germinación y el crecimiento  La localización de la espora en la célula puede ser usada para su identificación
  • 53. Formación de esporas A- el ADN se duplica y enrolla alrededor del eje central (filamento axial) B- Uno de los cromosomas se rodea de membrana plasmática. C- el protoplasto es rodeado por la célula madre D- se sintetizan las cubiertas de la espora. E- se elimina agua, se forma estructura resistente al calor. F- se libera la espora por lisis de la célula madre. En B. subtilis 6-7 horas, 50 genes.
  • 54. Inclusiones citoplasmáticas  Algunas bacterias tienen estructuras internas – gránulos de almacenamiento - polifosfato,azufre, polihidroxibutirato (PHBs) – vesículas de gas – flotación – Carboxisomas, clorosomas.
  • 55. Gránulos de polihidroxibutirato (PHBs) vesículas de gas flotación
  • 56. Cubiertas extracelulares  Glicocálix: Material externo a la pared celular – Cápsulas - Material en la superficie celular – Capas mucilaginosas - Material adherido, menos fuertemente – Capa S: Subunidades proteicas o glicoproteicas.  G+, G- y Archaea  Pueden constituir la pared  Funciones – Protección contra defensas del huésped (fagocitosis) – Protección contra desecación – Protección contra virus, toxinas – Adhesión a superficies (células, objetos inanimados) formación de biofilms.
  • 59. Diferencia entre la estructura celular de Bacteria, Archaea y Eucarya Propiedad Bacteria Eucarya Archaea Membrana nuclear NO SI NO Organelos NO SI NO Tamaño ribosoma 70S 80S 70S Peptidoglicano en la pared SI NO NO Esteroles en membrana NO (hopanoides) SI SI Lípidos de membrana Ester unidos a glicerol Ester unido a glicerol Eter, ramificados
  • 60.
  • 61. ¿Cómo se estudia?  Microscopía (óptica y electrónica)  Análisis químicos y bioquímicos  Estudios genéticos (mutaciones) – BIOLOGÍA MOLECULAR – BIOTECNOLOGÍA