HEMOCULTIVOS 2020 Unidad 7.pdf

1. MICROBIOLOGÍA 2020
Unidad 7
HEMOCULTIVOS
• Prof. Adj. Dra. María Eugenia Torres
• Asist. Lic. Alicia Rodríguez
2020
Declaramos no tener conflictos de interés.

2. HEMOCULTIVO
Examen microbiológico que consiste en cultivar una muestra de sangre del
paciente obtenida mediante punción, habitualmente venosa.
Mediante el mismo documentamos la bacteriemia, obtenemos el germen,
podemos identificarlo, estudiar su sensibilidad a antimicrobianos, etc.
Es uno de los exámenes
más importantes que
se realizan en el
Laboratorio de Microbiología
Clínica.

3. HEMOCULTIVOS .
La realización de hemocultivos está
indicada en:
 Sospecha de sepsis o bacteriemia
 Fiebre de origen desconocido
 Infecciones graves
 Sospecha de endocarditis infecciosa.
 Sospecha de infección debida a catéter
vascular.
 Otras situaciones clínicas.

4. Frascos de Hemocultivo
• La sangre debe obtenerse en forma aséptica
ser colocada de inmediato (al lado del
paciente) en frascos que contienen medios
de cultivo líquidos (caldos con nutrientes
que permitan el desarrollo de bacterias y
hongos.
Frascos de hemocultivo

5. Preanalítica
• Deben obtenerse ANTES DE SUMINISTRAR
ANTIBIÓTICOS
• Sustancias que inactivan antibioticos (relativo)
• Las muestras se toman con intervalo de
10 a 60 min
• En emergencia se toman de dos sitios
diferentes de punción , sin esperar .

6. Antes del inicio de los antibióticos
o INMEDIATAMENTE ANTES DE LA
PROXIMA DOSIS (Valle)

7. Hemocultivos
• MUESTRA DE HEMOCULTIVO cantidad de
sangre que se extrae de un único sitio de
punción y que se inocula en uno o más frascos
• EN ADULTOS se realiza una SERIE que son en
general DOS MUESTRAS en el mismo día
• En pocas ocasiones está indicado realizar TRES
muestras en el dia (Endocarditis)

8. Numero de muestras
• Realizar más de dos muestras por día no
mejora el rendimiento en adultos.
• En niños se toma un solo frasco, en la
bacteriemia, gran cantidad de bacterias/ml.
• Los frascos no son baratos y extraer más
sangre a los pacientes pueden llevar a
anemia.

9. Intervalo entre muestras
• Es una variable que incide menos en los
resultados.
• En casos de urgencia 2 muestras
simultaneas o sucesivas, de distintas venas.
• Habitualmente entre 10 y 60 minutos entre
tomas.

10. PREANALITICA
● Rotular frascos COLOCAR LA
HORA DE EXTRACCION,
fundamental en BACTERIEMIA
asociada a catéteres.
● No poner cintas adhesivas
● No cubrir códigos de barras

11. Recolección de la muestra de sangre
● Ligar, palpar venas, elegir la que se
va puncionar
● Realizar la antisepsia de piel.
● Usar guantes estériles, no volver a
palpar luego de colocárselos.
● Emplear campo fenestrado estéril.

12. • Qué antiséptico emplear
par preparar la piel?
Clorhexidina alcohólica al 2%
Recomendada
Basado en pautas internacionales y nacionales
De lo contrario Yodóforos o alcohol seguido de yodóforos
SUMAMENTE IMPORTANTE PARA EVITAR CONTAMINAR
LA MUESTRA

13. Volumen de sangre
• ES LA VARIABLE MAS IMPORTANTE
• ADULTOS mínimo 10 ml por muestra
recomendado 15 a 20 ml /muestra
30 a 40 ml/SERIE
• NIÑOS: 1 a 5 ml
debido a la magnitud de la bacteriemia
en gral se extrae un solo frasco.
El volumen debe ajustarse al frasco
Imagen: http://medsci.indiana.edu/

14. Volumen de sangre necesario

15. Si se sacan dos
muestras de 10 ml
DEPENDIENDO DE LA INSTITUCION
PUEDEN HABER 1 o 2 FRASCOS
PAUTADOS POR PUNCION
RECOMENDADO TOTAL DE LA
SERIE : ENTRE 20 Y 40 ML
PRIMERA EXTRACCION
SEGUNDA EXTRACCION

16. Si se realizan dos punciones de
20 cm cada una se deben
distribuir
Hora 5:00
Hora 5:30
PRIMERA EXTRACCION
´ 10 mL en cada frasco
SEGUNDA EXTRACCION
10 ml en cada frasco.

17. Tipo de frasco
• DEPENDE
Tipo de servicio (Cirugía , Ginecología)
• Tipo de infección que se sospecha (anaerobios,
levaduras)
• Si no hay directivas , es adecuado obtener un par
compuesto por un frasco aerobio y uno anaerobio
FRASCO ANAEROBIO: Necesario para
servicios de cirugía y ginecología o
cuando se sospechen infecciones por
anaerobios.

18. Inoculación frasco de Hemocultivo

19. Es necesario cambiar la aguja
luego de la extracción y antes de
pinchar el frasco??

20. Es necesario cambiar la aguja
luego de la extracción y antes de
pinchar el frasco??
Aumenta el riesgo de accidentes
por punción
Si se respetan las condiciones de
asepsia no contribuye a
disminuir la contaminación
NO

21. Es necesario desinfectar la goma?

22. Es necesario desinfectar la goma?
SI ESNECESARIO,LATAPADEPLASTICO
NO
ESTÁDESTINADAA GARANTIZAR LA
ESTERILIDAD

23. Con que desinfectar la goma
del frasco?
● Alcohol?
● Clorhexidina?
● Yodoforos
● Alcohol yodadado?

24. Con que desinfectar la goma del
frasco?
● Alcohol?
● Clorhexidina?
● Yodoforos
● Alcohol yodadado?
ALCOHOL 70% ES LO RECOMENDADO
POR EL FABRICANTE

25. ● Luego de colocar la
sangre en el frasco agitar
suavemente para mezclar
● El frasco tiene sustancias
para evitar que la sangre
coagule

26. Transporte al Laboratorio
• De inmediato es lo recomendado.
• De lo contrario:
• A temperatura ambiente
• No refrigerar
• No colocar en incubadoras

27. TIPOS DE TECNICAS DISPONIBLES
Hemocultivos manuales:
 Se examinan a diario y se realizan subcultivos
a ciegas.
Sistemas automatizados de
hemocultivos
Los frascos se colocan en un equipo y el crecimiento de las bacterias
es monitorizado a intervalos de 10 minutos
imagen: Oxoid (MR)

28. PROCESAMIENTO
Sistemas automatizados
• Naranja anaerobio
• Verde aerobio
• Amarillo pediátrico
• Marca BACTALERT bio
Merieux (MR)

29. • BD
• Rosa Pediátricos
• Azul aerobios
• Naranja anaerobios
• Tambien botellas para
Mycobacterias,

30. Lo primero EL VOLUMEN ES CRITICO!!!!!! De Ud. Depende!!
LO RECOMENDADO SON 20 a 40 ml por serie
Por debajo de 20 ml en un adulto se afecta severamente la sensiblidad (Aumentan
falsos negativos)
Una Serie LAS MUESTRAS SACADAS EN UN DIA
Habitualmente dos muestras , excepcionalmente tres ….
Una muestra LOS FRASCOS SACADOS EN UNA PUNCION
Un Pinchazo = Una muestra
Puede ser un frasco o dos por punción (10 a 20 ml)
Una sola muestra en adultos( ya sea en un frasco o en dos ) es INADECUADA
En adultos son dos PUNCIONES, en cada pinchazo hay que sacar entre 10 y 20 ml
Resumen

31. Sistemas automatizados de detección
• Incuban los frascos
y los agitan
• Censan
permanentemente
aumento de CO2
producido por el
metabolismo
bacteriano
• Llegado a un umbral
dan un aviso sonoro
• Cuando da señal
sonora positiva, se
retira un poco de la
mezcla de sangre y
caldo.
• Gram u otras
coloraciones
• Subcultivos
• Luego las colonias serán
identificadas y se
estudia su sensibilidad

33. Fuentes de error
● Dos problemas PREANALITICOS
FALSOS POSITIVOS : Contaminación
FALSOS NEGATIVOS: Escaso volúmen,
antibióticos previos.
Soluciones:
● Seguir las recomendaciones de la extracción
(técnica aséptica)
● Extraer los volúmenes adecuados

34. Hemocultivos: Interpretación
• Crecimiento de una
bacteria patógena
• En las dos muestras
• Cuadro clínico
compatible
• Se interpreta como el
agente de la
• Gérmenes de escasa
virulencia, p ej de piel
• En una sola muestra
• Resultado no
compatible con el
cuadro clínico
• CONTAMINANTE
bacteriemia
EN MUCHAS OCASIONES NO SE PUEDE CONCLUIR SI ES UN
CONTAMINATE O NO
Se deben hacer los máximos esfuerzos para evitar la
contamiación

35. Hemocultivos
• La CONTAMINACION se
produce en el momento de
la recolección
• ANULA la posibilidad de
establece la causa de la
sepsis
• Agrega costos y
tratamientos
innecesarios
• Tasas de contaminación
mayores a 3% deben hacer
revisar los procedimientos
TANTO EL LABORATORIO
COMO LOS
ENCARGADOS DE
REALIZAR LAS TOMAS
COMO MÉDICOS Y
ENFERMEROS DEBE
HACER EL MÁXIMO
ESFUERZO PARA LLEVAR
LA CONTAMINACION AL
MINIMO

36. Indicadores de calidad en
Hemocultivos
● Porcentaje de contaminación
● menor a 3% de las muestras.
• Nº de muestras con volumen inadecuado.
• Tiempo en que se avisa al médico
• Menor a 1 hora
● Numero de series con un solo frasco.

37. Nuevas técnicas para diagnóstico
de bacteriemia
PCR multiplex
Bacterias y
mecanismos de
resistencia
Hongos.
Resultado en 1 hora
Proteómica
(Malditof)
Láser que rompe al
microorganismo
Se dispersan las proteínas
Se crea un perfil y se
compara con una base de
datos
Resultado: Identificación
en minutos.

38. Bacteriemia asociada a cateter
Constituyen una de las infecciones hospitalarias más frecuentes
Aumento progresivo de técnicas invasivas.
Mayor sobrevida de pacientes de edades extremas, recién nacidos de
muy bajo peso, pacientes inmunocomprometidos, pacientes oncológicos
o en diálisis que requieren uso de catéteres.
Se considera un indicador de la calidad del servicio de salud.
Aislamiento de un mismo germen en la punta del
catéter y en un hemocultivo de punción
periférica, en un paciente con síntomas y signos
compatibles con bacteriemia y sin otra causa que
lo explique.

39. Diagnóstico de bacteriemia asociada
al uso de catéter vascular
Debe notificarse al programa de
control de infecciones
MSP

40. Cultivo de punta de catéter vascular
• No existe la ¨infección del catéter¨
• Existe la bacteriemia asociada a uso de catéter
• Por lo tanto, si no hay signos de infección el
catéter se saca y se descarta, no se envía al
laboratorio.
• Incluso si está colonizado, si no hay signos
de infección, retirar el catéter es suficiente.

41. CATETERES
● VASCULARES CENTRALES
● De Corta estadía
● De Larga estadía
●
● ESPECIALES (DVP, DPCA) no son
catéteres vasculares, se procesan de
otra forma , como implantes.

42. Punta de catéter
● Cuando es necesario enviar a cultivo la
punta de catéter vascular??
SOLO SI SE SOSPECHA
BACTERIEMIA POR CATETER?
Los catéteres pueden colonizarse, pero si no hay
signos de infección es suficiente con retirarlos
SI hay signos de infección hay que realizar también
hemocultivos.

43. Cateteres intravenosos
● Enviar en tubo
● Los 4 cm distales e intravasculares
●No hilos, no piel ,
no trozos largos
Si se envían catéteres
Que no sean vasculares
Especificarlo en la
Solicitud del estudio

44. Cultivo de catéter
• La técnica más empleada es el recuento de
Maki
• Se rota el catéter en agar sangre, se incuba
35º C , 24 a 48 horas
• Se cuentan las colonias
• Recuento significativo de Maki: 15 o más
colonias

46. Retrocultivos
Hemocultivos extraído a través del catéter
Se desaconsejan
SALVO en el caso de catéteres hiper-valiosos
Por ejemplo catéteres implantables con dispositivos para
inyección de medicación en un paciente oncológico.
Se compara el tiempo que demora en dar positivo el
Retrocultivo respecto al hemocultivo de punción venosa
Si da positivo 120 minutos antes o más :
Se atribuye la bacteriemia a el cateter

47. Material complementario
y consultas en la
plataforma
Muchas gracias!