Buenas prácticas en hemocultivo

HEMOCULTIVO

QFB ADRIANA HERNÁNDEZ ANICA
DICIPA
ESPECIALISTA DE SOPORTE
QFB ADRIANA HERNANDEZ

INTRODUCCIÓN
La bacteremia se define como la presencia de
bacterias en el torrente sanguíneo,
confirmada su presencia por medio del
aislamiento de éstas en los cultivos de la
sangre.

La bacteremia se produce cuando la
multiplicación y llegada de microorganismos
en la sangre supera la capacidad del sistema
reticuloendotelial para eliminarlos.


INFECCIÓN
La invasión del torrente
sanguíneo se produce
desde un foco de
infección extravascular ,
a través de los capilares
o de las vías linfáticas o
desde un foco intra
vascular como en la
endocarditis.

Estas tienen implicaciones
pronósticas importantes
ya que se asocian con
una elevada mortalidad
que oscila entre el 20 y
40% . QFB ADRIANA HERNANDEZ

El descenso de bacterias se encuentra
claramente relacionado con la
administración de una terapia
antimicrobiana lo más
tempranamente posible, de ahí la
importancia del aislamiento en los
hemocultivos de los microorganismos
comprometidos con el fin de
establecer un diagnóstico etiológico y
la sensibilidad a los antimicrobianos.

Los hemocultivos contaminados son muy
frecuentes y pueden dar falsos positivos.

Suceden porque la zona donde se toma la
muestra está colonizada por la flora
cutánea normal.


Para confirmar que la presencia de
microorganismos se debe a
contaminación se debe tener en cuenta :

el número de botellas

el tiempo de aislamiento

la revisión de la historia clínica del
paciente.

La técnica de obtención de la muestra
debe garantizar:
• El aislamiento de todos los microorganismos
productores de infecciones sanguíneas , para
ello se tiene en cuenta sus diferentes
requerimientos nutricionales, temperatura,
atmósfera de óptimo crecimiento y periodo de
incubación
• Detección precoz de bacterias en sangre
permite que se puedan realizar rápidas
modificaciones en la terapéutica (VOL
MUESTRA <30 ml)


La técnica de obtención de la muestra
debe garantizar:

• La diferencia de los casos de verdadera
bacteremia de aquéllos en los que la
positividad se debe a la contaminación
causada por una inadecuada técnica de
asepsia en la extracción y procesamiento
de la muestra
• La identificación precisa de los agentes
causales de la bacteremia y su
sensibilidad a los antimicrobianos


OBJETIVOS
• DESCRIBIR LAS NORMAS PARA LA
OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS DE
SANGRE PARA LOS CULTIVOS

• PROPORCIONAR RECOMENDACIONES
GENERALES PARA EL
PROCESAMIENTO Y TOMA DE LOS
MISMOS PARA EVITAR FALSOS
POSITIVOS

Con el desarrollo de los
sistemas de vigilancia
para las infecciones
intrahospitalarias (IIH) se
ha establecido un
objetivo adicional, apoyar
en el criterio de
notificación de la IIH
cuando la definición
requiere identificación
etiológica.

ELECCION DE MUESTRA
APROPIADA


HEMOCULTIVO
ES UN EXAMEN PARA DETERMINAR LA
PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN LA
SANGRE (BACTERIAS, MICOBACTERIAS,
HONGOS).
SE REALIZA LA ADICIÓN DE UNA MUESTRA DE
SANGRE A UNA PREPARACIÓN ESPECIAL
DE LABORATORIO (INFUSIÓN DE
EXTRACTOS DE CARNE Y PEPTONA A LA
QUE SE AÑADIRÁN OTROS INGREDIENTES)
E INCUBANDO E UN AMBIENTE
CONTROLADO DE 1-7 DIAS.

Se define como un Hemocultivo
la sangre obtenida a partir de un
sitio de venipunción, sin importar
el número de botellas llenadas


EL MATERIAL ALIMENTICIO EN EL QUE
CRECEN LOS MICROORGANISMOS ES EL
MEDIO DE CULTIVO Y EL CRECIMIENTO
DE MICROORGANISMOS ES EL CULTIVO.

PARA EL ÓPTIMO CRECIMIENTO SE DEBEN
REUNIR UNA SERIE DE CONDICIONES:

TEMPERATURA HUMEDAD
P DE OXIGENO ACIDEZ/ALCALINIDAD

MEDIO DE CULTIVO

DEBE CONTENER LOS NUTRIENTES Y FACTORES DE
CRECIMIENTO NECESARIOS Y ESTAR EXCENTO DE
TODO MICROORGANISMO CONTAMINANTE.

MATERIALES DE ENRIQUECIMIENTO:
Hidratos de carbono, suero, sangre completa.

(incrementar el valor nutritivo del medio para detectar
reacciones de fermentación de microorganismos y
promover el crecimiento de los microorganismos
menos resistentes)


Inhibidores de Otros Sistemas de
Hemocultivos

Carbón Activado:

• No es eficiente en la
neutralización de penicilinas,
cefalosporinas y vancomicina

• Interfiere en lectura de Tinción
de Gram

INDICACIONES
• Fiebre alta (>38.3°C), especialmente si se
acompaña de compromiso importante del estado
general sin una causa clara que lo justifique.
• Estado de shock no explicado por causas
hemodinámicas
• Infecciones localizadas que pueden complicarse
con bacteremia como neumonía, pielonefritis,
meningitis, infecciones intraabdominales,
infecciones complicadas de la piel o tejido celular
subcutáneo.
• Presencia de leucopenia, leucocitosis o
trombocitopenia no relacionada con procesos
hematológicos.

PRINCIPALES CAUSAS DE BAJO
RENDIMIENTO DE CULTIVO

• CAÍDA DE pH

• CAÍDA DE TEMPERATURA

• DESECACIÓN


CONSIDERACIONES
En el adulto obtener al menos dos
muestras (idealmente 3) de sangre
de 10 ml cada muestra y en RN dos
muestras entre 1 a 2 ml de acuerdo al
peso.


BUENAS PRÁCTICAS DE
PROCESO
GENERALIDADES DEL
HEMOCULTIVO


• Momento de la recolección de la
muestra
• Intervalo entre hemocultivos
• Número de botellas
• Volumen de sangre a extraer
• Elección del medio de cultivo
• Duración de la incubación
• Interpretación del hemocultivo
• Métricos e indicadores de calidad


INCIDENCIA
Los focos más frecuentes de bacteriemia
son el tracto genitourinario, los abscesos,
las heridas quirúrgicas, el tracto biliar y los
catéteres intravasculares, aunque hasta
en un 25% de los casos su foco originario
es desconocido


IMPACTO ECONÓMICO
• Aumentando el diagnóstico de
bacteremia se reduce
significativamente el costo de la
estancia del paciente al reducir el
número de días y la terapia
antimicrobiana inadecuada.
– Whittier, S.,M. Casey, et al. 2003. Financial impact of blood culture system
consolidation and media selection. Study presented at: 103rd General Meeting of
the American Society for Microbiology, Washington, D.C.


•La sensibilidad y especificidad del hemocultivo
es altamente dependiente de las Buenas
Prácticas para su procedimiento


o Momento de la recolección
de la muestra:

¿Cuándo es el mejor momento para la recolección de la muestra
sanguínea en pacientes con sospecha de sepsis?


TIEMPO ÓPTIMO
– Justo antes del inicio del escalofrío y
fiebre
– Se debe tomar la muestra de sangre lo
más cerca posible del pico febril o del
escalofrío
– No se demore, ya que la recuperación
de los microorganismos disminuye con
el tiempo después del pico febril

INTERVALOS ENTRE
HEMOCULTIVOS
Cada set de hemocultivo debe
obtenerse de manera simultánea, o
en un corto plazo

En casos de sospecha de
endocarditis infecciosa, sacar 3 set
de hemocultivos con 1 hora de
diferencia

BACTEREMIA ASOCIADA A CATÉTER

Dos hemocultivos extraídos con menos de 10
minutos.
Uno obtenido de catéter y otro de vena
periférica.
Una diferencia en tiempo de detección de 2
horas tiene alta sensibilidad y especificidad para
el diagnóstico de infección relacionada con
catéter

NÚMERO DE BOTELLAS
Dos botellas para cada hemocultivo

Mayor sensibilidad para la detección de patógenos (el
índice de positividad aumenta en la medida en que se
obtienen más hemocultivos)

Poder distinguir entre infección y contaminación
(interpretación)


– 1er HC – 91.5%
100 – 2do HC – 99.3

90
– 3ro HC – 99.6%

80
70
60
50 Juegos de
40 hemocultivo

30
20
10
0
1 2 3

• Weinstein MP, Reller LB, Murphy JR, and Lichtenstein KA
Rev Inf Dis 5:35, 1983

Nunca: 1 botella
Nunca: 1 solo set en la evaluación inicial de un
paciente febril
Mínimo: 2 juegos (set) (4 botellas)
Preferiblemente: 3 juegos (6 botellas)
CLSI: 20 a 30 mL de sangre por juego, para un total de
2 ó 3 juegos

Nota: Cada set debe ser optenido de diferente
sitio de venipunción


Interpretación de resultados del
hemocultivo

La presencia de un hemocultivo positivo
debe interpretarse a la luz del cuadro
clínico, el agente aislado y el número
de cultivos positivos, para así decidir
cuan significativo puede ser un
resultado determinado.

Microorganismos como Staphylococcus aureus,
Escherichia coli y otras enterobacterias,
Pseudomonas aeruginosa y Streptococcus
pneumoniae son responsables de bacteriemias
verdaderas en más del 90% de los casos.


Algunos de estos pueden ser responsables
Es dudoso el papel que representan de auténticas bacteriemias en algunas
los microorganismos que forman situaciones, su identidad no es un dato
parte de la microbiota del paciente suficiente para establecer el criterio de
como:
significación clínica.

Es preciso recurrir al número de
• Estafilococos coagulasa negativa hemocultivos en que se repite el aislado, la
• Streptococcus del grupo viridans
repetición de la misma bacteria en más de
una extracción (suponiendo que todas las
• Corynebacterium spp. extracciones no se han realizado desde
• Propionibacterium acnes una misma vía contaminada), aumenta la
probabilidad de que se trate de una
• Bacillus spp.
bacteriemia verdadera.

(Menos del 5% de las bacteriemias
verdaderas)


Aeróbica y Anaeróbica
El empleo de la botella anaeróbica
incrementa en un 5% la recuperación de
anaerobios y mejora la recuperación de
neumococos


Volumen de sangre a extraer

Adultos
– 20 mL por venipunción (dividido en dos botellas)

Niños
– No más del 1% del volumen total de sangre (una
botella)


En el caso de infantes…
Peso del paciente Volumen de sangre por cultivo
(Lb) (mL)
<19 1
18 - 30 3
30 - 60 5
60 - 90 10
90 - 120 15
>120 20


ELECCIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO

• El 28 al 63% de los pacientes que se realizan
hemocultivos están recibiendo tto. con
antibióticos

• Se considera que la recuperaciòn de
microorganismos en hemocultivos es
superior en un 3 al 23% si se neutralizan a
los agentes antimicrobianos presentes en la
muestra


Formas de minimizar los efectos de los
agentes antimicrobianos:

– Dilución de la muestra para reducir la
concentración de agentes antimicrobianos
– Adición de carbón activado
– Adición de resinas


BENEFICIOS DE RESINAS
Neutralizar los agentes antimicrobianos en la
muestra de sangre
Bombardear las células rojas para liberar los
nutrientes requeridos por los micoorganismos
Bombardear las células blancas para liberar los
microorganismos fagocitados y acelerar el tiempo de
recuperación
Incrementar el área de superficie para aumentar la
recuperación de microorganismos
Romper las cadenas de Strep. y racimos de Staph.


TIEMPO DE INCUBACIÓN
• Un protocolo de 5 días es adecuado para
la detección de la mayoría de los
hemocultivos positivos

• (CLSI y CAP recomiendan 5 días de
incubación para sistemas automatizados
solamente)


VENTAJAS DE LOS EQUIPOS
AUTOMATIZADOS PARA EL HEMOCULTIVO
• Impacto clínico:
• Monitoreo continuo
• Mayor sensibilidad (que la prueba manual)
• Acelera el crecimiento de los
microorganismos (disminuye el tiempo de
detección permitiendo resultados más
rápidos)
• Empleo de resinas que inhiben a los
antibióticos

Impacto microbiológico:
• Disminución de la carga de trabajo (no se
requieren tinciones ni subcultivos)
• Disminución de la contaminación
• Mayor bioseguridad

Impacto económico:
• Ahorro en subcultivos de muestras negativas


RECOMENDACIONES
• Realizar hemocultivo de acuerdo a las “Buenas Prácticas”
(CLSI M47-A)

• Tomar al menos, dos set de hemocultivos

• Protocolos de 5 días

• Las resinas inhiben antibióticos


SU EXPERIENCIA

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