La enfermedad de Chagas es causada por el parásito Trypanosoma cruzi y transmitida principalmente por insectos. Presenta una etapa aguda, una etapa latente de 30-40 años y una etapa crónica que puede afectar el corazón y los órganos digestivos. El diagnóstico se realiza mediante métodos parasitológicos como la búsqueda del parásito en sangre durante la etapa aguda, y métodos serológicos como ELISA e IFI para detectar anticuerpos en las etapas crónicas. El tratamiento

1. Generalidades de la Enfermedad de Chagas
Diagnóstico de Laboratorio
Dr. Guillermo G. Nuñez
Inmunoserología y Autoinmunidad

2. Tripanosomiasis americana (Enfermedad de Chagas)
 Enfermedad zoonótica causada por protozoario flagelado Trypanosoma
cruzi Trypanosomatidae
 Descubierta en Brasil en 1909 estudiada por Carlos Chagas y Salvador
Mazza
 C. Chagas describe por primera vez el ciclo completo del parásito en el
hospedador reservorio.

3.  La enfermedad de Chagas, es considerada por la O.M.S. uno de los
principales problemas sanitarios en Centro y Sud América.
 16-18 millones de personas están infectadas por T. cruzi, y el 25 %
de la población de América vive con el riesgo de ser
infectada, debido a las malas condiciones de vida y a la presencia del
vector.

4. VECTORES
Triatoma infestans
Rhodnius prolixus
Panstrongylus megistus

5. ESTADIOS EVOLUTIVOS
T. cruzi
trypomastigote amastigote
epimastigote

7. Insecto Reduviideo
Trypomastigote
Metacíclico en heces
Epimastigote
picadura
del insectoPiel
o
mucosa Trypomastigote
Invasión celular
Amastigote
eritrocito
circulación
rascado
Lisis celular
nido de
amastigotes
célula
colonización
muscular o SNC
Representación esquemática del ciclo de Trypanosoma cruzi

9. Curso clínico
ETAPA AGUDA
Período de incubación: ~7 días
 Generalmente asintomática
 Primoinfección en niños de zonas endémicas
 Forma sintomática
Signo de Romaña
Fiebre
Hepato/esplenomegalia
Encefalitis
*Alta parasitemia

10. Chagoma de inoculación
Signo de Romaña
(unilateral, bipalpebral)

11. ETAPA LATENTE
*Período de 30-40 años
*Equilibrio entre la patología parasitaria y la respuesta inmune
*Asintomático
*Baja parasitemia
*Alta producción de
Anticuerpos

12. ETAPA CRÓNICA
* Miocarditis chagásica crónica con o sin insuficiencia cardíaca que
afecta ventrículo derecho (bloqueo de rama derecha).
Manifestaciones: palpitaciones, edemas, disnea de esfuerzo, arritmias.
Tetralogía ECG de enfermedad de Chagas: Bloqueo de rama derecha -
Hemibloqueo anterior-Trastornos de la repolarización-Extrasístole
ventricular.
* Megavísceras: megaesófago o megacolon: denervación local del
órgano por destruccion del SN autónomo.
-50-90% de destrucción de neuronas provoca incoordinación con
hipertrofia y elongación, esto provoca dilatación del órgano.
-Megaesófago: disfagia, dolor torácico, tos y regurgitación.
-Megavisceras: meteorismo, dolor abdominal y fecaloma por
constipación.

13. Common findings in chronic Chagas heart disease. (A) Cardiac segmental form. (B). Cardiac global dilated
form.AV, atrioventricular; LAFB, left anterior fascicular block;MR, mitral regurgitation; RBBB, right bundle branch block;
TR, tricuspid regurgitation. (Adapted from Rassi A Jr, Rassi A, Marin-Neto JA. Chagas disease. Lancet 2010;375:1395; with
permission.)

14. Gastrointestinal manifestations of chronic Chagas disease. (A) Megaesophagus (groups, I, II, III, and IV). (B) Hypertrophic parotids in a
patient with megaesophagus. (C) Megastomach associated with megaesophagus group IV. (D) Cholecystomegaly. (E) Megaduodenum. (F)
Megajejunum. (G) Megaileum. (H) Megarectum. (I) Megasigmoid. (J) Megarectosigmoid. (K) Total megacolon. (L) Fecaloma. C, D, E, F, and
G are rare manifestations
Infect. Dis. Clin. North.-Am.2012 Jun;26(2):275-91.

15. Nido de amastigotes Reacción inflamatoria
MIOCARDIOPATÍA CHAGÁSICA:
¿AUTOINMUNIDAD O PERSISTENCIA PARASITARIA?

16. Patogénesis de la cardiopatía
chagásica
Martin-Neto et al. Circulation 2007;115:1109-1123León and Engman. Int. J. for Parasit. 31 (2001) 555-561

17. N
FL
REG
TS
TS
A
CMH-II
CMH-I
CD4+
CD8+
TNF - IL-12
NK+
IFN
Activación
Invasión de Macrófagos
por T. cruzi- Respuesta
Inmune

18. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

19. Infección Aguda Infección Crónica
Intensidadderespuesta
clínica clínica
Anti-T.cruzi IgM
Anti-T.cruzi IgG
parasitemia
Período
incubación
Infección
1-2 semanas 9-10 semanas

20. Infección Aguda Infección Crónica
clínica
Período
incubación
Transmisión
congénita
Transmisión
vectorial
Infección
Intensidadderespuesta
TRATAMIENTO ETIOLOGICO
1-2 semanas 8-10 semanas >1 año 3-5 años
Anti-T.cruzi IgG
parasitemia

21. METODOS PARASITÓLOGICOS
Fase aguda -
Reactivaciones
Xenodiagnóstico Microhematocrito
Hemocultivo
Strout

22. Tripomastigote sanguíneo –(May-Grünwald-Giemsa)

23. METODOS SEROLÓGICOS
HAI
• Antígenos solubles de membrana y
citoplasmáticos
ELISA
• Antígenos recombinantes
(SAPA)
IFI
• Epimastigotes enteros
Etapas latente y crónica – Screening bancos de sangre

24. IgGAM
Hemaglutinación Indirecta (HAI)
Sensibilidad
analítica
Económico
NO
automatizable

25. IgG IgM
Sensibilidad
analítica
Económico
Automatizable Reproducible
Enzimoinmunoensayo (ELISA)

26. IgG IgM
Sensibilidad
analítica
Reproducible
Requiere
microscopía de
fluorescencia
Inmunofluorescencia Indirecta (IFI)

28. CMIA
• Antígenos recombinantes
Inmunoensayo quimioluminiscente (CMIA)

29. h.
H2O2
Micropartículas-Ags
TcF-FP3
FP6-FP10
muestra
conjugado

30. Es la amplificación enzimática de un fragmento de ADN flanqueado
por dos secuencias de oligonucleótidos que hibridan en la cadena
complementaria de la molécula molde que se va a amplificar
(cebadores o “primer”) y que son utilizados por una DNA
polimerasa termoresistente para copiar la secuencia de la misma.
desnaturalización hibridización extensión
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
kDNA o
sDNA
costosa
Sensible y
específica
Requiere
tecnología y
experiencia
No dependiente
de Estado
Inmunitario

31. primers
Taq DNA-polimerasa
F
R
ADN totalextracción
PCR
convencional
PCR
En Tiempo Real
nucleótidos
dATP, dGTP, dCTP, dTTP

32. 96°C
56°C
72°C
Ciclado (Amplificación)
Desnaturalización
Alineamiento
Elongación

33. Schijman et al.
PLoS Negl Trop Dis. 2011 Enero; 5(1): 931

34. Técnica de
diagnóstico
Formas clínicas de la Enfermedad de Chagas
AGUDA LATENTE-CRÓNICA CONGÉNITA
GOTA FRESCA + - +
GOTA GRUESA ++ - ++
MICROCONCENTRACION +++ - +++
STROUT +++ - +++
HEMOCULTIVO +++ -/+ +++
XENODIAGNÓSTICO +++ + +++
PCR ++++ ++ ++++
SEROLOGÍA -(inicio)
+ (>20 días)
+++ IgG materna<6 meses
IgM niño

35. ANTECEDENTE EPIDEMIOLOGICO
-Transmisión vectorial
-Transfusión sanguínea
-Transmisión congénita
-Trasplante de órganos
INFECCION POCO PROBABLE
SINTOMÁTICO ASINTOMÁTICO
FORMA AGUDA
Búsqueda de tripanosomas en sangre
---------------------------------------------------
Métodos parasitológicos:
Xenodiagnóstico-Strout-
Microhematocrito
Hemocultivo -PCR
FORMA CRONICA
Búsqueda de Anticuerpos
---------------------------------------------------
Métodos Serológicos:
HAI-ELISA-IFI
Acs totales-IgG-IgM
DIAGNOSTICO IMPROBABLE
Xenodiagnóstico
PCR Seguimiento clínico
DIAGNÓSTICO CONFIRMADO
no
si
(-) (-)
(+) dos tests
(-)
(+)
Algoritmo diagnóstico

36. GESTANTE CHAGÁSICA
RECIEN NACIDO
BUSQUEDA DEL PARÁSITO
-Microconcentración
-PCR
BUSQUEDA DE ANTICUERPOS
(IgG)
-ELISA
-IFI (titulación del suero)
CONTROL SEROLÓGICO A LOS
3, 6 y 9 meses
-ELISA
-IFI (titulación del suero)
IgG >basal IgG ≤basal
NO CONFIRMA
CASO
CONFIRMA
CASO (tratamiento)

37. El problema de Inmunorreactividad Cruzada…

38. Enfermedad de Chagas
Leishmaniosis

39. Trypanosoma cruzi
(tripomastigotes)
Leishmania spp
(promastigotes)
Familia Trypanosomatidae
ANTÍGENOS COMPARTIDOS

40. Geles 7,5% acrilamidabisacrilamida (A-B). (a) Sueros de pacientes leishmaniásicos
(c) Sueros de pacientes chagásicos con patrón característico. (b) Sueros de pacientes
leishmaniásicos con patrón de reactividad semejante al de chagásicos.
Clin Exp Immunol 1994; 97:417-423
Reactividad de sueros de pacientes chagásicos y leishmaniásicos frente a antígenos
de epimastigotes de T. cruzi

41. LABORATORIO
CLÍNICA
DIAGNÓSTICO
DE
CERTEZA

42. Muchas gracias