El documento describe la inmunofluorescencia indirecta (IFI) como una prueba para el diagnóstico de la leptospirosis humana. La IFI mostró una sensibilidad del 89,47% y una especificidad del 100% en comparación con la prueba de microaglutinación. Asimismo, un estudio encontró anticuerpos IgM contra Leptospira en el 11% de muestras de síndrome febril, lo que indica que la leptospirosis es una causa frecuente de este síndrome. La IFI es una alternativa
Radioinmunoensayo, ELISA y Western BlotBryan Priego
A continuación, te proporciono información detallada sobre los tipos de ELISA, inmunoensayo y Western Blot, incluyendo los pasos a seguir, la técnica, el fundamento, los materiales, la historia y las aplicaciones. Espero que esta explicación te ayude a comprender mejor cómo se llevan a cabo estas técnicas y para qué se utilizan. Si tienes alguna duda, no dudes en preguntar, estaré encantado de ayudarte.
El ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una técnica de ensayo inmunológico ampliamente utilizada para detectar y cuantificar la presencia de una sustancia específica, como un antígeno o un anticuerpo, en una muestra biológica. Existen diferentes tipos de ELISA, incluyendo el competitivo, directo, indirecto y sándwich.
En el ELISA competitivo, el antígeno de interés compite con un antígeno marcado previamente conocido por su unión a un anticuerpo. La cantidad de antígeno presente en la muestra se determina midiendo la cantidad de antígeno marcado que se une al anticuerpo.
En el ELISA directo, el antígeno de interés se une directamente a una superficie sólida (como un pozo de una placa de microtitulación) y se detecta utilizando un anticuerpo marcado que se une específicamente al antígeno.
En el ELISA indirecto, se utilizan dos anticuerpos: uno primario, que se une específicamente al antígeno, y otro secundario, marcado con una enzima, que se une al anticuerpo primario. La enzima proporciona una señal detectable para cuantificar la presencia del antígeno.
En el ELISA sándwich, se utilizan dos anticuerpos: uno de captura, que se une al antígeno, y otro de detección, que se une a otra región del antígeno. El antígeno se "sándwicha" entre los dos anticuerpos, lo que permite una alta sensibilidad en la detección.
El inmunoensayo es una técnica general que utiliza anticuerpos para detectar y cuantificar antígenos o anticuerpos específicos. El ELISA es un ejemplo de inmunoensayo, pero también existen otras técnicas, como el radioinmunoensayo (RIA), que utiliza isotopos radiactivos, y los inmunoensayos enzimáticos basados en enzimas para la detección.
El Western Blot, también conocido como inmunotransferencia, es una técnica utilizada para detectar proteínas específicas en una muestra. Consiste en separar las proteínas de la muestra mediante electroforesis en gel, transferirlas a una membrana y luego incubar la membrana con anticuerpos específicos para las proteínas de interés. Los anticuerpos marcados permiten la detección de las proteínas mediante reacciones enzimáticas o quimioluminiscencia.
Twitter.com/@bryanpriegop
Radioinmunoensayo, ELISA y Western BlotBryan Priego
A continuación, te proporciono información detallada sobre los tipos de ELISA, inmunoensayo y Western Blot, incluyendo los pasos a seguir, la técnica, el fundamento, los materiales, la historia y las aplicaciones. Espero que esta explicación te ayude a comprender mejor cómo se llevan a cabo estas técnicas y para qué se utilizan. Si tienes alguna duda, no dudes en preguntar, estaré encantado de ayudarte.
El ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una técnica de ensayo inmunológico ampliamente utilizada para detectar y cuantificar la presencia de una sustancia específica, como un antígeno o un anticuerpo, en una muestra biológica. Existen diferentes tipos de ELISA, incluyendo el competitivo, directo, indirecto y sándwich.
En el ELISA competitivo, el antígeno de interés compite con un antígeno marcado previamente conocido por su unión a un anticuerpo. La cantidad de antígeno presente en la muestra se determina midiendo la cantidad de antígeno marcado que se une al anticuerpo.
En el ELISA directo, el antígeno de interés se une directamente a una superficie sólida (como un pozo de una placa de microtitulación) y se detecta utilizando un anticuerpo marcado que se une específicamente al antígeno.
En el ELISA indirecto, se utilizan dos anticuerpos: uno primario, que se une específicamente al antígeno, y otro secundario, marcado con una enzima, que se une al anticuerpo primario. La enzima proporciona una señal detectable para cuantificar la presencia del antígeno.
En el ELISA sándwich, se utilizan dos anticuerpos: uno de captura, que se une al antígeno, y otro de detección, que se une a otra región del antígeno. El antígeno se "sándwicha" entre los dos anticuerpos, lo que permite una alta sensibilidad en la detección.
El inmunoensayo es una técnica general que utiliza anticuerpos para detectar y cuantificar antígenos o anticuerpos específicos. El ELISA es un ejemplo de inmunoensayo, pero también existen otras técnicas, como el radioinmunoensayo (RIA), que utiliza isotopos radiactivos, y los inmunoensayos enzimáticos basados en enzimas para la detección.
El Western Blot, también conocido como inmunotransferencia, es una técnica utilizada para detectar proteínas específicas en una muestra. Consiste en separar las proteínas de la muestra mediante electroforesis en gel, transferirlas a una membrana y luego incubar la membrana con anticuerpos específicos para las proteínas de interés. Los anticuerpos marcados permiten la detección de las proteínas mediante reacciones enzimáticas o quimioluminiscencia.
Twitter.com/@bryanpriegop
I. OBJETIVOS:
Adiestrar al alumno en la preparación de muestras parasitologías.
Diferenciar y observar las muestras parasitologías en heces.
Identificar los distintos elementos normales en las heces por medio de la observación microscópica con la finalidad de diferenciarlos posteriormente de las formas parásitas que puede encontrarse en un diagnóstico.
I. OBJETIVOS:
Adiestrar al alumno en la preparación de muestras parasitologías.
Diferenciar y observar las muestras parasitologías en heces.
Identificar los distintos elementos normales en las heces por medio de la observación microscópica con la finalidad de diferenciarlos posteriormente de las formas parásitas que puede encontrarse en un diagnóstico.
La Inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcaje que se vale del uso de anticuerpos marcados con moléculas fluorescentes para demostrar la presencia de una determinada molécula de interés en un tejido. órgano, o solución de estudio.
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Facultad de Ciencias Químicas
Químico Farmacobiólogo
Ébola su diagnóstico y medidas de seguridad en el laboratorio
Zapata Barrientos Sidney Montserrath (Noviembre 2014)
Tema 68 "Fundamento y descripción de las pruebas serológicas y de evaluación ...Dian Alex Gonzalez
La serología es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos en sangre. Es una prueba fundamental a la hora de realizar donaciones de sangre y transfusiones......
1891 - 14 de Julio - Rohrmann recibió una patente alemana (n° 64.209) para s...Champs Elysee Roldan
El concepto del cohete como plataforma de instrumentación científica de gran altitud tuvo sus precursores inmediatos en el trabajo de un francés y dos Alemanes a finales del siglo XIX.
Ludewig Rohrmann de Drauschwitz Alemania, concibió el cohete como un medio para tomar fotografías desde gran altura. Recibió una patente alemana para su aparato (n° 64.209) el 14 de julio de 1891.
En vista de la complejidad de su aparato fotográfico, es poco probable que su dispositivo haya llegado a desarrollarse con éxito. La cámara debía haber sido accionada por un mecanismo de reloj que accionaría el obturador y también posicionaría y retiraría los porta películas. También debía haber sido suspendido de un paracaídas en una articulación universal. Tanto el paracaídas como la cámara debían ser recuperados mediante un cable atado a ellos y desenganchado de un cabrestante durante el vuelo del cohete. Es difícil imaginar cómo un mecanismo así habría resistido las fuerzas del lanzamiento y la apertura del paracaídas.
2-Mutarrotación de glúcidos. Caso de la glucosa.pdf
Prueba IFAT (inmunofluorescencia directa e indirecta)
1. IFAT
(inmunofluorescencia directa e indirecta)
Universidad de la Salle Colombia
Facultad de ciencias agropecuarias
Medicina Veterinaria
Bogotá-Colombia
Luis G. Perez
Yeili Álvarez Niño
Andrés Ricardo Avellaneda
2. CONCEPTOS CLAVES
• ANTÍGENO (Ag): Un antígeno es aquella
sustancia que siendo reconocida como
extraña por el sistema inmune, es capaz de
inducir en este una respuesta específica
encaminada a su neutralización.
• ANTICUERPO (Ac):Sustancia segregada por
los linfocitos de la sangre para combatir una
infección de virus o bacterias que afecta al
organismo.
3. ¿QUÉ ES ?
La inmunofluorescencia es una técnica utilizada para
visualizar la distribución de una proteína o antígeno
específico en células o secciones de tejido utilizando la
especificidad de los anticuerpos por su antígeno para
dirigir marcadores fluorescentes a las biomoléculas
dianas de forma específica.
Tomado de http://goo.gl/YCMIkK
4. TIPOS DE INMUNOFLUORESCENCIA
• INMUNOFLUERESCENCIA DIRECTA:
el marcaje directo en el que el anticuerpo primario está marcado con
un marcador fluorescente.
• INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA:
el marcaje indirecto en el que un anticuerpo secundario marcado
con un fluorocromo se utiliza para reconocer un anticuerpo primario.
NOTA: Las muestras marcadas inmunofluorescentemente se examinan bajo
un microscopio de fluorescencia o un microscopio confocal.
5. INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
• Usa una unión covalente entre fluoróforo con el
anticuerpo primario.
• Requiere de una etapa de incubación con el
antígeno y una sola etapa de lavado.
PROCEDIMIENTO
• El marcador fluorescente produce una sustancia
colorada que identifica si el antígeno está presente.
(En caso de no estar presente el antígeno, la
fluorescencia no identificara nada.).
7. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
• Se divide en dos etapas:
1. El anticuerpo primario no marcado, se une
con el antígeno diana.
2. El anticuerpo secundario, lleva el fluoróforo,
identifica al anticuerpo primario y se une a
él.
Nota: varios anticuerpos se pueden unir al
anticuerpo primario y la señal aumentaría.
10. APLICACIONES CLÍNICAS:
• La prueba IFAT, ayuda a reconocer el
diagnóstico de sífilis por medio de la
bacteria Treponema pallidum.
• La prueba de IFAT se puede utilizar en:
Renibacterium Salmonirarum.
Vibrio Ordalii
Ehrlichia Canis
11.
12.
13. • Introducción. El diagnóstico de la leptospirosis es difícil debido al amplio espectro
de síntomas clínicos que presenta. Varias pruebas diagnósticas serológicas se han
desarrollado, pero su aplicación y utilidad en Colombia no han sido determinadas.
• Objetivos. Evaluar la prueba de inmunofluorescencia indirecta para el diagnóstico
de leptospirosis humana y determinar así los anticuerpos de las clases
inmunoglobulina G y M producidos contra Leptospira.
• Materiales y métodos. Se establecieron tres grupos de estudio. El primero incluyó
19 muestras positivas para leptospirosis de pacientes con diagnóstico clínico y
prueba de microaglutinación positiva; el segundo, 40 muestras de personas sin
antecedentes de leptospirosis y con microaglutinación negativa, y el tercero con 96
muestras de pacientes con otras enfermedades diferentes a leptospirosis. Todas las
muestras fueron procesadas por inmunofluorescencia indirecta.
• Resultados. Se determinó que la inmunofluorescencia indirecta tiene sensibilidad
de 89,47%, especificidad de 100%, valor predictivo negativo de 95,2% (IC95%82,6 a
99,2) y valor predictivo positivo de 100%. En forma paralela, un estudio exploratorio
en 27 muestras de suero que habían sido remitidas para diagnóstico de diferentes
síndromes febriles encontró que 11% de ellas fueron positivas por
inmunofluorescencia indirecta para anticuerpos IgM contra Leptospira.
• Conclusiones. La inmunofluorescencia indirecta es una alternativa que
complementa el diagnóstico de leptospirosis y los estudios seroepidemiológicos. La
presencia de anticuerpos dirigidos contra Leptospira en las muestras de síndrome
febril del estudio indica que la leptospirosis es una de las causas de este síndrome
que el clínico debe explorar.
14. BIBLIOGRAFÍA
• . Kassirer JP. Our stubborn quest for diagnostic certainty. A cause of excesive
testing. N Engl J Med 1989; 320: 1489-91.
• http://encontroiberico.no.sapo.pt/docs/Serologia_UHofle.pdf
• http://asignatura.us.es/mbclinica/docs/recursos/12/tema-14.pdf
• Eguiarte L. et all., Ecología Molecular. México 2007; cap. 17: 517-40
• Merchant. I.A. & Packer, R. (1980). Bacteriología y Virología Veterinarias. Zaragoza :
Acribia.
• Anaya, Elizabeth, Morón, Cecilia, Arias, Patricia, Chauca, Johann, Román, Raúl.
EVALUACIÓN DE PRUEBAS DE ELISA E INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA
LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IgM CONTRA RICKETTSIOSISRevista Peruana de
Medicina Experimental y Salud Pública [en linea] 2008, 25 (Sin mes) : [Fecha de
consulta: 19 de noviembre de 2014] Disponible
en:<http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36311611017> ISSN 1726-4642.
• AGUDELO-FLOREZ, Piedad; RESTREPO, Marcos y LOTERO, María Amparo.
Evaluación de la prueba de inmunofluorescencia indirecta para el diagnóstico de
leptospirosis humana. Biomédica [online]. 2006, vol.26, n.2, pp. 216-223. ISSN
0120-4157.
Notas del editor
Es una técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable, como cambio de color o algún otro tipo; en ocasiones, con el fin de reducir los costos del ensayo, nos encontramos con que existe un anticuerpo primario que reconoce al antígeno y que a su vez es reconocido por un anticuerpo secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente mencionada.