Este documento describe un experimento que evalúa el efecto de diferentes colorantes (cristal violeta, safranina, azul de metileno y verde de malaquita) sobre el crecimiento de bacterias. Los resultados mostraron que la safranina y el azul de metileno interfieren con la síntesis del material genético bacteriano, mientras que el cristal violeta y el verde de malaquita interfieren con la síntesis de la pared celular. Los colorantes derivados del compuesto trifenilmetano fueron más efectivos contra bacterias gramp

1. EFECTO DE LOS COLORANTES
SOBRE EL CRECIMIENTO DE
LOS MICROORGANISMOS
Integrantes:
Gutiérrez Solorzano David
Trejo Sánchez Gabriel

2. INTRODUCCIÓN
■ ¿Qué es un colorante?
Toda sustancia que posee la
capacidad de dar color, o teñir
sustancias, fibras, alimentos etc.
■ Químicamente hablando es una
sustancia que cuenta con la
capacidad de absorción de
distintas y concretas longitudes
de onda dentro del espectro de la
luz visible.

3. Grupo Cromoforo
Son arreglos de dobles enlaces
conjugados, es el responsable del
color.
Grupo Auxocromo
Intensifica el color y permite
acoplarse a las estructuras
deseadas de un sustrato.

4. Clasificación química de los colorantes.
■ Colorantes nitrosos
( verde naftol b)
Colorantes del índigo
■ Colorantes azoicos
Curso breve de orgânica. Walter W. Linstromberg

5. ■ Derivados de Trifenilmetano
(verde de malaquita)
“ Interfieren en la síntesis
de la pared celular”

6. ■ Derivados de acrinida
Interfieren con la síntesis
de ácidos nucleicos y
proteínas

7. Importancia de los colorantes en la microbiología
■ Tinciones
Tinción de Gram Tinción de Ziehl Neelsen

8. Medios de cultivo selectivos
Agar EMB Agar SS
Agar MacConkey
(Azul de metileno)
(Cristal violeta)
(Verde Brillante)

9. Indicadores de pH Indicadores
Redox
Tubos de Durham (rojo fenol) Azul de metileno en
leche

10. Conceptos
■ Bacteriostático: Agente que no destruye la célula. Solo inhibe el crecimiento.
Por lo general intervienen en la síntesis de proteínas.
■ Bactericida: Mata a la célula, sin provocar lisis.
■ Bacteriolítico: Provoca la muerte celular, provocando lisis.
■ CMI: Cantidad mínima de agente antimicrobiano que causa la muerte de algún
microorganismo.

11. Objetivos
■ Realizar dos técnicas que permitan
observar el efecto de los colorantes sobre la
viabilidad de los microorganismos.

12. PROCEDIMIENTO
Efecto de los colorantes en tubo.
En 11 tubos
adicionar 4.5 mL
de caldo
nutritivo.
Hacer diluciones
decimales hasta
10−10
Inocular los 11 tubos con
el microorganismo
correspondiente.
Incubar a 37°C
durante 24 horas.
Observar hasta
que tubo hay
inhibición (CMI)
Resembrar una
asada del ultimo
tubo donde se
observe inhibicon.

13. Efecto de los colorantes en placa.
Marcar las
siguientes cajas:
3 de gelosa-cristal
violeta
3 de gelosa-
safranina
1 de gelosa
simple
Sembrar por
estría abierta
cada una de las
cepas.
Incubar a 37 °C
durante 24 horas.
Observar si hay
crecimiento en las
distintas
concentraciones de
colorantes.

14. Resultados
Cepa: Escherichia
coli diluciones
colorante 1 -1 -2 -3 -4 -5 -6 -7 -8 -9 -10
Cristal
violeta (-) (-) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)
safranina (+) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)
azul de
metileno (+) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)
verde de
malaquita (+) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)

15. Cepa:
Staphylococcus
aureus diluciones
colorante 1 -1 -2 -3 -4 -5 -6 -7 -8 -9 -10
Cristal
violeta (+) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-)
safranina (+) (+) (+) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)
azul de
metileno (+) (-) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+) (+)
verde de
malaquita (+) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-)

16. Colorantes Escherichia coli Staphylococcus aeurus
dilución
CMI(µg/mL
) Efecto dilución
CMI(µg/m
L) Efecto
Cristal violeta 10*-2 20Bactericida 10*-1 <2x10*-7 Bacteriostático
safranina 1 2000
Bactericida
error
Bactericida
azul de metileno 10*-1 200
Bactericida
10*-1 20Bacteriostático
verde de malaquita 10*-1 200
Bactericida
10*-1 <2x10*-7 Bactericida

17. Colorante: Safranina
Dilució
n
Escherichia
coli
Bacillus
megaterium
Staphylococcus
aeurus
Klebsiella
pneumoniae
-4
-5
-6
Colorante: Cristal
violeta
Dilució
n
-4
-5
-6

18. Cepa Cristal violeta Safranina
Escherichia coli 0.1 >1
Bacillus megaterium >1 0.1
Staphylococcus aeurus 0.001 0.1
Klebsiella pneumoniae 0.001 >1

19. Conclusiones.
Se observo el efecto de los colorantes sobre la viabilidad de los microorganismos.
La safranina y el azul de metileno son colorantes que actúan sobre el material genético de las
bacterias.
El cristal violeta y el verde de malaquita son colorantes que actúan sobre la pared celular de los
microorganismos.
Los colorantes derivados del compuesto trifenilmetano son más efectivos en bacterias gram(+)
que en gram(-).
Estructuras de resistencia como la endoespora y la exoespora dan resistencia a la bacterias en
presencia de colorantes.