Enzima de restriccion y adn

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE
INGENIERIA AMBIENTAL
CURSO:
BIOTECNOLOGIA
SEMESTRE VII
TEMA:
INFORME DE ENZIMA DE RESTRICCION Y ADN
ESTUDIANTE:
CUSILAYME ROMERO VALERIA ABIGAIL
DOCENTE:
Dc. HEBERT SOTO GONZALES
JUNIO 20 – 2021
ILO - PERÚ

2. INDICE
I. OBJETIVOS..................................................................................................................................3
Objetivo General:..............................................................................................................................3
Objetivo específico:...........................................................................................................................3
II. MARCO TEORICO .....................................................................................................................3
ADN....................................................................................................................................................3
¿Cómo se usan las secuencias de ADN para elaborar proteínas?.............................................6
¿Quién descubrió el ADN?...........................................................................................................6
ENZIMA DE RESTRICCION ........................................................................................................7
BACTERIÓFAGO LAMBDA ...........................................................................................................9
MAPA DE RESTRICCIÓN BACTERIÓFAGO LAMBDA ...........................................................12
III. CONCLUSIONES.......................................................................................................................13
IV. ANEXOS......................................................................................................................................14
V. BIBLIOGRAFIA.........................................................................................................................15

3. INTRODUCCION
El ADN es como un ácido que se puede llamar nucleico que funciona con los organismos vivos
y algunos de esos tiene virus. El ADN tiene muchas comparaciones, aunque no lo sepan cómo
puede ser una receta, plano y también es como un polímero que ese polímero está compuesto
por unidades simples como si fuera un tren y cada vagón del tren contiene nucleótido.
El ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el material genético que se encuentra en las células
de todos los organismos. Está compuesto por nucleótidos unidos entre sí (Adenina, Timina,
Guanina, Citosina) . El ordenamiento y secuencia de los nucleótidos forma un polímero de
ADN de doble cadena, el cual se traduce en un ARN mensajero (ARNm), este ARN contiene
la información para generar una o varias proteínas utilizando diversos ARNs como
intermediarios como los ARN de transferencia (ARNt) y ARN ribosomales (ARNr) (figura
1B). En células eucariotas la mayor parte del ADN se localiza en el núcleo que está rodeada
por una bicapa lipídica. Sin embargo, una pequeña cantidad de ADN también se puede
encontrar en
otras
estructuras
celulares,
como en la
mitocondria en
animales o
cloroplastos en
plantas (A.

4. Checa, 2016).
Alberto Checa Rojas. (2017). A
I. OBJETIVOS
Objetivo General:
Conocer los conceptos clave acerca del ADN y de la Enzima de Restricción.
Objetivo específico:
Que el alumno relación la importancia del ADN y enzima de estricción en la carrera
profesional de Ingeniería Ambiental.
II. MARCO TEORICO
ADN
El ADN, o ácido desoxirribonucleico, es la molécula que contiene la información genética de
todos los seres vivos, incluso algunos virus. El nombre viene de su estructura. El ADN tiene
una parte central con un azúcar y un fosfato, a la que se enlazan unas moléculas llamadas bases.
La desoxirribosa se refiere al azúcar, y el nucleico es el ácido formado por el fosfato y la base

5. nitrogenada. Estas bases pueden ser de 4 tipos: Adenina, citosina, timina y guanina, nombradas
normalmente como A, C, T, G. Y el orden en que se combinen una después de la otra, es lo
que codifica la información genética.
El ADN se organiza estructuralmente en cromosomas. A nivel funcional se organiza en genes,
que son piezas de ADN que generan características físicas específicas. Estas características no
vienen directamente del propio ADN, sino de una molécula llamada ARN, formada a partir del
ADN, y codifica una proteína.
Esto es lo que se llama el dogma central de la biología molecular: en el ADN hay genes que
generan ARNs mensajeros, y estos generan proteínas. Y esto es lo que da las diferentes
características físicas que observamos en individuos, como el color de ojos, o la altura.
También se ha visto que algunas veces estas instrucciones estan almacenadas directamente en
el ARN, sin necesidad de pasar a proteínas, como en el caso de los micro ARNs. Pero estos
suelen ser una excepción.
Ventajas
 Es la innovación de la tecnología que ahora puedes sacar el ADN por internet.
 Otra es con un algodón con el interior de la mejilla y un poco de saliva.
 Es muy rápido y eficiente.
 Es un tipo para ser justicia con alguien.
 Mayor dinero.
Desventajas
 Interviene para agarrar a alguien de un crimen o violación.
 Todos los microbios o bacterias llegan al mundo.

6.  Contaminación.
 Creación de almacenamiento.
En los organismos llamados eucariotas, el ADN se encuentra dentro de un área compartimental
izada dentro de la célula llamada núcleo. Debido a que la célula es muy pequeña, y porque los
organismos tienen muchas moléculas de ADN por célula, cada molécula de ADN debe estar
empaquetada de forma muy compacta y precisa. Esta forma supe rempaquetada del ADN se
denomina cromosoma.
Durante la replicación del ADN, el ADN se desenrolla para que pueda ser copiado. En otros
puntos del ciclo celular, secciones puntuales del ADN también se desenrollan cuando es
necesario para que distintos juegos de instrucciones se usen en la fabricación de proteínas y
para otros procesos biológicos. Pero, durante la división celular, el ADN se encuentra en su
forma compacta de cromosoma para hacer posible la transferencia a nuevas células.
Los investigadores llaman ADN nuclear al ADN encontrado en el núcleo de la célula. El
conjunto completo de ADN nuclear de un organismo se conoce como su genoma.
Además del ADN ubicado en el núcleo, los seres humanos y otros organismos complejos
también tienen una pequeña cantidad de ADN en otras estructuras celulares adicionales
conocidas como mitocondria. Las mitocondrias son las factorías de las células, generando la
energía que la célula necesita para funcionar correctamente.
En la reproducción sexual, los organismos heredan la mitad de su ADN nuclear del padre y la
mitad de la madre. No obstante, los organismos heredan todo su ADN mitocondrial de la
madre. Esto ocurre porque sólo los óvulos, y no los espermatozoides, conservan su mitocondria
durante la fecundación.

7. ¿Cómo se usan las secuencias de ADN para elaborar proteínas?
Las instrucciones del ADN se usan para elaborar proteínas en un proceso de dos pasos. Primero,
unas proteínas especializadas denominadas enzimas leen la información en una molécula de
ADN y la transcriben a una molécula intermediaria llamada ácido ribonucleico mensajero, o
ARNm.
A continuación, la información contenida en la molécula de ARNm se traduce en una secuencia
específica de aminoácidos, o los componentes básicos de las proteínas.. En conjunto, existen
20 tipos de aminoácidos, que pueden ser colocados en muchos órdenes distintos para formar
una gran variedad de proteínas diferentes.
¿Quién descubrió el ADN?
El primero en observar el ADN fué el bioquímico suizo Frederich Miescher, a finales del siglo
XIX. Sin embargo, pasó casi un siglo desde ese descubrimiento hasta que los investigadores
entendieron la estructura de la molécula de ADN y se dieron cuenta de su importancia
fundamental para la biología.
Por muchos años, los científicos debatieron qué molécula portaba las instrucciones biológicas
de la vida. La mayoría pensaba que el ADN era una molécula demasiado sencilla para
desempeñar un papel tan importante. En vez de ello, argumentaban que era más probable que
las proteínas desempeñaran esta función vital debido a su mayor complejidad y más amplia
variedad de formas.
La importancia del ADN se aclaró en 1953 gracias a la labor de James Watson*, Francis Crick,
Maurice Wilkins y Rosalind Franklin. Al estudiar patrones de difracción de rayos X y construir

8. modelos, los científicos descifraron la estructura de doble hélice del ADN, una estructura que
le permite pasar información biológica de una generación a otra.
* James Watson fue el primer director del NHGRI y aparece aquí como parte de nuestra
colección de historia. A pesar de sus logros científicos, la carrera del Dr. Watson también
estuvo marcada por una serie de comentarios ofensivos y científicamente erróneos con
respecto a sus creencias sobre raza, origen, homosexualidad, género y otros temas sociales.
Las opiniones del Dr. Watson sobre estos temas no están respaldadas por la ciencia y son
contrarias a la misión y los valores del NHGRI.
ENZIMA DE
RESTRICCION
Las enzimas de restricción se encuentran en bacterias (y otros procariontes). Reconocen
secuencias específicas de ADN, llamadas sitios de restricción, y se unen a ellas. Cada enzima
de restricción reconoce solo uno o unos pocos sitios de restricción. Cuando encuentra su
secuencia blanca, la enzima de restricción cortará las dos cadenas de una molécula de ADN.
Por lo general, el corte es en o cerca del sitio de restricción y ocurre en un patrón ordenado y
predecible.
Como un ejemplo de cómo una enzima de restricción reconoce y corta en una secuencia de
ADN, veamos a EcoRI, una enzima de restricción de uso común en el laboratorio. EcoRI
corta en el siguiente sitio:

9. Cuando EcoRI reconoce y corta este sitio, siempre lo hace en un patrón muy específico que
produce extremos sobresalientes de ADN de cadena sencilla:
Si otro fragmento de ADN tiene secuencias sobresalientes complementarias (porque también
se cortó con EcoRI, por ejemplo), los extremos pueden unirse por complementariedad de bases.
Por esta razón se dice que las enzimas que dejan extremos de cadena sencilla
producen extremos cohesivos. Los extremos cohesivos son útiles en la clonación porque
mantienen dos fragmentos de ADN juntos para que la ADN ligasa los pueda unir.
No todas las enzimas de restricción producen extremos cohesivos. Algunas producen
"extremos romos", cortes a la mitad de la secuencia blanco que no dejan extremos de cadena
sencilla. La enzima de restricción SmaI es un ejemplo de enzima que corta así:

10. La ADN ligasa puede unir fragmentos romos entre
sí. Sin embargo, es más difícil ligar fragmentos
romos (la reacción de ligación es menos eficiente y
es más probable que falle) porque no hay
secuencias sobresalientes de cadena
sencilla que sostengan a las moléculas de ADN en su
posición.
BACTERIÓFAGO LAMBDA
Un bacteriófago es un virus que infecta exclusivamente bacterias. Tal y como sucede con
muchos otros virus que infectan a células eucariotas, los bacteriófagos o fagos también tienen
una cápsula proteica que sirve principalmente para albergar el material genético que
propagarán a las células que infecten. La mayoría de los fagos poseen ADN de longitud variable
como material genético. Atendiendo a la morfología que presentan pueden clasificarse en
icosaédricos sin cola, virus con cola contráctil, con cola no contráctil y filamentosos.

11. Los fagos son ubicuos y puede decirse sin miedo a equivocarse que hay fagos prácticamente
en cualquier entorno en el que existan bacterias. También suele decirse que, para cualquier
especie de bacteria, con toda probabilidad hay un fago correspondiente que puede infectarla.
El fago más conocido, ya que ha servido como modelo de estudio en biología molecular, es el
fago lambda. También posee una estructura que podríamos denominar típica: una cápside
icosaédrica que encierra el material genético, una cola contráctil y una serie de espículas que
sirven para su contacto con la célula a infectar. El acoplamiento a la bacteria se realiza mediante
la unión a receptores específicos en la superficie bacteriana, lo cual determina la especificidad
de infección del virus por una especie bacteriana concreta. Los fagos pueden seguir dos
posibles tipos de ciclos infectivos: el ciclo lítico y el ciclo lisogénico. En el ciclo lítico, la
infección del fago produce la lisis de la bacteria hospedadora y la liberación de nuevas
partículas de fagos. En cambio, en el ciclo lisogénico el fago inserta su material genético en el
genoma bacteriano, o bien queda como plásmido independiente, replicándose en cualquier caso
al mismo tiempo que el genoma de la bacteria, pero sin producir la lisis bacteriana. Podría
considerarse la lisogenia como una especie de latencia aplicada a los fagos. En general muy
pocos fagos son capaces de realizar ambos ciclos. Los que lo hacen entran en una u otra versión
dependiendo de las condiciones externas.

12. Los fagos han jugado y juegan un papel importantísimo como herramientas biotecnológicas.
Su genoma puede aceptar la inclusión de material genético extra hasta cierto punto, razón por
la cual son utilizados como vectores de clonación formando las llamadas librerías (aunque el
término correcto sería bibliotecas) de fagos. En estas librerías, una población de fagos contiene,
fragmentado y repartido entre los diferentes fagos que forman la población, un genoma o
transcriptoma de interés. De esta forma es muy fácil manejar colecciones de genes, ya que los
fagos son fáciles de reproducir y conservar. Las librerías suelen incluir sistemas que permiten
amplificar o liberar el fragmento genético de interés. Esta posibilidad, combinada con la
posibilidad de recombinación controlada y la capacidad de ciertos fagos de mostrar proteínas
exógenas en su cubierta, es la base de la técnica de “phage display”.

13. MAPA DE RESTRICCIÓN BACTERIÓFAGO LAMBDA
En la secuencia de nucleótidos del fago lambda, que tiene 48502 pares de bases, podemos
encontrar diferentes lugares donde las enzimas de restricción cortan. En esta práctica vamos a
utilizar los enzimas Eco RI y Hind III para ver que patrón de bandas proporciona al digerir el
fago lambda. Estas digestiones se preparan comercialmente con el nombre de marcadores de
peso molecular conocido o estándar y se utilizan para determinar el tamaño de fragmentos de
ADN en una electroforesis en gel de agarosa.
En las imágenes anteriores podemos observar 3 de los marcadores de peso molecular más
utilizados en trabajos de biología molecular y como hemos comentado tiene como base la
digestión del fago lambda. Estas imágenes representan electroforesis en gel de agarosa 1% del
ADN del fago lambda digerido con diferentes enzimas de restricción (los que utilizaremos en
este experimento), se ha de tener en cuenta que la visualización del ADN se ha realizado con
bromuro de etidio que tiene una sensibilidad mayor a nuestro método NO TÓXICO (utilizado
en este kit), lo cual supondrá que en nuestro experimento no observaremos las bandas de los
fragmentos más pequeños, a no ser que su laboratorio ya disponga de un método de detección

14. del ADN con una sensibilidad similar al bromuro de etidio como puede ser nuestro método NO
TÓXICO del GELSAFE que necesita el uso de un transiluminador de luz UV, como el método
de bromuro de etidio.
III. CONCLUSIONES
 En conclusión, el ADN es la molécula más importante de todo el cuerpo ya que es la
que guarda la información hereditaria y también la información para el correcto
funcionamiento de nuestro cuerpo. Este gran descubrimiento se lo debemos a los
hombres que dedicaron la vida al entendimiento de esta complicada molécula. Esta
pequeña molécula es sumamente importante no solo para los humanos si no para todos
los seres vivos incluyendo las plantas. Esta nueva ciencia llamada genética ahora nos
beneficia a nosotros los humanos ya que podemos manipulas los genes y beneficiarnos
con ellos.
 Las enzimas de restricción son enzimas que cortan ADN. Cada enzima reconoce una o
un número pequeño de secuencias blanco y corta el ADN en o cerca de esas secuencias.
 Muchas enzimas de restricción hacen cortes escalonados que producen extremos
sobresalientes de ADN de cadena sencilla. Sin embargo, algunos producen extremos
romos.
 La ADN ligasa es una enzima que une ADN. Si dos fragmentos de ADN tienen
extremos complementarios, la ligasa puede unirlos para formar una molécula única e
intacta de ADN.
 En la clonación de ADN, se utilizan enzimas de restricción y ADN ligasa para insertar
genes y otros fragmentos de ADN en plásmidos.

15. IV. ANEXOS

16. V. BIBLIOGRAFIA
 Gómez-Rodríguez, J. A., & Huete-Pérez, J. A. (2008). Bioprospección de enzimas de
restricción en bacterias de suelos y ambientes volcánicos de Nicaragua. Encuentro,
(81), 70-87.
 Trujillo, L. E., Reyes, G., Bayolo, E., Vázquez, M. M., & García, O. (1990).
Purificación de la enzima de restricción NciI. Biotecnol. apl, 320-5.
 Garin, I., Beristain, E., & Pereda, A. Capítulo 1: CONCEPTOS BÁSICOS:
TÉCNICAS MOLECULARES PARA EL ESTUDIO DE ENFERMEDADES DE
IMPRONTA. ENFERMEDADES DE IMPRONTA Guías de buena práctica clínica, 1.
 Claros, G. (2003). Aproximación histórica a la biología molecular a través de sus
protagonistas, los conceptos y la terminología fundamental. Panace, 4(12), 168.
 Máttar, S. (2000). Utilidad de la biología molecular en el estudio de las
zoonosis. Revista MVZ Córdoba, 5(1), 46-50.
 de Educación, J. D. A. C. (2007). Las herramientas de la Ingeniería Genética.