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NEOSPOROSIS BOVINA
         CORTESÍA DEL DR. PEDRO ORTIZ
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA SANMARCOS




                                              TRANSTORNOS REPRODUCTIVOS DE LA
                                                         HEMBRA
       Abortos por Neosporosis:
               Control
FMV - UNMSM                    Cortesía Dra. H. Rivera
                                                          Aborto




    UK 12.5 % abortos diagnosticados son debidos a N.c.
                  Davidson y col. 1999



                            Aborto                        Aborto
Enfermedades que pueden causar aborto




                                                             Neosporosis en Ganado Vacuno




                                                                                           HISTORIA
                  INTRODUCCION
                                                          Neosporosis: se reconoce por primera vez como una enfermedad en
                                                           perros en Noruega (Bjerkas y col. 1984)
La neosporosis es una enfermedad parasitaria              1988 parásito protozoario denominado Neospora caninum (Dubey y col.
                                                           1988)
producida por el protozoario Neospora caninum,            1989 se demostró que N. caninum producía aborto en ganado vacuno:
                                                           desarrollaron pruebas diagnósticas (IFAT, IPX) (Thilsted JP, Dubey JP,
apicomplexa parecido a Toxoplasma gondii que               1989).
                                                          1989 se confirmó la transmisión transplacentaria (Dubey y Lindsay,
provoca abortos en el ganado vacuno. El parásito           1989; Dubey y Lindsay, 1992).
                                                          1991 N. caninum es reconocido como causa principal de aborto en
cierra su ciclo (fase sexual) en el perro, en el que       hatos de California (Anderson y col. 1991; Bar y col, 1991).
provoca enfermedad neuromuscular.                         1994 se reporta neosporosis como infección asintomática común en
                                                           California (Pare y col. 1994).
                                                          ELISA desarrollada para diagnóstico (Bjorkman y col. 1994; Pare y col.
                                                           1995; Dubey y col. 1996; Williams y col. 1997).
                                                          1998 demostración que el perro es el huésped definitivo de N.
                                                           caninum (McAllister y col. 1998)
                                                          Estudios retrospectivos: 1957 (Dubey y col. 1990)
Nuevo parásito: Neospora


   Neospora caninum (Dubey y col. 1988)

   Neospora hughesi (Marsh y col. 1998)


          Publicados mas de 600 artículos




                                            Ciclo de vida de Neospora caninum
       Ciclo de vida de Neospora caninum
PROTOZOARIO INTRACELULAR



                                                                  •   Receptores superficiales
                                                                  •   Taquizoito: Ag inmunodominante
                                                                      superficial N. caninum SAG-
      BIOLOGIA GENERAL DE NEOSPORA CANINUM                            related sequence 2 (NcSRS2)
                                                                      Hemphill, 1996
                                                                  •   Extremo apical
                                                                  •   Plasmalema de cels. huésped
                                                                  •   Fuerte unión: “joins junction”
                                                                      Mordue y col. 1999
                                                                  •   Nace vacuola parasitófora por
                                                                      inversión del plasmalema
                                                                  •   Vacuola parasitófora crea
                                                                      asociación con organelos
                                                                      celulares
                                                                      Carruthers y Sibley (1997)




                                                                                                               Buxton y col. 2002




                          PROTOZOARIO INTRACELULAR                                           PROTOZOARIO INTRACELULAR



•   Receptores superficiales                                       •   Receptores superficiales
•   Taquizoito: Ag inmunodominante                                •   Taquizoito: Ag inmunodominante
    superficial N. caninum SAG-                                        superficial N. caninum SAG-
    related sequence 2 (NcSRS2)                                       related sequence 2 (NcSRS2)
    Hemphill, 1996                                                    Hemphill, 1996
•   Extremo apical                                                •   Extremo apical
•   Plasmalema de cels. huésped                                   •   Plasmalema de cels. huésped
•   Fuerte unión: “joins junction”                                •   Fuerte unión: “joins junction”
    Mordue y col. 1999                                                Mordue y col. 1999
•   Nace vacuola parasitófora por                                 •   Nace vacuola parasitófora por
    inversión del plasmalema                                          inversión del plasmalema
•   Vacuola parasitófora crea                                     •   Vacuola parasitófora crea
    asociación con organelos                                          asociación con organelos
    celulares                                                         celulares
    Carruthers y Sibley (1997)                                        Carruthers y Sibley (1997)




                                             Buxton y col. 2002                                                 Buxton y col. 2002
Neosporosis: Transmisión


La principal vía de
transmisión es vertical:
madre-cría, a través de la
placenta.
Dubey y Lindsay, 1989; Dubey y Lindsay,
1992


 La transmisión fecal-oral
 del perro al ganado no se
 considera de relevancia
 epidemiológica.
 Pocos oocystos
 McAllister y col. 1998
 De Marez y col. 1999




                                                                         Patogenia


                                                     • Destrucción celular y enfermedad depende de
                                                       balance entre taquizoitos capaces de penetrar
                                                       y multiplicarse en células del hospedero y la
                                                       habilidad de éste para inhibir la multiplicación
                                                       del parásito.
Patogenia                                                   Fuentes de citokinas



   Daño en la placenta
    (cotiledones).
    – Primer trimestre gestación = feto
      muy vulnerable (no sobrevive).
    – Segundo tercio (RI rudimentaria)
      mayoría abortos ocurre.
    – Tercer tercio (RI competente)
      mayoría sobrevive.
        Gonzáles, 1999


   Destrucción celular =
    Necrosis
   Muerte fetal                                                             Entrican, 2002


   Aborto



                                                                                              Relaciones hospedero-parásito
          Citokinas juegan rol crucial en interface materno fetal para
                 asegurar que preñez proceda normalmente


        Respuesta TH1                               Respuesta TH2
      • Citokinas inflamatorias:                   • Citokinas reguladoras:
        TNF-α                                       IL-10
        IFN-γ                                       IL-4
        IL-2                                        TGF-β
      • Efecto fatal                              • Beneficiosas
      • Respuesta TH1                             • Predominan en preñez
        efectivamente limita                        normal
        multiplicación de N.
        caninum pero es
        incompatible con preñez
        exitosa

                            DILEMA PARA LA VACA
                              Innes y col. 2002; Raghupathy 1997                                    Innes y col. 2002
SIGNOS CLINICOS
                                            Patogenia



                                                                                       Infección Clínica
• Cerebro:
  Necrosis licuefactiva                                                                       ABORTO
                                                                                             Barr y col. 1994
                                                                                            Dubey y col. 1992



                                                                                      Infección Sub
                                                                                      Clínica
                                                                                      Mucho más común
                 Buxton y col. 2002                                                   Dubey, J.P. and Lindsay, D.S.
                                                                                      (1996)




                                  Signos Clínicos                                                                     Lesiones

     Bovinos adultos: único signo clínico
      aborto: 4– 6 meses
      Dubey y Lindsay, 1996

     95% terneros pueden nacer                                                     Microscópicas:
      normales siendo seropositivos =
      pocos fetos mueren y son
      abortados.
                                                                                    Placentitis
      Davidson y col. 1999                                                          Autolisis
     Infección madre-feto puede                                                    Necrosis
      producirse en cualquier momento
      de la gestación, presentarse en                                                 Trofoblasto fetal
      forma esporádica, endémica o
      como brotes epidémicos.
                                                                                      Carúncula materna
     Según el momento de la infección                                                Villi fetal (flecha)
      se presenta:
          Aborto con reabsorción
          Aborto con expulsión fetal
          Nacidos afectados (Neosporosis
           congénita clínica)
          Nacidos sanos infectados
           (Neosporosis congénita sub-clínica)                                                                              Macaldowie y col. 2004
                                                    Neosporosis congénita clínica
Lesiones




Macroscópicas:
 Momificación
 Lesiones fetales y de
  placenta inespecíficas
                                              Momificación Fetal




                         Lesiones                                                                                   Diagnóstico

                                                                                 En el feto abortado:
                                                                                         Histología; Inmunohistoquímica
Microscópicas:
                                                                                     
                                                                                         (IPX)
 Lesiones específicas en                                                               Aislamiento: Cultivos celulares o
  feto abortado:                                                                         animales experimentación
                                                                                        PCR
 Lesiones en SNC = 100%
                                                                                        Detección de anticuerpos (IFI,
  de los infectados:           Corte hist. Cerebro feto bovino – área focal de
                                                                                         ELISA)
                                 necrosis rodeada de células inflamatorias
  Necrosis
  Encefalomielitis no                                                            En la Madre:
  purulenta                                                                            Detección de anticuerpos
 Lesiones en músculo                                                                   (IFI, ELISA)
  esquelético e hígado: 60-
  70% de abortos.

                              Sección músculo esquelético de feto bovino, con
                                cluster de zoitos dentro de cels. musculares
Impacto Económico
                                                                                                  Impacto Económico

   Costo directo:
    Valor del feto abortado                                                          25% de los abortos en California, USA y Países
                                                                                      Bajos son debidos a N . caninum (Anderson y col.
                                                                                      1991; Wouda, 1998).
   Costos indirectos:
    Ayuda profesional                                                                California 1.2 millones de vacas = 40,000
                                                                                      abortos/año.
    Diagnóstico
    Volver a preñar                                                                  Pérdida económica en California: $ 35 millones
                                                                                      por año
    Tiempo lactación incrementada
    Costos de reemplazo (saca)                                                       Pérdida por aborto a media gestación = $ 800




                  Neosporosis - Control
                                                                                                     Neosporosis - Control


               Explotaciones con animales seropositivos


                                                                                              ¿Son los perros el enemigo?
        Hay abortos                              No hay abortos


                                                                                                            ¡NO!
                                     Medición de anticuerpos en terneros
                                      precalostrales o a los de 6 meses

Eliminar los seropositivos                                                       Evitar que los perros consuman fetos abortados
                               Seropositivos                 Seronegativos                     y/o membranas fetales

                             Vender para carne            Reposición de madres
Resultados de                              SEROPREVALEN CI A DE N EOSPORA
  investigaciones sobre                       CAN I N UM EN GAN ADO VACUN O LECHERO
                                                             DE CHOTA
  Neospora caninum en
       Cajamarca                                              Torres, L..; Cabrera, M.; Ortiz, P.
                                                                            2005




                                                               Metodología
             Objetivo
                                                GRUPO              CLASE                   NUMERO DE
                                                                                           ANIMALES

Estimar la seroprevalencia de Neospora                  I                 VACAS                     94
caninum en ganado vacuno lechero criado en              II           VAQUILLONAS                    32
Chota.                                                  III             TERNERAS                    48
                                                     TOTAL                                          174



                                              ELISA indirecto para detección de anticuerpos
                                               (Williams y col, 1997)
Resultados                                          VACAS SEROPOSITIVAS A Neospora caninum ,
                                                                                 MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA
              ANIMALES SEROPOSITIVOS A Neospora caninum ,
                    MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA.


                                                                                 N° DE VACAS              N° DE VACAS
                                                                  N° DE       SEROPOSITIVAS A N.       SERONEGATIVAS A N.
  TOTAL DE         SEROPOSITIVOS            SERONEGATIVOS       ANIMALES            caninum                  caninum
 ANIMALES
MUESTREADOS

                                                                   94           N°           %            N°            %
                   Nº           %            Nº             %

                                                                                42          44.6          52           55.4
    174            68          39.08        106         61.02




                                                                        TERNERAS SEROPOSITIVAS A Neospora caninum ,
           VAQUILLONAS SEROPOSITIVAS A Neospora                               MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA
            caninum , MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA




               N° DE VAQUILLONAS        N° DE VAQUILLONAS                     N° DE TERNERAS             N° DE TERNERAS
  N° DE        SEROPOSITIVAS A N.       SERONEGATIVAS A N.        N° DE      SEROPOSITIVAS A N.        SERONEGATIVAS A N.
ANIMALES              caninum                  caninum          ANIMALES          caninum                    caninum

   32            N°           %            N°           %          48          N°           %            N°            %


                  11          34.3         21          65.7                     15          31.2         33            68.8
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Neosporosis

  • 1. NEOSPOROSIS BOVINA CORTESÍA DEL DR. PEDRO ORTIZ UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA SANMARCOS TRANSTORNOS REPRODUCTIVOS DE LA HEMBRA Abortos por Neosporosis: Control
  • 2. FMV - UNMSM Cortesía Dra. H. Rivera Aborto UK 12.5 % abortos diagnosticados son debidos a N.c. Davidson y col. 1999 Aborto Aborto
  • 3. Enfermedades que pueden causar aborto Neosporosis en Ganado Vacuno HISTORIA INTRODUCCION  Neosporosis: se reconoce por primera vez como una enfermedad en perros en Noruega (Bjerkas y col. 1984) La neosporosis es una enfermedad parasitaria  1988 parásito protozoario denominado Neospora caninum (Dubey y col. 1988) producida por el protozoario Neospora caninum,  1989 se demostró que N. caninum producía aborto en ganado vacuno: desarrollaron pruebas diagnósticas (IFAT, IPX) (Thilsted JP, Dubey JP, apicomplexa parecido a Toxoplasma gondii que 1989).  1989 se confirmó la transmisión transplacentaria (Dubey y Lindsay, provoca abortos en el ganado vacuno. El parásito 1989; Dubey y Lindsay, 1992).  1991 N. caninum es reconocido como causa principal de aborto en cierra su ciclo (fase sexual) en el perro, en el que hatos de California (Anderson y col. 1991; Bar y col, 1991). provoca enfermedad neuromuscular.  1994 se reporta neosporosis como infección asintomática común en California (Pare y col. 1994).  ELISA desarrollada para diagnóstico (Bjorkman y col. 1994; Pare y col. 1995; Dubey y col. 1996; Williams y col. 1997).  1998 demostración que el perro es el huésped definitivo de N. caninum (McAllister y col. 1998)  Estudios retrospectivos: 1957 (Dubey y col. 1990)
  • 4. Nuevo parásito: Neospora  Neospora caninum (Dubey y col. 1988)  Neospora hughesi (Marsh y col. 1998) Publicados mas de 600 artículos Ciclo de vida de Neospora caninum Ciclo de vida de Neospora caninum
  • 5. PROTOZOARIO INTRACELULAR • Receptores superficiales • Taquizoito: Ag inmunodominante superficial N. caninum SAG- BIOLOGIA GENERAL DE NEOSPORA CANINUM related sequence 2 (NcSRS2) Hemphill, 1996 • Extremo apical • Plasmalema de cels. huésped • Fuerte unión: “joins junction” Mordue y col. 1999 • Nace vacuola parasitófora por inversión del plasmalema • Vacuola parasitófora crea asociación con organelos celulares Carruthers y Sibley (1997) Buxton y col. 2002 PROTOZOARIO INTRACELULAR PROTOZOARIO INTRACELULAR • Receptores superficiales • Receptores superficiales • Taquizoito: Ag inmunodominante • Taquizoito: Ag inmunodominante superficial N. caninum SAG- superficial N. caninum SAG- related sequence 2 (NcSRS2) related sequence 2 (NcSRS2) Hemphill, 1996 Hemphill, 1996 • Extremo apical • Extremo apical • Plasmalema de cels. huésped • Plasmalema de cels. huésped • Fuerte unión: “joins junction” • Fuerte unión: “joins junction” Mordue y col. 1999 Mordue y col. 1999 • Nace vacuola parasitófora por • Nace vacuola parasitófora por inversión del plasmalema inversión del plasmalema • Vacuola parasitófora crea • Vacuola parasitófora crea asociación con organelos asociación con organelos celulares celulares Carruthers y Sibley (1997) Carruthers y Sibley (1997) Buxton y col. 2002 Buxton y col. 2002
  • 6. Neosporosis: Transmisión La principal vía de transmisión es vertical: madre-cría, a través de la placenta. Dubey y Lindsay, 1989; Dubey y Lindsay, 1992 La transmisión fecal-oral del perro al ganado no se considera de relevancia epidemiológica. Pocos oocystos McAllister y col. 1998 De Marez y col. 1999 Patogenia • Destrucción celular y enfermedad depende de balance entre taquizoitos capaces de penetrar y multiplicarse en células del hospedero y la habilidad de éste para inhibir la multiplicación del parásito.
  • 7. Patogenia Fuentes de citokinas  Daño en la placenta (cotiledones). – Primer trimestre gestación = feto muy vulnerable (no sobrevive). – Segundo tercio (RI rudimentaria) mayoría abortos ocurre. – Tercer tercio (RI competente) mayoría sobrevive. Gonzáles, 1999  Destrucción celular = Necrosis  Muerte fetal Entrican, 2002  Aborto Relaciones hospedero-parásito Citokinas juegan rol crucial en interface materno fetal para asegurar que preñez proceda normalmente Respuesta TH1 Respuesta TH2 • Citokinas inflamatorias: • Citokinas reguladoras: TNF-α IL-10 IFN-γ IL-4 IL-2 TGF-β • Efecto fatal • Beneficiosas • Respuesta TH1 • Predominan en preñez efectivamente limita normal multiplicación de N. caninum pero es incompatible con preñez exitosa DILEMA PARA LA VACA Innes y col. 2002; Raghupathy 1997 Innes y col. 2002
  • 8. SIGNOS CLINICOS Patogenia Infección Clínica • Cerebro: Necrosis licuefactiva ABORTO Barr y col. 1994 Dubey y col. 1992 Infección Sub Clínica Mucho más común Buxton y col. 2002 Dubey, J.P. and Lindsay, D.S. (1996) Signos Clínicos Lesiones  Bovinos adultos: único signo clínico aborto: 4– 6 meses Dubey y Lindsay, 1996  95% terneros pueden nacer Microscópicas: normales siendo seropositivos = pocos fetos mueren y son abortados. Placentitis Davidson y col. 1999 Autolisis  Infección madre-feto puede Necrosis producirse en cualquier momento de la gestación, presentarse en Trofoblasto fetal forma esporádica, endémica o como brotes epidémicos. Carúncula materna  Según el momento de la infección Villi fetal (flecha) se presenta:  Aborto con reabsorción  Aborto con expulsión fetal  Nacidos afectados (Neosporosis congénita clínica)  Nacidos sanos infectados (Neosporosis congénita sub-clínica) Macaldowie y col. 2004 Neosporosis congénita clínica
  • 9. Lesiones Macroscópicas:  Momificación  Lesiones fetales y de placenta inespecíficas Momificación Fetal Lesiones Diagnóstico En el feto abortado: Histología; Inmunohistoquímica Microscópicas:  (IPX)  Lesiones específicas en  Aislamiento: Cultivos celulares o feto abortado: animales experimentación  PCR  Lesiones en SNC = 100%  Detección de anticuerpos (IFI, de los infectados: Corte hist. Cerebro feto bovino – área focal de ELISA) necrosis rodeada de células inflamatorias Necrosis Encefalomielitis no En la Madre: purulenta  Detección de anticuerpos  Lesiones en músculo (IFI, ELISA) esquelético e hígado: 60- 70% de abortos. Sección músculo esquelético de feto bovino, con cluster de zoitos dentro de cels. musculares
  • 10. Impacto Económico Impacto Económico  Costo directo: Valor del feto abortado  25% de los abortos en California, USA y Países Bajos son debidos a N . caninum (Anderson y col. 1991; Wouda, 1998).  Costos indirectos: Ayuda profesional  California 1.2 millones de vacas = 40,000 abortos/año. Diagnóstico Volver a preñar  Pérdida económica en California: $ 35 millones por año Tiempo lactación incrementada Costos de reemplazo (saca)  Pérdida por aborto a media gestación = $ 800 Neosporosis - Control Neosporosis - Control Explotaciones con animales seropositivos ¿Son los perros el enemigo? Hay abortos No hay abortos ¡NO! Medición de anticuerpos en terneros precalostrales o a los de 6 meses Eliminar los seropositivos Evitar que los perros consuman fetos abortados Seropositivos Seronegativos y/o membranas fetales Vender para carne Reposición de madres
  • 11. Resultados de SEROPREVALEN CI A DE N EOSPORA investigaciones sobre CAN I N UM EN GAN ADO VACUN O LECHERO DE CHOTA Neospora caninum en Cajamarca Torres, L..; Cabrera, M.; Ortiz, P. 2005 Metodología Objetivo GRUPO CLASE NUMERO DE ANIMALES Estimar la seroprevalencia de Neospora I VACAS 94 caninum en ganado vacuno lechero criado en II VAQUILLONAS 32 Chota. III TERNERAS 48 TOTAL 174  ELISA indirecto para detección de anticuerpos (Williams y col, 1997)
  • 12. Resultados VACAS SEROPOSITIVAS A Neospora caninum , MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA ANIMALES SEROPOSITIVOS A Neospora caninum , MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA. N° DE VACAS N° DE VACAS N° DE SEROPOSITIVAS A N. SERONEGATIVAS A N. TOTAL DE SEROPOSITIVOS SERONEGATIVOS ANIMALES caninum caninum ANIMALES MUESTREADOS 94 N° % N° % Nº % Nº % 42 44.6 52 55.4 174 68 39.08 106 61.02 TERNERAS SEROPOSITIVAS A Neospora caninum , VAQUILLONAS SEROPOSITIVAS A Neospora MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA caninum , MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA N° DE VAQUILLONAS N° DE VAQUILLONAS N° DE TERNERAS N° DE TERNERAS N° DE SEROPOSITIVAS A N. SERONEGATIVAS A N. N° DE SEROPOSITIVAS A N. SERONEGATIVAS A N. ANIMALES caninum caninum ANIMALES caninum caninum 32 N° % N° % 48 N° % N° % 11 34.3 21 65.7 15 31.2 33 68.8
  • 13. Trabajo Futuro • Estudios histopatológicos en tejidos de fetos abortados • Aislamiento del parásito