El documento describe el método Kjeldahl para determinar el nitrógeno total en una muestra de suelo. El método implica la digestión de la muestra con ácido sulfúrico y catalizadores para convertir el nitrógeno en forma amoniacal, seguido de la destilación y titulación del amoniaco para cuantificar el nitrógeno total. Los cálculos toman en cuenta el peso seco de la muestra, volúmenes de ácido utilizados en la muestra y blanco, y la normalidad del ácido para determinar el porcentaje

1. 1.1. Nitrógeno Total (NT).
Método.
Se determinó mediante el método Kjeldahl (FONAIAP, 1990).
Fundamento.
El método Kjeldahl comprende tres fases fundamentales:
1) Digestión de la muestra. La muestra de suelo se somete a una digestión por
calentamiento con ácido sulfúrico y por una mezcla de sales que aceleran y facilitan
tanto la oxidación de la materia orgánica como la conversión de todas las formas de
nitrógeno en N+3, que en medio ácido se encuentran en forma de radical amonio
(NH4+); es decir, se llevan las formas orgánicas a formas minerales de nitrógeno.
2) Destilación. Una vez transformado el nitrógeno en NH4+, se expone a una base fuerte
como el hidróxido de sodio para formar hidróxido de amonio, que por la acción del
calor se descompone en amoniaco (NH3) y agua.
3) Valoración. El amoniaco desprendido por la reacción se recoge en un volumen
conocido de solución valorada de ácido bórico y por comparación con un blanco se
determina la cantidad de ácido que reaccionó con el NH3.
Material y Equipo.
 Muestras.
 Balanza Analítica.
 Espátula.
 Mortero.
 Tubos Digestores.

2.  Digestor.
 Pipetas de 5 ml y 10 ml ó Cilindros Graduados.
 Matraces de Erlenmeyer de 50 ml.
 Perlas de Ebullición.
 Matraz Aforado de 100 ml.
 Gotero.
 Bureta.
 Soporte Universal con pinza.
 Campana de Extracción.
 Balón de Destilación.
 Unidad de Destilación (Condensador tipo allihn, tubos de conexión, Soporte universal
con pinza, Mechero, tapón de hule).
Reactivos.
Catalizador de Selenio metálico, sulfato de cobre y sulfato de potasio (tabletas
Kjeldahl).
Ácido Sulfúrico (H2SO4) Concentrado.
Hidróxido de Sodio (NaOH).
Ácido Bórico (H3BO3).
Indicador Azul de Metileno (C16H18N3ClS).
Indicador Rojo de Metilo (C15H15N3O2).
Etanol (C2H6O).
Preparación de Soluciones.
 Catalizador: Se trituró 1 tableta Kjeldahl en un mortero.
 Solución de Hidróxido de Sodio (NaOH) 40 % p/v: Se pesaron 40 g de hidróxido de
sodio, se disolvieron en agua destilada y aforó a 100 ml. Se almacenó en recipiente
plástico esterilizado e identificado.

3.  Solución de Ácido Bórico (H3BO3) 2 % p/v: Se pesaron 2 g de ácido bórico, se
disolvieron en agua destilada y aforó a 100 ml. Esta solución se preparó un día anterior
a su uso y se almacenó en frasco ámbar esterilizado e identificado.
 Indicador Mixto (Rojo de metilo + Azul de Metileno):
 Se pesó 0,2 g de rojo de metilo y diluyeron en 100 ml de etanol.
 Se pesó 0,1 g de azul de metileno y diluyeron en 50 ml de etanol.
 Se mezclaron las 2 soluciones anteriores.
 Se almacenó en frasco ámbar identificado y tapado herméticamente.
 Solución de Ácido Sulfúrico (H2SO4) 0,0275 N: Se diluyó 0,77 ml de ácido sulfúrico
concentrado en agua destilada y se aforó a 500 ml. Se almacenó en frasco ámbar
identificado.
Procedimiento.
A. Digestión.
1) Se pesó 0,3 g de muestra húmeda.
2) Se colocó en un tubo digestor.
3) Se preparó un Blanco (Tubo digestor que no contiene muestra, sólo 1 ml de agua
destilada).
4) Se adicionó 0,2 g de catalizador.
5) Se agregaron 5 ml de ácido sulfúrico concentrado.
6) Se calentó en el digestor a una temperatura de 360 ºC durante 2 horas (la muestra se
tornó clara).
7) Se dejaron enfriar los tubos digestores hasta el día siguiente.
B. Destilación.
8) Se lavó el tubo digestor con cuatro porciones de 10 ml de agua destilada, vertiendo las
aguas de lavado en el balón de destilación.

4. 9) Se añadieron al balón 10 ml de hidróxido de sodio 40 % y se colocaron de 5 a 6 perlas
de ebullición, tapado herméticamente con tapón de hule.
10) Se colocó el balón en la unidad de destilación.
11) Se colocó en la salida de la unidad de destilación un Erlenmeyer de 50 ml con una
mezcla de 5 ml de ácido bórico 2 % y 0,5 ml de indicador mixto (se obtuvo una
solución de color Violeta oscuro).
12) Se conectó el flujo de agua y se inició la destilación.
13) Se destiló hasta obtener en el Erlenmeyer un volumen de 20 ml (solución de color
verde).
14) Se tituló el nitrógeno amoniacal con la solución de ácido sulfúrico 0,0275 N, hasta que
viró de verde a Violeta pálido.
15) Se anotaron los volúmenes gastados de ácido sulfúrico 0,0275 N para el blanco y las
muestras.
Cálculos.
𝑷 𝒔𝒆𝒄𝒐 = 𝑷 𝒉ú𝒎𝒆𝒅𝒐 ∗ 𝑭𝑯
𝑭𝑯 = (𝟏 − (
% 𝑯
𝟏𝟎𝟎
))
% 𝑵𝑻 =
(𝑻 − 𝑩) ∗ 𝑵 ∗ 𝟏, 𝟒
𝑷 𝒔𝒆𝒄𝒐
Donde:
P seco: Peso seco de la muestra (g).
P Húmedo: Peso húmedo de la muestra (g).
FH: Factor de corrección de Humedad.

5. % H: Porcentaje de humedad de la muestra (%).
% NT: Porcentaje de Nitrógeno Total presente en la muestra (%).
T: Volumen gastado de ácido sulfúrico en la muestra durante la titulación (ml).
B: Volumen gastado de ácido sulfúrico en el blanco durante la titulación (ml).
1,4: Peso equivalente de H2SO4.
N: Normalidad del ácido sulfúrico empleada en la titulación (0,0275 N).