El documento describe la ontogenia de los linfocitos B. Los linfocitos B se originan a partir de células progenitoras en la médula ósea y pasan por varias etapas de desarrollo antes de madurar e ingresar a la circulación. El proceso incluye el reordenamiento de genes, la expresión de marcadores de superficie celular y la interacción con el microambiente de la médula ósea. Una vez maduros, los linfocitos B pueden encontrarse con antígenos en los órganos linfoides secund

1. Ontogenia de los linfocitos B
Brenda Manzur Iñiguez
Reumatología

2. Ontogenia de linfocitos
 Linfocitos son las únicas
células del cuerpo con una
alta diversidad de
receptores, capaces de
reconocer a una amplia
variedad de antígenos.
 Responden frente a los
agentes extraños, con alta
especificidad (respetando
la integridad de los tejidos
propios) y preservando la
tolerancia.

3. ¿Cuál es la razón de la existencia de finos
mecanismos de regulación del desarrollo de
los linfocitos?
 Asegurarse de contar con el repertorio de
células capaces de reconocer a todos los Ag
extraños presentes en la naturaleza.
 Asegurarse que el sistema inmune reconozca
como propio a los Ag del individuo
(TOLERANCIA).
 Asegurarse que los linfocitos migren hacia la
periferia con las herramientas básicas para
enfrentarse a los Ag extraños.

4. Elementos que participan
 Célula progenitora pluripotencial.
 Mediadores solubles.
 Interacción entre las células linfoides con
elementos del microambiente.

5. Elementos del sistema
inmune
 Microambiente dado por los órganos linfoides
primarios y secundarios
 M H C - I y M H C - I I – Moléculas del complejo
mayor de histocompatibilidad de clase I y II
 Receptor de linfocitos T (TCR)
 Receptor de linfocitos B (BCR)
 Mediadores solubles (Ej. Interleucinas)

6. Los linfocitos T, B y NK se originan de un
precursor
 El primer evento es ubicarse en estadio precursor linfoide
común (CLP), dará origen a: T, B, NK y células dendríticas
de origen linfoide.
 Destinados a originar células B permanecen en la MO.
 Destinados a madurar como células T egresan de la MO y se
ubican en el timo.
 IL-7 indispensable para el desarrollo de linfocitos T y B.
 Mientras IL-15 es requerida para el desarrollo de NK.

8. Localización
 En los mamíferos, primero se forman en el hígado fetal,
a partir de la octava y novena semana de gestación.
 Posteriormente se desvanece esta función y pasa a
la médula ósea.
 Los progenitores de los LB pueden producir hasta 64
descendientes (reordenamiento de genes).
 Estas células migran al centro de la cavidad del hueso
esponjoso y maduran en asociación con las células
reticulares del estroma.
 Sólo llegan al final del proceso de maduración el 25% de
los LB, y el resto muere por apoptosis, y son fagocitadas
por los macrófagos.

9. Fases del proceso
La ontogenia de las células B se puede dividir en dos grandes
fases:
Fase independiente de antígeno: ocurre en la médula ósea y
concluye con la salida de la médula del linfocito B maduro virgen
e inmunocompetente.
Fase dependiente de antígeno: ocurre en los órganos linfoides
secundarios o periféricos, y que conduce a la diferenciación del
linfocito B en dos subclones hermanos: uno de células
plasmáticas secretoras de Ac y otro de linfocitos B cebados de
memoria.

11. Fase independiente del
antígeno
 Las CM de la médula ósea no tienen Ig en superficie, no han
reordenados sus genes y para diferenciarse requieren de la
participación de células del estroma de la médula ósea
(adipocitos, fibroblastos).
 El proceso de diferenciación se inicia por la interacción del CD44
de la CM con ácido hialurónico de células del estroma.
 Esta interacción parece favorecer contactos entre el c-kit de la
célula precursora con el stem cell factor.
 Formación de Pro-B.

12.  Posteriormente, en las células pro-B tardías y células pre-B es
necesaria la participación de factores solubles de activación y
en concreto de la IL-7.
 Esta citosina, producida por las células del estroma, induce
proliferación de los precursores.

13.  Durante las fases de progenitor linfoide, pro-B y parte de pre-B
se expresan los genes de activación de recombinación (RAG-1 y
RAG-2), así como el gen de la desoxinucleotidil transferasa
terminal (TdT).
 Durante las fases de progenitor y pro-B se reordena DH/JH en
ambos cromosomas.

14. En esta fase pre-B tiene lugar la síntesis del receptor de células
pre-B:
Se ensambla VHDHJH con el gen C-mu, con lo que se producen
cadenas pesadas de tipo mu.
Se unen por dos segmentos nuevos: VpreB y delta-5, que conduce a
la síntesis de lo que se llama cadena L sustititutiva (“pseudo-L”).
El ensamblaje de dos cadenas mu y dos cadenas pseudo-L
produce la pseudo-IgM de membrana (que va acompañada de Ig-
alfa/Ig-beta), que es el receptor característico de células pre-B.

15. Este receptor de pre-B está implicado en algunos de los
fenómenos que vienen a continuación:
1)El receptor en su conjunto induce la expansión proliferativa de
las células pre-B que han logrado la reordenación productiva de
la cadena H (selección positiva ).
2)En las células pre-B seleccionadas tiene lugar la reordenación
aleatoria de genes de cadenas lambda. Si el primer alelo de
lambda no es productivo, se intenta con el segundo, y si
tampoco es productivo, se intenta con los kappa.
3)Si finalmente ninguno de los alelos son productivos, se entra
en apoptosis.

16.  Si la célula ha logrado reordenaciones productivas y ha escapado a
la apoptosis, ha alcanzado la fase de célula B inmadura, que
expresa en su superficie auténtica mIgM, con una determinada
especificidad.
 Estas B inmaduras son de vida corta (3-4 días), y durante este
período se produce el proceso de selección negativa.

17. Fase dependiente de
antígeno
 En la periferia, el linfocito B virgen puede encontrarse
o no con el antígeno para el que son específicas sus
inmunoglobulinas de membrana.
1) Si no encuentra su antígeno específico, muere
por apoptosis al cabo de unos pocos días o semanas
(menos de un mes).
2) Si entra en contacto con su antígeno específico, se
convierte en linfocito B activado que se expande
clonalmente.

18.  Células plasmáticas secretoras de anticuerpos: Se
producen y secretan grandes cantidades de Ac con la
misma especificidad del linfocito B progenitor. Las
células plasmáticas son células a término que ya no se
diferencian más, y mueren por apoptosis al cabo de unos
días.
 Células B cebadas de memoria: Las células B de
memoria que quedan en los centros germinales de los
órganos linfoides secundarios sufren hipermutación
somática, por lo que va madurando la afinidad. Vida
larga.

20. Marcadores del linaje B
 En el camino de la maduración, van encendiendo y
apagando la expresión de ciertas proteínas de superficie
(con diferente CD), que permiten determinar en que
estado de diferenciación se encuentran las células.

22. Pro B : No producen inmunoglobulinas. Expresan moléculas de superficie
CD19, CD10. las proteínas Rag-1 y Rag-2 producen a primera recombinación
en la cadena pesada.

23. Pre B : Expresa la cadena pesada en la superficie celular asociada a otras
proteínas (Recptor de preinfocito B). Reordenamiento de cadenas ligeras.

24. EL RECEPTOR DE PRELNFOCTO B
SE ASOCIA A MOLECULAS
TRANSMISORAS DE SEÑAN Ig ALFA
Y BETA QUE FRMAN PARET DEL
COPLEJO BCR EN LOS LINFOCITOS
B MADUROS.
FALLO : AGAMMAGLOBULINEMIA
LIGADA AL X

25. B inmaduro: Sufre un nuevo reordenamiento en la cadena ligera kappa.
Expresa IgM.

27. Recombinación genética
cadenas pesadas

28. Recombinación genética
cadenas ligeras

29. Subtipos de linfocitos B

30. Localización final de los
linfocitos B
 Bazo (folículos primarios y secundarios de la pulpa
blanca de la zona marginal): 50%.
 Médula ósea: 75%.
 Sangre periférica: 10-15%.

31. Hipermutación somática
 Las mutaciones en regiones variables de cadenas
livianas ~10,000 veces más frecuentes que lo basal
después de la activación de la célula B.
 La hipermutación somática implica un proceso
de mutación programada que afecta a las regiones
variables de los genes de inmunoglobulina.
 Genera la maduración de afinidad: seleción de
mutantes que poseen una afinidad por el antígeno en
respuestas secundarias.

32. PRODUCCION DE BCR
DE DISTINTA
AFINIDAD
BAJA AFINIDAD ALTA AFINIDAD
APOPTOSIS
PROLIFERACION

33. Maduración por afinidad
 La maduración de la afinidad es un proceso por el cual
los linfocitos B producen anticuerpos con una afinidad cada
vez mayor durante el curso de una respuesta inmunitaria.
 Con las repetidas exposiciones al mismo antígeno, el
hospedador producirá anticuerpos de afinidades
sucesivamente mayores.

35. Switch isotípico
 Cambio en el isotipo de cadena pesada por una
determinada células B. Células B ‘naive’ sólo
expresan IgM e IgD.
 Es estimulado por la exposición a Ag + citoquinas
producidas por linfocitos T.
 Especificidad por la unión a antígeno no cambia.

38. Función de los linfocitos B

41. Ontogenia de los
linfocitos T

42. Introducción
El TCR presenta dos funciones principales según la
fase de desarrollo en que se encuentre la célula
dentro del linaje de los linfocitos T:
Durante la maduración de los timocitos en el timo,
participa en la selección tímica positiva y negativa.
Sólo llegan a madurar el 2% de los timocitos
intracelulares.
Una vez que el linfocito T ha madurado, emigra a la
periferia, y entonces el receptor participa en el
reconocimiento de antígenos.

43. El proceso de reconocimiento varía según el tipo de TCR:
TCR-2 (alfa/beta): se reconocen péptidos en el contexto
del MHC clásico, y se requieren moléculas coestimuladoras
y coseñalizadoras como CD4 (para linfocitos TH) o CD8
(para los linfocitos TC). La maduración es intratímica y
representan el 90-95% del total de los linfocitos T.
TCR-1 (gamma/delta): no se requiere MHC clásico, y no
participan CD4 ni CD8. Estos LT que se diferencian en la
médula ósea y/o en el timo, y van a recubrir las
superficies epiteliales, aunque también se encuentran en
sangre y ganglios linfáticos. Son LT con actividad citolítica
constitutiva.

44. Formación del timo
 El esbozo tímico se desarrolla a partir de
la tercera bolsa faríngea, que recibe a las
células primordiales linfoides que llegan por vía
sanguínea, de la médula ósea.
 Las células primordiales que rodean al esbozo
tímico humano ya expresan el marcador pant-T y
CD7 (marcadores de linaje T).

45. Estructura del timo
 Corteza : timocitos en fases tempranas de su
maduración, representan el 85-90% de los
timocitos que son muy sensibles a corticoides.
 Médula: timocitos en fases más avanzadas de
maduración. Los timocitos medulares abandonan
el timo por las venulas postcapilares de la unión
corticomedulares o por los vasos linfáticos.

47. Cambios fenotípicos durante
la maduración de células T
 El primer marcador de superficie en aparecer es CD2
(marcador que caracteriza al linaje de T).
 Estas células CD2+ CD4- CD8- (dobles negativas) pueden
escoger dos vías alternativas:
 TCR 1
 TCR 2

48. TCR-2 (alfa/beta)
Son la mayoría de los LT en tejidos linfoides secundarios y sangre
periférica.
a) Estadio I (timocitos precoces):
Expresan CD7,CD2,CD5,CD38 y Rc transferrina (CD71).
Son CD3+CD4-CD8- y se sitúan cerca de la región
subcapsular.
Reordenamiento de los genes beta del TcR.
Si no se logran reordenaciones productivas, entran en
apoptosis.
Si la reordenación es productiva, la cadena beta se asocia
con la llamada cadena alfa sustitutiva generando el receptor
pTalfa:beta – Induce proliferación celular.

49. b) Estadio II (timocitos intermedios):
Constituyen el 85% de los timocitos. Se trata de los
pequeños timocitos dobles positivos, que dejan de
dividirse.
Se caracterizan por presentar CD1, CD4 y CD8 (células
dobles positivas) y se sitúan en la zona cortical.
Los genes alfa del TcR están reordenados y se expresan
en baja densidad, junto a CD3, en la membrana.
Estas células ya provistas del complejo receptor
específico van a ser sometidas, hasta la época del
nacimiento, a selección positiva y negativa.

50. c) Estadio III (timocitos maduros):
Presentan TCR2/CD3 en alta densidad, en la membrana
y pierden CD1, CD38, Rc de transferrina.
También hay diferenciación de dos subclases de
timocitos (CD4+ y CD8+) que son casi indistinguibles de
los LT maduros.
Todas estas células expresan CD44 (interviene en la
migración y asentamiento en los tejidos linfoides
periféricos).

53. TCR-1 (gamma/delta)
 Son la minoría.
 En la ontogenia, la recombinación de los genes
gamma preceden a alfa y beta de TCR2.
 No hay expresión de CD1, CD4, CD8.
 El producto final de esta vía son TCR1/CD3 y no
expresan CD4 y CD8.
 Son los linfocitos intraepiteliales con funciones
citotóxicas.

54. Selección tímica
 En ambos procesos selectivos son importantes las
células del estroma tímico, células epiteliales tímicas,
macrófagos y células dendríticas; todas ellas expresan
en sus membranas grandes niveles de moléculas MHC-I
y/o MHC-II.
 Los timocitos inmaduros dobles positivos (CD4+ CD8+
TCR+ CD3+) interaccionan con estas células estromales,
lo que conduce a la selección positiva y negativa.

55. a) Hay una selección positiva de las células capaces
de reconocer el MHC propio (educación tímica).
Sobreviven aquellas células que tengan TCR
capaces de reconocer MHC-I o MHC-II de células
epiteliales del timo.
Con ello se garantiza la restricción por propio
haplotipo de las células T.
Se produce una muerte programada (apoptosis) de
las células que tienen baja afinidad por el MHC.

57. b) Hay una selección negativa (tolerancia central)
de las células T que reaccionan contra los auto-Ag
sobre las CPA.
La selección es producida por las células
entrelazadas y los macrófagos de la corteza profunda
y médula.
Garantiza la propiedad de autotolerancia por
eliminación de los linfocitos T autorreactivos.
Después de esta fase se pierde CD4 o CD8 y se
convierten en timocitos maduros positivos
simples (sólo el 5% de la población total, el resto
muere).

59. Localización final de los
linfocitos T
 Los linfocitos vírgenes emigran desde los órganos
linfoides primarios a los secundarios, donde
pueden reconocer los Ag.
 Los linfocitos estimulados evolucionan a células.

60. Activación de linfocitos TH
 La activación y expansión clonal de TH es un
acontecimiento central en la producción de las
respuestas inmunes humoral y celular.
 Los linfocitos T vírgenes son células en reposo que se
encuentran “aparcadas” en la fase G0 del ciclo celular.
 La activación se inicia cuando el linfocito
TH interacciona, a través de su complejo TCR-CD3, con el
antígeno peptídico (exógeno) enclavado en MHC-II de
una célula presentadora ( activación correceptor CD4).

61.  Esta interacción “dispara” una cascada activación
en el que intervienen proteínas con actividades
quinasas y fosfatasas, entre los que se cuentan el
de la IL-2 y el de su receptor.
 La secreción autocrina de IL-2 por parte de los
linfocitos TH hace que éstos salgan de la fase G0 y
entren y progresen en el ciclo celular.
 Se obtiene la proliferación y diferenciación de la
célula T en dos subpoblaciones: una de células
efectoras y las TH de memoria.

63. Rutas de señalización
intracelular
 Una vez que el TCR se une al MHC, esta señal se
transduce al interior de la célula T por medio de
los dominios citoplásmicos de CD3, el correceptor
CD4 y varias moléculas accesorias (CD2, CD45).
 Dicha transducción de señal se realiza por medio
de una serie de proteín-quinasas y proteín-
fosfatasas: Proteín-quinasas de la familia del
protooncogén src (Proteína p56lck, Proteína p59
fyn), fosforilasa ZAP-70, fosfatasa CD45
(=LCA=T200).

65. Señales coestimuladoras
 Además de las señales suministradas a partir del
contacto entre el complejo TCR-CD3 con el
péptido-MHC, la activación del linfocito
TH requiere una señal adicional, denominada
coestimulatoria:
 IL-1 suministrada por la APC.
 IL-6 de la APC.
La señal más potente es la que supone el contacto
entre la molécula B7 (=CD80) de la célula
presentadora y la CD28 o la CTLA-4 del linfocito
TH.

66. Función linfocitos Th

67. FUNCIÓN

68. FUNCIÓN

69. FUNCIÓN

70. Función de linfocitos Tc

71. ANERGIA CLONAL
 Es la incapacidad proliferativa de un linfocito tras un
contacto con el MHC, y se debe a la carencia de la
señal coestimulatoria proporcionada por la
interacción entre CD28 del linfocito TH y B7 de la
APC.
 La anergia es un estado activo de no proliferación.
 El requerimiento simultáneo de ambas señales
implica que sólo las APC profesionales pueden iniciar
las respuestas inmunes dependientes de células T.
 Ello es importante para evitar la autoinmunidad
porque no todos los clones de T potencialmente
autorreactivos son eliminados durante la maduración
tímica.