Este documento describe el aislamiento e identificación estructural del cucumariosido A8, un intermediario metabólico del pepino de mar Eupentacta fraudatrix. El cucumariosido A8 es un 3β-O-glicosilado-16β-acetoxi-9β-H-lanosta-7,24-dieno-3β,18,20β-triol que proporciona nueva información sobre la biosíntesis de los glicósidos de trimetilesterol en pepinos de mar.

1. 9β-H-lanosta-7,24-diene-
3β,18,20β-triol,
an intermediate metabolite from
the sea cucumber Eupentacta
fraudatrix
and its biosynthetic significance
Presentado por:
Jasmín Salazar Mendoza
Factor de impacto: A. S., Silchenko; A. I., Kalinovsky; S. A., Avilov; P. V., Andryjashchenko;
0.931 P. S. Dmitrenok; V. I., Kalinin; V. A., Stonik. Biochemical Systematics and
5 años: 1.226 Ecology 2012, 44, 53–60.

2.  Presencia de saponinas
 Sustancias distribuidas en plantas y
organismos marinos como esponjas y pepinos
de mar
 Bioactividad
 Quimiotaxonomia

4.  Reino: Animalia
 Phylum: Echinodermata
 Subphylum: Echinozoa
 Clase: Holothuroidea
 Subclase: Dendrochirotacea
 Orden: Dendrochirotida
 Familia: Sclerodactylidae
 Género: Eupentacta
Eupentacta fraudatrix (Djakonov et
Baranova, 1958)

5.  Biosíntesis de los glicósidos tipo holostano no ha sido
claramente detallada.
 No ha sido establecido los productos policiclicos derivados de
la ciclación del óxido escualeno (precursor de glicósidos
triterpénicos).
 Estudios de Biosíntesis de productos naturales
complejos:
 1) Incorporación de precursores marcados radiactivamente
en experimento de radiomarcaje
 2) Aislación e identificación estructural del componente
minoritario, también conocido como sustancia activa
metabolicamente

6. OBJETIVOS

7.  Aislamiento e identificación estructural del
Cucumariosido A8, con un grupo hidroxilo en C18 de una
subfracción de un oligosacarido tetraosidico no
sulfatado del pepino de mar E. fraudatrix
 Comparación de literatura y resultado para proponer un
esquema de la biosíntesis del glicósido trimetilesterol en
pepinos de mar

8. MATERIAL Y MÉTODO

9. Material y método
Punto de fusión Rotación específica RMN 1H/13C
Kofler-Termogenerador Polarímetro Perkin–Elmer 343 ADVANCE III-700 Bruker
MALDI TOF MS modelo
BIFLEX III Bruker
HPLC 700.13 MHz/176.04 MHz
Agilent 1100 (1H/13C)
en C5D5N a 35 C con
TMS como referencia interna
Matriz de α-ciano-4-ácido
hidroxicinámico
Columnas Discovery
C18(10-250 µm, 5 mm)

10. Material animal
 Se colectaron especímenes de E.
fraudatrix
 Estación Experimental Marina del
Instituto del Pacífico de Química
Bioorganica en Troitsa Bay
 Profundidad de 1.0 a 1.5 m (colector
P.P. Kicha)
 Identificados por Prof. Valery S. Levin
(Instituto de Biología
Marina, Vladivostok, Rusia)
 Colección del Lab. De
Quimicotaxonomía con Núm.
Colección PIBOC-1988-MES-EFR

11. Extracción y aislamiento
Extracción Concentrados a
Picado por reflujo sequedad y cromatografiados
s (x2) EtOH redisueltos en en columna de
70% H2O Polychrom-1
PTseco=650
g
Fracción de glicósidos Sales inorganicas
crudos con 60% e impurezas
acetona (15 g) polares con H2O
Sub-Fracción A 
Separada por HPLC en
columna Discovery C-18 Cromatografía en columna de Si gel
(10 250 mm) con 83% column
MeOH  5mg de [CHCl3/EtOH/H2O (100:100:17)]  650
cucumariosido A8 mg

12. RESULTADOS Y
DISCUSIÓN

13.  Cucumarioside A8
 Fórmula: C55H90O22
 HR MALDI TOF MS (þ) m/z 1125.5812 (calc 1125.5816) [M þ
Na]þ.
 3 β -O-[3-O-metil-β-D-xilopiranosil-(1/3)-b-D-
glucopyranosyl-(1/4)-b-D-quinovopiranosil-(1/2)-β-D-
xilopiranosil]-16β acetoxi-9β-H-lanosta-7,24-dieno-
18,20β-diol

14.  7(8)doble enlace (122.8 (C-7)
y 147.5 (C-8) ppm en el 13C
RMN
 Grupo16β-acetoxido [señales
a 76.7 ppm (C-16) y 5.88
(td, J ¼ 7.9, 5.4) ppm (H-16)
en el espectro de 13C y 1H
RMN, respectivamente; 169.9
y 21.2 ppm y 2.13 ppm (OAc)
en el espectro de 13C y 1H
RMN
 La configuración 9β -H
[señales a 2.54 (brd, J ¼
13.9) ppm (H-9) y 24.4 ppm
Cucumariosides A8 (1) y G1 (2) de Eupentacta
(C-19)]
fraudatrix.

15.  Ausencia de la señal a ≈180.0
ppm del grupo carbonilo C-18
indica la ausencia del grupo
lactona

18. CONCLUSIÓN

19.  El descubrimiento del 3β-O-glicosilado16 β -acetoxi-9 β -H-
lanosta-7,24-dieno-3 β,18,20 β –triol, permitió esclarecer
algunos de los estados de la biosíntesis de los 4,4,14-
trimetilesterol glicósidos
 La unidad aglicona no procede de la glicosilación
 La configuración 9β-H y el tipo de insaturación en la unidad
policiclica son formadas en los estados tempranos de la
biosíntesis cuando la unidad lactona aun no esta presente en
la aglicona
 Estos datos permiten el esquema hipotetico de la biosinteis
de 4, 4, 14 trimetil glicósido estereoide