Este documento resume un estudio sobre la caracterización de Acinetobacter baumannii, una bacteria gram-negativa patógena en hospitales. El estudio encontró que la bacteria tiene múltiples factores de virulencia como resistencia al suero y bombas de eflujo que le permiten sobrevivir en condiciones adversas. También demostró resistencia a múltiples drogas pero susceptibilidad a colistina, polimixina y tigeciclina. El estudio identificó genes de resistencia y virulencia en 21 cepas de A. baumannii aisladas del

1. José Gabriel Hernández Franco

2. INTRODUCTION
Different studies about
health protection are based
on acquiered infections at
hospitals, inventigators
found that it causes
signifcant mortality and
morbidity in most hospital
around the world.
For this reason some
scientific and medical
groups are focus to
determine the infection-
causing organism in the
hospital environment and
how treated with them.
In this article an iraqui
characterized the
Acinetobacter baumanii.

3. INTRODUCTION
• Acinetobacter baumannii is a Gram-
negative bacillus and human pathogen in
hospitals.
• Baumanni has the ability to gain multiple
virulence factors, including resistance
such as, serum resistance, motility and
efflux pumps, that help it to survive in
adverse environmental conditions.
Acinetobact
er
baumannii
• Baumanni has multiple drug
resistance, this provided various
virulence factors among different
strains.
• Baumani can cause serious 3 that is
why is lethal for all patients

4. General Objetive
The present study aimed to
investigate the molecular
epidemiology of Acinetobacter
baumannii, isolated from items
in the hospital environment and
the presence of various
resistance determinants to
deduce their potential ability to
cause human infections.

5. Materiales y
métodos• PCR: Se utilizo la PCR con el fin de detectar la Acinetobacter baumannii a través del gen recA y los
elementos amplificados fueron comprobados por emparejamiento BLAST.
• PCR para
virulencia:
• Se utilizo
igualmente la PCR
en los pacientes
con presencia de
A. Baumanii para
detectar
diferentes
generes de
virulencia.

6. •Materiales y
•Métodos
Susceptibilidad: Se utilizo basado en el MIC
(Mínima concentración inhibitoria) de la A.
Baumanii, se evaluaron los siguientes
farmacos:
1. Amikacin (30 μg)
2. Gentamicin (30 μg)
3. Imipenem (10 μg)
4. Norfloxacin (10
μg)
5. Azithromycin
(15μg)
6. Levofloxacin (5 μg)
7. Amoxicillin +
clavulanic acid (30
μg
Escherichia
coli
Pseudomon
as
Aeruginosa
Control
Control

7. Materiales y
métodos• La resistencia sérica se evaluó de
acuerdo con el protocolo de Kim et
al. Las bacterias crecieron en medio
TSBD para ser incubadas en suero
humano de donadores sanos,
finalmente los recuentos viables se
determinaron en puntos de tiempo
de 0 y 2 horas para obtener
resultados.
Biocapas: Con la determinación de los
factores de virulencia en la A. Baumanii,
se busco crear una biocapa, para
determinar las diferentes cepas de la
Baumanii encontrada en 21 de 112
pacientes. Estas se prepararon en un
medio abiotico y se dejaron en cristal
violeta al 1% para luego ser medias por
OD540.

8. Materialesy
métodos
• Para la cuantificación se obtuvo el sobrenadante
del cultivo (se diluyó 1: 1 en tampón Z), para
determinar la actividad de β-galactosidasa.
• La actividad de β-galactosidasa usando o-
nitrofenil-D-galactopirlanósido como substrato.
• Para la producción y medición de AHL, se utilizó la cepa
reportera E. coli MG4, biosensores de AHL
Chromobacterium violaceum.
• La producción AHL se realizo en cubiertas de agar con
40 μL de X-Gal, como resultado de la presencia de AHL
las cepas se tornaban de un color azul.
• Finalmente los extractos se resuspendieron en HPLC con
acetato de etilo de calidad y se evaluaron mediante
cromatografía de capa fina.
Producción de AHL
Cuantificación de AHL
AHL
(N-acyl-homoserine
lactone)

9. •Resultado
s
Tabla:1, en amarillo: genes de resistencia a farmacos, en rojo: Medicamentos resistentes, en azul:medicamentos efectivos.

10. •Resultado
s• Los patrones de susceptibilidad
muestran en mayor porcentaje como
principalmente la colistina,
tigeciclina, polimixina actuan
efectivamente sobre el control de la
Acinetobacter baumannii.
• Igualmente al utilizar un MIC50 y
un MIC90 Sobre diferentes
farmacos, los cuales buscan
indicar ante cuales y en que
cantidad son mas efectivos
contra las Acinetobacter
baumannii.
Tabla:3, MIC para A. Baaumanii.
Figura 1: Porcentaje suseptibilidad de la A. Baumanii

11. •Resultado
s
• Se dio la formacion biocapas fuertes en
superficies abióticas en las 21 diferentes cepas
de A. Baumanii, a pesar de que no en su
totalidad (solo 14 cepas) produjeron el AHL.
• Se dio una resistencia serica total y se obtuve
que el gen abal y CsgA tuvieron una gran
presencia dentro de las 21 cepas, confiriendo
gran virulencia a la A. Baumanii
Figura 2: Electroforesis para genes de resistencia. Tabla4 :PCR basada en genes de virulencia; en amarillo, resistencia
serica; en naranja,formacion biocapas; en rojo, genes para la virulencia
• Se muestra por electroforesis los
genes positivos para CTMX, TEM y
VIM.
• Dando así presencia para genes
multiresistencia, presentes en
bandas 2,4,5,6,7; ya que el 3 es el
control positivo y el 8 el control
negativo.

12. •Resultado
s
Figura 4: Formación biocapas
Figura 3: Producción AHL y resultados
• En la figura 4, las muestras de la
izquierda se encuentra el control
negativo y a la derecha de esta se
encuentran los controles positivos.
Dentro de cada una se da la
producción de AHL que se midió
por densidad óptica (OD)

13. DISCUSSION
Autor What was proposed Was it true?
Peleg AY et al.
A.B. grows as a nosocomial because it can develop and
survive in hospital environments for prolonged periods
as a result of its exceptional ability to produce highly
resistant biofilms
Yes
Antunes LC et al.
Though initially A.B considered to be an organism of
low virulence, A. baumannii is gradually gaining
virulence.
Yes
Darvishi M. et al
Rational use of antibiotics according to the results of
disc diffusion studies can help to decrease the
prevalence of resistance
Yes
Anbazhagan D et al
We showed that among the 21 biofilm-forming isolates,
only 14 produced AHLs, which may be because biofilm
formation is a multifactorial event involving a number
of molecules in which QS signals are one of the factors
Yes

14. • We observed strains
with multifactorial
pheno- types related
to pathogenesis, such
as biofilm formation,
motility and resistance
to human serum,
suggesting the ability
to persist, which
accounts the presence
of A. baumannii at
hospitals
ConclusionConclusion
• Despite the multidrug
resistance to
commonly antibiotics,
A. baumanii is
susceptible to 3
specific drugs such as
colistin, Polmiyin B
and tigecycline; which
can be used for the
reduction of Baumanii
strains and infections
in patients