Este resumen describe los resultados de un experimento para medir la eficacia de tres antibióticos (ampicilina, amoxicilina y vancomicina) contra cuatro muestras de bacterias (trapo, agua con tierra, baño y lavabo) mediante la técnica de antibiograma. Se observó que la vancomicina y la amoxicilina produjeron los halos de inhibición más grandes, lo que indica que son los antibióticos más eficaces contra las bacterias estudiadas. Los antibiogramas permiten determinar qué antibióticos

1. Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios Noº128
Práctica 8. Hongos.
Sub módulo 3: Ejecuta técnicas de identificación de microorganismos con base en las normas.
Equipo 3. Integrantes: Cabral Brandon, González Lesly, Hernández Nayelli, Hernández Alan, Jiménez Fabiola,
Lagunas Itzel, Lira Vanesa, Mata Lizbet.
Facilitadora: Ing. Acosta Jessica
Fecha: Inició 18 de Noviembre del 2014, 20 de Noviembre del 2014.
Introducción
Los antibióticos son medicamentos potentes que
combaten las infecciones bacterianas. Actúan ma-tando
las bacterias o impidiendo que se reproduz-can.
Eso productos químicos pueden ser producidos por
algunos seres vivos o por medios sintéticos, estos
últimos resultan más potentes debido a que sus pro-piedades
han sido perfeccionadas a tal grado que
cuentan con un gran espectro de inhibición.
Los antibiogramas son pruebas microbiológicas que
se realizan para determinar la susceptibilidad de una
bacteria a un grupo de antibióticos.
En esta práctica observaremos los halos de inhibi -
ción que presentan los siguientes antibióticos: ampi-cilina,
amoxicilina, vancomicina.
Resumen
Los antibiogramas permiten medir el espectro de efi -
cacia de una serie de antibióticos antes distintas es-pecies
y cepas de microorganismos sensibles a es-tos.
Para medir la eficacia de antibióticos como la ampi-cilina,
la amoxicilina y la vancomicina, se emplearon
los halos de inhibición.
Primero se prepararon los medios nutritivos en una
serie de Placas de Petri. Luego, estas fueron inocu-ladas
con 4 muestras infecciosas diferentes (trapo,
agua con tierra, baño, lavabo).
Para aplicar el antibiograma, se disolvieron los anti-bióticos
en 5 ml de agua, luego se colocaron mues-tras
de antibiótico en cuadrados de papel filtro y fue-ron
colocados en el medio de cultivo.
Las placas fueron incubadas a 36° por 24 horas.
Luego de este lapso, se realizó un análisis morfoló-gico
de las colonias y midieron los halos que se for-maron
alrededor de cada antibiótico.
Para identificar el tipo de bacterias que estaban pre-sentes
en las colonias, se aplicó la tinción de Gram.
Abstract
The antibiograms allow to measure the spectrum of
effectiveness of some antibiotics against a range of
different species and strains of sensitive microorga-nisms.
To measure the effectiveness of antibiotics like am-picilina,
amoxicillin and vancomycin, the inhibition
halos were used.
First, nutrient media were prepared in a series of
Petri dishes. Then, these were inoculated with 4 dif-ferent
infectious samples (rag, water with Earth, toi-let,
sink).
To apply the antibiogram, antibiotics in 5 ml of water
were disolved. Then, the antibiotics samples were
placed in squares of filter paper and were placed in
the culture medium.
The plates were incubated at 36 ° for 24 hours. Af-ter
this period, a morphological analysis of colonies
was performed and was measured the halos that
formed around each antibiotic.
To identify the type of bacteria that were present in
the colonies, Gram stain was applied.
Materiales y métodos
Preparación del medio
Materiales
 Matraz Erlenmeyer
 Espátula
 Balanza granataria
 Vidrio de reloj
 Guante de asbesto
 Agitador
 4 Placas de Petri

2.  Papel canela o periódico
 Cinta para etiquetar
Reactivos
 Agar Nutritivo
 Agua destilada
Procedimiento
1-Preparar la cantidad necesaria de agar nutritivo
para 4 placas de Petri (tomando en cuenta el mar-gen
de error) en un matraz Erlenmeyer.
2-Hervir el matraz y agitarlo hasta que el agar se di-suelva.
3-Envolver las placas de Petri con el papel y colo-car
una protección sobre el matraz. Etiquetar el ma-terial
correctamente.
4-Esterilizar a 15 libras de presión por 15 minutos
en la olla de presión.
5-Sacar el instrumental de la olla y vaciar el agar en
las placas de Petri (20 ml por cada placa), dentro
de un triángulo de seguridad (de mecheros de Bun-sen).
6-Dejar solidificar las placas con el medio Nutritivo.
Inoculación y aplicación del antibiograma
Materiales
 4 Placas de Petri con medio Nutritivo.
 Asas de platino
 Papel filtro
 3 Mecheros de Bunsen
 3 Mangueras de látex
 3 pinzas de disección
Reactivos
 Muestras para inocular (trapo, baño, agua
con tierra, lavabo)
 Antibióticos (ampicilina, amoxicilina, vanco-micina)
Procedimiento
1-Inocular las placas con las muestras (trapo, agua
con tierra, baño, lavabo) usando un asa de platino y
empleando la técnica de estriado de crecimiento.
(Realizarlo dentro de un triángulo de seguridad de
mecheros de Bunsen).
2-Disolver los antibióticos con 5 ml de agua.
3-Cortar 3 cuadrados de papel filtro por cada placa
de Petri y bañarlos en los antibióticos disueltos.
4-Empleando las pinzas, colocar 3 cuadrados con
antibióticos diferentes en cada Placa de Petri.
5-Etiquetar las placas de Petri.
6-Incubar las placas a 36° por 24 horas.
Morfología de colonias, medición de los halos y
tinción de Gram
Materiales
 Asas de Platino
 3 Mecheros de Bunsen
 3 Mangueras de látex
Reactivos
 Cristal violeta
 Yodo-Lugol
 Safranina
 Alcohol cetona
 Aceite de Inmersión
 Agua
Procedimiento
1-Realizar el análisis morfológico de las colonias de
cada placa tomando en cuenta los siguientes pará-metros:
 Color
 Forma
 Superficie
 Borde
 Número de colonias
2-Con ayuda de una regla, medir el radio de los ha-los
de inhibición de cada antibiótico y compararlos.
3-Aplicar la tinción de Gram:

3.  Colocar una gota de agua en un portaobje-tos.
 Tomar una muestra de una colonia con el
asa platino.
 Diseminar la muestra sobre el portaobjetos
 Dejar secar el portaobjetos.
 Fijar la muestra pasando el portaobjetos tres
veces por la llama del mechero de Bunsen.
 Agregar una gota de cristal violeta, esperar
1 minuto y enjuagar con agua.
 Agregar una gota de Yodo-Lugol, esperar 1
minuto y enjuagar con agua.
 Agregar una gota de alcohol cetona, esperar
30 segundos y enjuagar con agua.
 Agregar una gota de safranina, esperar 30
segundos y enjuagar con agua.
 Colocar una gota de aceite de inmersión en
el portaobjetos y cubrir con un portaobjetos.
 Observar la muestra en el microscopio a
100x
Resultados
Se obtuvieron los siguientes resultados:
Medio Muestra
inoculada
Halo de
Ampici-lina
Halo de
Amoxici-lina
Halo de
Vanco-micina
Nutritivo
1
Trapo _______ ________ ________
Nutritivo
2
Baño 1.5 cm 1.5 cm 3 cm
Nutritivo
3
Lavabo 0.5 cm 2 cm 2 cm
Nutritivo
4
Agua con
tierra
_______ ________ ________
Medio Color Forma Su-perfi-cie
Borde Co-lo-nias
Nutritivo 1 Amari-llo
Circu-lar
Plana Re-don-deado
5
Nutritivo 2 Blanco Punti-forme
Plana Re-don-deado
57
Nutritivo 3 Blanco Punti-forme
Plana Re-don-deado
130
Nutritivo 4 Blanco Circu-lar
Con-vexa
Re-don-deado
2
Conclusiones
Cabral Brandon:
González Lesly: Como conclusión yo obtengo que
las antibióticos usados tienen diferentes propieda-des,
así como las bacterias que se inocularon ya que
el hijas de ellas si crecían dentro del halo y otras de
ellas no, se puede determinar que esto es gracias a
la eficacia que tienen los antibióticos usados, res-pecto
a las bacterias inoculadas, algunos de los si
presentaban su halo con un diámetro extenso así
como otras presentaban un halo pequeño. En pocas
palabras de llega a la conclusión de que no todos los
antibióticos en los que confiamos cuando nos encon-tramos
enfermo, actúan de la misma manera y tienen
la misma eficacia que otro.
Hernández Nayelli: En conclusión pues los halos de
inhibición nos damos cuenta que funcionan en este
caso usando antibióticos, mediante alrededor de es-tos
no aparecieron colonias u hongos. Lo importante
que es saber realizar un antibiograma ya que tiene
sus cualidades para realizarse correctamente y el
saberlo hacer/realizar. La higiene como ya se ha di-cho
es muy importante en todo caso.
Hernández Alan: Los antibiogramas permiten me-dir
la eficacia de una amplia gama de antibióticos
sobre determinados microorganismos que pueden
llegar a ser patógenos.
Este tipo de pruebas son de gran importancia en la
industria farmacéutica, ya que permiten identificar a
los antibióticos más eficaces y comprobar sus efec-tos
sobre determinadas cepas de microorganismos.
En la práctica, se observó que la Vancomicina y la
Amoxicilina son los antibióticos más eficaces, de los
que se utilizaron, sobre las especies de bacterias
que crecieron en los medios de cultivo.
También hay que tomar en cuenta que no todos los
antibióticos actúan sobre todos los tipos de microor-ganismo,
ya que algunos de estos productos quími-cos
cuentan con un amplio espectro de eficacia,
mientras que otros cuentan con uno muy débil.
Jimenez Fabiola: Como conclusión para esta prác-tica
se tuvo una observación del crecimiento de hon-gos
y la reacción de los antibióticos ante ellos y ver

4. la eficacia que tienen ante algunas bacterias y hon-gos
producidas que por lo cual no permitieron que
hubiera crecimiento sobre el papel filtro que contenía
cada uno de los antibióticos sino que el crecimiento
se observó alrededor de ellos dando así el pensar de
cuan eficaz son ellos. Y dar por entender cuáles son
los antibióticos más eficaces tanto ante bacterias en
agares como así podría ser en la humanidad.
Lagunas Itzel: Los antibiogramas son las pruebas
que se realizan para determinar qué tan sensible es
un antibiótico a alguna colonia. Permite medir que
tan eficiente es.
Lira Vanessa:
Mata Lucero: En esta práctica nos damos a conocer
cuál es el antibiótico que funciona mejor a agentes
contaminantes. También nos ayuda a descubrir cuál
es la resistencia de la bacteria que ha crecido en
nuestro cultivo.
Nos ayudara en nuestra vida cotidiana al momento
de tratar con nuestras enfermedades así ya conoce-remos
cual antibiótico podría darnos los mejores re-sultados.
Por eso es muy importante conocer acerca
de los antibiogramas y su aplicación en la vida coti-diana.
Meléndez Araceli: En esta práctica pudimos obser-var
cual es el antibiótico que mejor funciona en los
agentes contaminantes, lo que nos ayuda en la vida
diría a saber qué es lo que estamos consumiendo el
número de bacterias que crea nuestro cuerpo con
estos medicamentos al momento de ingerirlo o solo
a darnos una idea del mundo diminuto que nos ro-dea.
Discusión
Al igual que en la práctica 7 se pusieron en práctica
el método de halos de inhibición para así poder me-dir
la eficacia que tienen los antibióticos que se ino-cularon,
mostrando unos pequeños halos, algunos
de los antibióticos inoculados eran más fuerte que
los otros ya que presentaban un halos con un diáme-tro
más amplio en cambio los que tenían propieda-des
más débiles mostraban un diámetro pequeño en
su halo. Ninguno de ellos presento un halo perfecta-mente
circular, pero se pudo saber que tanta y cuál
de ellos tienen mejor eficacia.
Bibliografía
Pedrique M., (2002). DETERMINACIÓN DE LA
SENSIBILIDAD DE LAS BACTERIAS A LOS ANTI-BIOTICOS
(ANTIBIOGRAMA). Noviembre 23, 2014,
de UVC Sitio web: http://www.ucv.ve/fil ead-min/
user_upload/facultad_farmacia/catedraMi-cro/
10_Antibiograma.pdf
Sante-Medecine. (2011). Antibiograma. Noviembre
23, 2014, de Kioskea Sitio web: http://salud.kios-kea.
net/faq/5924-antibiograma
Anexos
ANTIBIOGRAMA
El antibiograma es la prueba microbiológica que se
realiza para determinar la sensibilidad de una colonia
bacteriana a un antibiótico o grupo de antibióticos. El
antibiograma permite definir para cada antibiótico, si
la bacteria es sensible (antibiótico eficaz), intermedio
(antibiótico eficaz en ciertas condiciones) o resis-tente
(antibiótico ineficaz). El antibiograma permite
medir la capacidad de un antibiótico a inhibir el cre-cimiento
bacteriano. Permite evaluar la eficacia de
un antibiótico sobre una bacteria.
Se considera como antimicrobiana cualquier sustan-cia
con capacidad de matar o al menos de inhibir el
crecimiento de los microorganismos y que sea sus-ceptible
de utilización como tratamiento en los pa-cientes.
Pueden ser naturales, sintéticos o semisin-téticos
(modificación química de un compuesto natu-ral).
La historia moderna de los antibióticos comienza
con el descubrimiento de sustancias presentes en
unos microorganismos capaces de matar a otros mi-croorganismos.
La utilización de antibióticos supuso
un avance enorme en la esperanza de vida de las
personas que padecían procesos infecciosos, aun-que
también supuso un aumento en los niveles de
resistencia antibiótica.
Importancia del antibiograma
Todos los antibióticos no son eficaces contra todas
las bacterias y el antibiograma ayuda al médico en la
elección del antibiótico que hay que prescribir. Per-mite
determinar el antibiótico más eficaz en caso de
una infección bacteriana.

5. Resultados de un antibiograma
Los antibióticos son sometidos a un test frente a una
bacteria o un grupo de bacterias y se clasifica el
efecto del antibiótico sobre estas en sensible, inter-medio
o resistente. Los resultados pueden variar se-gún
las técnicas utilizadas por los laboratorios. Los
resultados no constituyen un diagnóstico. Es impor-tante
consultar a un médico con el fin de prever exá-menes
complementarios o un eventual tratamiento.
El antibiograma tiene cuatro utilidades principales:
La utilidad básica del antibiograma es la instauración
de un tratamiento antibiótico correcto al paciente. Es
necesario conocer si el microorganismo responsable
de la infección posee mecanismos que le confieran
inmunidad frente a algún antibiótico para no incluirlo
como terapia.
En cuanto al tratamiento el antibiograma no sólo es
necesario en la instauración, también resulta útil en
el seguimiento e incluso en la confirmación de trata-mientos
empíricos. En ocasiones la enfermedad in-fecciosa
resulta grave y se comienza el tratamiento
antes de conocer los datos de sensibilidad de la
cepa. El antibiograma tiene que confirmar, o en su
caso corregir el tratamiento.
Otra aplicación de las técnicas de estudio de resis-tencia
es la epidemiología. Es necesario detectar el
aumento de los niveles de resistencia en los aisla-mientos
clínicos para tomar medidas correctoras.
Por otro lado también puede tener utilidad diagnós-tica
porque el perfil de resistencia puede en algún
caso orientar en la identificación bacteriana.
Existen multitud de antimicrobianos en el mercado y
el número sigue creciendo porque el desarrollo de
más mecanismos de resistencia por parte de los mi-croorganismos
se traduce en un esfuerzo mayor por
fabricar más y mejores antibióticos. No es necesario
contrastar la eficacia de todos los antibióticos para
cada aislamiento bacteriano. Los criterios que se si-guen
para seleccionar que antimicrobianos se ensa-yan
respondes a factores de diversa índole:
Factores microbiológicos: Tipo de agente infeccioso
y mecanismos de resistencia descritos previamente
en su especie.
Factores farmacológicos: Tipo de antimicrobiano y
parámetros de absorción, distribución y eliminación.
Factores del paciente: Tipo de infección. Factores de
riesgo y estado general de salud. Situación inmuno-lógica
e hipersensibilidad.