El documento resume los conceptos clave sobre resistencia bacteriana a los antimicrobianos, incluyendo su definición, los mecanismos de acción de diferentes clases de antimicrobianos, y los métodos utilizados en el laboratorio para detectar la resistencia bacteriana, como el antibiograma.

1. Resistencia Bacteriana
Generalidades

2. Resistencia antimicrobiana
“Fenómeno por el cual un microorganismo
deja de verse afectado por un antimicrobiano
al que anteriormente era sensible, son
inmunes a los efectos de los antimicrobianos,
de modo que los tratamientos habituales se
vuelven ineficaces y las infecciones persisten y
pueden transmitirse a otras personas”.
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs194/es/index.html

3. Sensibles vs Resistentes

5. Origen

6. Actividad
Bacteriostáticos: Inhiben el crecimiento
pero no matan al microorganismo,
permitiendo que las propias defensas
del huésped puedan eliminar a las
bacterias.
(Tetraciclina,
Cloranfenicol,
Sulfonamidas,
Trimetroprim
sulfa,
Lincomicina Clindamicina, Macrólidos)
Bactericidas: acción letal e irreversible
sobre la bacteria.
(Fosfomicina,
Vancomicina,
bLactámicos,
Polimixina,
Aminoglucósidos, Rifampicina, Acido
Nalidíxico,
Quinolonas,
Nitrofurantoinas)

7. Espectro de acción
• Espectro reducido:
Son activos selectivamente frente a un grupo determinado de bacterias
Ej: Macrólidos: cocos Gram (+)
Gentamicina: bacilos Gram (-)
• Espectro amplio:
Presentan actividad frente a la mayoría de los grupos bacterianos de importancia
clínica
Ej: Penicilina: cocos Gram (+), cocos Gram (-), bacilos Gram (+)
Ampicilina: cocos Gram (+) y Gram (-), algunos bacilos Gram (-)

8. Mecanismos de acción de
los antimicrobianos

9. Interfieren en el superenrrolamiento del DNA uniendose a la topoisomerasa II o
IV. Esto produce la ruptura de la doble cadena de DNA y muerte celular y
fragmenta la proteina en sintesis dependiente o independiete.
Nature Reviews Microbiology 8, 423-435 (June 2010).How antibiotics kill bacteria: from targets to networks

10. β-lactamicos inhiben la transpeptidación por union a las (PBPs) en las cadenas
maduras de peptidoglicano. La disminución en la síntesis y el incremento en la
autolisis permiten muerte celular.
Nature Reviews Microbiology 8, 423-435 (June 2010).How antibiotics kill bacteria: from targets to networks

11. Los aminoglicosidos se unen a la subunidad ribosomal 30S causando la falta
de incorporación de aminoacidos en los peptidos en elongación, estas
proteinas no traducidas pliegue inadecuado, y la incorporación de proteínas
mal plegadas en la membrana de la envoltura celular conduce a un aumento
en la absorción del antibiotico. Esto junto al incremento en la unión al ribosoma
se asocia con muerte celular.
Nature Reviews Microbiology 8, 423-435 (June 2010).How antibiotics kill bacteria: from targets to networks

12. Nature Reviews Microbiology 5, 175-186 (March 2007) The antibiotic resistome: the nexus of chemical and genetic diversity

15. Gram Negativos
The New England Journal of Medicine, Volume 362:1804-1813, May 13 2010

16. Gram Positivos
Arias C, Murray B. Nature Review, 2012 Vol 10; P 266-278.

17. Adquisición
de Genes de
resistencia
Andersson D, Hughes D. Nature Review 2010
Vol 8 April p. 260 – 271.

18. Movimiento de genes de
resistencia
Allen H, Donato J, Huimi Wang H, Cloud-Hansen K. Nature Review Microbiology. 2010 Vol 8 April p. 251 - 259

20. Bacterias multi-resistentes
HOSPITALARIO
Gram Negativos
COMUNIDAD
Gram Negativos
Acinetobacter sp
P. aeruginosa
E. coli
Citrobacter sp
Enterobacter sp
Klebsiella sp
Serratia marcescens
E coli
N gonorroheae
S typhi
S typhimurium
Gram Positivos
Enterococcus sp
S. Coagulasa negativo
MRSA
MRSA heterogeneamente resistente a
vancomicina
Gram Positivos
Enterococcus sp
M. tuberculosis
MRSA
S. pneumoniae
S. pyogenes

21. Clases de superbacterias
Nature Reviews Microbiology 5, 175-186 (March 2007) The antibiotic
resistome: the nexus of chemical and genetic diversity

23. Que hacer?.....

24. Papel del laboratorio en la
epidemiología hospitalaria
• Tradicionalmente:
• Detectar
• Identificar
• Caracterizar fenotípicamente
• Informar

25. Papel del laboratorio en la
epidemiología hospitalaria
• Actualmente:
•
•
•
•
•
•
Generar información sistematizada
Implementación de pruebas adicionales
Determinar la epidemiología molecular
Asesorar
Educar
Trabajar en conjunto para contener la resistencia
bacteriana
• Dar soporte técnico

26. Antibiograma

27. Técnicas de laboratorio
1. Métodos de dilución
– En agar
– En caldo (macro y micro).
2. Métodos de difusión.
– Kirby Bauer
•
Método Epsilometrico
- E- test

28. Control de calidad interno
• Mueller Hinton: Alta reproducibilidad, bajo
contenido de inhibidores y crecimiento satisfactorio
de la mayoría de los patógenos no fastidiosos.
• Control de calidad a cada lote de medio preparado
aunque provenga del mismo frasco de medio o para
cada lote de placas adquiridas comercialmente
(Independiente de que se cuente con el certificado
de calidad del proveedor).

29. • pH: 7,2 - 7,4. T° amb. Con medio solido luego de esterilizar. Dejar
solidificar el agar alrededor del bulbo del electrodo. No tiras.
• Ca++ y Mg++: Usar P. aeruginosa ATCC 27853 frente a gentamicina
(rango aceptable: 16-21mm).
• Zn++: Usar P. aeruginosa ATCC 27853 frente a IMI (Rango
aceptable: 20-28mm).
• Timina /Timidina: Usar E. faecalis ATCC 29212 frente a SXT, halo
claro y definido de 20 mm o más.
• Profundidad: 4mm +/- 0,5 mm.

30. Dilución en caldo
0,5 Mac Farland
Absorbancia (625 nm): 0,08 - 0,10

31. Difusión

32. Difusión

33. E-Test

38. Gracias
Grupo de Microbiología
Subdirección Red Nacional de Laboratorios
Instituto Nacional de Salud
Correo electrónico
Teléfono (57-1) 220 77 00 Extensión 1423
Bogotá, COLOMBIA
www.ins.gov.co
Línea gratuita nacional: 01 8000 113 400