Este documento describe las diferentes pruebas de diagnóstico para la detección del VIH, incluyendo pruebas serológicas, pruebas rápidas, ensayos confirmatorios como el Western Blot, detección viral mediante ARN del VIH, y pruebas para la detección de resistencias a antirretrovirales. Explica que la combinación de tres pruebas con diferentes principios, incluyendo el Western Blot, proporciona una detección del 99,9% con pocos falsos negativos o positivos. También cubre el uso de

1. PRUEBAS DIAGNOSTICAS EN
VIH
DRA ARACELY AGUILAR
DR JORGE FUENMAYOR

2. PRUEBAS DIAGNOSTICAS EN VIH
• En el diagnóstico de la infección VIH, para considerar un resultado
positivo, se recomienda el uso de tres técnicas con distinto principio
o base antigénica, siendo obligado que para la confirmación una de
ellas sea el Western Blot.
• Las técnicas serológicas de cuarta generación acortan el período
ventana a 13-15 días incluyen la detección de antígeno-p24.
• La detección del genoma-VIH (ADN proviral/ARN) complementa al
diagnóstico serológico en situaciones complejas.
• La viremia plasmática (carga viral) se utiliza para el seguimiento de
los pacientes infectados por VIH, para contribuir a la decisión del
inicio de tratamiento y para comprobar el fallo virológico al régimen
antirretroviral en uso.

3. Técnicas de detección de infección
VIH
• El diagnóstico de infección se realiza detectando la presencia
de anticuerpos específicos ya que estos se encuentran en el
suero prácticamente en el 100% de las personas infectadas.
• El incremento de la sensibilidad lleva aparejado un descenso
de la especificidad (se producen falsos positivos), aunque las
técnicas actuales cifran la especificidad en torno al 99%.
• Por otro lado, a menor prevalencia de la infección VIH en la
población estudiada, disminuye el valor predictivo positivo y es
por tanto mayor la probabilidad de que se produzcan resultados
falsos positivos con tasas de infección por VIH bajas. Por ello,
todo resultado positivo debe ser confirmado mediante un test
confirmatorio

4. Pruebas diagnosticas
• PRUEBAS RAPIDAS
• La sensibilidad oscila entre el 85-99%,
y la especificidad entre el 93-99%. Se
suelen producir falsos negativos en
muestras con bajo nivel de anticuerpos
o estadios recientes de infección, y
falsos positivos en regiones con alta
prevalencia de anticuerpos1.
• Una prueba de laboratorio positiva debe
confirmarse con un ensayo de
diferenciación de VIH-1/VIH-2 o, si no está
disponible, un Western blot de VIH.
• Pruebas combinadas de antígeno y
anticuerpo del VIH
• La sensibilidad y especificidad de las
pruebas de cuarta generación se
aproximan al 100 por ciento para
pacientes con infección crónica por
VIH. Además, estas pruebas pueden
identificar infecciones agudas/tempranas
en hasta el 80 por ciento de los pacientes
cuyo diagnóstico de VIH se habría pasado
por alto con las pruebas de anticuerpos
únicamente, aunque no son tan sensibles
como las pruebas de ARN del VIH.

5. Pruebas diagnosticas
• ENSAYOS CONFIRMATORIOS.
• Las técnicas confirmatorias que se utilizan más
frecuentemente son el Western Blot (WB) y el
inmunoblot recombinante o imunoensayo en línea (LIA)
Tienen como mínimo la misma sensibilidad que el
ELISA y una especificidad superior. Ambas técnicas
pueden incorporar antígenos de envoltura de VIH-2 lo
que permite diagnosticar este tipo vírico.
• El Western blot detecta anticuerpos IgG contra el VIH-1; sin
embargo, pueden pasar hasta dos meses después de la
adquisición del VIH para que la prueba se vuelva
completamente positiva.
• Los ensayos de Western blot del VIH-1 no detectan de forma
fiable el virus del subtipo O y puede incluso requerirse un
Western blot especial para el VIH-2.
• Existen casas comerciales que incluyen al menos una
proteína del gen env de VIH-2 lo que permite identificar
las infecciones producidas por dicho tipo vírico.
• Detección viral
• El virus está presente en las muestras de sangre antes de que
se puedan detectar los anticuerpos contra el VIH.
• El primer marcador que aparece tras la infección es el
ARN-VIH que se puede detectar por técnicas de
amplificación aproximadamente a las dos semanas de
la infección, generalmente a los 10-12 días.
Prácticamente al mismo tiempo que el ARN-VIH, se
puede detectar el ADN de VIH integrado en el genoma
celular (ADN proviral).
• La prueba de ARN del VIH en plasma no se considera superior
a las pruebas serológicas de rutina en la mayoría de las
situaciones, sin embargo, el uso de la detección viral como
ensayo de diagnóstico está indicado para:
• Infección por VIH neonatal
• Evaluación de pacientes con una prueba serológica
indeterminada
• La evaluación de la sospecha de infección aguda en alguien
que puede estar en el "período ventana" de seroconversión
del VIH
• Detección de donantes de sangre

6. PRUEBAS DIAGNOSTICAS EN VIH
Con estas técnicas
la sensibilidad
incrementa hasta
un 99,9%, reduce la
posibilidad de un
resultado
falsamente
negativo
La especificidad se sitúa
entre el 99,5% y 99,9% y
se pueden producir falsos
positivos como
consecuencia de
reconocimientos no
específicos

8. Pruebas para la detección de
resistencias a antirretrovirales
• El conocimiento de los mecanismos que llevan a la selección de
resistencias y de sus consecuencias (fracaso terapéutico), así como
del perfil de resistencia de cada fármaco, junto con la posibilidad de
detectar su presencia mediante ensayos que se pueden llevar a
cabo en laboratorios de diagnóstico clínico, han modificado la forma
de utilización de la terapia antirretroviral
• Entre las técnicas disponibles para la detección de resistencias se
encuentran los métodos «fenotípicos», consistentes en enfrentar al
virus a diferentes concentraciones de un determinado fármaco y
establecer el grado de inhibición comparando con cepas control, y
los métodos “genotípicos”, que emplean el análisis de la secuencia
de ácidos nucleicos del virus para detectar la presencia de
mutaciones de resistencia.

9. Indicaciones para la realización de los
estudios de resistencia
• La recomendación de realizar el estudio de resistencia antes de
comenzar el tratamiento antirretroviral, sea una infección
reciente o crónica, tras el fracaso terapéutico, en embarazo o
tras una exposición accidental al caso fuente si no lo posee. No
se recomienda tras suspensión del tratamiento por la reversión
de la mayoría de las mutaciones que no se detectarían al ser
variantes minoritarias.