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Bioquímica de Carbohidratos
1. Que significado tiene el siguiente
resultado en TSI:
A. La bacteria fermenta glucosa
B. La bacteria fermenta los 3
   carbohidratos
C. Produce H2S a partir de la
   peptona
D. A y C
E. A, B y C
2. El resultado para la prueba de Rojo de
metilo mostrado en la figura significa que:

  A.   Fermenta la glucosa
  B.   Produce ácidos y gas
  C.   Produce metilcarbinol
  D.   No fermenta la glucosa
  E.   N.A.
3.   El resultado para la prueba de Voges
Proskauer mostrado en la figura significa que:


  A.   Fermenta la glucosa
  B.   Produce ácidos y gas
  C.   Produce metilcarbinol
  D.   No fermenta la glucosa
  E.   N.A.
4. El resultado para la prueba de Citrato
mostrado en la figura significa que:

  A. No utiliza el citrato
  B. Utiliza el citrato como
     fuente de energía
  C. Fermenta glucosa
  D. Utiliza la peptona del
     medio
  E. N.A.
5.    El resultado para la prueba fermentación de
hidratos de carbono de la figura significa que:


  A. No utiliza el carbohidrato
  B. Lo utiliza oxidándolo
  C. Fermenta el carbohidrato
  D. Es medio de cultivo sin
     inocular
  E. N.A.
6. En una prueba de OF un resultado de
fermentador sería:
A. Tubo abierto amarillo, tubo cerrado
   verde
B. Ambos tubos de color amarillo
C. Ambos tubos de color verde
D. Tubo abierto verde, tubo cerrado azul
E. N.A.
7. En una prueba en LIA un resultado de
K/A significa que la bacteria:


    A.   Descarboxila la lisina
    B.   Fermenta la glucosa
    C.   No utiliza la lactosa
    D.   Es oxidadora
    E.   N.A.
8. El resultado mostrado en la figura para
una prueba de ureasa significa que hay:
A. Fermentación de
   glucosa
B. Producción de
   ureasa
C. Utilización de la
   peptona del medio
D. No hay degradación
   de la urea
E. N.A.
9. El resultado mostrado en la figura para
una prueba de DNAsa significa que:
A. La bacteria es un
   Staphylococcus
B. La bacteria degrada
   el DNA
C. La bacteria no
   degrada el DNA
D. Tanto A como B
E. N.A.
10. En una prueba de desaminación del
triptófano, lo mostrado en la figura es:
A. Un resultado
   negativo
B. Se ha producido
   Indol
C. Se ha producido
   cadaverina
D. Se dio cambio de
   pH
E. N.A.
Pruebas Bioquímicas
•Metabolismo respiratorio
•Metabolismo de carbohidratos
•Metabolismo de Proteínas
•Metabolismo de lípidos
•Metabolismo de Bases nitrogenadas
Metabolismo Respiratorio

Oxidasa

          Catalasa

                OF
CEPA




                                Oxidación       Fermentador
                                                 anaerobio
                                 (Aerobio)
                  37°c X 24 h




Medio de
 Hugh y
Leiffson
                                Fermentación
                                               Ni fermentador
                                   (A.F.)       ni oxidador
Metabolismo de Hidratos de
              Carbono
• Fermentación de azúcares
     • Caldo Base de fermentación
     • TSi o KIA
• Utilización de fuentes de Carbono
     • Citrato
     • Malonato
• Determinación de rutas catabólicas
     • VP-RM
• Catabolismo de Macromoléculas
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Fermentación de hidratos de
        Carbono
TSI
• TSI es un medio de pruebas múltiples
• Medio sólido preparado en tubos que se dejan
  inclinar luego de la esterilización: pico de flauta



                                        Área Aerobia




                                        Área Anaerobia
Compuesto por:
  • Carbohidratos:
         • Glucosa 0.1%
         • Lactosa 1%
         • Sucrosa 1%
  • Indicador de pH
         • Rojo fenol
  • Indicadores de H2S
         • Citrato de amonio férrico
         • Tiosulfato de sodio
  bacteria (acidez) + tiosulfato de sodio = H2S gas
  H2S + iones férricos = Sulfuro ferroso (ppdo. negro)
Resultados:
Reaction
   (slant /
   butt)        Recorded   Colors             Description
Alkaline /
    Acid        K/A        Red / Yellow       Only glucose utilized.**

                                              Glucose and lactose and/or sucrose
Acid / Acid     A/A        Yellow / Yellow       utilized.***

                                              Glucose and lactose and/or sucrose utilized
Acid/Acid       A/A        Yellow/Black          along with H2S production.

                                              Only glucose is utilized along with H2S
Alkaline/Acid   K/A        Red/Black             production.

Alkaline/No                                   No carobohydrates utilized; peptones
    Change      K/NC       Red/Orange             utilized.*
                           Black or Dark
Alkaline/No                    Blue-          No carobohydrates utilized; peptones utilized
    Change      K/NC           Green/Orange       with pigment production
♣ Voges - Praskauer (VP)
    Producción de acetil-metilcarbinol o acetoína

    Complejo rojo con α-naftol y creatina.
♣ Rojo de metilo (RM)
   Producción de ácidos a partir de glucosa.
Utilización del Citrato
Hidrólisis del Almidón
Metabolismo de Proteínas
• Descarboxilación de AAS
     • LIA
     • LOA
• Desaminación de AAS
     • Desaminación de la fenilalanina
     • Producción de Indol
• Proteólisis
     • Licuefacción de la gelatina
     • Hidrólisis de la caseína
Descarboxilación    Desaminación
                                (-)         (+)




             37°C   8h   24h
                                 K/A        K/K          R/A




Medio LIA:
Glucosa 0.1%
L-Lisina
Peptona
                                 K/A+       K/K+         R/A+
LOA

Caldo Descarboxilación:
•Purpura de Bromocresol
•Glucosa
•AAS:
        Lisina
        Ornitina
        Arginina
Desaminación de la Fenilalanina




Medio de cultivo:
Caldo o Agar Fenilalanina                 Ácido
                                          Fenilpirúvico
Reactivo de lectura:
FeCl2 10%
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Licuefacción de la gelatina




                                              Gelatinasa (-)



            37°C x 24 h
            22°C x 3-5 días
                              Refrigeración
Gelatina                      x 10 min        Gelatinasa (+)
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Hidrólisis de la Caseína

                       Halo de
                       proteólisis



    (-)
                 (+)
Metabolismo de Lípidos, Ácidos
nucleicos y otras fuentes nitrogenadas

• Lípidos
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Lipólisis del Agar Yema de Huevo

                           Halo de
                           lipólisis



        (-)
                     (+)
Producción de DNAsas

Bañar con               Halo de
HCl 0,1N                degradación



            (-)
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UREASA

Caldo o Agar urea
• Urea
     • NH3
     • CO2

• Rojo Fenol
     • Amarillo         Ácido
     • Naranja          Neutro
     • Rojo grosella    Básico
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                                                               (-)
Caldo
Nitrato                                       Polvo
                                              de Zn


                                       (-*)
           37°C x 24h


          Reactivos de lectura:
          Α-naftilamina                                         (+)
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Bioquímica de cho

  • 2. 1. Que significado tiene el siguiente resultado en TSI: A. La bacteria fermenta glucosa B. La bacteria fermenta los 3 carbohidratos C. Produce H2S a partir de la peptona D. A y C E. A, B y C
  • 3. 2. El resultado para la prueba de Rojo de metilo mostrado en la figura significa que: A. Fermenta la glucosa B. Produce ácidos y gas C. Produce metilcarbinol D. No fermenta la glucosa E. N.A.
  • 4. 3. El resultado para la prueba de Voges Proskauer mostrado en la figura significa que: A. Fermenta la glucosa B. Produce ácidos y gas C. Produce metilcarbinol D. No fermenta la glucosa E. N.A.
  • 5. 4. El resultado para la prueba de Citrato mostrado en la figura significa que: A. No utiliza el citrato B. Utiliza el citrato como fuente de energía C. Fermenta glucosa D. Utiliza la peptona del medio E. N.A.
  • 6. 5. El resultado para la prueba fermentación de hidratos de carbono de la figura significa que: A. No utiliza el carbohidrato B. Lo utiliza oxidándolo C. Fermenta el carbohidrato D. Es medio de cultivo sin inocular E. N.A.
  • 7. 6. En una prueba de OF un resultado de fermentador sería: A. Tubo abierto amarillo, tubo cerrado verde B. Ambos tubos de color amarillo C. Ambos tubos de color verde D. Tubo abierto verde, tubo cerrado azul E. N.A.
  • 8. 7. En una prueba en LIA un resultado de K/A significa que la bacteria: A. Descarboxila la lisina B. Fermenta la glucosa C. No utiliza la lactosa D. Es oxidadora E. N.A.
  • 9. 8. El resultado mostrado en la figura para una prueba de ureasa significa que hay: A. Fermentación de glucosa B. Producción de ureasa C. Utilización de la peptona del medio D. No hay degradación de la urea E. N.A.
  • 10. 9. El resultado mostrado en la figura para una prueba de DNAsa significa que: A. La bacteria es un Staphylococcus B. La bacteria degrada el DNA C. La bacteria no degrada el DNA D. Tanto A como B E. N.A.
  • 11. 10. En una prueba de desaminación del triptófano, lo mostrado en la figura es: A. Un resultado negativo B. Se ha producido Indol C. Se ha producido cadaverina D. Se dio cambio de pH E. N.A.
  • 12. Pruebas Bioquímicas •Metabolismo respiratorio •Metabolismo de carbohidratos •Metabolismo de Proteínas •Metabolismo de lípidos •Metabolismo de Bases nitrogenadas
  • 14.
  • 15. CEPA Oxidación Fermentador anaerobio (Aerobio) 37°c X 24 h Medio de Hugh y Leiffson Fermentación Ni fermentador (A.F.) ni oxidador
  • 16. Metabolismo de Hidratos de Carbono • Fermentación de azúcares • Caldo Base de fermentación • TSi o KIA • Utilización de fuentes de Carbono • Citrato • Malonato • Determinación de rutas catabólicas • VP-RM • Catabolismo de Macromoléculas • Hidrólisis del almidón
  • 18.
  • 19. TSI • TSI es un medio de pruebas múltiples • Medio sólido preparado en tubos que se dejan inclinar luego de la esterilización: pico de flauta Área Aerobia Área Anaerobia
  • 20. Compuesto por: • Carbohidratos: • Glucosa 0.1% • Lactosa 1% • Sucrosa 1% • Indicador de pH • Rojo fenol • Indicadores de H2S • Citrato de amonio férrico • Tiosulfato de sodio bacteria (acidez) + tiosulfato de sodio = H2S gas H2S + iones férricos = Sulfuro ferroso (ppdo. negro)
  • 21. Resultados: Reaction (slant / butt) Recorded Colors Description Alkaline / Acid K/A Red / Yellow Only glucose utilized.** Glucose and lactose and/or sucrose Acid / Acid A/A Yellow / Yellow utilized.*** Glucose and lactose and/or sucrose utilized Acid/Acid A/A Yellow/Black along with H2S production. Only glucose is utilized along with H2S Alkaline/Acid K/A Red/Black production. Alkaline/No No carobohydrates utilized; peptones Change K/NC Red/Orange utilized.* Black or Dark Alkaline/No Blue- No carobohydrates utilized; peptones utilized Change K/NC Green/Orange with pigment production
  • 22.
  • 23.
  • 24. ♣ Voges - Praskauer (VP)  Producción de acetil-metilcarbinol o acetoína  Complejo rojo con α-naftol y creatina.
  • 25.
  • 26. ♣ Rojo de metilo (RM) Producción de ácidos a partir de glucosa.
  • 29. Metabolismo de Proteínas • Descarboxilación de AAS • LIA • LOA • Desaminación de AAS • Desaminación de la fenilalanina • Producción de Indol • Proteólisis • Licuefacción de la gelatina • Hidrólisis de la caseína
  • 30. Descarboxilación Desaminación (-) (+) 37°C 8h 24h K/A K/K R/A Medio LIA: Glucosa 0.1% L-Lisina Peptona K/A+ K/K+ R/A+
  • 31. LOA Caldo Descarboxilación: •Purpura de Bromocresol •Glucosa •AAS: Lisina Ornitina Arginina
  • 32. Desaminación de la Fenilalanina Medio de cultivo: Caldo o Agar Fenilalanina Ácido Fenilpirúvico Reactivo de lectura: FeCl2 10%
  • 34. Licuefacción de la gelatina Gelatinasa (-) 37°C x 24 h 22°C x 3-5 días Refrigeración Gelatina x 10 min Gelatinasa (+) Nutritiva
  • 35. Hidrólisis de la Caseína Halo de proteólisis (-) (+)
  • 36. Metabolismo de Lípidos, Ácidos nucleicos y otras fuentes nitrogenadas • Lípidos • Lipólisis del agar yema de huevo • Ácidos Nucleicos • DNAsas • Otras fuentes nitrogenadas • Ureasa • Reducción del NO3
  • 37. Lipólisis del Agar Yema de Huevo Halo de lipólisis (-) (+)
  • 38. Producción de DNAsas Bañar con Halo de HCl 0,1N degradación (-) (+)
  • 39. UREASA Caldo o Agar urea • Urea • NH3 • CO2 • Rojo Fenol • Amarillo Ácido • Naranja Neutro • Rojo grosella Básico
  • 40. Reducción del NO3 (-) Caldo Nitrato Polvo de Zn (-*) 37°C x 24h Reactivos de lectura: Α-naftilamina (+) Ácido sulfanílico (+) NO3   NO2 → → → N 2 → NO3 → NO2 Nitrato reductasa