1. FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
FARMACIA Y BIOQUÍMICA
CURSO : INMUNOLOGIA
DOCENTE : BLGO. HENRY SANCHEZ MENDOZA.
TEMA : PRACTICA DE RECUENTRO LEUCOCITARIO
INTEGRANTES :
CIEZA DIAZ MARILI, CELIDA
FLORES HUAMÀN , CLIDE
NEPO CABREJOS ,VERÒNICA
CICLO : VII
CHICLAYO,SEPTIEMBRE DE 2016
2. PRACTICA Nº 01
OBJETIVO
Aprender a hacer recuentos de los distintos tipos de leucocitos, con respecto a su representación
total por mm3 de sangre e interpretar el resultado
FUNDAMENTO
Los leucocitos, también conocidos como glóbulos blancos, son un componente importante de la
sangre y una pieza clave en el sistema inmunológico del cuerpo. Hay cinco tipos diferentes de
leucocitos, cada uno con funciones específicas. Se pueden dividir en dos tipos principales:
los granulocitos y agranulocitos.
Granulocitos
Los granulocitos tienen pequeños gránulos de material dentro de sus membranas celulares, que
desempeñan un papel importante en su función, ya que las células pueden liberar los gránulos para
matar las bacterias, hongos y otros invasores. Hay tres tipos de granulocitos
Eosinófilos: Están diseñados para atacar a los parásitos, y también desempeñan un papel en
las reacciones alérgicas.
3. Neutrófilos: Son los más abundantes y son el primer tipo de célula inmune que responde y
llega al sitio de la infección.
Basófilos: Representan menos del uno por ciento. Desempeñan un papel en la respuesta
inmune.
Agranulocitos
Carecen de gránulos en sus membranas celulares. Los agranulocitos pueden ser dividido en:
Linfocitos: Constituyen alrededor del 20-40% del recuento total de leucocitos, e incluyen:
1. Linfocito B:
2. Linfocito T:
4. Los linfocitos pueden defender el cuerpo contra las infecciones, ya que distinguen las células del
propio cuerpo de las extranjeras.
Monocitos: Conforman del 2 al 9% de la cantidad de glóbulos blancos, y están diseñados
para presentar antígenos a los linfocitos para estimular la respuesta inmune. Estas células
eventualmente maduran a macrófagos leucocitos especializados que tragan material extraño
para neutralizarlo.
MATERIALES
Microscopio
Lanceta o aguja
Alcohol , algodón
Aceite de inmersión
Dos portaobjetos
5. Procedimiento
Como realizar un Frotis y diferenciar Células con la ayuda de la tinción de Wright
1. Realizar el frotis por la técnica de los dos portaobjetos que se describe en seguida:
a. Depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un portaobjetos limpio y libre de grasa.
b. Con el borde de otro portaobjetos a 45º, tocar la gota, esperar a que la sangre se distribuya por
capilaridad (sin permitir que la sangre toque los extremos del portaobjetos que se desliza) y después
deslizar suavemente pero con suficiente rapidez el portaobjetos sobre el otro en sentido longitudinal
hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del primer portaobjetos.
c. El grosor de la extensión sanguínea puede variar según sea el ángulo que se forma entre los dos
portaobjetos, si es superior a 45º, la extensión será gruesa y corta; si es inferior a 45º será larga y
fina.
6. d. Dejar secar el frotis de 15 a 20 minutos a temperatura ambiente en posición horizontal.
TINCIÓN DE WRIGHT
1. Colocar los extendidos en un plano horizontal en el puente para tinción con la extensión de
sangre hacia arriba
2. Cubrir toda la superficie de la preparación con Wright. Esperar de 2”
3. Agregar un volumen igual de solución amortiguadora (pH 6.4) o en su defecto agua de destilada
de pH 7 con resultados igualmente buenos. La cantidad de agua o buffer debe ser suficiente para
cubrir la lámina completamente, pero no en exceso.
4. Soplar suavemente el extendido para mezclar hasta obtener una película uniforme de apariencia
metálica - verdosa. Esperar de 7 a 15 minutos (dependiendo de la maduración del colorante).
5. Lavar el colorante con agua corriente manteniendo los extendidos en posición horizontal. El
lavado debe ser rápido (5 - 30 segundos) para evitar la precipitación del colorante sobre la
superficie del extendido.
6. Dejar secar alaire.
7. Quitar con una gasa o algodón humedecido en alcohol, el colorante que queda adherido al dorso
del portaobjetos, teniendo cuidado de que el alcohol no tenga contacto con la superficie coloreada.
Podemos observar unas muestras del frotis y tinción
7. RESULTADO
Barremos la muestra en busca de leucocitos y vamos anotando cada tipo que nos
encontremos, hasta contar un máximo de unidades. Nosotras contamos al 50 .
TIPO DE
LEUCOCITOS
Leucocitos encontrados en
la observados
%
LINFOCITOS 13 26
MONOCITOS 4 8
SEGMENTADOS 31 62
EOSINOFILOS 2 4
BASOFILOS 0 0
ABASTONADOS 0 0
TOTAL 50 100%
Conclusión
Con ayuda de esta práctica pudimos diferenciar y conocer los diferentes tipos de leucocitos
además de saber los niveles normales de cada uno de estos y así posteriormente utilizar este
conocimiento en la realización análisis e identificar si estos niveles son o no correctos y
analizarla en el microscopio realizando un conteo de células (glóbulos blancos).