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EXPERIENCIA DE CULTIVO
IN VITRO DEL GERANIO
Daniel Felipe Zapata Bustamante
Natalia Johanna Quintero Valencia
Duvan Alexis cardona
PROCESO CULTIVO IN VITRO
1. Planta madre
2. Establecimiento del
cultivo in vitro
3. Asepsia
4. Proliferación
5. Enraizamiento /
Acondicionamiento
6. Aclimatación
http://cultivo-invitro-santiso.blogspot.com/
¿PORQUE LO REPRODUCEN?
El cultivo in vitro del
geranio es más
utilizado para la
obtención de
metabolitos
secundarios con fines
medicinales a partir
de la inducción para la
formación de raíces
de donde los
obtienen.
http://www.laestrellaquenosguia.com/index.php?option=com_content&view=ar
ticle&id=170:mi-otra-aficion-ix&catid=1:latest-news
TEJIDOS VEGETALES
Se utilizaron como explantes discos de
hoja de 0,8cm2, segmentos nodales de 1
cm y microesquejes de 1,5 a 2 cm.
http://www.canstockphoto.es/geranio-planta-tallo-hojas-11018901.html
PROTOCOLO DE DESINFECCIÓN
http://otri.datacom.st/cien_biotec/microbios/equipos.htm
Desinfección de explantes:
• Lavado con agua y jabón
comercial
• Lavado con solución povidine
(15 min)
• Lavado con solución fungicida
(VITAVAX, 30 min)
• Lavado con cloro comercial
(20%) y Tween 20
• Tres enjuagues con agua
destilada estéril bajo cámara
de flujo laminar.
MEDIOS DE CULTIVO
Los explantes se cultivaron en los
medios conformados por las sales
Murashige y Skoog (MS, 1962)
suplementados con tiamina (0,4 mg/l),
mio-inositol (100 mg/l), ácido ascórbico
100 mg/l), cisteína (50 mg/l), sacarosa
(30 g/l), y solidificado con agar (8 g/l).
MEDIOS DE CULTIVO
Los tratamientos empleados fueron:
• Segmentos de hojas (SH): Cinetina (K,
5mg/l) + Ácido Naftaleno Acético (ANA, 1
mg/l).
• Segmentos nodales (SN): K (8 mg/l) +
ANA (1 mg/l)
• Micro-esquejes
- ME1: BA 6-Bencilaminopurina (0,5 mg/l),
- ME2: BA (2 mg/l) + Ácido Indol Acético
(AIA, 0,2 mg/l)
RESULTADOS
Los explantes probados mostraron la formación de
callo a la primera semana de cultivo; a los 3 meses
se observo el desarrollo de raíces en los diferentes
explantes.
TRATAMIENTOS SH SN ME1 ME2
N° de explantes 60 52 34 20
% Explantes con callo 73 13 9 15
% Callo con formación de
raíces
23 3 100 33
RESULTADO
Además mostraron que
para inducir la
formación de callo en
los explantes se
necesita colocar bajas
concentraciones de
auxina frente a la
concentración de
citoquinina.
Bibliografía
• Como preparar un medio de cultivo Murashige-Skoog
9/01/2011
http://green-eaters.blogspot.com/2011/09/como-preparar-
un-medio-de-cultivo.html
• Practicas de biotecnología vegetal
http://ocw.uniovi.es/pluginfile.php/2621/mod_resource/co
ntent/1/practicas/Cuaderno_Pract_Biotec_11_OCW.pdf
Organogénesis de raíces en geranio. Sandra Alva T.*, Maira
Oropeza C.* y Teresa Edith Vargas C.
• http://www.sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_ci/Agrono
mia%20Tropical/at5604/pdf/sandra_a.pdf

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Cultivo in vitro del geranio

  • 1. EXPERIENCIA DE CULTIVO IN VITRO DEL GERANIO Daniel Felipe Zapata Bustamante Natalia Johanna Quintero Valencia Duvan Alexis cardona
  • 2. PROCESO CULTIVO IN VITRO 1. Planta madre 2. Establecimiento del cultivo in vitro 3. Asepsia 4. Proliferación 5. Enraizamiento / Acondicionamiento 6. Aclimatación http://cultivo-invitro-santiso.blogspot.com/
  • 3. ¿PORQUE LO REPRODUCEN? El cultivo in vitro del geranio es más utilizado para la obtención de metabolitos secundarios con fines medicinales a partir de la inducción para la formación de raíces de donde los obtienen. http://www.laestrellaquenosguia.com/index.php?option=com_content&view=ar ticle&id=170:mi-otra-aficion-ix&catid=1:latest-news
  • 4. TEJIDOS VEGETALES Se utilizaron como explantes discos de hoja de 0,8cm2, segmentos nodales de 1 cm y microesquejes de 1,5 a 2 cm. http://www.canstockphoto.es/geranio-planta-tallo-hojas-11018901.html
  • 5. PROTOCOLO DE DESINFECCIÓN http://otri.datacom.st/cien_biotec/microbios/equipos.htm Desinfección de explantes: • Lavado con agua y jabón comercial • Lavado con solución povidine (15 min) • Lavado con solución fungicida (VITAVAX, 30 min) • Lavado con cloro comercial (20%) y Tween 20 • Tres enjuagues con agua destilada estéril bajo cámara de flujo laminar.
  • 6. MEDIOS DE CULTIVO Los explantes se cultivaron en los medios conformados por las sales Murashige y Skoog (MS, 1962) suplementados con tiamina (0,4 mg/l), mio-inositol (100 mg/l), ácido ascórbico 100 mg/l), cisteína (50 mg/l), sacarosa (30 g/l), y solidificado con agar (8 g/l).
  • 7. MEDIOS DE CULTIVO Los tratamientos empleados fueron: • Segmentos de hojas (SH): Cinetina (K, 5mg/l) + Ácido Naftaleno Acético (ANA, 1 mg/l). • Segmentos nodales (SN): K (8 mg/l) + ANA (1 mg/l) • Micro-esquejes - ME1: BA 6-Bencilaminopurina (0,5 mg/l), - ME2: BA (2 mg/l) + Ácido Indol Acético (AIA, 0,2 mg/l)
  • 8. RESULTADOS Los explantes probados mostraron la formación de callo a la primera semana de cultivo; a los 3 meses se observo el desarrollo de raíces en los diferentes explantes. TRATAMIENTOS SH SN ME1 ME2 N° de explantes 60 52 34 20 % Explantes con callo 73 13 9 15 % Callo con formación de raíces 23 3 100 33
  • 9. RESULTADO Además mostraron que para inducir la formación de callo en los explantes se necesita colocar bajas concentraciones de auxina frente a la concentración de citoquinina.
  • 10. Bibliografía • Como preparar un medio de cultivo Murashige-Skoog 9/01/2011 http://green-eaters.blogspot.com/2011/09/como-preparar- un-medio-de-cultivo.html • Practicas de biotecnología vegetal http://ocw.uniovi.es/pluginfile.php/2621/mod_resource/co ntent/1/practicas/Cuaderno_Pract_Biotec_11_OCW.pdf Organogénesis de raíces en geranio. Sandra Alva T.*, Maira Oropeza C.* y Teresa Edith Vargas C. • http://www.sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_ci/Agrono mia%20Tropical/at5604/pdf/sandra_a.pdf