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Pseudomonas
Vibrio
Brucella

    Dra. Belem Celiz Nicho
    Microbiología 2012-II
    Facultad de Medicina Humana
    Universidad de San Martín de Porres
Pseudomonas

• Bacilos Gram negativo
• Rectos: curvados
  -alargados.
• Móvil: Flagelo polar
• 37-42 °C
• No fermentadores.
• Oxidasa positivo.
• Aerobios estrictos
• Crecen anaerobiosis
  (nitratos)
Cultivo




Colonias de P. aeruginosa       Piocianina
Pseudomonas de importancia clínica
   Homología rARN/ ADN
   I Grupo fluorescente    P. aeruginosa
                           P. fluoresecntis
                           P. butida
   Grupo No fluorescente   P. mendocina
   II                      Burkholderia pseudomaller
                           B. mallei
                           Raistonia picketti
   III                     Especies de comamonas
                           Especies de acidovorax
   IV                      Especies de brevudimonas

   V                       Stentrophomonas maltophila
Factores de virulencia
ADHESINAS-MOTILIDAD:
• Flagelo- Pili ( fimbrias)


ALGINATO:
• Expopolisacarido
  (colonia mucoide)
• Antifagocítico
• Resistencia bacteriana


LPS: Exotoxina
Factores de virulencia- Toxinas
Exotoxina A:
•Necrosis tisular
•Pioverdina : Sideróforo


Daño tisular
•Piocianina: Pigmento azul :
radicales tóxicos O2
•LasA – Las B: Degrada elastina
•Proteasa alcalina
•Fosfolipasa C


 Exoenzimas S y T:
•Daño celular - diseminación
Resistencia a antibacterianos




   Mutación de las porinas
Clínica
Pulmonar              Asintomático-bronconeumonía
                      necrosante (Fibrosis quística-
                      cuadro crónico)
Heridas quemaduras    Pus verdoso
Foliculitis           Agua contaminada
Osteocondritis        Herida
Aparato urinario      Sondas por período prolongado
Oído                  Otitis externa (oído nadador)
                      Otitis maligna (diabéticos)
Ojo                   Úlcera corneal
Bacteriemia
Septicemia
Epidemiología
• Patógenos oportunistas.
• Resiste: antibióticos y desinfectantes.
• Objetos húmedos
• Soluciones y medicaciones.
• Infecciones intrahospitalarias: UCI (ventiladores
  mecánicos).
• Enfermedad pulmonar obstructiva crónica
  (EPOC).
• Fibrosis quística.
Laboratorio
Microscopía                   Cultivo




                               Agar Sangre




 Tinción Gram

                              Agar Mac Conkey
Laboratorio
• Característico : Olor dulce (uva)


• Otras Pseudomonas:
• Pruebas bioquímicas
• Sensibilidad a antibióticos, análisis deADN
Vibrio
   • Bacilo curvo (“coma”)
   • Flagelo polar (móvil)
   • 2-4 µm
   • Crecen en presencia
    de sal (excepto V.
    cholerae)
Cultivo
• 37°C
• Agar Tiosulfato-citrato-
  bilis-sacrosa (TCBS)
• Colonias amarillas
• Oxidasa positivos
• pH amplio
Vibriones de importancia médica
    Microorganismo                    Enfermedad
V. cholerae serogrupos      Cólera
O1 y O139
V. cholerae serogrupos      Diarrea similar a cólera , leve,
no O1/ no O139              Extraintestinales : poco
                            frecuentes.
V. parahaemolyticus         Gastroenteritis
V. vulnificus , V. mimicus, Heridas ,oído, tejidos blandos y
V. hollisae                 otros cuadros extraintestinales.
                            Poco comunes
Estructura antigénica- Clasificación
                             Lípido “A”         ENDOTOXINA


LIPOPOLISACÁRIDO             PS central

                             PS “O”             ESPECIFICIDAD

      Vibrio          SEROGRUPO              SEROTIPOS       BIOTIPOS
    V. cholerae        O1 y O139          O1 :INABA-OGAWA-   CLÁSICO
                      Cólera (tóxina)          HIKOJIMA       El Tor
                      No O1/ No O139
                       Similar cólera
V. parahaemolyticus   13 serotipos “O”

   V. vulnificus      7 serotipos “O”
Patogenia
  Bacteriófago CTXØ                    Pilus corregulado
                         Se une
      (ctxA-ctxB)                      por toxina (tcp)



                        ENTRADA

                      UNIÓN A GENOMA         •   Enterotoxina accesoria (ace)
                                             •   T. Zónula ocludens (zot)
                          (locus )           •   Factor colonización (cep)




                  SÍNTESIS TOXINA
Toxina del cólera: Mecanismo de
             acción
Patogenia : Otros vibrios

V. parahaemolyticus • Hemolisina TE directa (TDH) :
                      Kanagawa
                    • Enterotoxina : NaCl
                    • β-hemólisis agar sangre

V. cholerae no O1   • Cápsula acídica PS
V. vulnificus       • Expansión: extraintestinales
Clínica V. cholerae O1

• Asintomático hasta diarrea
  mortal
• PI: 2-3 días
• Inicio brusco
• Diarrea “agua de arroz” :
  • Moco
  • Células epiteliales
  • Gran número de bacterias
• Deshidratación severa
Clínica
V. cholerae O139    Similar a V. cholerae O1
V. parahaemolyticus Gastroenteritis (similar cólera)
                    PI: 5-72h
                    Diarrea explosiva (sangre-
                    leucocitos)
                    Cefalea-espasmos
V. vulnificus         Heridas
                      Necrosis
Epidemiología
• 6 pandemias : 1871-1923 (V. chloreae O1 clásico)
• 7ma : 1961 (V. cholerae El Tor)
       1991: Perú y América del Sur
• 1992 V. cholerae O139 (India) ¿8 va pandemia?


• Propagación : agua – alimentos contaminados

                   Acidez      1010 Agua – líquidos
                   normal       102      Alimentos

                    Acidez            102 - 105
                  disminuida
Epidemiología




3 a 5 millones de casos de cólera y entre 100 000 a 120 000 muertes
(OMS)
Laboratorio
         Microscopía                     Cultivo
                           •Muestras fase inicial
•Diarrea : No confiable
                           •Transporte: M. Cary Blair
•Piel : Útil
                           •Refrigeración
•Bacilos curvos Gram       •Agar sangre-Mac Conkey
negativos                  •Peptona
                           •TCBS
Laboratorio
Pruebas específicas:
•Aglutinación: Antisuero polivalentes anti O1 o O139


Vibrios halófilos: Medios complementados con NaCl.

Tratamiento y Prevención:
Vacuna LPS o suspensión densa vibriones (corto tiempo)
80% de los casos : responde a rehidratación oral (OMS)
Brucella




• Cocobacilos Gram negativos intracelulares
• Inmóviles no encapsulados
• 0,5-0,6 a 1,5 µm (1,2)
• 4 especies patógenas:
• B. melitensis, B. suis, B.abortus,B. canis
Brucella : Cultivo
• Crecimiento lento (7 d)
• Medios complejos
• Aerobio estricto
• B. abortus (CO2)
• Catalasa-oxidasa
• No fermenta CH
• Sensibles a calor y
 acidez
Estructura

• Pared celular :
• LPS: Antígeno O
• 2 variantes antigénicas
  mayores: Antígenos A
  y M.
• Colonias
• Lisas: Virulentas
• Rugosas : avirulentas
Patogenia
                                      Intestinal : Leche / Queso
         INGRESO                            Piel : producto
                                            contaminados
                                           Mucosas : Gotas
Macrófagos-monocitos: Replicación
Anula fagolisosomas                     Ganglios linfáticos
Supresión FNT-α
Producción catalasa
Citocromo oxidasa: Radicales
                                             Sangre



                                    SISTEMA RETICULOENDOTELIAL
Clínica
• Depende del patógeno
• PI: 1-3 semanas
• Cuadro agudo: 50%
• Inicio: inespecífico
• Dolor articular, fiebre (ondulante),sudoración vespertina,
 mialgias, debilidad.
           B. abortus        Leve
           B. canis          Leve
           B. suis           Crónica, supurativa, lesiones
                             destructivas.
           B. melitensis     Gran número bacterias
                             Complicaciones
Epidemiología
• Animales : eritritol: mama, útero, placenta

  B. abortus        Vacunos
  B. canis          Perro , zorros, coyotes
  B. suis           Cerdos
  B. melitensis     Cabras, ovejas
• Riesgo: laboratorio
• Intestinal : Leche no pasteurizada y derivados.
  Piel : producto contaminados (pieles)
• Enfermedad ocupacional ( hasta 1980)
• Contacto directo
• Universal : endémica América Latina
Laboratorio
• Muestras: Sangre
• Hemocultivo - mielocultivo
• Microscopía: Poca información
• Cultivos: Agar sangre - Mac Conkey
• Crecimiento lento (3días)
• Hemocultivo: 2 semanas : para reportar “negativo”
• Identificación:
• Morfología cepa
• Oxidasa- ureasa positivas
• Anticuerpos : Todas reaccionan excepto B. canis
Laboratorio

• Detección anticuerpos
• Inicio IgM
• Luego IgG, IgA
• Normal: 1/160: Aumentos 4 veces: sospecha
• Antígeno: SAT (B. abortus )

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  • 1. Pseudomonas Vibrio Brucella Dra. Belem Celiz Nicho Microbiología 2012-II Facultad de Medicina Humana Universidad de San Martín de Porres
  • 2. Pseudomonas • Bacilos Gram negativo • Rectos: curvados -alargados. • Móvil: Flagelo polar • 37-42 °C • No fermentadores. • Oxidasa positivo. • Aerobios estrictos • Crecen anaerobiosis (nitratos)
  • 3. Cultivo Colonias de P. aeruginosa Piocianina
  • 4. Pseudomonas de importancia clínica Homología rARN/ ADN I Grupo fluorescente P. aeruginosa P. fluoresecntis P. butida Grupo No fluorescente P. mendocina II Burkholderia pseudomaller B. mallei Raistonia picketti III Especies de comamonas Especies de acidovorax IV Especies de brevudimonas V Stentrophomonas maltophila
  • 5. Factores de virulencia ADHESINAS-MOTILIDAD: • Flagelo- Pili ( fimbrias) ALGINATO: • Expopolisacarido (colonia mucoide) • Antifagocítico • Resistencia bacteriana LPS: Exotoxina
  • 6. Factores de virulencia- Toxinas Exotoxina A: •Necrosis tisular •Pioverdina : Sideróforo Daño tisular •Piocianina: Pigmento azul : radicales tóxicos O2 •LasA – Las B: Degrada elastina •Proteasa alcalina •Fosfolipasa C Exoenzimas S y T: •Daño celular - diseminación
  • 7. Resistencia a antibacterianos Mutación de las porinas
  • 8. Clínica Pulmonar Asintomático-bronconeumonía necrosante (Fibrosis quística- cuadro crónico) Heridas quemaduras Pus verdoso Foliculitis Agua contaminada Osteocondritis Herida Aparato urinario Sondas por período prolongado Oído Otitis externa (oído nadador) Otitis maligna (diabéticos) Ojo Úlcera corneal Bacteriemia Septicemia
  • 9. Epidemiología • Patógenos oportunistas. • Resiste: antibióticos y desinfectantes. • Objetos húmedos • Soluciones y medicaciones. • Infecciones intrahospitalarias: UCI (ventiladores mecánicos). • Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). • Fibrosis quística.
  • 10. Laboratorio Microscopía Cultivo Agar Sangre Tinción Gram Agar Mac Conkey
  • 11. Laboratorio • Característico : Olor dulce (uva) • Otras Pseudomonas: • Pruebas bioquímicas • Sensibilidad a antibióticos, análisis deADN
  • 12. Vibrio • Bacilo curvo (“coma”) • Flagelo polar (móvil) • 2-4 µm • Crecen en presencia de sal (excepto V. cholerae)
  • 13. Cultivo • 37°C • Agar Tiosulfato-citrato- bilis-sacrosa (TCBS) • Colonias amarillas • Oxidasa positivos • pH amplio
  • 14. Vibriones de importancia médica Microorganismo Enfermedad V. cholerae serogrupos Cólera O1 y O139 V. cholerae serogrupos Diarrea similar a cólera , leve, no O1/ no O139 Extraintestinales : poco frecuentes. V. parahaemolyticus Gastroenteritis V. vulnificus , V. mimicus, Heridas ,oído, tejidos blandos y V. hollisae otros cuadros extraintestinales. Poco comunes
  • 15. Estructura antigénica- Clasificación Lípido “A” ENDOTOXINA LIPOPOLISACÁRIDO PS central PS “O” ESPECIFICIDAD Vibrio SEROGRUPO SEROTIPOS BIOTIPOS V. cholerae O1 y O139 O1 :INABA-OGAWA- CLÁSICO Cólera (tóxina) HIKOJIMA El Tor No O1/ No O139 Similar cólera V. parahaemolyticus 13 serotipos “O” V. vulnificus 7 serotipos “O”
  • 16. Patogenia Bacteriófago CTXØ Pilus corregulado Se une (ctxA-ctxB) por toxina (tcp) ENTRADA UNIÓN A GENOMA • Enterotoxina accesoria (ace) • T. Zónula ocludens (zot) (locus ) • Factor colonización (cep) SÍNTESIS TOXINA
  • 17. Toxina del cólera: Mecanismo de acción
  • 18. Patogenia : Otros vibrios V. parahaemolyticus • Hemolisina TE directa (TDH) : Kanagawa • Enterotoxina : NaCl • β-hemólisis agar sangre V. cholerae no O1 • Cápsula acídica PS V. vulnificus • Expansión: extraintestinales
  • 19. Clínica V. cholerae O1 • Asintomático hasta diarrea mortal • PI: 2-3 días • Inicio brusco • Diarrea “agua de arroz” : • Moco • Células epiteliales • Gran número de bacterias • Deshidratación severa
  • 20. Clínica V. cholerae O139 Similar a V. cholerae O1 V. parahaemolyticus Gastroenteritis (similar cólera) PI: 5-72h Diarrea explosiva (sangre- leucocitos) Cefalea-espasmos V. vulnificus Heridas Necrosis
  • 21. Epidemiología • 6 pandemias : 1871-1923 (V. chloreae O1 clásico) • 7ma : 1961 (V. cholerae El Tor) 1991: Perú y América del Sur • 1992 V. cholerae O139 (India) ¿8 va pandemia? • Propagación : agua – alimentos contaminados Acidez 1010 Agua – líquidos normal 102 Alimentos Acidez 102 - 105 disminuida
  • 22. Epidemiología 3 a 5 millones de casos de cólera y entre 100 000 a 120 000 muertes (OMS)
  • 23. Laboratorio Microscopía Cultivo •Muestras fase inicial •Diarrea : No confiable •Transporte: M. Cary Blair •Piel : Útil •Refrigeración •Bacilos curvos Gram •Agar sangre-Mac Conkey negativos •Peptona •TCBS
  • 24. Laboratorio Pruebas específicas: •Aglutinación: Antisuero polivalentes anti O1 o O139 Vibrios halófilos: Medios complementados con NaCl. Tratamiento y Prevención: Vacuna LPS o suspensión densa vibriones (corto tiempo) 80% de los casos : responde a rehidratación oral (OMS)
  • 25. Brucella • Cocobacilos Gram negativos intracelulares • Inmóviles no encapsulados • 0,5-0,6 a 1,5 µm (1,2) • 4 especies patógenas: • B. melitensis, B. suis, B.abortus,B. canis
  • 26. Brucella : Cultivo • Crecimiento lento (7 d) • Medios complejos • Aerobio estricto • B. abortus (CO2) • Catalasa-oxidasa • No fermenta CH • Sensibles a calor y acidez
  • 27. Estructura • Pared celular : • LPS: Antígeno O • 2 variantes antigénicas mayores: Antígenos A y M. • Colonias • Lisas: Virulentas • Rugosas : avirulentas
  • 28. Patogenia Intestinal : Leche / Queso INGRESO Piel : producto contaminados Mucosas : Gotas Macrófagos-monocitos: Replicación Anula fagolisosomas Ganglios linfáticos Supresión FNT-α Producción catalasa Citocromo oxidasa: Radicales Sangre SISTEMA RETICULOENDOTELIAL
  • 29. Clínica • Depende del patógeno • PI: 1-3 semanas • Cuadro agudo: 50% • Inicio: inespecífico • Dolor articular, fiebre (ondulante),sudoración vespertina, mialgias, debilidad. B. abortus Leve B. canis Leve B. suis Crónica, supurativa, lesiones destructivas. B. melitensis Gran número bacterias Complicaciones
  • 30. Epidemiología • Animales : eritritol: mama, útero, placenta B. abortus Vacunos B. canis Perro , zorros, coyotes B. suis Cerdos B. melitensis Cabras, ovejas • Riesgo: laboratorio • Intestinal : Leche no pasteurizada y derivados. Piel : producto contaminados (pieles) • Enfermedad ocupacional ( hasta 1980) • Contacto directo • Universal : endémica América Latina
  • 31. Laboratorio • Muestras: Sangre • Hemocultivo - mielocultivo • Microscopía: Poca información • Cultivos: Agar sangre - Mac Conkey • Crecimiento lento (3días) • Hemocultivo: 2 semanas : para reportar “negativo” • Identificación: • Morfología cepa • Oxidasa- ureasa positivas • Anticuerpos : Todas reaccionan excepto B. canis
  • 32. Laboratorio • Detección anticuerpos • Inicio IgM • Luego IgG, IgA • Normal: 1/160: Aumentos 4 veces: sospecha • Antígeno: SAT (B. abortus )