Presentación que contiene información necesaria para la identificación microbiológica de algunas de las bacterias patógenas del tracto gastrointestinal.
2. IntroducciónEnf.gastrointestinales
Primeras causas de
consulta médica y de
las principales causas
de muerte en México
y en el mundo.
Agentesetiológicos
- Bacterias
- Virus
- Parásitos
Enterobacterias
Saprofitos en el
tubo digestivo,
forma parte de la
microbiota
intestinal normal
del hombre.
3. Bacterias de Importancia Clínica:
Enterobacteriaceae
Características
Gram –
Bacilos, cocos y cocobacilos
Fácil cultivo
Oxidasa negativo (S/Cyt oxidasa)
Catalasa positivos
Temperatura óptima 22 – 37° C
Reducen Nitrato a Nitrito
Anaeróbicos facultativos
Fermentadores de carbohidratos en anaerobiosis
con o sin gas +
Son oxidadores de sustratos en aerobiosis
Con o sin flagelo
Sin esporas
Con o sin producción de toxinas
Diagnóstico
No selectivos
• Agar Sangre de Cordero al 5%
• Agar Chocolate
Selectivos-Diferenciales
• Agar MacConkey
• Agar Eosina y Azul de Metileno (EMB)
Altamente Selectivos
• Agar Entérico Hektoen
• Agar Xilosa-Lisina-Desoxicolato (XLD)
• Agar Salmonella-Shigella (SS)
IMViC
• Indol, Rojo de Metilo, Voger Proskauer y
Citratos
4.
5. E. coli
• Bacilo Gram –
• 0.5μ - 3μ
• Fermenta glucosa y lactosa con
producción de gas.
• Anaerobio facultativo
Prueba +/-
Oxidasa -
Catalasa +
Citrato -
Voges Proskauer -
Movilidad +
Indol +
EMB Hektoen McConkey XLD Salmonella - Shigella
Crecimiento de bueno a
excelente; colonias color
negro azulado con brillo
verde metálico.
Inhibición parcial o
completa; colonias
amarillo anaranjado,
puede haber
precipitaciones biliares
alrededor, halos de color
salmón a naranja
Crecimiento; colonias de
color rosa.
Inhibición parcial a
completa; colonias de
amarillas a rojo
amarillentas.
Inhibición de parcial a
completa; colonias de
color rojo carmesí con
precipitación
6. Salmonella typhimurium
• Bacilos Gram-
• 0.7 – 1.5 μ x 2 -5 μ
• No fermentadores de lactosa
• Anaerobios facultativos
Prueba +/-
Oxidasa -
Catalasa +
Citrato +
Indol -
Rojo de metilo +
Voges Proskauer -
EMB Hektoen McConkey XLD Salmonella - Shigella
Crecimiento bueno a
excelente; colonias
gris claro a ámbar
Crecimiento bueno a
excelente; colonias
de color verde a azul
verdoso con centro
negro
Crecimiento;
colonias de incoloras
a color beige.
Crecimiento de
bueno a excelente;
colonias rojas con
centro de color
negro.
Crecimiento de
bueno a excelente;
colonias de color
beige, con centros
blancos.
7. Shigella flexneri
• Gram –
• No fermentadoras de lactosa
• Anaerobias facultativas
Prueba +/-
Oxidasa -
Catalasa +
Citrato -
Voges Proskauer -
Movilidad +
Indol +
Rojo de metilo +
EMB Hektoen McConkey XLD Salmonella - Shigella
Crecimiento
adecuado a
excelente; colonias
desde incoloras
hasta ámbar claro.
Crecimiento bueno a
excelente; colonias
color verde claro.
Crecimiento;
colonias incoloras.
Crecimiento bueno a
excelente; colonias
de color rojo.
Crecimiento de
bueno a excelente;
colonias color rosa
claro a incoloras.
8.
9. Bacillus cerus
• Gram +
• Bacilos cortos en cadena
• Esporas elipsoidales
centrales o periféricas
Prueba +/-
Ancho de la célula >1 um
Deformación por
espora
-
Lecitinasa +
Voges Proskauer +
Glucosa con gas -
Manitol -
Xilosa -
Anaerobiosis +
Citrato +
Indol -
Movilidad +
Sensible a penicilina -
Agar sangre Agar hierro triple
azúcar, urea o nutritivo
con 5 mg MnSO4
Agar Bacillus cerus
Colonias β
hemolíticas
blancas,
grandes y
planas
Crecimiento para la
inducción de esporas
Colonias de 5 mm,
rojas, rugosas y secas
con un halo de
precipitación de
manitol (rosa-púrpura)
10. Clostridium difficile
• Gram +
• Bacilos anaerobio
• Esporas ovaladas subterminales o libres
• Tcd A y B
Prueba +/-
Fluoresceina +
Hidrolisis de gelatina + (débil)
Hidrolisis de escualina +
Lipasa -
Lecitinasa -
Manitol +
Paracresol +
BHI Agar sangre Agar Cicloserina Cefoxitina
Fructosa (CCFA)
Crecimiento para
la detección de
citotoxicidad
Colonias no hemolíticas
de color amarillento a
grisáceo, mate, planas
grandes e irregulares
Colonias de 2 – 5 mm color
blanco amarillento, sin
hemólisis, planas o
levemente convexas,
circulares o rizoides, opacas
y de aspecto granuloso
11. Plesiomonas shigelloides
• Gram –
• Bacilo recto redondeado
• Motilidad (flagelos polares)
Hektoen, McConkey, XLD
Prueba +/-
Glucosa +
Inositol +
Manitol -
Lactosa -
Oxidasa +
Indol +
Arginina -
Lisina +
Ornitina +
ADNasa y proteasas -
Voges Proskauer -
Agar sangre
Colonias no
hemolíticas de
1.5 mm grises,
brillantes, lisas y
opacas con
elevación céntrica
13. Vibrio cholerae
• Enfermedades transmitidas por alimentos (ETA’s) -> tipo infeccioso y de origen químico, como las
intoxicaciones.
• Bacilo gram negativo
• +100 especies descritas de bacilos curveados -> 3
importantes para SH.
• V. cholerae
• V. parahaemolyticus
• V. vulniticus
• T. optima de 14°C-40 °C
• pH optimo de 6.5-9
• Pared celular con lipopolisacaridos (Lip A,
polisacárido central, y lipopolisacarido O)
14. • Crece en diversos medios, el aislamiento a partir de muestras fecales se realiza con
mayor facilidad empleando medios selectivos.
• Agua peptonada alcalina (APW)-> caldo de enriquecimiento.
• Agar con tiosulfato, citrato, sales biliares y sacarosa (TCBS) -> Mselec.
• Vibrio spp, crece 6-8 hras.
• Medios de enriquecimiento: Monsur que contiene tripticasa, telurito de
potasio y taurocolato de sodio (sales biliares).
15.
16. • TCBS -> MEDIO PREFERENTE, fácil, no requiere esterilizarse. Vida de almacenamiento
corto** (3-5 días)
17. Agar taurocolato-telurlto-gelatlna (agar TTG 0 medlo de Monsur
• Agar diferencial y selectivo. vida de almacenamiento larga después de preparado, y se
pueden utilizar las colonias tomadas directamente del medio para efectuar las pruebas
de la oxidasa y de aglutinación.
• No se expende en el comercio y que las colonias tienden a ser mas pequeñas (1 a 2 mm)
que las cultivadas en agar TCBS.
• EI crecimiento de un día para otro (18 a 24 horas) -> colonias pequeñas y opacas con el
centro ligeramente oscuro.
18.
19. Yersinia enterocolitica
• Enterobacteriaceae.
• Es un bacilo gram negativo, no esporulado,
capaz de crecer dentro de una amplia escala
de temperaturas, desde -1 °C hasta +40 °C.
• Se multiplica en las mucosas y se puede
transmitir a través del contacto con
animales, ingestión de productos
alimenticios o contaminados o agua
contaminada.
• Temp: óptima:29°C Max:42°C
• Virulencia: cepas patogenas: secretan
una enterotoxina resistente al calor e
invaden el intestino delgado.
Prueba +/-
sacarosa +
Ureasa -+
Indol +
Rojo de metilo +
Ornitina +
Voges Proskauer +
20. Yersinia Selective Agar (CIN Agar)
• Alternativa al agar MacConkey y otros medios
comúnmente utilizados para el aislamiento de
Yersinia enterocolitica,.
• Se ha determinado que este medio es superior a los
agares MacConkey, SS, CAL.
21. Campylobacter
• familia Campylobacteraceae.
• Las especies de este género
son bacilos Gram negativo con forma de coma y
móviles por la presencia de uno o
dos flagelos polares. Miden entre 0,5 y
5 micras de largo por 0,2 a 0,5 micras de ancho,
tomando forma cocoide en cultivos antiguos o
expuestas de forma prolongada al aire.
22.
23. • Benenson AS, Islam MR, Greenough WB. Rapid identification of Vibrio cholerae by darkfield
microscopy. Bull WHO 1964; 30:827-831.
• Shaffer N, Silva do Santos E, Andreason P, Farmer JJ. Rapid laboratory diagnosis of cholera in the
field. Trans Soc Trop Med Hyg 1989; 83:119-120.