El documento describe los requisitos y procedimientos para la capacitación del personal en un laboratorio de microbiología. Incluye la necesidad de entrenar al personal en técnicas básicas, bioseguridad, y realizar registros de capacitación. También cubre los procedimientos para el control de calidad de equipos, medios de cultivo, y pruebas de sensibilidad a antimicrobianos. El objetivo general es garantizar la competencia técnica del personal a través de la capacitación y el control de calidad de los procesos y resultados del laboratorio.

2. Capacitación del PersonalCapacitación del Personal
ENTRENAMIENTOENTRENAMIENTOFORMACIÓNFORMACIÓN
“Proceso continuo y sistemático destinado a la formación,
entrenamiento, actualización o perfeccionamiento específico del
personal”
 Incorporación de conocimientos
Generales y específicos.
 Formación académica del
personal
 Enseñar las habilidades.
 Carácter eminentemente
práctico

3. Requisitos en la Formación del PersonalRequisitos en la Formación del Personal
 Se debe realizar un estudio de las necesidades
de capacitación y entrenamiento
 Planificación
 La formación permanente de su personal
 La formación a ser adquirida deberá orientarse a
garantizar la competencia en las técnicas y
métodos realizados por el personal involucrado en
el ensayo.
 El laboratorio debe asegurar …

4. Capacitación del Personal en elCapacitación del Personal en el
Laboratorio de MicrobiologíaLaboratorio de Microbiología
Todo el personal técnico debe recibir un
adecuado entrenamiento que incluyen:
 Técnicas básicas de microbiología para la
manipulación de cultivos y muestras en
Condiciones de esterilidad
 Adecuado Criterio para el manejo
Potencialmente Infeccioso
 Conocimiento de normas de bioseguridad

5. RegistrosRegistros
El laboratorio debe elaborar, conservar
y actualizar registros:
 De la autorización del personal
 Curriculum vitae
 Capacitación en la realización de la tarea
asignada.
 Relativos a la competencia del personal.

6. Documentación de los ProcedimientosDocumentación de los Procedimientos
 Registro de los cultivos en
existencia
 Potencia y sensibilidad de los
discos
 Registro de la comprobación de
los medios
 Controles de tinción
 Controles positivos y negativos
 Los autoclaves deben
comprobarse por registros de
temperatura o termógrafos “Se hace lo que se escribe
y se escribe lo que se hace”

7. ¤ Almacenamiento y Conservación
¤ Preparación
¤ Control de esterilidad y funcionamiento
Medios de CultivosMedios de Cultivos

8. Medios de CultivosMedios de Cultivos
(Almacenamiento y Conservación)(Almacenamiento y Conservación)
LOS MEDIOS DESHIDRATADOS NO PUEDEN
ALMACENARSE DURANTE MUCHO TIEMPO
PUEDE OCURRIR OXIDACION Y DESHIDRATACIÓN
SISTEMA DE INVENTARIO
EFECTIVO
LOS ESTANTES DEL ALMACEN NO DEBEN SER
LOCALIZADOS CERCA DEL AUTOCLAVES
LISTA DE INVENTARIO
NOMBRE DEL FABRICANTE
NUMERO DE CONTROL
FECHA DE RECEPCIÓN
FECHA EN QUE SE ABRIO LA
BOTELLA

9. Medios de Cultivos (Preparación)Medios de Cultivos (Preparación)

10.  Todos los medios deben inspeccionarse visualmente
 Las muestras procedentes de cada preparación
deben ensayarse para verificar su funcionamiento
Medios de CultivosMedios de Cultivos
(Control de Esterilidad y Funcionamiento)(Control de Esterilidad y Funcionamiento)
METODOS PARA
COMPROBAR LA
CALIDAD DE
MEDIOS EN
TUBOS
METODOS
PARA
COMPROBAR
LA CALIDAD
DE MEDIOS EN
PLACAS
Los tubos y placas deben refrigerarse.

11. METODOS PARA COMPROBAR LA
CALIDAD
DE MEDIOS EN PLACAS
Se
seleccionan
placas
Se inoculan con
los cultivos
almacenados
Se deben emplear
menos de 2
microorganismos
Positivo
Negativo
Tamaño e inoculo
deben normalizarse
Caldos nutritivos
Asa calibrada
Se anotan los
resultados del
Análisis
Se dispone del medio si funcionan
adecuadamente

12. Importancia del Espécimen enImportancia del Espécimen en
MicrobiologíaMicrobiología
Los especímenes clínicos deben recogerse
cuidadosamente para minimizar la contaminación de
la flora microbiana normal del lugar donde se toma la
muestra. Y una vez recogido debe ser enviado al
laboratorio lo más rápido posible(1 a 2 horas).

13. Espécimen aceptable muestras conEspécimen aceptable muestras con
para el diagnostico predominancia depara el diagnostico predominancia de
Bacteriológico células inflamatorias.Bacteriológico células inflamatorias.
se comprueba lase comprueba la
aceptabilidad por losaceptabilidad por los
resultados cuantitativosresultados cuantitativos
Importancia del Espécimen enImportancia del Espécimen en
MicrobiologíaMicrobiología

14. Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos
Todo equipo debe ser
evaluado por un programa
de control de calidad en
base a las instrucciones del
proveedor y las
regulaciones internas del
laboratorio.

15. Incubadoras
• Controlar diariamente la temperatura.
• Observar el termorregulador.
• Colocar las muestras, platos y tubos
en una posición segura.
• Limpieza mensual y llevar un record
de mantenimiento preventivo.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

16. Autoclaves
Procedimiento por corrida diario, semanal, mensual
• Examine record de temperatura y precisión.
• Utilice indicadores de esterilización.
• Chequeo del nivel del agua.
• Limpieza interior y exterior.
• Limpieza de la pantalla de temperatura.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

17. Cámaras de seguridadCámaras de seguridad
• Apague la lámpara ultravioleta antes de empezar a
trabajar.
• Observe que no se obstruye el flujo de aire.
• Compruebe los sistemas de alarma de funcionamiento.
• Desinfecte la cabina antes y después de utilizar.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

18. Incinerador
• Temperatura optima de esterilización (815°c)
• Bastan 5 seg para lograr la destrucción de bacterias,
hongos y mico bacterias.
• Inspeccione la cerámica del incinerador por rajaduras.
• Aleje el incinerador de elementos que puedan
incendiarse por el calor generado.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

19. Generadores de ambiente- sistema Gas Pak
• Mantenga los generadores de gas a T.A y sobre
sellado
• Mantenga indicadores de anaerobiosis a temperatura
de (2-8°C)
• El tiempo de generación de la atmosfera dentro de la
jarra es de 30 min.
• Una evidencia sugestiva de ambiente anaerobio, es el
cambio de color de rojo vino del agar sangre.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

20. Refrigeradoras
• Control diario de la temperatura entre 4-8°C.
• Utilice refrigeradores que no hacen escarcha.
• No coloque medios de cultivos aun ligeramente calientes
dentro de la refrigeradora.
• Evite abrir con frecuencia la puerta de la refrigeradora.
• No guarde alimentos en refrigeradoras para especímenes
clínicos.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

21. Microscopios
• Limpieza del aceite de objetivos, condensador, etc.
• Apagar la fuente de luz.
• Colocar cobertor contra polvo.
• Limpieza de ocular, diafragma con liquido de limpieza
de lentes.
• Limpieza y ajuste del sistema óptico.
• Limpieza y lubricación del sistema mecánico.
Control de calidad de equiposControl de calidad de equipos

22. Control de calidad de reactivosControl de calidad de reactivos
Los reactivos son fundamentales para la
caracterización de microorganismos
Colorantes
Discos
impregnados
Antisueros

23. Colorantes
El control de calidad cada lote preparado.
semanal para mantener
la seguridad
Control de calidad de reactivosControl de calidad de reactivos

24. Discos impregnados
Pruebas de para microorganismos de
Sensibilidad rápido crecimiento.
(NCCLS M2-A6) evalúa multiresistencia,
escogencia y valoración
de un antibiótico.
Control de calidad de reactivosControl de calidad de reactivos
PTZ CAZ
MER
IMP
CXT
AMC
COL

25. Antisueros
son considerados exámenes bacteriológicos y no test
serológicos.
• Para uso exclusivo de cepas in vitro.
• Conservar los reactivos en refrigeración.
• Colocar la fecha en que se abre el kits.
• Nunca pipetear con la boca muestras o reactivos.
• Dejar los reactivos a T.A antes de utilizarlos.
Control de calidad de reactivosControl de calidad de reactivos

26. Mantenimiento de medios de cultivosMantenimiento de medios de cultivos
almacenadosalmacenados
Las cepas deben almacenarse de forma adecuada para preservar
sus características morfológicas y fisiológicas conocidas.
Para el almacenamiento a largo plazo se debe:
 almacenar en un medio estabilizador apropiado, como caldo de
soya tripticasa con 10 – 15% de glicerol o sangre de cordero
desfibrinada.
Almacenarlas liofilizadas (congelación seca).
Obtenga caldos de cultivos liofilizados comercial
Para trabajar una o mas veces al mes:
Subcultive el caldo de cultivo permanente (congelado o liofilizado)
a medios sólidos en placa.
Subcultive 4 – 5 colonias aisladas de medios en placa a un tubo
con agar inclinado e incube durante la noche para preparar caldo de
cultivo listo para trabajar.

27. Mantenimiento de medios deMantenimiento de medios de
cultivos almacenadoscultivos almacenados
 Almacenar las cepas no fastidiosas en tubos
picos de flauta con agar tripticasa de soya
inclinado.
Dos días antes de las pruebas de CC:
Subcultive el crecimiento del agar inclinado a
medios en placa e incube durante la noche.
Seleccione 4 – 5 colonias aisladas de la placa
para la prueba de CC y pruebe con el mismo
método utilizado para los aislamientos de
pacientes.

28. Pruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana
NCCLS: El Instituto para la normatización de Laboratorios Clínicos
anteriormente conocido como El Comité Nacional para la
Normatización de Laboratorios Clínicos
(NCCLS) es una organización sin fines de lucro, con miembros
representando a varias disciplinas. Es una organización educativa
que enseña a través de foros el desarrollo, promoción y uso de
normas nacionales e internacionales relacionadas con las pruebas de
susceptibilidad, su uso apropiado y la interpretación de los
resultados.
ATCC: también conocida como American Type Culture Collection.
Suministra cepas certificadas como: S.aureus, E. coli y
Pseudomonas sp

29. PruebasPruebas de sensibilidad antimicrobianade sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana
• Prueba de difusión en disco: El método del disco esta bien
normalizado y es capaz de producir resultados fiables.
• El proceso que se recomienda corrientemente es aplicable a
las pruebas con la mayoría de patógenos comunes de
crecimiento rápido, como: enterobacterias, S. aureus y
Pseudomonas sp.
• los estudios aun no están adecuados para desarrollar patrones
de zonas fiables para la interpretación de pruebas de disco con
microorganismos que:
1. Son exigentes en sus requerimientos nutricionales.
2. Necesitan de una atmósfera anaeróbica o una concentración
ce CO2 incrementada para crecer.
3. Crecen a una velocidad lenta en agar Mueller – Hinton.
4. Los que manifiestan una marcada variación en la velocidad de
crecimiento cepa a cepa

30. Pruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana
• Para controlar la técnica de difusión en disco, los tres microorganismos
control designados S. aureus , E.coli y P. aeruginosa deben emplearse
cada día que se realice un ensayo.
•La precisión y exactitud de este proceso analítico puede determinarse
por métodos estadísticos patrones ; es decir, que el 95% de las zonas
deben estar dentro de 2SD por encima o por debajo de la media cada
agente antimicrobiano.
•Se debe controlar la densidad del inóculo.
•Verificar que los discos no estén deteriorados.
•Controlar el pH de los medios.
•La desviación típica máxima es la diferencia entre el tamaño de la zona
minima para cepas susceptibles y el tamaño de la zona máxima para
cepas resistentes.

31. Pruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana
Fuentes de errores técnicos:
• preparación inadecuada del agar Muller – Hinton
•Introducción de un nuevo lote de agar sin probarlo.
•Almacenamiento inadecuado de los discos.
•Normalización inadecuada de la densidad de caldo de cultivo.
•Preparación inexacta o almacenamiento de patrones de referencia
turbios.
•Fallo al exprimir el liquido sobrante de la torunda.
•Incubación a temperatura distinta de 35 ºc
•Lectura prematura de las placas
•Fallo al medir los bordes de la zona.
•Errores de transcripción

32. Empleo de laboratorio de referenciaEmpleo de laboratorio de referencia
Incluso los laboratorios clínicos
más sofisticados, ocasionalmente
encuentran un aislamiento microbiano
que no pueden identificar. Deben
establecer algunas disposiciones para que
un laboratorio de referencia (tal como
laboratorios del departamento de salud
estatal o nacional o laboratorios clínicos en
los centros médicos más importantes)
examinen los cultivos problemáticos.

33. Pruebas de eficacias:Pruebas de eficacias:
Externa e InternaExterna e Interna
Es recomendable que los laboratorios de
microbiología puedan participar en programas de
evaluación externa. Estos programas miden la
capacidad del laboratorio para evaluar una muestra
desconocido y llegar a un resultado seguro. Los
mismos consisten en la identificación de muestras o
microorganismos desconocidos y se debe informar
del resultado de la identificación, pruebas utilizadas
para el diagnóstico etiológico y sensible a los
antibióticos. Estos programas de control de calidad
externos pueden ser nacionales o internacionales.

34. El laboratorio, debe diseñar sistema de control
interno para verificar que la calidad alcanzada es la
especificada. Es importante, para todo tipo de laboratorio que
el sistema de control proporcione al personal información
clara y fácilmente comprensible para que sirva de base para
la toma de decisiones. Se debe poner énfasis a la eliminación
de errores en el manejo de muestras, solicitudes, exámenes
e informes.
El control de calidad en el laboratorio tiene como
objetivo , que el producto final del trabajo tenga un grado
aceptable de seguridad, de conformidad con los limites
establecidos. Debido a que la mayoría de los resultados en
microbiología son producto de interpretaciones y evaluación
de reacciones bioquímicas de seres vivos donde la capacidad
y experiencia del evaluador tienen un gran valor