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LABORATORIO EN DIAGNOSTICO
PARASITOLÓGICO
Los métodos de diagnostico son los que detectan al parasito, elementos de ellos o fracciones
antigénicas en muestras de deposiciones, orina, expectoración, sangre u otros fluidos
orgánicos.
METODO DIRECTO
Hacen evidente la respuesta inmune especialmente humoral del hospedero, frente a la
presencia de antígenos parasitarios extraños a su organismo.
METODO INDIRECTO
Existen múltiples métodos para la detección e identificación de PARASITOS.
Métodos para detectar diferentes
especies
Métodos para detectar especies
en particular
Los mas utilizados . Los menos utilizados
Analisis de sangre y heces
Muestras urogenitales, esputo, los
aspirados y las biopsias
Las muestras recogidas para la valoración dependen de la especie y el estudio del parasito
sospechado
El conocimiento del ciclo de vida del parasito da información de la determinación del tipo,
numero y secuencia de muestras necesarias para el diagnostico
IMPORTANTE
la calibración y uso de un micrómetro ocular
Es IMPORTANTE saber :
Diferenciar entre ameba: - Patógena (Entamoeba histolytica)
- No patógena (Entamoeba hertmanni)
Que solo se diferencian con la cuidadosa medición del tamaño, igualmente los huevos de
- Paragonimus westermani
- Fasciola hepatica
Que se distinguen solo su tamaño.
La medición del tamaño de: -Trofozoitos de los protozoos y los quistes
-Huevos de los helmintos y las larvas
Examen de sangre.
8 11::Parásitos que se detectan en muestras de sangre:
Malaria
(Plasmodium spp.)
Babesiosis (Babesia
spp)
Tripanosomiasis
(Tripanosoma spp)
Leishmaniasis
(Leishmania
donovani)
Filariasis
(Wuchereria
bancrofti, Brugia
malayi, Loa loa y
Mansonella spp)
Técnicas mas importantes: PREPARACION, LA TINCION Y EL EXAMEN EN EXTENSIONES DE
GOTA GRUESA Y FINA DE SANGRE
1. FROTIS SANGUINEO GRUESO Y FINO
Frotis fino Frotis grueso
La sangre se extiende
en el portaobjetos en
una fina capa evitando
la superposición de los
elementos tisulares
Tiempo de examen: 30
min
La sangre se concentra
en una pequeña ares
en el que las células
yacen en el fondo.
Tiempo de examen: 5
min
Durante la tinción los GR
pierden la hemoglobina,
de modo que solo son
visibles los núcleos
leucocitarios , las
plaquetas y los PARASITOS
( si hubieren)
Para la detección del parasito se usa el frotis grueso
Para la identificación se una el frotis fino
Preparación de las extensiones
Obtención de la sangre
Punción del dedo,
oreja o venosa. Si es
de:
Dedo , debe dejarse salir
libre y no ser contaminada
con alcohol
Venosa, sin y con
anticoagulante
Frotis fino
Frotis grueso
• Diámetro 1.5cm
• Seca a temperatura
ambiente
Tinciones
Tinción Giemsa
La cromatina de células y
del parasito de tiñe con
viveza.
Mientras que la
hemoglobina de
eritrocitos queda pálido
Es la única tinción que permite ver
el punteado eritrocitario que se
produce por el infección de algunos
parásitos en la malaria
Tinción de Wright
Se usa para frotis finos,
pero tiñe los eritrocitos
dejando un fondo poco
nítido
Debido a que lleva alcohol como
fijador , los frotis grueso se deben
lisar con agua antes de ser teñidos
Examen de las extensiones
Tinción Giemsa
Tinción de Wright
Objetivo 10x
Para detectar
microfilarias
Se examinan los bordes de los frotis finos, ya
que particularmente la microfilaria se
desplaza ahí.
Objetivo 50x en
aceite de inversión
Para la búsqueda de protozoos en frotis
sanguíneos
Objetivo 100x
Para detectar parásitos mas pequeños
Plasmodium spp, Babesia spp, Leishmania
spp
2. TÉCNICAS DE CONCENTRACIÓN
Utiles para Leishmaniasis,
Tripanosomas, Microfilarias
Los huevos, larvas de gusano y quistes de
protozoos pueden recuperarse
Pero los trofozoitos de protozoos se suelen
destruir
Indicado cuando el examen preliminar dio
resultado negativo a pesar de que se tienen
los síntomas clínicos
MÉTODO DE KNOTT o filtración de membrana
Examen de muestras fecales.
Para la identificación de parásitos intestinales
Usando heces acuosas, técnicas de concentración, tinciones
permanentes e infrecuentemente cultivo
El método de inmunoensayo mediante anticuerpos específicos
detecta antígenos de la Giardia lamblia, Cryptosporidium parvun y
Entamoeba histolytica
Los estadios de helmintos mas frecuentes mas vistos son los
huevos y larvas
RECOJIDA, MANEJO Y CONSERVACION DE
MUESTRAS
Las muestras se deben remitir al laboratorio
mientras esten frescas o con conservantes
apropiados
Toda muestra se debe examinar en la primera
hora tras ser remitida y las muestras liquidas se
examinara menos de 30 min
La muestra que no se procese se deja refrigerada
o T° ambiente
La mezcla inadvertida de orina o agua destruye
los protozoos y trofozoitos
 Laxante oleoso y aceite mineral interfiere el examen
 Los antibióticos o medios de contraste disminuyen el numero de organismos
 O ser puestas en conservantes para mantener el máximo
rendimiento
 Nunca colocarlo en incubadora, peligra la
integridad del parásitos para el diagnostico
Examen macroscópico
1° examina consistencia de heces
Forma, blanda, acuosa,
descompuesta
Si hay presencia de:
Moco, sangre, larvas, gusanos
adultos y proglotides
Mayoria de parasitos se
distribuye de modo uniforme en
la muestra
Muestra acuosa y descompuesta (protozoos
y trofozoitos)
Muestras blandas o formadas (quistes)
Helmintos o sus huevos en cualquier heces
Los esquistosomas pasan al torrente fecal
en colon descendente recto
Los trofozoitos de protozoos son mas
numeroso en la parte final de la deposición
Examen microscópico
De tinción
De material fresco
conservado
Por examen de
concentrados
Por examen
directo
Con suero salino permite la detección y
observación de trofozoitos móviles de
protozoos y larvas de helmintos
puede permitir la detección de parásitos
que no se concentren bien.
para la detección de quistes de protozoos y
huevos de helmintos, larvas, pero no es
satisfactorio para la detección de
trofozoitos de protozoos.
son útiles para la detección y el examen
morfológico de los trofozoitos de los
protozoos y los quistes
ESTUDIO DIRECTO EN FRESCO
Sacar un
poco de
muestra
Ya en la lamina ,
además colocar una
gota de suero salino
0,85%
cubreobjeto
10x bajo aumento
40x objetivo de gran aumento se detecta quistes de los
protozoos
Los movimientos lento de amebas requiere un examen
durante al menos 15 seg.
En ausencia de imágenes sospechosas por lo menos se
examina 1/3 de la preparación con 40x
Métododeconcentración
Flotación o sedimentación
TECNICAS DE CONCENTRACION
Métododeconcentración Flotación
Método de Faust o Flotación en Sulfato
de Zinc
Diagnostico quistes de protozoarios
Métododeconcentración Sedimentación
Método de Formol Eter o Ritchie
Diagnostico huevo de helminto, larvas
y quistes de protozoarios
TINCIONES PERMANENTES
1. permite guardar
permanentemente las muestras y
cuando aparezcan dificultades de
identificación
2. es la diseñada para el uso del
objetivo de aceite de inversión
(100X).
3. Pueden reconocerse cuando la
preparación en fresco y los
concentrados sean negativos en
detección de trofozoítos y quistes
de protozoos
4. Aunque no suele ser útil para la
detección de huevos o larvas de
helmintos
Tinción de tricromo
de Wheatley
Tinción hierro
hematoxilina
Detectan amebas y
flagelados
Simple, fiable y bajo coste
Mas costoso pero emjores resutados
incrementan la definicion del nucleo del
citoplasma
Tinción ácidos
resistentes
modificadas
Tinción para
microsporidios
Enterocytozoon
bieneusi y
Encephalilozoon
inleslinalis
ooquistes de
Cryptosporidium,
Cyclospora e Isospora
TÉCNICAS ADICIONALES PARA EL EXAMEN DE PARÁSITOS ENTÉRICOS
Técnica de papel de celofán
para oxiuros
La hembra del oxiuro : Enterobius
vermicularis, emigra desde el colon a
la piel perianal, donde deposita sus
típicos huevos fecundados. Los
huevos, y a veces los gusanos adultos,
se pueden detectar por el examen de
un trozo de adhesivo de celofán de
pegado en la piel perianal. Los huevos
o los adultos no suelen encontrarse en
las heces
.Las muestras se deben tomar por la
noche, cuando los gusanos son activos,
o a primera hora de la mañana, antes
de la ducha o de la deposición
Cultivo de nematodo y
técnica de detección
Técnica de Harada-Mori
detección e identificación de los
distintos nematodos y larvas de
Strongyloides, con filtro de papel
Harada-Mori , el cultivo en filtro de
papel inclinado y el cultivo en carbón
vegetal donde las larvas emigran desde
las heces a la fase acuosa. En el cultivo
del carbón vegetal las larvas migran
primero a una gasa húmeda que se
coloca en agua, permitiendo su
colonización.
Tecnica de Baermann
detección de Strongyloides y otras
larvas de nematodos a partir de
muestras fecales. Las heces se colocan
en varias capas de gasas parte sup. El
extremo del embudo cerrado con una
abrazadera se añade agua hasta el
nivel de la gasa, las larvas migran por
la gasa y se depositan en la base del
embudo, para su examen
METODOS DIAGNOSTICOS
METODOS DE CULTIVO
METODOS INMUNOLOGICOS
La respuesta inmunologica especifica se inicia cuando el parasito entra en contacto con las
celulas del sistema inmunologico, luego de romper las barreras primarias de defensa.
HEMAGLUTINACION INDIRECTA (HAI):
se basa en la adsorción de antígenos a una
partícula (látex, globulos rojos, proteína, etc.)
CONTRAINMUNOELECTROFORESIS:
REACCION DE INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA: Permite la localizacion de antigenos y la
identificacion de anticuerpos, sirve para confirmar
el diagnostico clinico y constituye un excelente
metodo de control de curacion.
EL ENSAYO RADIOINMUNOLOGICO O RIA: es
un metodo muy sensible para la determinacion
cuantitativa de anticuerpos, permitiendo la
identificacion de la clase de inmunoglobulina
presente.
ELISA:
Es especialmente apropiado en las formas
invasoras de la amibiasis, ya que en la
intestinal, principalmente en los pacientes sin
diarrea, generalmente pocos anticuerpos
circulante son detectados por las pruebas
serologicas.
REACCION EN CADENA DE LA
POLIMERASA (PCR): La cual
permite la produccion masiva de
secuencias de ADN o ARN
del parasito, a partir de una
muestra clinica; el segmento
amplificado puede ser luego
identificado por algun ensayo
inmunologico.
METODOS MOLECULARES
Es una reacción enzimática
in vitro que amplifica
millones de veces una
secuencia específica de ADN
durante varios ciclos
repetidos en los que la
secuencia blanco es copiada
fielmente
Para ello, la reacción
aprovecha la actividad de la
enzima ADN polimerasa
que tiene la capacidad de
sintetizar naturalmente el
ADN en las células
Todos estos elementos
interactúan en tres etapas
principales de las que se
compone la PCR:
desnaturalización,
hibridación y extensión.
• PCR se usa en los siguientes
parásitos:
-Amebas.
-Toxoplasmosis.
-Balantidiosis.
-Malaria.
-Tripanosomiasis.
Trichomoniasis.
Microsporidiasis.
-Babasiosis.
Trypanosoma
Trypanosoma.brucei
• se transmite a travez de la picadura de la mosca TseTse
del genero Glossia , produce chancro transitorio
• cuadro febril agudo de rápido progreso con
adenopatías y produciendo muerte del paciente por
afeccion del SNC
• Para su diagnostico se debe indagar acerca de los
antecedentes epidemiológicos y hallazgos clínicos, en
los cuales se observa aumento de la IgM total en
sangre y liquido cefalorraquídeo, existe pleocitos con
50-500 celulas mononucleadas/um en LCR . El
diagnostico se confirme por la
• demostración de los parasitos en frotis sanguieos,
tanto grueso como finas, extensiones y aspiraciones o
en centrifugado de liquido cefalorraquídeo teñido con
Giensa
• Trypanosoma cruzi
• mal de chagas ,propio de america y es común en
mexico . los chinches contaminan los alimentos al
defecar
• Las manifestaciones crónicas de la infección puede
producir megaesofago , megacolon y alteraciones
de la conducción miocárdica a la destrucción de
células efectoras del sistema parasimpático por
anticuerpos
• El diagnostico en estado agudo se realiza mediante
frotis gruesos o finos de sngre, extensiones y
aspirados en las adenopatías .Tambien se puede
cultiva,con ayuda del medio Novy-MacNeal. Se
pueden sealizar exámenes serológicos EI EIA, IFA y
test de CF ,sin embargo no permite diferenciar
entre enfermedad agua o crónica
Leishmania
La leishmani cutánea en el
nuevo mundo es casada
principalmente por
• L.mexicana
• L.braziliensis
• L.amazonensis
• L.venezuelensis
• L.guyanensis
• L.peruviana
Leishmaniamucocutanea
o espundia, causada por
L.braziliensis, se produce
mayormente en niños y
en ocasiones se disemina
a las membranas
mucosas nasal, oral y
faringea produciendo
lesiones desfigurantes
por erosión de partes
blandas y de cartílagos,
L.braziliensis se
encuentra en Mexico,
America centrar y
Sudamerica
Producida por protozoos cinetoplastos del genero Leishmania , se transmiten por
picadura de vectores (Pbhlebotomos del viejo mundo y Luzomya en el nuevo mundo )
• Leisbhmania visceral .- leishmani del
viejo mundo , causado por
L.donovani que predomina en
Africa, Asia y la india ,
mediterráneas y oriente medio y la
leishmania del nuevo mundo
(America central y sudamerica)
L.chagas.
• La infección en inmunodeprimidos
,produce la afeccion visceral
(hígado, bazo, medula osea y
ganglios linfáticos )
• El diagnostico se realiza por visualización de amastigotes en
extensiones o biopsias, cultivos de promastigotes, la biopsia se realiza
en los bordes de las lesiones 2-3 mm , se tiñen con Giemsa
• en casos de leishmaniasis visceral se realizan aspirados de adenopatias
o medula osea , biopsia de hígado o bazo
• Los cultivos se realizan en medio Novy-MacNweal-Nicolle o en medio
Drosophila de Schneider, los cultivos muestran promastigotes de 2 a 5
dias ,sin embargo se debe esperar por lo menos 4 semanas
Gota gruesa , gota fina , ELISA, deteccion
de anticuyerpos IgM
Babesiosis
• Protozoo apicomplexa , infectan
eritrocitos ¸ se transmite a travez de
la garrapata , roedores por
garrapatas I.capularis
• El parasito se multiplica en los
eritrocitos como esquizontes pero no
produce gametocitos .B.microli suele
parecerce a una forma anular, se
diferencian por los multiples anillos
que pueden formar una tretada (cruz
de malta), las celulasinfectadas
carecen de pigmento de hemozoina
• Hay test serologico para babesia
microti y WA1
Toxoplasma gondi
• Parasito protozoo del filo apicomplexa, distribución
mundial y humano y animales (principalmente felinos)
• El diagnostico se establece por examen de tejido, sangre y
fluidos corporales, se debe observar taquizoitos o quistes
tisulares en tinciones hematoxilina eosina, fluorecentes o
con inmunoperoxidasa.
Giargia lambria
Entamoeba hystolitica
• Parasito patógeno puede producir amebiasis, colitis amebiana y
obsesos hepáticos. puede conducir a perforación y peritonitis
• El diagnostico se da mediante una seria de muestras fecales, no se
debe tomar medicamentos, pues esto podría enmascarar una
amebiasis intestinal , se puede realizar un aspirado de absceso
hepático que puede mostrar trofozoitos al microscopio
• test serológicos de detección de antígenos especificos, sensibles y
capaces de diferenciar a E.hystolitica y E.dispar , técnicas de PCR
• Los trofozoitos de E.hystolitica miden 10-60 um de diámetro ,
formas invasivas de 20 um . En preparaciones teñidas se observa
cromatina nuclear periférica que suele distribuirse a los largo de la
membrana nuclear como finos granulos, cariosoma pequeño y
aveces centrales
Nematodos
• Enterobius vermicularis:
• Principalmente típica en niños
• Los gusanos viven en el ciego y áreas adyacentes.
• Las hembras miden más de 13 mm y tienen un extremo posterior puntiagudo.
• Los machos son raramente vistos, las hembras se pueden encontrar en la superficie de las
heces o en la piel perianal, especialmente por la noche, donde deposita sus huevos; estos
son incoloros y ovoidales con un lado aplanado y miden entre 20 y 40 µm de ancho y 50 y
60 de µm de largo.
• Aunque la infección puede ser asintomática, los niños presentan frecuentemente prurito
anal, irritabilidad e insomnio.
• La detección de los huevos y, a veces de gusanos adultos en la piel perianal se hace
mediante la técnica de la cinta adhesiva durante el sueño a primera hora de la mañana.
• Trichuris trichiura:
• Se encuentran especialmente en el ciego y a veces en el colon y el recto.
• Miden más de 50 mm de longitud y permanecen en la mucosa por el extremo
anterior, que es fino, mientras que el otro extremo es más grueso y cuelga libremente
en la luz.
• La hembra es alargada, mientras que la cola de los machos es enrollada.
• Tiene un ciclo vital en el que los huevos salen con las heces sin embrionar y tarda
varias semanas, en adecuadas condiciones de la tierra en madurar a estado infectivo.
Cuando se ingieren huevos embrionados, se liberan larvas y maduran en el colon,
donde se fijan y pueden vivir más de diez años.
• Las infecciones leves suelen ser asintomáticas, pero cuando hay muchos parásitos
puede aparecer diarrea o disentería junto con anemia y deshidratación.
• El diagnostico se hace al hallar los huevos en muestras fecales o con técnicas de
conservación.
• Los huevos tienen forma de barril con unos tapones retractiles en ambos extremos,
suelen medir de 50 a 55 µm de largo por 22 a 24 µm de ancho
• Áscaris lumbricoides:
• Vive en el duodeno y yeyuno proximal.
• Las hembras miden más de 35 cm de largo por 6 mm de diámetro. El macho es más
pequeño y tiene un extremo curvado ventralmente.
• Cuando se ingieren alcanzan el intestino y las larvas penetran la mucosa llegando al
torrente sanguíneo. De ahí van a los pulmones donde maduran en el lecho capilar
alveolar y luego pasan al alveolo. Son arrastrados hasta la epiglotis y nuevamente
son ingeridos y se hacen adultos en el intestino.
• Desde que son huevos hasta que se vuelven adultos pasan aproximadamente 2
meses.
• Se puede presentar neumonitis por áscaris o un síndrome de Löffer. La presencia de
pocos gusanos no se advierte, mientras que la infección grave produce diferentes
grados de diarrea y dolor abdominal. También puede producirse obstrucción por una
masa de gusanos.
• Tienen facilidad para invadir sitios ectópicos como la vía biliar, el hígado y el
apéndice.
• El diagnostico se realiza al observar los huevos en heces o por la detección de un
gusano adulto en el vómito o las heces.
• Uncinarias:
• Necator americanus se encuentra en Estados Unidos y Ancylostoma duodenale,
no se halla en Estados Unidos.
• Las hembras miden más de 12 mm y los machos un poco menos. Los machos se
diferencian por la bolsa copulatoria en forma de abanico en su extremo posterior.
• Los huevos se eliminan por las heces. Las larvas rabdiformes se liberan y se
hacen infectivas en su estado de filarias en 7 días. Cuando contactan con el
huésped, penetran su piel y llegan a través de la circulación a los pulmones,
donde suben por el árbol bronquial hasta ser deglutidas. Cuando maduran en el
intestino empiezan a poner huevos.
• Pueden causar patología cutánea en su sitio de entrada caracterizado por
inflamación, eritema y ampollas con mucho prurito. Puede causar síndrome de
Löffer. La infección intestinal puede ocasionar gastroenteritis con dolor
abdominal, diarrea y nauseas.
• Su principal manifestación es la anemia ferropénica secundaria. El diagnostico se
realiza por la presencia de huevos en las heces. Miden de 58 a 76 µm de longitud
por 36 a 40 µm de ancho.
• Strongyloides stercolaris:
• Las hembras miden de 2 a 3 mm y viven unidas a la mucosa del
duodeno, donde se reproducen por partenogénesis. Los machos no se
dan en los vertebrados.
• Los huevos se abren en el intestino, liberando larvas rabdiformes que
salen en las heces, estas se trasforman en filarias infectivas en el suelo.
Penetran con facilidad la piel de los individuos y migran hacia los
pulmones mediante la sangre y de ahí al árbol bronquial siendo
nuevamente deglutidas.
• La entrada de las filarias causa irritación, eritema y prurito. También
causa síndrome de Löffer. Puede producir síntomas de ulcera péptica,
dolor abdominal y diarrea.
• El diagnostico se hace por el hallazgo de las larvas rabdiformes en las
heces y se deben diferenciar de las de Uncinarias, y se caracterizan por
una cavidad bucal corta y un primordio genital prominente.
Larva rabditiforme Larva filariforme
Es una reacción enzimática in vitro
que amplifica millones de veces una
secuencia específica de ADN durante
varios ciclos repetidos en los que la
secuencia blanco es copiada fielmente
Para ello, la reacción aprovecha la
actividad de la enzima ADN
polimerasa que tiene la capacidad
de sintetizar naturalmente el ADN en
las células
Todos estos elementos interactúan
en tres etapas principales de las que
se compone la PCR:
desnaturalización, hibridación y
extensión.
• PCR se usa en los siguientes
parásitos:
-Amebas.
-Toxoplasmosis.
-Balantidiosis.
-Malaria.
-Tripanosomiasis.
Trichomoniasis.
Microsporidiasis.
-Babasiosis.
Trypanosoma
Trypanosoma.brucei
• se transmite a travez de la picadura de la mosca TseTse
del genero Glossia , produce chancro transitorio
• cuadro febril agudo de rápido progreso con
adenopatías y produciendo muerte del paciente por
afeccion del SNC
• Para su diagnostico se debe indagar acerca de los
antecedentes epidemiológicos y hallazgos clínicos, en
los cuales se observa aumento de la IgM total en
sangre y liquido cefalorraquídeo, existe pleocitos con
50-500 celulas mononucleadas/um en LCR . El
diagnostico se confirme por la
• demostración de los parasitos en frotis sanguieos,
tanto grueso como finas, extensiones y aspiraciones o
en centrifugado de liquido cefalorraquídeo teñido con
Giensa
• Trypanosoma cruzi
• mal de chagas ,propio de america y es común en
mexico . los chinches contaminan los alimentos al
defecar
• Las manifestaciones crónicas de la infección puede
producir megaesofago , megacolon y alteraciones
de la conducción miocárdica a la destrucción de
células efectoras del sistema parasimpático por
anticuerpos
• El diagnostico en estado agudo se realiza mediante
frotis gruesos o finos de sngre, extensiones y
aspirados en las adenopatías .Tambien se puede
cultiva,con ayuda del medio Novy-MacNeal. Se
pueden sealizar exámenes serológicos EI EIA, IFA y
test de CF ,sin embargo no permite diferenciar
entre enfermedad agua o crónica
Leishmania
La leishmani cutánea en el
nuevo mundo es casada
principalmente por
• L.mexicana
• L.braziliensis
• L.amazonensis
• L.venezuelensis
• L.guyanensis
• L.peruviana
Leishmaniamucocutanea
o espundia, causada por
L.braziliensis, se produce
mayormente en niños y
en ocasiones se disemina
a las membranas
mucosas nasal, oral y
faringea produciendo
lesiones desfigurantes
por erosión de partes
blandas y de cartílagos,
L.braziliensis se
encuentra en Mexico,
America centrar y
Sudamerica
Producida por protozoos cinetoplastos del genero Leishmania , se transmiten por
picadura de vectores (Pbhlebotomos del viejo mundo y Luzomya en el nuevo mundo )
• Leisbhmania visceral .- leishmani del
viejo mundo , causado por
L.donovani que predomina en
Africa, Asia y la india ,
mediterráneas y oriente medio y la
leishmania del nuevo mundo
(America central y sudamerica)
L.chagas.
• La infección en inmunodeprimidos
,produce la afeccion visceral
(hígado, bazo, medula osea y
ganglios linfáticos )
• El diagnostico se realiza por visualización de amastigotes en
extensiones o biopsias, cultivos de promastigotes, la biopsia se realiza
en los bordes de las lesiones 2-3 mm , se tiñen con Giemsa
• en casos de leishmaniasis visceral se realizan aspirados de adenopatias
o medula osea , biopsia de hígado o bazo
• Los cultivos se realizan en medio Novy-MacNweal-Nicolle o en medio
Drosophila de Schneider, los cultivos muestran promastigotes de 2 a 5
dias ,sin embargo se debe esperar por lo menos 4 semanas
Gota gruesa , gota fina , ELISA, deteccion
de anticuyerpos IgM
Babesiosis
• Protozoo apicomplexa , infectan
eritrocitos ¸ se transmite a travez de
la garrapata , roedores por
garrapatas I.capularis
• El parasito se multiplica en los
eritrocitos como esquizontes pero no
produce gametocitos .B.microli suele
parecerce a una forma anular, se
diferencian por los multiples anillos
que pueden formar una tretada (cruz
de malta), las celulasinfectadas
carecen de pigmento de hemozoina
• Hay test serologico para babesia
microti y WA1
Toxoplasma gondi
• Parasito protozoo del filo apicomplexa, distribución
mundial y humano y animales (principalmente felinos)
• El diagnostico se establece por examen de tejido, sangre y
fluidos corporales, se debe observar taquizoitos o quistes
tisulares en tinciones hematoxilina eosina, fluorecentes o
con inmunoperoxidasa.
• La infecion de sangre y fluidos indica una infección aguda,
si es en tejidos indica una infección crónica, en la extensión
se observa taquizoitoas ovalados o forma demedia luna,
mide de tres a siete micras , quistes esféricos de 30 micras
de diámetro
• Uso de PCR es de alta sensibilidad y especificidad para
detección de encefalitis por toxoplasma, enfermedad
diseminada, test de anticuerpos IgM
Giargia lambria
Entamoeba hystolitica
• Parasito patógeno puede producir amebiasis, colitis amebiana y
obsesos hepáticos. puede conducir a perforación y peritonitis
• Absesos hepaticos se diagnostica por ecografia, radiografia y test
serológicos
• El diagnostico se da mediante una seria de muestras fecales, no se
debe tomar medicamentos, pues esto podría enmascarar una
amebiasis intestinal , se puede realizar un aspirado de absceso
hepático que puede mostrar trofozoitos al microscopio
• test serológicos de detección de antígenos especificos, sensibles y
capaces de diferenciar a E.hystolitica y E.dispar , técnicas de PCR
• Los trofozoitos de E.hystolitica miden 10-60 um de diámetro ,
formas invasivas de 20 um . En preparaciones teñidas se observa
cromatina nuclear periférica que suele distribuirse a los largo de la
membrana nuclear como finos granulos, cariosoma pequeño y
aveces centrales
Nematodos
• Enterobius vermicularis:
• Principalmente típica en niños
• Los gusanos viven en el ciego y áreas adyacentes.
• Las hembras miden más de 13 mm y tienen un extremo posterior
puntiagudo.
• Los machos son raramente vistos, las hembras se pueden encontrar en
la superficie de las heces o en la piel perianal, especialmente por la
noche, donde deposita sus huevos; estos son incoloros y ovoidales con
un lado aplanado y miden entre 20 y 40 µm de ancho y 50 y 60 de µm
de largo.
• Aunque la infección puede ser asintomática, los niños presentan
frecuentemente prurito anal, irritabilidad e insomnio.
• La detección de los huevos y, a veces de gusanos adultos en la piel
perianal se hace mediante la técnica de la cinta adhesiva durante el
sueño a primera hora de la mañana.
• Trichuris trichiura:
• Se encuentran especialmente en el ciego y a veces en el colon y el recto.
• Miden más de 50 mm de longitud y permanecen en la mucosa por el extremo
anterior, que es fino, mientras que el otro extremo es más grueso y cuelga libremente
en la luz.
• La hembra es alargada, mientras que la cola de los machos es enrollada.
• Tiene un ciclo vital en el que los huevos salen con las heces sin embrionar y tarda
varias semanas, en adecuadas condiciones de la tierra en madurar a estado infectivo.
Cuando se ingieren huevos embrionados, se liberan larvas y maduran en el colon,
donde se fijan y pueden vivir más de diez años.
• Las infecciones leves suelen ser asintomáticas, pero cuando hay muchos parásitos
puede aparecer diarrea o disentería junto con anemia y deshidratación.
• El diagnostico se hace al hallar los huevos en muestras fecales o con técnicas de
conservación.
• Los huevos tienen forma de barril con unos tapones retractiles en ambos extremos,
suelen medir de 50 a 55 µm de largo por 22 a 24 µm de ancho
• Áscaris lumbricoides:
• Vive en el duodeno y yeyuno proximal.
• Las hembras miden más de 35 cm de largo por 6 mm de diámetro. El macho es más
pequeño y tiene un extremo curvado ventralmente.
• Cuando se ingieren alcanzan el intestino y las larvas penetran la mucosa llegando al
torrente sanguíneo. De ahí van a los pulmones donde maduran en el lecho capilar
alveolar y luego pasan al alveolo. Son arrastrados hasta la epiglotis y nuevamente son
ingeridos y se hacen adultos en el intestino.
• Desde que son huevos hasta que se vuelven adultos pasan aproximadamente 2 meses.
• Se puede presentar neumonitis por áscaris o un síndrome de Löffer. La presencia de
pocos gusanos no se advierte, mientras que la infección grave produce diferentes
grados de diarrea y dolor abdominal. También puede producirse obstrucción por una
masa de gusanos.
• Tienen facilidad para invadir sitios ectópicos como la vía biliar, el hígado y el apéndice.
• El diagnostico se realiza al observar los huevos en heces o por la detección de un
gusano adulto en el vómito o las heces.
• Los huevos fértiles de Áscaris son redondos o ligeramente ovales, miden de 55 a 75 µm
de largo y 35 a 50 µm de ancho.
• Uncinarias:
• Necator americanus se encuentra en Estados Unidos y Ancylostoma duodenale, no
se halla en Estados Unidos.
• Las hembras miden más de 12 mm y los machos un poco menos. Los machos se
diferencian por la bolsa copulatoria en forma de abanico en su extremo posterior.
• Los huevos se eliminan por las heces. Las larvas rabdiformes se liberan y se hacen
infectivas en su estado de filarias en 7 días. Cuando contactan con el huésped,
penetran su piel y llegan a través de la circulación a los pulmones, donde suben por
el árbol bronquial hasta ser deglutidas. Cuando maduran en el intestino empiezan a
poner huevos.
• Pueden causar patología cutánea en su sitio de entrada caracterizado por
inflamación, eritema y ampollas con mucho prurito. Puede causar síndrome de
Löffer. La infección intestinal puede ocasionar gastroenteritis con dolor abdominal,
diarrea y nauseas.
• Su principal manifestación es la anemia ferropénica secundaria. El diagnostico se
realiza por la presencia de huevos en las heces. Miden de 58 a 76 µm de longitud
por 36 a 40 µm de ancho.
• Strongyloides stercolaris:
• Las hembras miden de 2 a 3 mm y viven unidas a la mucosa del
duodeno, donde se reproducen por partenogénesis. Los machos no se
dan en los vertebrados.
• Los huevos se abren en el intestino, liberando larvas rabdiformes que
salen en las heces, estas se trasforman en filarias infectivas en el suelo.
Penetran con facilidad la piel de los individuos y migran hacia los
pulmones mediante la sangre y de ahí al árbol bronquial siendo
nuevamente deglutidas.
• La entrada de las filarias causa irritación, eritema y prurito. También
causa síndrome de Löffer. Puede producir síntomas de ulcera péptica,
dolor abdominal y diarrea.
• El diagnostico se hace por el hallazgo de las larvas rabdiformes en las
heces y se deben diferenciar de las de Uncinarias, y se caracterizan por
una cavidad bucal corta y un primordio genital prominente.
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Laboratorio Clínico en el Diagnóstico Parasitológico

  • 2. Los métodos de diagnostico son los que detectan al parasito, elementos de ellos o fracciones antigénicas en muestras de deposiciones, orina, expectoración, sangre u otros fluidos orgánicos. METODO DIRECTO Hacen evidente la respuesta inmune especialmente humoral del hospedero, frente a la presencia de antígenos parasitarios extraños a su organismo. METODO INDIRECTO
  • 3. Existen múltiples métodos para la detección e identificación de PARASITOS. Métodos para detectar diferentes especies Métodos para detectar especies en particular Los mas utilizados . Los menos utilizados Analisis de sangre y heces Muestras urogenitales, esputo, los aspirados y las biopsias Las muestras recogidas para la valoración dependen de la especie y el estudio del parasito sospechado El conocimiento del ciclo de vida del parasito da información de la determinación del tipo, numero y secuencia de muestras necesarias para el diagnostico IMPORTANTE
  • 4. la calibración y uso de un micrómetro ocular Es IMPORTANTE saber : Diferenciar entre ameba: - Patógena (Entamoeba histolytica) - No patógena (Entamoeba hertmanni) Que solo se diferencian con la cuidadosa medición del tamaño, igualmente los huevos de - Paragonimus westermani - Fasciola hepatica Que se distinguen solo su tamaño. La medición del tamaño de: -Trofozoitos de los protozoos y los quistes -Huevos de los helmintos y las larvas
  • 5.
  • 6. Examen de sangre. 8 11::Parásitos que se detectan en muestras de sangre: Malaria (Plasmodium spp.) Babesiosis (Babesia spp) Tripanosomiasis (Tripanosoma spp) Leishmaniasis (Leishmania donovani) Filariasis (Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, Loa loa y Mansonella spp) Técnicas mas importantes: PREPARACION, LA TINCION Y EL EXAMEN EN EXTENSIONES DE GOTA GRUESA Y FINA DE SANGRE
  • 7. 1. FROTIS SANGUINEO GRUESO Y FINO Frotis fino Frotis grueso La sangre se extiende en el portaobjetos en una fina capa evitando la superposición de los elementos tisulares Tiempo de examen: 30 min La sangre se concentra en una pequeña ares en el que las células yacen en el fondo. Tiempo de examen: 5 min Durante la tinción los GR pierden la hemoglobina, de modo que solo son visibles los núcleos leucocitarios , las plaquetas y los PARASITOS ( si hubieren) Para la detección del parasito se usa el frotis grueso Para la identificación se una el frotis fino
  • 8. Preparación de las extensiones Obtención de la sangre Punción del dedo, oreja o venosa. Si es de: Dedo , debe dejarse salir libre y no ser contaminada con alcohol Venosa, sin y con anticoagulante Frotis fino Frotis grueso • Diámetro 1.5cm • Seca a temperatura ambiente
  • 9. Tinciones Tinción Giemsa La cromatina de células y del parasito de tiñe con viveza. Mientras que la hemoglobina de eritrocitos queda pálido Es la única tinción que permite ver el punteado eritrocitario que se produce por el infección de algunos parásitos en la malaria Tinción de Wright Se usa para frotis finos, pero tiñe los eritrocitos dejando un fondo poco nítido Debido a que lleva alcohol como fijador , los frotis grueso se deben lisar con agua antes de ser teñidos
  • 10. Examen de las extensiones Tinción Giemsa Tinción de Wright Objetivo 10x Para detectar microfilarias Se examinan los bordes de los frotis finos, ya que particularmente la microfilaria se desplaza ahí. Objetivo 50x en aceite de inversión Para la búsqueda de protozoos en frotis sanguíneos Objetivo 100x Para detectar parásitos mas pequeños Plasmodium spp, Babesia spp, Leishmania spp
  • 11. 2. TÉCNICAS DE CONCENTRACIÓN Utiles para Leishmaniasis, Tripanosomas, Microfilarias Los huevos, larvas de gusano y quistes de protozoos pueden recuperarse Pero los trofozoitos de protozoos se suelen destruir Indicado cuando el examen preliminar dio resultado negativo a pesar de que se tienen los síntomas clínicos
  • 12. MÉTODO DE KNOTT o filtración de membrana
  • 13. Examen de muestras fecales. Para la identificación de parásitos intestinales Usando heces acuosas, técnicas de concentración, tinciones permanentes e infrecuentemente cultivo El método de inmunoensayo mediante anticuerpos específicos detecta antígenos de la Giardia lamblia, Cryptosporidium parvun y Entamoeba histolytica Los estadios de helmintos mas frecuentes mas vistos son los huevos y larvas
  • 14. RECOJIDA, MANEJO Y CONSERVACION DE MUESTRAS Las muestras se deben remitir al laboratorio mientras esten frescas o con conservantes apropiados Toda muestra se debe examinar en la primera hora tras ser remitida y las muestras liquidas se examinara menos de 30 min La muestra que no se procese se deja refrigerada o T° ambiente La mezcla inadvertida de orina o agua destruye los protozoos y trofozoitos  Laxante oleoso y aceite mineral interfiere el examen  Los antibióticos o medios de contraste disminuyen el numero de organismos  O ser puestas en conservantes para mantener el máximo rendimiento  Nunca colocarlo en incubadora, peligra la integridad del parásitos para el diagnostico
  • 15. Examen macroscópico 1° examina consistencia de heces Forma, blanda, acuosa, descompuesta Si hay presencia de: Moco, sangre, larvas, gusanos adultos y proglotides Mayoria de parasitos se distribuye de modo uniforme en la muestra Muestra acuosa y descompuesta (protozoos y trofozoitos) Muestras blandas o formadas (quistes) Helmintos o sus huevos en cualquier heces Los esquistosomas pasan al torrente fecal en colon descendente recto Los trofozoitos de protozoos son mas numeroso en la parte final de la deposición
  • 16. Examen microscópico De tinción De material fresco conservado Por examen de concentrados Por examen directo Con suero salino permite la detección y observación de trofozoitos móviles de protozoos y larvas de helmintos puede permitir la detección de parásitos que no se concentren bien. para la detección de quistes de protozoos y huevos de helmintos, larvas, pero no es satisfactorio para la detección de trofozoitos de protozoos. son útiles para la detección y el examen morfológico de los trofozoitos de los protozoos y los quistes
  • 17. ESTUDIO DIRECTO EN FRESCO Sacar un poco de muestra Ya en la lamina , además colocar una gota de suero salino 0,85% cubreobjeto 10x bajo aumento 40x objetivo de gran aumento se detecta quistes de los protozoos Los movimientos lento de amebas requiere un examen durante al menos 15 seg. En ausencia de imágenes sospechosas por lo menos se examina 1/3 de la preparación con 40x
  • 19. Métododeconcentración Flotación Método de Faust o Flotación en Sulfato de Zinc Diagnostico quistes de protozoarios
  • 20. Métododeconcentración Sedimentación Método de Formol Eter o Ritchie Diagnostico huevo de helminto, larvas y quistes de protozoarios
  • 21. TINCIONES PERMANENTES 1. permite guardar permanentemente las muestras y cuando aparezcan dificultades de identificación 2. es la diseñada para el uso del objetivo de aceite de inversión (100X). 3. Pueden reconocerse cuando la preparación en fresco y los concentrados sean negativos en detección de trofozoítos y quistes de protozoos 4. Aunque no suele ser útil para la detección de huevos o larvas de helmintos
  • 22. Tinción de tricromo de Wheatley Tinción hierro hematoxilina Detectan amebas y flagelados Simple, fiable y bajo coste Mas costoso pero emjores resutados incrementan la definicion del nucleo del citoplasma Tinción ácidos resistentes modificadas Tinción para microsporidios Enterocytozoon bieneusi y Encephalilozoon inleslinalis ooquistes de Cryptosporidium, Cyclospora e Isospora
  • 23. TÉCNICAS ADICIONALES PARA EL EXAMEN DE PARÁSITOS ENTÉRICOS Técnica de papel de celofán para oxiuros La hembra del oxiuro : Enterobius vermicularis, emigra desde el colon a la piel perianal, donde deposita sus típicos huevos fecundados. Los huevos, y a veces los gusanos adultos, se pueden detectar por el examen de un trozo de adhesivo de celofán de pegado en la piel perianal. Los huevos o los adultos no suelen encontrarse en las heces .Las muestras se deben tomar por la noche, cuando los gusanos son activos, o a primera hora de la mañana, antes de la ducha o de la deposición Cultivo de nematodo y técnica de detección Técnica de Harada-Mori detección e identificación de los distintos nematodos y larvas de Strongyloides, con filtro de papel Harada-Mori , el cultivo en filtro de papel inclinado y el cultivo en carbón vegetal donde las larvas emigran desde las heces a la fase acuosa. En el cultivo del carbón vegetal las larvas migran primero a una gasa húmeda que se coloca en agua, permitiendo su colonización. Tecnica de Baermann detección de Strongyloides y otras larvas de nematodos a partir de muestras fecales. Las heces se colocan en varias capas de gasas parte sup. El extremo del embudo cerrado con una abrazadera se añade agua hasta el nivel de la gasa, las larvas migran por la gasa y se depositan en la base del embudo, para su examen
  • 25. METODOS INMUNOLOGICOS La respuesta inmunologica especifica se inicia cuando el parasito entra en contacto con las celulas del sistema inmunologico, luego de romper las barreras primarias de defensa.
  • 26. HEMAGLUTINACION INDIRECTA (HAI): se basa en la adsorción de antígenos a una partícula (látex, globulos rojos, proteína, etc.) CONTRAINMUNOELECTROFORESIS:
  • 27. REACCION DE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA: Permite la localizacion de antigenos y la identificacion de anticuerpos, sirve para confirmar el diagnostico clinico y constituye un excelente metodo de control de curacion. EL ENSAYO RADIOINMUNOLOGICO O RIA: es un metodo muy sensible para la determinacion cuantitativa de anticuerpos, permitiendo la identificacion de la clase de inmunoglobulina presente.
  • 28. ELISA: Es especialmente apropiado en las formas invasoras de la amibiasis, ya que en la intestinal, principalmente en los pacientes sin diarrea, generalmente pocos anticuerpos circulante son detectados por las pruebas serologicas.
  • 29. REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR): La cual permite la produccion masiva de secuencias de ADN o ARN del parasito, a partir de una muestra clinica; el segmento amplificado puede ser luego identificado por algun ensayo inmunologico. METODOS MOLECULARES
  • 30. Es una reacción enzimática in vitro que amplifica millones de veces una secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia blanco es copiada fielmente Para ello, la reacción aprovecha la actividad de la enzima ADN polimerasa que tiene la capacidad de sintetizar naturalmente el ADN en las células Todos estos elementos interactúan en tres etapas principales de las que se compone la PCR: desnaturalización, hibridación y extensión.
  • 31. • PCR se usa en los siguientes parásitos: -Amebas. -Toxoplasmosis. -Balantidiosis. -Malaria. -Tripanosomiasis. Trichomoniasis. Microsporidiasis. -Babasiosis.
  • 32. Trypanosoma Trypanosoma.brucei • se transmite a travez de la picadura de la mosca TseTse del genero Glossia , produce chancro transitorio • cuadro febril agudo de rápido progreso con adenopatías y produciendo muerte del paciente por afeccion del SNC • Para su diagnostico se debe indagar acerca de los antecedentes epidemiológicos y hallazgos clínicos, en los cuales se observa aumento de la IgM total en sangre y liquido cefalorraquídeo, existe pleocitos con 50-500 celulas mononucleadas/um en LCR . El diagnostico se confirme por la • demostración de los parasitos en frotis sanguieos, tanto grueso como finas, extensiones y aspiraciones o en centrifugado de liquido cefalorraquídeo teñido con Giensa • Trypanosoma cruzi • mal de chagas ,propio de america y es común en mexico . los chinches contaminan los alimentos al defecar • Las manifestaciones crónicas de la infección puede producir megaesofago , megacolon y alteraciones de la conducción miocárdica a la destrucción de células efectoras del sistema parasimpático por anticuerpos • El diagnostico en estado agudo se realiza mediante frotis gruesos o finos de sngre, extensiones y aspirados en las adenopatías .Tambien se puede cultiva,con ayuda del medio Novy-MacNeal. Se pueden sealizar exámenes serológicos EI EIA, IFA y test de CF ,sin embargo no permite diferenciar entre enfermedad agua o crónica
  • 33. Leishmania La leishmani cutánea en el nuevo mundo es casada principalmente por • L.mexicana • L.braziliensis • L.amazonensis • L.venezuelensis • L.guyanensis • L.peruviana Leishmaniamucocutanea o espundia, causada por L.braziliensis, se produce mayormente en niños y en ocasiones se disemina a las membranas mucosas nasal, oral y faringea produciendo lesiones desfigurantes por erosión de partes blandas y de cartílagos, L.braziliensis se encuentra en Mexico, America centrar y Sudamerica Producida por protozoos cinetoplastos del genero Leishmania , se transmiten por picadura de vectores (Pbhlebotomos del viejo mundo y Luzomya en el nuevo mundo ) • Leisbhmania visceral .- leishmani del viejo mundo , causado por L.donovani que predomina en Africa, Asia y la india , mediterráneas y oriente medio y la leishmania del nuevo mundo (America central y sudamerica) L.chagas. • La infección en inmunodeprimidos ,produce la afeccion visceral (hígado, bazo, medula osea y ganglios linfáticos )
  • 34. • El diagnostico se realiza por visualización de amastigotes en extensiones o biopsias, cultivos de promastigotes, la biopsia se realiza en los bordes de las lesiones 2-3 mm , se tiñen con Giemsa • en casos de leishmaniasis visceral se realizan aspirados de adenopatias o medula osea , biopsia de hígado o bazo • Los cultivos se realizan en medio Novy-MacNweal-Nicolle o en medio Drosophila de Schneider, los cultivos muestran promastigotes de 2 a 5 dias ,sin embargo se debe esperar por lo menos 4 semanas Gota gruesa , gota fina , ELISA, deteccion de anticuyerpos IgM
  • 35. Babesiosis • Protozoo apicomplexa , infectan eritrocitos ¸ se transmite a travez de la garrapata , roedores por garrapatas I.capularis • El parasito se multiplica en los eritrocitos como esquizontes pero no produce gametocitos .B.microli suele parecerce a una forma anular, se diferencian por los multiples anillos que pueden formar una tretada (cruz de malta), las celulasinfectadas carecen de pigmento de hemozoina • Hay test serologico para babesia microti y WA1
  • 36. Toxoplasma gondi • Parasito protozoo del filo apicomplexa, distribución mundial y humano y animales (principalmente felinos) • El diagnostico se establece por examen de tejido, sangre y fluidos corporales, se debe observar taquizoitos o quistes tisulares en tinciones hematoxilina eosina, fluorecentes o con inmunoperoxidasa.
  • 38. Entamoeba hystolitica • Parasito patógeno puede producir amebiasis, colitis amebiana y obsesos hepáticos. puede conducir a perforación y peritonitis • El diagnostico se da mediante una seria de muestras fecales, no se debe tomar medicamentos, pues esto podría enmascarar una amebiasis intestinal , se puede realizar un aspirado de absceso hepático que puede mostrar trofozoitos al microscopio • test serológicos de detección de antígenos especificos, sensibles y capaces de diferenciar a E.hystolitica y E.dispar , técnicas de PCR • Los trofozoitos de E.hystolitica miden 10-60 um de diámetro , formas invasivas de 20 um . En preparaciones teñidas se observa cromatina nuclear periférica que suele distribuirse a los largo de la membrana nuclear como finos granulos, cariosoma pequeño y aveces centrales
  • 39. Nematodos • Enterobius vermicularis: • Principalmente típica en niños • Los gusanos viven en el ciego y áreas adyacentes. • Las hembras miden más de 13 mm y tienen un extremo posterior puntiagudo. • Los machos son raramente vistos, las hembras se pueden encontrar en la superficie de las heces o en la piel perianal, especialmente por la noche, donde deposita sus huevos; estos son incoloros y ovoidales con un lado aplanado y miden entre 20 y 40 µm de ancho y 50 y 60 de µm de largo. • Aunque la infección puede ser asintomática, los niños presentan frecuentemente prurito anal, irritabilidad e insomnio. • La detección de los huevos y, a veces de gusanos adultos en la piel perianal se hace mediante la técnica de la cinta adhesiva durante el sueño a primera hora de la mañana.
  • 40. • Trichuris trichiura: • Se encuentran especialmente en el ciego y a veces en el colon y el recto. • Miden más de 50 mm de longitud y permanecen en la mucosa por el extremo anterior, que es fino, mientras que el otro extremo es más grueso y cuelga libremente en la luz. • La hembra es alargada, mientras que la cola de los machos es enrollada. • Tiene un ciclo vital en el que los huevos salen con las heces sin embrionar y tarda varias semanas, en adecuadas condiciones de la tierra en madurar a estado infectivo. Cuando se ingieren huevos embrionados, se liberan larvas y maduran en el colon, donde se fijan y pueden vivir más de diez años. • Las infecciones leves suelen ser asintomáticas, pero cuando hay muchos parásitos puede aparecer diarrea o disentería junto con anemia y deshidratación. • El diagnostico se hace al hallar los huevos en muestras fecales o con técnicas de conservación. • Los huevos tienen forma de barril con unos tapones retractiles en ambos extremos, suelen medir de 50 a 55 µm de largo por 22 a 24 µm de ancho
  • 41. • Áscaris lumbricoides: • Vive en el duodeno y yeyuno proximal. • Las hembras miden más de 35 cm de largo por 6 mm de diámetro. El macho es más pequeño y tiene un extremo curvado ventralmente. • Cuando se ingieren alcanzan el intestino y las larvas penetran la mucosa llegando al torrente sanguíneo. De ahí van a los pulmones donde maduran en el lecho capilar alveolar y luego pasan al alveolo. Son arrastrados hasta la epiglotis y nuevamente son ingeridos y se hacen adultos en el intestino. • Desde que son huevos hasta que se vuelven adultos pasan aproximadamente 2 meses. • Se puede presentar neumonitis por áscaris o un síndrome de Löffer. La presencia de pocos gusanos no se advierte, mientras que la infección grave produce diferentes grados de diarrea y dolor abdominal. También puede producirse obstrucción por una masa de gusanos. • Tienen facilidad para invadir sitios ectópicos como la vía biliar, el hígado y el apéndice. • El diagnostico se realiza al observar los huevos en heces o por la detección de un gusano adulto en el vómito o las heces.
  • 42. • Uncinarias: • Necator americanus se encuentra en Estados Unidos y Ancylostoma duodenale, no se halla en Estados Unidos. • Las hembras miden más de 12 mm y los machos un poco menos. Los machos se diferencian por la bolsa copulatoria en forma de abanico en su extremo posterior. • Los huevos se eliminan por las heces. Las larvas rabdiformes se liberan y se hacen infectivas en su estado de filarias en 7 días. Cuando contactan con el huésped, penetran su piel y llegan a través de la circulación a los pulmones, donde suben por el árbol bronquial hasta ser deglutidas. Cuando maduran en el intestino empiezan a poner huevos. • Pueden causar patología cutánea en su sitio de entrada caracterizado por inflamación, eritema y ampollas con mucho prurito. Puede causar síndrome de Löffer. La infección intestinal puede ocasionar gastroenteritis con dolor abdominal, diarrea y nauseas. • Su principal manifestación es la anemia ferropénica secundaria. El diagnostico se realiza por la presencia de huevos en las heces. Miden de 58 a 76 µm de longitud por 36 a 40 µm de ancho.
  • 43. • Strongyloides stercolaris: • Las hembras miden de 2 a 3 mm y viven unidas a la mucosa del duodeno, donde se reproducen por partenogénesis. Los machos no se dan en los vertebrados. • Los huevos se abren en el intestino, liberando larvas rabdiformes que salen en las heces, estas se trasforman en filarias infectivas en el suelo. Penetran con facilidad la piel de los individuos y migran hacia los pulmones mediante la sangre y de ahí al árbol bronquial siendo nuevamente deglutidas. • La entrada de las filarias causa irritación, eritema y prurito. También causa síndrome de Löffer. Puede producir síntomas de ulcera péptica, dolor abdominal y diarrea. • El diagnostico se hace por el hallazgo de las larvas rabdiformes en las heces y se deben diferenciar de las de Uncinarias, y se caracterizan por una cavidad bucal corta y un primordio genital prominente. Larva rabditiforme Larva filariforme
  • 44. Es una reacción enzimática in vitro que amplifica millones de veces una secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia blanco es copiada fielmente Para ello, la reacción aprovecha la actividad de la enzima ADN polimerasa que tiene la capacidad de sintetizar naturalmente el ADN en las células Todos estos elementos interactúan en tres etapas principales de las que se compone la PCR: desnaturalización, hibridación y extensión.
  • 45. • PCR se usa en los siguientes parásitos: -Amebas. -Toxoplasmosis. -Balantidiosis. -Malaria. -Tripanosomiasis. Trichomoniasis. Microsporidiasis. -Babasiosis.
  • 46. Trypanosoma Trypanosoma.brucei • se transmite a travez de la picadura de la mosca TseTse del genero Glossia , produce chancro transitorio • cuadro febril agudo de rápido progreso con adenopatías y produciendo muerte del paciente por afeccion del SNC • Para su diagnostico se debe indagar acerca de los antecedentes epidemiológicos y hallazgos clínicos, en los cuales se observa aumento de la IgM total en sangre y liquido cefalorraquídeo, existe pleocitos con 50-500 celulas mononucleadas/um en LCR . El diagnostico se confirme por la • demostración de los parasitos en frotis sanguieos, tanto grueso como finas, extensiones y aspiraciones o en centrifugado de liquido cefalorraquídeo teñido con Giensa • Trypanosoma cruzi • mal de chagas ,propio de america y es común en mexico . los chinches contaminan los alimentos al defecar • Las manifestaciones crónicas de la infección puede producir megaesofago , megacolon y alteraciones de la conducción miocárdica a la destrucción de células efectoras del sistema parasimpático por anticuerpos • El diagnostico en estado agudo se realiza mediante frotis gruesos o finos de sngre, extensiones y aspirados en las adenopatías .Tambien se puede cultiva,con ayuda del medio Novy-MacNeal. Se pueden sealizar exámenes serológicos EI EIA, IFA y test de CF ,sin embargo no permite diferenciar entre enfermedad agua o crónica
  • 47. Leishmania La leishmani cutánea en el nuevo mundo es casada principalmente por • L.mexicana • L.braziliensis • L.amazonensis • L.venezuelensis • L.guyanensis • L.peruviana Leishmaniamucocutanea o espundia, causada por L.braziliensis, se produce mayormente en niños y en ocasiones se disemina a las membranas mucosas nasal, oral y faringea produciendo lesiones desfigurantes por erosión de partes blandas y de cartílagos, L.braziliensis se encuentra en Mexico, America centrar y Sudamerica Producida por protozoos cinetoplastos del genero Leishmania , se transmiten por picadura de vectores (Pbhlebotomos del viejo mundo y Luzomya en el nuevo mundo ) • Leisbhmania visceral .- leishmani del viejo mundo , causado por L.donovani que predomina en Africa, Asia y la india , mediterráneas y oriente medio y la leishmania del nuevo mundo (America central y sudamerica) L.chagas. • La infección en inmunodeprimidos ,produce la afeccion visceral (hígado, bazo, medula osea y ganglios linfáticos )
  • 48. • El diagnostico se realiza por visualización de amastigotes en extensiones o biopsias, cultivos de promastigotes, la biopsia se realiza en los bordes de las lesiones 2-3 mm , se tiñen con Giemsa • en casos de leishmaniasis visceral se realizan aspirados de adenopatias o medula osea , biopsia de hígado o bazo • Los cultivos se realizan en medio Novy-MacNweal-Nicolle o en medio Drosophila de Schneider, los cultivos muestran promastigotes de 2 a 5 dias ,sin embargo se debe esperar por lo menos 4 semanas Gota gruesa , gota fina , ELISA, deteccion de anticuyerpos IgM
  • 49. Babesiosis • Protozoo apicomplexa , infectan eritrocitos ¸ se transmite a travez de la garrapata , roedores por garrapatas I.capularis • El parasito se multiplica en los eritrocitos como esquizontes pero no produce gametocitos .B.microli suele parecerce a una forma anular, se diferencian por los multiples anillos que pueden formar una tretada (cruz de malta), las celulasinfectadas carecen de pigmento de hemozoina • Hay test serologico para babesia microti y WA1
  • 50. Toxoplasma gondi • Parasito protozoo del filo apicomplexa, distribución mundial y humano y animales (principalmente felinos) • El diagnostico se establece por examen de tejido, sangre y fluidos corporales, se debe observar taquizoitos o quistes tisulares en tinciones hematoxilina eosina, fluorecentes o con inmunoperoxidasa. • La infecion de sangre y fluidos indica una infección aguda, si es en tejidos indica una infección crónica, en la extensión se observa taquizoitoas ovalados o forma demedia luna, mide de tres a siete micras , quistes esféricos de 30 micras de diámetro • Uso de PCR es de alta sensibilidad y especificidad para detección de encefalitis por toxoplasma, enfermedad diseminada, test de anticuerpos IgM
  • 52. Entamoeba hystolitica • Parasito patógeno puede producir amebiasis, colitis amebiana y obsesos hepáticos. puede conducir a perforación y peritonitis • Absesos hepaticos se diagnostica por ecografia, radiografia y test serológicos • El diagnostico se da mediante una seria de muestras fecales, no se debe tomar medicamentos, pues esto podría enmascarar una amebiasis intestinal , se puede realizar un aspirado de absceso hepático que puede mostrar trofozoitos al microscopio • test serológicos de detección de antígenos especificos, sensibles y capaces de diferenciar a E.hystolitica y E.dispar , técnicas de PCR • Los trofozoitos de E.hystolitica miden 10-60 um de diámetro , formas invasivas de 20 um . En preparaciones teñidas se observa cromatina nuclear periférica que suele distribuirse a los largo de la membrana nuclear como finos granulos, cariosoma pequeño y aveces centrales
  • 53. Nematodos • Enterobius vermicularis: • Principalmente típica en niños • Los gusanos viven en el ciego y áreas adyacentes. • Las hembras miden más de 13 mm y tienen un extremo posterior puntiagudo. • Los machos son raramente vistos, las hembras se pueden encontrar en la superficie de las heces o en la piel perianal, especialmente por la noche, donde deposita sus huevos; estos son incoloros y ovoidales con un lado aplanado y miden entre 20 y 40 µm de ancho y 50 y 60 de µm de largo. • Aunque la infección puede ser asintomática, los niños presentan frecuentemente prurito anal, irritabilidad e insomnio. • La detección de los huevos y, a veces de gusanos adultos en la piel perianal se hace mediante la técnica de la cinta adhesiva durante el sueño a primera hora de la mañana.
  • 54. • Trichuris trichiura: • Se encuentran especialmente en el ciego y a veces en el colon y el recto. • Miden más de 50 mm de longitud y permanecen en la mucosa por el extremo anterior, que es fino, mientras que el otro extremo es más grueso y cuelga libremente en la luz. • La hembra es alargada, mientras que la cola de los machos es enrollada. • Tiene un ciclo vital en el que los huevos salen con las heces sin embrionar y tarda varias semanas, en adecuadas condiciones de la tierra en madurar a estado infectivo. Cuando se ingieren huevos embrionados, se liberan larvas y maduran en el colon, donde se fijan y pueden vivir más de diez años. • Las infecciones leves suelen ser asintomáticas, pero cuando hay muchos parásitos puede aparecer diarrea o disentería junto con anemia y deshidratación. • El diagnostico se hace al hallar los huevos en muestras fecales o con técnicas de conservación. • Los huevos tienen forma de barril con unos tapones retractiles en ambos extremos, suelen medir de 50 a 55 µm de largo por 22 a 24 µm de ancho
  • 55. • Áscaris lumbricoides: • Vive en el duodeno y yeyuno proximal. • Las hembras miden más de 35 cm de largo por 6 mm de diámetro. El macho es más pequeño y tiene un extremo curvado ventralmente. • Cuando se ingieren alcanzan el intestino y las larvas penetran la mucosa llegando al torrente sanguíneo. De ahí van a los pulmones donde maduran en el lecho capilar alveolar y luego pasan al alveolo. Son arrastrados hasta la epiglotis y nuevamente son ingeridos y se hacen adultos en el intestino. • Desde que son huevos hasta que se vuelven adultos pasan aproximadamente 2 meses. • Se puede presentar neumonitis por áscaris o un síndrome de Löffer. La presencia de pocos gusanos no se advierte, mientras que la infección grave produce diferentes grados de diarrea y dolor abdominal. También puede producirse obstrucción por una masa de gusanos. • Tienen facilidad para invadir sitios ectópicos como la vía biliar, el hígado y el apéndice. • El diagnostico se realiza al observar los huevos en heces o por la detección de un gusano adulto en el vómito o las heces. • Los huevos fértiles de Áscaris son redondos o ligeramente ovales, miden de 55 a 75 µm de largo y 35 a 50 µm de ancho.
  • 56. • Uncinarias: • Necator americanus se encuentra en Estados Unidos y Ancylostoma duodenale, no se halla en Estados Unidos. • Las hembras miden más de 12 mm y los machos un poco menos. Los machos se diferencian por la bolsa copulatoria en forma de abanico en su extremo posterior. • Los huevos se eliminan por las heces. Las larvas rabdiformes se liberan y se hacen infectivas en su estado de filarias en 7 días. Cuando contactan con el huésped, penetran su piel y llegan a través de la circulación a los pulmones, donde suben por el árbol bronquial hasta ser deglutidas. Cuando maduran en el intestino empiezan a poner huevos. • Pueden causar patología cutánea en su sitio de entrada caracterizado por inflamación, eritema y ampollas con mucho prurito. Puede causar síndrome de Löffer. La infección intestinal puede ocasionar gastroenteritis con dolor abdominal, diarrea y nauseas. • Su principal manifestación es la anemia ferropénica secundaria. El diagnostico se realiza por la presencia de huevos en las heces. Miden de 58 a 76 µm de longitud por 36 a 40 µm de ancho.
  • 57. • Strongyloides stercolaris: • Las hembras miden de 2 a 3 mm y viven unidas a la mucosa del duodeno, donde se reproducen por partenogénesis. Los machos no se dan en los vertebrados. • Los huevos se abren en el intestino, liberando larvas rabdiformes que salen en las heces, estas se trasforman en filarias infectivas en el suelo. Penetran con facilidad la piel de los individuos y migran hacia los pulmones mediante la sangre y de ahí al árbol bronquial siendo nuevamente deglutidas. • La entrada de las filarias causa irritación, eritema y prurito. También causa síndrome de Löffer. Puede producir síntomas de ulcera péptica, dolor abdominal y diarrea. • El diagnostico se hace por el hallazgo de las larvas rabdiformes en las heces y se deben diferenciar de las de Uncinarias, y se caracterizan por una cavidad bucal corta y un primordio genital prominente. Larva rabditiforme Larva filariforme