5. ¿Qué vamos a ver hoy?
In vivo:
• Pruebas funcionales
Pruebas para
evaluar
la inmunidad celular:
In vitro:
• Pruebas funcionales
• Pruebas no funcionales
7. Pruebas in vitro
No
Funcionales
Citometría de Flujo
Inmunofluorescencia
UTILIDADES: Caracterizar poblaciones celulares
* Detección de tipos celulares
Diagnóstico y clasificación de leucemias y linfomas
* Caracterización fenotípica
Evaluación del pronóstico en cáncer
* Evaluación número total de linfocitos
Pronóstico de pacientes con HIV
* Relaciones LT/LB, LT CD4+/ CD8+
Estado inmunitario en pacientes transplantados
10. Pruebas in vitro
Funcionales
No
Funcionales
Citometría de Flujo
Inmunofluorescencia
Funcionalidad de LT:
Bioensayos,ELISA,ELISPOT
Detección de sustancias liberadas
(Respuesta efectora)
-ADCC (Citotoxicidad mediada por
Ac)
Citotoxicidad (Respuesta efectora)
-por antígenos
Proliferación celular (linfocitaria) (Activa
11. ¿Cómo se cultiva una célula?
Condiciones esterilidad para
evitar contaminaciones con
bacterias y hongos
fundamentalmente
12. Proliferación por antígenos
Co-cultivo de Células presentadoras de
antígenos (CPA) con LT
Evalúa: Funcionalidad de LT específicos de memoria
contra una antígeno determinado
LINFOCIT
O T o B
CPA
ANTIGENO
5-7 días
Proliferación de Linfocitos
14. BIOENSAY
O
Evalúa la funcionalidad biológica de una molécula
determinada
Ejemplos:
• Proliferación inducida por citoquinas (proliferación de LT por IL-2)
• Citotoxicidad de una molécula (TNF-α produce citotoxicidad de
células fibroblasticas, L929)
• Funcionalidad de anticuerpos (anti TNF-α inhibe la funcionalidad
del TNF- α)
15. Pruebas para evaluar la inmunidad
celular
Pruebas in vivo
Funcionales Intradermo-reacción
Hipersensibilidad
Retardada
16. Intradermo-reacción
Prueba de Mantoux, tuberculina o PPD
Inoculación del
Ag Intradérmico
LT reconoce el
Ag y libera
citoquinas que
actúan sobre el
endotelio
Reclutamiento de
macrófagos y
leucocitos
INFLAMACION
Evalúa la respuesta celular (activacion de CPS y linfocitos de
memoria)
ante el Mycobacterium tuberculosis