ANATOMÍA
PATOLÓGICA
PRÁCTICA

INTEGRANTES:

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y tejidos histopatológicos

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1 Recepción de muestras
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QUE ES BIOPSIA?
Puede definirse como el pro...
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Colecistitis
crónica con
reagudización
hemorrágica en
granulación.
Ulcera gástrica
activa, en
organización
fibrosa avanzada
y en partes con
reepitelización.
Proceso inflamatorio
crónico de reacción
a cuerpo extraño
(Granuloma de
reacción a cuerpo
extraño).
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Clase #

3 Acortamiento del proceso

En muchas ocasi...
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Se realiza una ...
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Una vez colocad...
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Laboratotio de patologia inclusion,fijacion,corte,tincion de muestras
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  1. 1. ANATOMÍA PATOLÓGICA PRÁCTICA INTEGRANTES: - BRAVO CRESPO LUIS ARTURO CHONILLO FRANCO JORDI ALBERTO FERNADEZ CHACON LUIS DAVID LOOR VERA JOSSELYN MARIA GARCIA ZAMBRANO ANGIE LEONOR OBANDO CHANCAY XIOMARA DAYANA SALAZAR ALCIVAR CRISTHIAN DAVID
  2. 2. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # El diagnóstico histopatológico muchas veces precede y determina la actitud terapéutica en un caso dado. Por consiguiente, el diagnóstico de la biopsia es siempre URGENTE. Esto es importante no sólo por la decisión terapéutica, sino que también porque significa reducir gastos de hospitalización, ahorro de tiempo, entre otros. 1 Recepción de muestras Para la adecuada recolección, conservación y envío de las muestras, es indispensable tener presentes las siguientes normas: 1. Toda muestra debe ser perfectamente identificada. 2. Las muestras se obtienen de pacientes vivos o de una la necropsia, 3. Para la recolección de cualquier otro tipo de muestra, utilizar material limpio y seco. 4. Los envases utilizados para el envío de muestras deben ser en lo posible irrompibles, herméticos y de dimensiones adecuadas. Las
  3. 3. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 1 Recepción de muestras Identificación de las muestras - Toda muestra para examen histopatológico o citológico debe ser identificada en el frasco, sobre o bolsa con el nombre completo del paciente y el órgano de donde procede. - La muestra debe acompañarse de un formulario en el que se consigne el nombre completo y edad del paciente, órgano de donde se obtuvo, diagnóstico y antecedentes clínicos y médico que envía
  4. 4. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # QUE ES BIOPSIA? Puede definirse como el procedimiento en el que se remueve tejido de un organismo vivo para examen microscópico y así establecer un diagnóstico. Según el tipo de muestra se distinguen: 1) Biopsia por punción: 2) Biopsia excisional: 3) Biopsia incisional: 4) Formas especiales de biopsia.
  5. 5. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras a) Fijación • Es el primer proceso en la preparación de un tejido que engloba un conjunto de técnicas en la que se estabilizan las proteínas y cuya finalidad es evitar la autolisis y crecimiento bacteriano para ello se utilizan una serie de soluciones liquidas como el formol, bouin, y medios físicos como el calor de la llama o la congelación de la muestra por medio del criostato).
  6. 6. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras b) Inclusión • Una vez fijado el tejido tenemos que procesarlo para su observación con el microscopio. Hay 2 formas para endurecer el tejido la congelación y la inclusión • La inclusión es el método más común de endurecer el tejido y consiste en infiltrar la muestra con sustancias líquidas que tras un proceso de polimerización o enfriamiento se solidifican, sin afectar a las características del tejido. • La congelación de los tejidos previamente fijados permite la obtención de secciones que pueden ir desde unas 50 µm hasta nm, para lo que se utilizan diferentes aparatos: y el ultracriotomo para secciones ultrafinas del orden de nm
  7. 7. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras b) Inclusión El proceso para la inclusión de un tejido con parafina es: o Primero una vez que ya está fijada la muestra se procede a deshidratarla. o Después se coloca el tejido en un recipiente para poder llenarlo con parafina. o Se procede a esperar que se forme el bloque. o Una vez formado el bloque se encuentra listo para proceder a cortar el tejido en el micrótomo
  8. 8. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras Inclusión
  9. 9. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras c) Corte • Para realizar el corte de la muestra vamos a precisar de un micrótomo, con una buena técnica se pueden obtener secciones (rebanaditas de tejido) de unas 5 µm e incluso menores en algunos casos. Durante el corte las secciones unas pegadas a otras forman una fila que es cómoda de manejar y montar. El objetivo de realizar cortes tan delgados es para que estos puedan ser atravesados por la luz del microscopio.
  10. 10. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras c) Corte ¿Qué es un micrótomo? CUCHILLAS VIDRIO/ CORTES FINOS INSTRUMENTO DE CORTE CUCHILLAS DIAMANTE/ CORTES DUROS UTILIZAN CUCHILLAS CUCHILLAS ACERO/ TEJIDOS BLANDOS
  11. 11. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras c) Corte ¿Qué es un criostato? En ocasiones se necesitará tener un diagnóstico más rápido de una muestra por lo que la usar la técnica clásica de inclusión en parafina para realizar un corte tardaría mucho, entonces se puede congelar la muestra ganando tiempo, para eso se necesita de un criostato. Un CRIOSTATO en patología es un micrótomo montado en el interior de un congelador para el procesamiento de tejido congelado, puede congelar hasta temperaturas de -35° C, pero en el laboratorio se trabaja entre -20°C a -25°C
  12. 12. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción El método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, que por ser catiónica o básica, tiñe estructuras ácidas (basofilas) en tonos azul y púrpura,como por ejemplo los núcleos celulares; y el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidofilas) en tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aniónica o ácida, como el citoplasma.
  13. 13. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial Las tinciones diferenciales se utilizan para distinguir entre tipos de microorganismos, malformaciones, virus entre otras. La técnica de tinción diferencial consta de dos etapas: una tinción primaria (siguiendo el mismo método que en una tinción simple) seguida de una tinción de contraste.
  14. 14. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial • La tinción de Gram La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas.
  15. 15. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial • • • • La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción de contraste: 1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta. 2. Se añade el mordiente, iodo. 3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas retienen el colorante. • 4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un color violeta más intenso.
  16. 16. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial
  17. 17. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial • La tinción de ácido-alcoho] resistencia(Ziehl-Neelsen) La tinción diferencial de ácido-alcohol resistencia fue desarrollada por Paul Ehrlich en 1 882. Actualmente se utiliza una modificación de la técnica de Ehrlich que recibe el nombre de tinción de Ziehl-Neelsen. Esta tinción sirve para teñir bacterias del género Mycobacterium, el resto de las bacterias se tiñen de azul por el colorante de contraste. M. tuberculosis, causante de la tuberculosis y M leprae, causante de la lepra o enfermedad de Hansen, se identifican mediante esta tinción.
  18. 18. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras d) Tinción diferencial • La plata metanamina de Grocott es un método de tinción especial más empleado para hongos. La reacción tintorial está basada en que, en presencia de ácido peryódico, los polisacáridos de la pared celular de los hongos son oxidados a aldehídos; éstos, a su vez, reducen el complejo nitrato-plata metanamina (o metenamina) produciendo una coloración de café a negra, debido al depósito de plata reducida en los lugares de localización de los aldehídos.
  19. 19. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras e) Observación PROCESO MACROSCOPICO Comprende el estudio de sus características organolépticas, tales como: • Ubicación o localización • Tamaño • Peso • Forma • Consistencia • Descripción superficie externa • Descripción superficie de corte
  20. 20. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras e) Observación PROCESO MACROSCOPICO Etiqueta: Nombre Paciente Fecha Localización de la lesión Diagnóstico clínico Nombre del doctor Hospital
  21. 21. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras e) Observación PROCESO MICROSCOPICO El microscopio es una herramienta de gran importancia para la observación e identificación de los microorganismos. Método: • De Menor a Mayor aumento • Recorrido sistemático • Centrado del campo óptico
  22. 22. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras e) Observación PROCESO MICROSCOPICO Pautas Fundamentales 1. Criterio tridimensional 2. Elementos básicos: • Células • Sustancias intercelulares • Líquidos • Artefactos
  23. 23. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 2 Preparación de muestras e) Observación PROCESO MICROSCOPICO Debemos distinguir entre las técnicas para observación de microorganismos vivos y las preparaciones para tinción. Las tinciones ofrecen una información adicional a la simple observación de la morfología, ya que ponen de manifiesto características de la pared celular o la existencia de estructuras especiales, como las esporas bacterianas.
  24. 24. Colecistitis crónica con reagudización hemorrágica en granulación.
  25. 25. Ulcera gástrica activa, en organización fibrosa avanzada y en partes con reepitelización.
  26. 26. Proceso inflamatorio crónico de reacción a cuerpo extraño (Granuloma de reacción a cuerpo extraño).
  27. 27. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso En muchas ocasiones en una cirugía es necesario la extracción de muestras de tejidos, que nos permitan definir si el tejido es benigno o maligno, y que nos permita . tomar una rápida decisión.
  28. 28. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso Se realiza una biopsia del tipo necesario, se realiza un análisis macroscópico, se coloca la muestra en el OCT (un alcohol viscoso con polivinil y polienglicol) el cual permite mejor fijación, congelación y corte
  29. 29. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso Una vez colocado el tejido En el molde para ser congelado, lo sometemos a - 35° centígrados dentro de la parrilla del criostato
  30. 30. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso Dentro del Criostato, también contamos con un Micrótomo el cual utilizamos para realizar el corte deseado
  31. 31. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso Una vez que ya se encuentran hechos los cortes o el corte deseado, procedemos a a colocarlo en la laminilla
  32. 32. 1 Recolección, procesamiento de muestras y tejidos histopatológicos Clase # 3 Acortamiento del proceso Procedemos a teñir, los tejidos pueden teñirse en Hematoxilina Eosina, o también en Azul de Toluideno

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