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ITZEL MORALES BURGOS R2 ANATOMÍA PATOLÓGICA.
TÉCNICAS BÁSICAS DE HISTOLOGÍA
HISTOPATOLOGÍA: TEJIDOS CITOPATOLOGÍA: CÉLULAS
Fijación
Examen
macroscópico
Procesado
Inclusión Microtomo Tinción
TINCIÓN H&E
COLORACIÓN O
TINCIÓN
COLORANTE: SUBSTANCIA QUE PUEDE
TRANSFERIR SU COLOR A OTRO CUERPO
TINCIÓN H&E
La técnica de tinción de uso más frecuente
H&E: Tinción bicrómica estándar.
TINCIONES ESPECIALES
TINCIONES
ESPECIALES
TEJIDO CONECTIVO
LÍPIDOS
HIDRATOS DE
CARBONO (Mucinas)
PIGMENTOS Y
MINERALES
MICROORGANISMOS
Se emplean para
demostrar grupos
específicos de
químicos, o de
algunas sustancias.
Visualizar la
morfología de ciertos
microorganismos.
TEJIDO CONECTIVO
COLÁGENO
ELÁSTICAS
RETICULINA
TRICRÓMICO DE MASSON
Fibras de colágeno, y el tejido conectivo
en general, en comparación células
musculares o epitelios.
• NÚCLEOS- NEGRO
• MUSCULO, CITOPLASMA Y QUERATINA- ROJO
• COLÁGENO - AZUL
TINCIÓN:
VAN GIESON
FIBRAS COLÁGENAS
FIBRAS ELÁSTICAS
Ayuda a delinear las arterias, porque la lámina elástica de las
arterias musculares y la media de la aorta contienen fibras
elásticas.
El método de van Gieson para fibras elásticas proporciona un
buen contraste.
• FIBRAS ELÁSTICAS: NEGRO
• NÚCLEOS: AZUL-NEGRO
• CITOPLASMA: AMARILLO
• COLÁGENO: ROJO
TINCIÓN:
VERHOEFF
SWEET GORDON
(FIBRAS RETICULARES)
La tinción de reticulina es útil en órganos parenquimatosos, para
delinear la arquitectura. Se pueden ver las fibras reticulares
delicadas, que son argirofílicas. Fibras reticulares y membrana
basal.
• FIBRAS RETICULARES: NEGRO
• TEJIDO CONECTIVO: AMARILLO
• NÚCLEOS : ROJOS
TINCIÓN:
HIDRATOS DE CARBONO: MUCINAS
• Neutral (GI, próstata. Solo se
tiñen con PAS)
• Acida (simple o no sulfatada)
Típicas de las células epiteliales
• Acida (simple mesenquimal)
acido hialuronico, tejido
estromal, sarcomas.
• Acida (compleja sulfatada)
Adenocarcinomas
• Acida (compleja Tejido
conectivo) . Tejido estromal,
cartilago. Hueso.
MUCICARMÍN
Muy específico para las mucinas epiteliales, incluidos los
adenocarcinomas. Aunque insensible. Tinción que contiene
carmín (material colorante rojo) y cloruro de aluminio.
• MUCINA: ROSA
• CAPSULA CRIPTOCOCO: ROSADO OSCURO
• NÚCLEOS: NEGROS
• FONDO: AMARILLO
TINCIÓN:
P.A.S.
Tiñe tanto el glucógeno como las mucinas, pero el tejido se
puede digerir previamente con diastasa para eliminar el
glucógeno.
Colorantes neutros y ácidos simples no sulfatados y
mucinas sulfatadas de complejo ácido.
• GLUCÓGENO, MUCINA Y ALGUNAS MEMBRANAS BASALES:
ROJO A PURPURA
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simple a pH 2.5, mucinas ácido-complejo sulfatadas a pH 1.0.
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Las partículas de hierro se estabilizan en amoniaco, y glicerina y
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• FONDO AMARILLO
TINCIÓN:
ROJO CONGO: AMILOIDE
El rojo congo es un compuesto orgánico utilizado para teñir
amiloide en secciones de tejido. Se utiliza para evaluar la
presencia y extensión de la amiloidosis en diferentes órganos.
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BAJO LUZ POLARIZADA.
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TINCIÓN:
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La tinción de hierro de Perl es el método clásico para
demostrar el hierro en los tejidos. La sección se trata con
ácido clorhídrico diluido para liberar iones férricos. Estos iones
luego reaccionan con el ferrocianuro de potasio para producir
un compuesto azul insoluble (la reacción del azul de Prusia).
• HEMOSIDERINA, ALGUNOS ÓXIDOS Y SALES DE
HIERRO: AZUL
• NÚCLEOS, CITOPLASMA: ROJOS
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FONTANA MASSON GRÁNULOS
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El método de Fontana-Masson ("tinción de melanina") comúnmente
utilizado se basa en la propiedad de los gránulos de melanina para
reducir el nitrato de plata amoniacal ( algunos pigmentos de
lipocromo también se tiñerán de negro).
• GRÁNULOS ARGENTAFINES: NEGRO
• MELANINA: NEGRO
• NÚCLEOS, CITOPLASMA: ROJO-ROSADO
TINCIÓN:
VON KOSSA
La tinción de VonKossa es un método de reducción de plata
que muestra fosfatos y carbonatos, pero estos suelen estar
presentes junto con el calcio. Esta tinción. es más útil cuando
están presentes grandes cantidades, como en el hueso.
• HUESOS Y SALES MINERALES (FOSFATOS
CARBONATOS Y OXALATOS): DEPÓSITOS NEGROS
• NÚCLEOS Y CITOPLASMA: ROSA, ROJO
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Las espiroquetas son muy difíciles de teñir. El mejor método es el
Warthin-Starry. Sin embargo, los organismos espirales pequeños y
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• FONDO: AMARILLO
• ESPIROQUETAS Y OTROS MICROORGANISMOS:
AZUL OBSCURO
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TINCIÓN:
Las espiroquetas H. pilory.
BACTERIAS, HONGOS.
ZIEHL NEELSEN
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organismos ácido resistentes como M. tuberculosis, y otras
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• BACILOS ACIDO- ALCOHOL RESISTENTE: ROJO BRILLANTE
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FITE FARACO
Modificación de la tinción de Ziehl Nelseen que tiene un ácido más
débil para los bacilos de M. Leprae que se supone son más
delicados.
• BACILOS DE LA LEPRA Y OTROS BACILOS, ACIDO-
ALCOHOL RESISTENTE: ROJO
• FONDO: AZUL PÁLIDO
TINCIÓN:
BACTERIAS, HONGOS.
GROCOTT METENAMINA DE PLATA
Esta tinción, a menudo abreviada como "GMS", se utiliza para teñir
hongos y Pneumocystis jirovecci. Las paredes celulares de estos
organismos se tiñen, (marrón a negro).
• HONGOS: PERFECTAMENTE DELINEADOS EN COLOR NEGRO
• MICELIO/HIFAS: ROSADO GRISÁCEO
• FONDO: VERDE
TINCIÓN:
PLATA METENAMINA DE JONES
Tiñe membranas basales, permitiendo ver la membrana basal
glomerular, (Glomerulonefritis membranosa). y tubulares de
biopsias renales.
• MEMBRANAS BASALES: NEGRO INTENSO.
• TEJIDO CONECTIVO: VERDE CLARO, ROJO.
TINCIÓN:
MOVAT
El pentacrómico de Movat es una tinción desarrollada por el patólogo
Henry Zoltan Movat para resaltar los componentes del tejido
conectivo, en especial el cardiovascular.
a) Azul alcián
b) Hematoxilina Verhoeff
c) Escarlata de Biebrich
d) Fucsina ácida
e) Azafrán
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TECNICAS ESPECIALES.pptx

  • 1. TINCIONES ESPECIALES ITZEL MORALES BURGOS R2 ANATOMÍA PATOLÓGICA.
  • 2. TÉCNICAS BÁSICAS DE HISTOLOGÍA HISTOPATOLOGÍA: TEJIDOS CITOPATOLOGÍA: CÉLULAS
  • 5. COLORACIÓN O TINCIÓN COLORANTE: SUBSTANCIA QUE PUEDE TRANSFERIR SU COLOR A OTRO CUERPO
  • 6. TINCIÓN H&E La técnica de tinción de uso más frecuente H&E: Tinción bicrómica estándar.
  • 7. TINCIONES ESPECIALES TINCIONES ESPECIALES TEJIDO CONECTIVO LÍPIDOS HIDRATOS DE CARBONO (Mucinas) PIGMENTOS Y MINERALES MICROORGANISMOS Se emplean para demostrar grupos específicos de químicos, o de algunas sustancias. Visualizar la morfología de ciertos microorganismos.
  • 9. TRICRÓMICO DE MASSON Fibras de colágeno, y el tejido conectivo en general, en comparación células musculares o epitelios. • NÚCLEOS- NEGRO • MUSCULO, CITOPLASMA Y QUERATINA- ROJO • COLÁGENO - AZUL TINCIÓN: VAN GIESON FIBRAS COLÁGENAS
  • 10. FIBRAS ELÁSTICAS Ayuda a delinear las arterias, porque la lámina elástica de las arterias musculares y la media de la aorta contienen fibras elásticas. El método de van Gieson para fibras elásticas proporciona un buen contraste. • FIBRAS ELÁSTICAS: NEGRO • NÚCLEOS: AZUL-NEGRO • CITOPLASMA: AMARILLO • COLÁGENO: ROJO TINCIÓN: VERHOEFF
  • 11. SWEET GORDON (FIBRAS RETICULARES) La tinción de reticulina es útil en órganos parenquimatosos, para delinear la arquitectura. Se pueden ver las fibras reticulares delicadas, que son argirofílicas. Fibras reticulares y membrana basal. • FIBRAS RETICULARES: NEGRO • TEJIDO CONECTIVO: AMARILLO • NÚCLEOS : ROJOS TINCIÓN:
  • 12. HIDRATOS DE CARBONO: MUCINAS • Neutral (GI, próstata. Solo se tiñen con PAS) • Acida (simple o no sulfatada) Típicas de las células epiteliales • Acida (simple mesenquimal) acido hialuronico, tejido estromal, sarcomas. • Acida (compleja sulfatada) Adenocarcinomas • Acida (compleja Tejido conectivo) . Tejido estromal, cartilago. Hueso.
  • 13. MUCICARMÍN Muy específico para las mucinas epiteliales, incluidos los adenocarcinomas. Aunque insensible. Tinción que contiene carmín (material colorante rojo) y cloruro de aluminio. • MUCINA: ROSA • CAPSULA CRIPTOCOCO: ROSADO OSCURO • NÚCLEOS: NEGROS • FONDO: AMARILLO TINCIÓN:
  • 14. P.A.S. Tiñe tanto el glucógeno como las mucinas, pero el tejido se puede digerir previamente con diastasa para eliminar el glucógeno. Colorantes neutros y ácidos simples no sulfatados y mucinas sulfatadas de complejo ácido. • GLUCÓGENO, MUCINA Y ALGUNAS MEMBRANAS BASALES: ROJO A PURPURA • HONGOS: ROJO A PURPURA • NÚCLEOS: AZUL TINCIÓN:
  • 15. AZUL ALCIÁN Tiñe mucinas mesenquimales ácido-simples no sulfatadas y ácido- simple a pH 2.5, mucinas ácido-complejo sulfatadas a pH 1.0. NO tiñe las mucinas neutras. • SUSTANCIAS MUCINOSAS SULFATADAS ACIDAS: AZUL OBSCURO • NÚCLEOS: ROSADO A ROJO • CITOPLASMA: ROSA PÁLIDO TINCIÓN:
  • 16. HIERRO COLOIDAL. Las partículas de hierro se estabilizan en amoniaco, y glicerina y son atraídas por los mucopolisacaridos acidos. Tinción de mucinas ácido-simple no sulfatadas. • MUCOPOLISACARIDOS ÁCIDOS: AZUL • MUSCULO: ROJO • FONDO AMARILLO TINCIÓN:
  • 17. ROJO CONGO: AMILOIDE El rojo congo es un compuesto orgánico utilizado para teñir amiloide en secciones de tejido. Se utiliza para evaluar la presencia y extensión de la amiloidosis en diferentes órganos. • AMILOIDE: DE ROSADO A ROJO Y VERDE MANZANA BAJO LUZ POLARIZADA. • NÚCLEOS: AZULES TINCIÓN:
  • 18. ROJO OLEOSO (LÍPIDOS) La tinción de aceite rojo Oleoso puede identificar lípidos neutros y ácidos grasos en frotis y tejidos. • GRASAS: ROJO BRILLANTE • NÚCLEOS: AZUL PÁLIDO • OTROS ELEMENTOS: CAFÉ, NARANJA. TINCIÓN:
  • 19. MINERALES Y OTROS ELEMENTOS: PERLS La tinción de hierro de Perl es el método clásico para demostrar el hierro en los tejidos. La sección se trata con ácido clorhídrico diluido para liberar iones férricos. Estos iones luego reaccionan con el ferrocianuro de potasio para producir un compuesto azul insoluble (la reacción del azul de Prusia). • HEMOSIDERINA, ALGUNOS ÓXIDOS Y SALES DE HIERRO: AZUL • NÚCLEOS, CITOPLASMA: ROJOS TINCIÓN:
  • 20. FONTANA MASSON GRÁNULOS ARGENTAFINES/ PIGMENTOS. El método de Fontana-Masson ("tinción de melanina") comúnmente utilizado se basa en la propiedad de los gránulos de melanina para reducir el nitrato de plata amoniacal ( algunos pigmentos de lipocromo también se tiñerán de negro). • GRÁNULOS ARGENTAFINES: NEGRO • MELANINA: NEGRO • NÚCLEOS, CITOPLASMA: ROJO-ROSADO TINCIÓN:
  • 21. VON KOSSA La tinción de VonKossa es un método de reducción de plata que muestra fosfatos y carbonatos, pero estos suelen estar presentes junto con el calcio. Esta tinción. es más útil cuando están presentes grandes cantidades, como en el hueso. • HUESOS Y SALES MINERALES (FOSFATOS CARBONATOS Y OXALATOS): DEPÓSITOS NEGROS • NÚCLEOS Y CITOPLASMA: ROSA, ROJO TINCIÓN:
  • 22. RODANINA Tinción que se utilizan para detectar la acumulación citoplasmática de cobre en el hígado • COBRE: ROJO • NÚCLEOS: AZUL TINCIÓN:
  • 23. BACTERIAS, HONGOS. WARTHIN STARRY Las espiroquetas son muy difíciles de teñir. El mejor método es el Warthin-Starry. Sin embargo, los organismos espirales pequeños y delgados son difíciles de ver y se debe realizar una búsqueda cuidadosa. • FONDO: AMARILLO • ESPIROQUETAS Y OTROS MICROORGANISMOS: AZUL OBSCURO TINCIÓN:
  • 24. GENTA • FONDO: ROSA-AMARILLO • ESPIROQUETAS Y OTROS MICROORGANISMOS: NEGRO • MUCOSA GÁSTRICA: ROSA TINCIÓN: Las espiroquetas H. pilory.
  • 25. BACTERIAS, HONGOS. ZIEHL NEELSEN Esta tinción usa carbol-fucsina para teñir las paredes lipídicas de organismos ácido resistentes como M. tuberculosis, y otras Mycobacterias. • BACILOS ACIDO- ALCOHOL RESISTENTE: ROJO BRILLANTE • ERITROCITOS: AMARILLO- ANARANJADO • OTROS ELEMENTOS : AZUL TINCIÓN:
  • 26. BACTERIAS, HONGOS. FITE FARACO Modificación de la tinción de Ziehl Nelseen que tiene un ácido más débil para los bacilos de M. Leprae que se supone son más delicados. • BACILOS DE LA LEPRA Y OTROS BACILOS, ACIDO- ALCOHOL RESISTENTE: ROJO • FONDO: AZUL PÁLIDO TINCIÓN:
  • 27. BACTERIAS, HONGOS. GROCOTT METENAMINA DE PLATA Esta tinción, a menudo abreviada como "GMS", se utiliza para teñir hongos y Pneumocystis jirovecci. Las paredes celulares de estos organismos se tiñen, (marrón a negro). • HONGOS: PERFECTAMENTE DELINEADOS EN COLOR NEGRO • MICELIO/HIFAS: ROSADO GRISÁCEO • FONDO: VERDE TINCIÓN:
  • 28. PLATA METENAMINA DE JONES Tiñe membranas basales, permitiendo ver la membrana basal glomerular, (Glomerulonefritis membranosa). y tubulares de biopsias renales. • MEMBRANAS BASALES: NEGRO INTENSO. • TEJIDO CONECTIVO: VERDE CLARO, ROJO. TINCIÓN:
  • 29. MOVAT El pentacrómico de Movat es una tinción desarrollada por el patólogo Henry Zoltan Movat para resaltar los componentes del tejido conectivo, en especial el cardiovascular. a) Azul alcián b) Hematoxilina Verhoeff c) Escarlata de Biebrich d) Fucsina ácida e) Azafrán

Notas del editor

  1. iencia que estudia los tejidos orgánicos: su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones
  2. Fijación: conserva permanente la estructura del tejido, deben sumergirse inmediatamente después de extraerse: abolir el metabolismo celular, impedir la degradación enzimática (autolisis) destruir microorganismos patógenos tales como bacterias, hongos o virus y endurecer el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la desnaturalización de proteínas. formolno altera su estructura tridimensional de forma significativa, las proteínas mantienen su capacidad de reaccionar con anticuerpos específicos. 2.- inclusión en parafina con el fn de permitir su corte. : infiltración con un medio de inclusión que permita realizar cortes muy delgados, por lo general en el rango de 5mm a 15mm. 3.-se lava y se deshidrata en una serie de soluciones alcohólicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100%. En el paso siguiente, el aclarado, se utilizan solventes orgánicos tales como el xileno o tolueno que son miscibles tanto en alcohol como en parafinas, para extraer el alcohol antes de la infiltración de la muestra con la parafina fundida. Cuando la parafina fundida se ha enfriado y endurecido, se empareja para formar un bloque de tamaño adecuado.
  3. os cortes en parafina son incoloros: Para teñir los cortes la parafina debe disolverse y extraerse, con xileno y los tej deben rehidratarse mediante el uso de una serie de soluciones de alcohol de concentración decreciente. Después, el tejido sobre el portaobjetos se tiñe con hematoxilina en agua. Debido a que el colorante de contraste, la eosina, es más soluble en alcohol que en agua, se vuelve a deshidratar la muestra a través de una serie de soluciones alcohólicas de concentración creciente y después se tiñe con eosina en alcohol. método de tinción de rutina en histología y citología.tinción nuclear por un colorante básico (hematoxilina) y la segunda, una tinción citoplasmática por un colorante ácido.
  4. El proceso de coloración o tinción consiste en que una estructura celular o tisular adquiere específicamente un color bajo la accionde una substancia colorante. HEMATOX: origen natural (base de un tinte -teñir núcleos)rbol de leña Hematoxylon campechianum (Yucatán en 1502). A mediados del siglo XIX, los microscopistas aficionados utilizaron por primera vez la hematoxilina para teñir los componentes celulares. Más tarde, los científicos desarrollaron una amplia gama de técnicas para demostrar diferentes componentes celulares. -Los colorantes ácidos tienen carga eléctrica negativa, por lo tanto la designación correcta es la de colorantes aniónicos. También se les conoce como colorantes citoplasmáticos. -Los colorantes basicos poseen una carga eléctrica positiva, por lo tanto son colorantes catiónicos. Se les denomina también colorantes nucleares, pues tienen afinidad por los ácidos nucleicos (ADN y ARN).
  5. Los núcleos se colorean de azul, azul morado, violeta, pardo oscuro o negro, dependiendo de los agentes oxidantes que se utilizaron. El citoplasma y material extracelular utilizando la eosina que les confiere diversos grados de color rosado.
  6. colágeno tipo I que forman fibras gruesas o haces. tres colorantes para diferenciar el núcleo celular, el citoplasma y las fibras de colágeno. La técnica presenta multitud de variantes, pero las principales modificaciones hacen referencia al uso de un diferenciador después de la hematoxilina (por ejemplo, ácido pícrico), el tiempo de las soluciones, .la temperatura.
  7. Forma enlaces catiónicos, aniónicos y no iónicos con la elastina, el constituyente principal del tejido elástico fibroso.2​ La elastina tiene una afinidad fuerte por el complejo hierro-hematoxilina formado por los reactivos en la tinción y por lo tanto la retendrá mucho más tiempo que otros componentes del tejido, por lo que aparecerá teñida, mientras los otros elementos aparecen poco coloreados.
  8. Se trata de una impregnación argéntica, Se utilizan sales metálicas para formar precipitados metálicos sobre las estructuras a teñir. El objetivo es precipitar plata metálica a partir de sus sales, 
  9. mucinas son glicoproteínas de alto peso molecular que se encuentran dispersas por los epitelios del tracto gastrointestinal, respiratorio y reproductivo. pueden colocarse en una de dos categorías amplias en base a la química y la composición del componente carbohidrato de la mucina. Las mucinas cargadas o “ácidas” contienen carbohidratos con grupos carboxilato (COO-) o sulfonato (SO3). Ambos grupos se ionizan a un pH fisiológico para producir una carga negativa general. Las cadenas de carbohidratos de mucinas neutras carecen de grupos ácidos y, por tanto, no tienen carga neta. Las mucinas neutras pueden encontrarse principalmente en los epitelios superficiales del estómago, las glándulas de Brunner del duodeno y el epitelio prostático. Las mucinas ácidas se encuentran ampliamente distribuidas por el tracto gastrointestinal y el tracto respiratorio.
  10.  evaluación de mucinas ácidas, especialmente las del tracto gastrointestinal. Además, esta técnica también es útil para teñir la cápsula del hongo Cryptococcus neoformans. El ácido carmínico es una molécula de colorante natural que se aísla de los cuerpos secos de las hembras de los insectos Coccus cacti.
  11. demostración de glicoproteínas, carbohidratos y mucinas. PAS también reconoce mucinas neutras. Además de las mucinas, la técnica PAS también se utiliza ampliamente para la detección de glucógeno y varias glicoproteínas. La técnica PAS es particularmente valiosa para la visualización de membranas basales debido a la presencia de glicoproteínas reactivas de Schiff dentro de estas estructuras.
  12. Al igual que la mucicarmina, el azul alcián no tiñe las mucinas neutras. La variación del pH de la solución de azul alcián es un método útil para la caracterización adicional de los subtipos de mucinas ácidas presentes en una muestra de tejido. Todas las mucinas ácidas, se ionizan a un pH de 2,5 para producir grupos aniónicos (COO, SO3) . Por lo tanto, el azul alcián estándar (pH de 2,5) tiñe todas las mucinas ácidas.
  13. La técnica del hierro coloidal se basa en la atracción de iones de hierro con carga positiva (cationes férricos) para las terminaciones de grupos de carboxilato y sulfato con carga negativa en mucinas ácidas.
  14. La tinción con rojo congo requiere experiencia y el uso de microscopio de luz polarizada. El diagnóstico de la tinción es identificando con la “birrefringencia verde manzana”,
  15. Se necesitan frotis frescos o cortes de tejido con criostato porque los fijadores que contienen alcoholes o el procesamiento rutinario de tejidos con aclarado eliminarán los lípidos.
  16. La enfermedad de Wilson es un trastorno hereditario poco frecuente que causa una acumulación de cobre en el hígado,
  17. La capacidad de unirse a iones de plata de la solución y reducir de forma independiente plata a forma metálica visible se refiere a la reacción como argentaffin
  18. La capacidad de unirse a iones de plata de la solución y reducir de forma independiente plata a forma metálica visible se refiere a la reacción como argentaffin
  19. La capacidad de unirse a iones de plata de la solución y reducir de forma independiente plata a forma metálica visible se refiere a la reacción como argentaffin