Curso Análisis Fisicoquímico y Microbiológico de Aguas -EAI - SESIÓN 5.pdf
Bbm2
1. GUSTAVO CRUZ
1
Universidad Abierta y a Distancia de México
Carrera: Ingeniería Biotecnológica
Materia: Biología Molecular II
Trabajo presentado a: Bertha Alejandra Flores Nuño
Actividad entregable U1
Nombre de la Actividad 2: Extracción de ácidos nucleicos
Gustavo Adolfo Cruz Hernández
Matrícula: ES162007982
Grupo: BI-BBM2-2001-B1-001
8 de febrero de 2020
2. GUSTAVO CRUZ
2
Extracción de DNACélulas Animales
Extracción de DNA
Células Animales
Romper uniones
celulares con tripsina
para liberar las células
Centrifugar por 5
minutos
500 x g
4º C
Lavar el paquete celular
obtenido
2 veces
1 ó 10 ml de buffer PBS
Enfriar con hielo
Centrifugar
Disolver la pastilla en
un mililitro de buffer de
digestión por cada 108
células
Almacenar
De 12 a 18 horas
Agitación constante a
50º C
Extraer el DNA con
mezcla de fenol,
cloroformo y alcohol
isoamílico
Volumen 1:1
Centrifugar para
separar las fases de la
mezcla
Transferir la fase superior
a un tubo con acetato de
amonio y etanol absoluto
por 24 hrs
Evitando la fragmentación
del DNA
Retirar el etanol y
cambiarlo por buffer
Tris EDTA
Almacenar a 4º C por
tiempo indefinido
3. GUSTAVO CRUZ
3
Extracción de DNACélulas Vegetales
Extracción de DNA
Células Vegetales
Obtener muestra de
Centrifugar por 5 minutos
500 x g
4º C
Lavar el paquete celular obtenido
2 veces
1 ó 10 ml de buffer PBS
Enfriar con hielo
Centrifugar
Disolver la pastilla en unmililitr
o de
buffer de digestión por cada 108
células
Almacenar
De 12 a 18 horas
Agitación constante a 50ºC
Extraer el DNA conmezcla de fenol,
cloroformo y alcohol isoamílico
Volumen 1:1
Centrifugar para separar las fases
de la mezcla
Transferir la fase superior a untubo
con acetato de amonio y etanol
absoluto por 24 hrs
Evitando la fragmentación del DNA
Retirar el etanol y cambiarlopor
buffer Tris EDTA
Almacenar a 4ºC por tiempo
indefinido
5. GUSTAVO CRUZ
5
Referencias
Noticias de la Ciencia. (2015).La importancia dela extracción de ADN en investigacionesgenómicas. febrero3, 2020,de
Noticias de la Cienciay la Tecnología Sitioweb: https://noticiasdelaciencia.com/art/17456/la-importancia-de-la-extraccion-
de-adn-en-investigaciones-genomicas
Ramos, S. (2018). Extracción YPurificación De ADN;Introducción E ImportanciaDe La Extracción Del ADN.Febrero 2, 2020,
de AnalitekSitioweb: http://blog.analitek.com/extraccion-y-purificacion-de-adn-introduccion-e-importancia-de-la-
extracciondel-adn-0-0-1
UnADM (2020). BiologíaMolecular II. Unidad1Biologíamolecularde ácidosnucleicos.Recuperadode:
https://csba.unadmexico.mx/pluginfile.php/2356/mod_label/intro/Unidad1.Biologiamoleculardeacidosnucleicos.pdf
Wako Latinoamérica.(2017). La extracción delADN, unatécnicaimprescindible para la biología modernaactual. febrero1,
2020, de WakoLA Sitioweb: https://www.wakolatinamerica.com/blog-reactivos/post/la-extraccion-del-adn-una-tecnica-
imprescindible-para-la-biologia-moderna-actual/