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UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA
FACULTAD INGENIERÍA DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS
ESCUELA PROFESIONAL MEDICINA
VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TEMA:
LACÉLULA.ORGANIZACIÓNCELULARYESTRUCTURASUBCELULAR
(PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS)
ESTUDIANTE:
GIOMAR TACA CHIPANA
Arequipa, 2022
 INTRODUCCIÓN:
La vida se caracteriza por una serie de propiedades que emergen en el nivel de
organización celular. La célula es la unidad de vida más pequeña. Es la unidad anatómica
y fisiológica de todos los seres vivos. Dos científicos alemanes el botánico Mattias
Schleiden (1804-1881) y el zoólogo Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en
señalar que "Los cuerpos de las plantas y de los animales están compuestos por células y
por productos celulares" enunciando el postulado inicial de la Teoría Celular.
CARACTERÍSTICAS DE LAS CÉLULAS
Todas las células están cubiertas por una membrana externa, llamada membrana
plasmática,que las separa de otras células y del medio circundante con el cual intercambian
materia y energía. Este intercambio está altamente regulado y es selectivo. De esta forma
la membranaplasmática debe actuar no sólo como límite celular sino también comobarrera
selectiva. Por lo tanto, la célula mantiene una composición química muy ordenada y
diferente a la del entorno.
Las células, almacenan en forma de ADN, ácido desoxirribonucleico, la información
necesaria para controlar sus actividades (reproducción, metabolismo), y para establecer su
propia estructura.El ADN, es un polímero formado por una secuencialineal, de monómeros,
llamados nucleótidos.
Las células deben captar alimento y otros materiales a través de su membrana plasmática
y deben eliminar los productos de desecho, generados en las distintas reacciones
metabólicas rápidamente antes de que estos se acumulen hasta niveles tóxicos para la
supervivencia celular. Por lo tanto, las células son pequeñas, de modo que en ellas las
moléculas recorren distancias cortas, lo que acelera las actividades celulares.
CÉLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS:
Todas las células se parecen y responden a un patrón común por más diversas que sean.
Las células de organismos pluricelulares son diferentes en su función, por ser distintas
estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrón común. Por ejemplo, aquellas
especializadas en la síntesis de lípidos, tendrán mayor desarrollo del retículo
endoplasmático liso y serán distintas de las neuronas especializadas en la transmisión del
impulso nervioso, cuya especialización es tan grande que pierden su capacidad de
reproducirse. A pesar de las semejanzas y diferencias entre las células y que todas cumplen
con los postulados de la Teoría Celular, se distinguen dos grandes tipos de células:
PROCARIOTAS (sin núcleo verdadero) y EUCARIOTAS (con núcleo).
Principales características comunes entre células eucariotas y procariotas.
 En ambos tipos celulares el ADN es el material genético.
 Ambos tipos celulares poseen membranas plasmáticas como límite celular
 Poseen ribosomas para la síntesis proteica.
 Poseen un metabolismo básico similar.
 Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.
 OBJETIVOS:
 Estudiar el paso de preparación de muestras para una célula procariota.
 Estudiar el procedimiento de tinción simple.
El examen al microscopio óptico de las células requiere la fijación y tinción de las células
antes de la observación. Estos procesos pueden aumentar la visibilidad y claridad de la
celda bajo estudio.
 MARCO TEORICO:
FIJACIÓN
La fijación es el proceso mediante el cual se conservan las estructuras internas y externas
de una célula. La célula no debe sufrir ningún cambio en su estado durante el proceso de
tinción y observación. Para garantizar esto, es necesario endurecer la celda y detener
cualquier reacción química que pueda tener lugar dentro de la celda, es decir, la celda debe
fijarse en su estado actual. Según el método de fijación, un portaobjetos microscópico
puede usarse durante un período de tiempo más largo o más corto o usarse como
portaobjetos temporales o permanentes. Incluso cuando se tiene mucho cuidado para
reparar las celdas correctamente, a veces se pueden producir artefactos. Por lo tanto, el
paso de fijación debe ser estandarizado. El procedimiento de fijación varía según el fijador
y el tipo de tejido o célula en estudio.
Hay 2 tipos de fijación.
 Fijación por calor: Esto ayuda a preservar la morfología general de una célula. Esto
se usa comúnmente en la preparación de frotis y la preparación de portaobjetos
temporales.
 Fijación química: en este método se utilizan productos químicos para preservar las
subestructuras celulares finas y la morfología de microorganismos más delicados. Los
productos químicos utilizados para la fijación se conocen como fijador. Un fijador
podría detener cualquier proceso bioquímico interno que tenga lugar dentro de una
célula, proteger la célula de daños externos o aumentar la resistencia mecánica y la
estabilidad. Los fijadores químicos se utilizan comúnmente en la preparación de
portaobjetos permanentes.
TINCIÓN
La muestra bajo examen se llama espécimen. La preparación de muestras es un paso
importante en el examen microscópico de luz de una muestra dada. La microscopía de luz
puede revelar mejores detalles si se da un color diferente a las diferentes partes de la
célula. Este proceso de colorear una célula se denomina tinción y los compuestos que se
utilizan para colorear las células se denominan tinciones o colorantes.
La tinción generalmente se realiza para mejorar el contraste de una célula. Esto ayuda a
resaltar la estructura bajo el estudio de interés. La técnica de tinción utilizada en
microscopía óptica variará según el objetivo del estudio. Si el objetivo del estudio es
observar la estructura y el tamaño de la célula, será suficiente teñir la célula con cualquier
colorante que absorba la célula. Pero si el objetivo es estudiar una estructura celular en
particular, entonces, según el requisito, se pueden usar dos o más tinciones para diferenciar
la estructura del citoplasma circundante. La técnica de tinción que usa una sola tinción se
llama tinción simple y la que usa más de una tinción se llama tinción diferencial.
Los compuestos que se utilizan como tinción contienen dos características importantes.
1. Un cromóforo que da color al compuesto.
2. El tinte que se une a la célula ya sea a través de enlaces covalentes o enlaces iónicos
o a través de enlaces hidrofóbicos.
Los tintes ionizables se clasifican en;
1. Colorante básico (que tiene grupos con carga positiva que se unen a la estructura con
carga negativa). Por ejemplo: azul de metileno.
2. Colorante ácido (que tiene un grupo cargado negativamente que se une a las
estructuras celulares cargadas positivamente).
Ej.: Eosina, fucsina ácida. La efectividad de estos colorantes varía con el pH. Un ejemplo
de colorante que se tiñe debido a la formación de un doble enlace es el reactivo de Schiff
que se une covalentemente a la desoxirribosa.
La tinción se puede realizar simplemente sumergiendo la muestraen la mancha. El proceso
de tinción real implica sumergir la muestra en un tinte, seguido de un enjuague y
observación. A veces, es posible que se requiera un paso adicional, como el
calentamiento. Muchos tintes requieren el uso de un mordiente. Los mordientes son
compuestos químicos que forman un precipitado insoluble con la mancha. Estos químicos
se utilizan principalmente para intensificar el color que le da la célula.
Tinciones de uso común para estudiar la célula procariota:
 Cristal violeta: para estudiar el tamaño y la morfología celular.
 Safranina: para estudiar el tamaño celular y la morfología celular.
 Verde malaquita: para observar la endospora.
 Azul de metileno: para estudiar el tamaño celular y la estructura celular.
 Tinción de Albert (azul de toluidina, ácido acético glacial verde malaquita 95% de
alcohol y agua destilada) - gránulos metacromáticos de tinción.
 Tinta china: para observar la cápsula que se ve como un halo sin mancha alrededor
del organismo.
PASOS INVOLUCRADOS EN LA PREPARACIÓN DE MUESTRAS
El paso principal involucrado en la preparación de muestras es la preparación y tinción de
frotis bacterianos. El frotis bacteriano es una preparación seca de células bacterianas en
un portaobjetos de vidrio. El propósito de hacer frotis bacterianos es fijarlos en el
portaobjetos de vidrio. Se prepara un frotis bacteriano en un portaobjetos de vidrio limpio y
se prepara a partir de bacterias que han crecido en un medio de agar nutritivo. Luego, estos
se fijan con calor en llamas para que las células bacterianas se adhieran al portaobjetos de
vidrio y no se corran junto con el tinte cuando se lava el exceso de tinte. El frotis no debe
ser muy grueso ya que los frotis más gruesos son más difíciles de observar y tardan más
tiempo en secarse. El frotis no debe ser demasiado delgado ya que un frotis más delgado
no contendrá suficiente cantidad de bacterias para examinar bajo el microscopio. El frotis
debe ser parejo. De lo contrario, las células se agruparán en una parte del frotis y en la otra
parte no habrá células suficientes para la observación. Solo debe haber un frotis por
portaobjetos de vidrio. Es más fácil preparar un frotis a partir de una muestra sólida que a
partir de una muestralíquida. El frotis se adhiere al portaobjetos de vidrio cuando se fija con
calor, lo que se hace agitándolo sobre una llama. La fijación por calor solo debe realizarse
después de secarcompletamenteel frotis al aire. Demasiadocalentamiento puede provocar
daños en la pared celular. Luego se coloca la mancha requerida en el frotis y se lava
después de un período de tiempo adecuado de exposición. A veces, se puede agregar un
mordiente para mejorar el color de la celda. Al estudiar ciertas estructuras celulares, es
posible que se requiera un paso adicional, como el calentamiento, para facilitar la entrada
de la tinción en ese componente en particular.
El experimento ilustrado aquí en esta sección es una tinción simple. La tinción simple es
uno de los procedimientos de tinción más fáciles y se realiza principalmente para estudiar
la morfología, la disposición y el aspecto de las células bacterianas. El principio detrás de
la tinción simple es muy simple. Los tintes básicos como el cristal violeta, el azul de metileno
tienen una carga positiva y pueden teñir muy fácilmente las células cargadas
negativamente. Según el tinte utilizado, se debe variar el tiempo de exposición al tinte.
Azul de metileno - 1 minuto, Cristal violeta -1 minuto, Carbol fucsina - 20 segundos. A
continuación, se lava el exceso de colorante, se seca y se observa al microscopio.
ESTRUCTURAS DE CÉLULAS PROCARIÓTICAS QUE SON VISIBLES A TRAVÉS DEL
MICROSCOPIO ÓPTICO
El aumento máximo que se puede obtener de un microscopio óptico es de 1000x o 1500x
y la resolución máxima es de 0,2 μm. Por lo tanto, solo se pueden observar muy pocos
detalles. El uso de diferentes técnicas de tinción ayuda a identificar y observar diferentes
componentes de las células. El tamaño y la forma de las células se pueden determinar
fácilmente con la ayuda de microscopía óptica.
TAMAÑO Y MORFOLOGÍADE LAS BACTERIAS:
Morfología:
La morfología bacteriana es muy diversa. Los dos tipos principales de bacterias según su
morfología son:
A. Coccus.
B. Bacilo.
Además de estas formas, también se encuentran bacterias de forma cuadrada y
rectangular. Algunas bacterias se encuentran en una variedad de formas y carecen de una
única forma característica. Estos se llaman pleomórficos.
Cocinero:
Los cocos son células aproximadamente esféricas. Pueden existir como células
individuales o estar agrupadas. En algunos casos, como en el género Neisseria, las células
se pueden encontrar en pares. Tal par de cocos se conoce como diplococos.
Neisseria
A veces se pueden encontrar unidos entre sí como en cadenas. Este tipo de morfología la
muestran los géneros Streptococcus, Enterococcus y Lactococcus.
Estreptococo
En ciertos géneros como Staphylococcus, las células se agrupan como uvas.
Estafilococo
Bacilos:
Los bacilos son bacterias en forma de bastón. Varios bacilos pueden variar en la relación
de largo a ancho. Hay ciertas bacterias que son tan pequeñas que se asemejan a cocos y
se denominan cocobacilos.
bacilos
La forma del extremo de la varilla puede ser plana, en forma de cigarro o circular. Algunas
de las bacterias tienen curvas distintivas y se conocen como vibriones.
Vibrión.
Algunas bacterias tienen forma de varillas largas retorcidas en espirales o hélices y se
llaman espirilos.
Espirilla
Tamaño de las bacterias:
Las células bacterianas se encuentran en varios tamaños. La bacteria más pequeña
perteneciente al género Mycoplasma tiene solo 0,3 μm de diámetro. El tamaño de la
mayoría de las bacterias cae en el rango de 1-5 μm. La bacteria más grande es
Thiomargarita namibiensis. Estos son generalmente de 0,1 x 0,3 mm (100 x 300 μm) de
ancho. La especie fue descubierta por Heide N. Schulz y otros en 1997, en los sedimentos
costeros de Walvis Bay (Namibia).
Thiomargarita namibiensis
Además de la estructura celular y la morfología celular, se pueden identificar y observar
otras estructuras celulares usando microscopía óptica. Se emplean técnicas especiales de
tinción para observar estas estructuras. La mayoría de las veces, estas técnicas de tinción
se denominan tinción diferencial. Algunos ejemplos de tinción diferencial son:
1. Tinción de Grams: diferenciar células gram negativas y gram positivas.
2. Tinción de endosporas: para identificar endosporas. (Una endospora es una estructura no
reproductiva, resistente y latente producida por ciertas bacterias. Estas estructuras son
extraordinariamente resistentes al estrés ambiental, como la radiación ultravioleta, la
radiación gamma, el calor, los desinfectantes químicos y la desecación).
Una preparación teñida de Bacillus subtilis que muestra la endospora en verde y la célula
vegetativa en rojo
1. Tinción de Albert: para identificar gránulos metacromáticos.
2. Tinción capsular: para observar la cápsula alrededor de la bacteria. La mancha
utilizada es tinta china.
Aunque no es posible estudiar completamente la estructura bacteriana completa, la
microscopía óptica proporciona una técnica simple y eficiente para proporcionar datos
primarios de una muestra.
PROCEDIMIENTO EN LÍNEA
1. Elija cualquier muestra A o B.
2. Limpie el portaobjetos con agua y jabón. Seca el portaobjetos con la ayuda de un
pañuelo de papel.
3. Tome la muestra de cultivo.
4. Coloque una gota de agua en el portaobjetos.
5. Caliente el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo. Deje que se enfríe lo
suficiente.
6. Sostenga la placa de Petri con la mano izquierda, ábrala y elija una colonia aislada.
7. Mezclar con el agua del portaobjetos.
8. Seca al aire el lugar. Y fije la mancha agitándola sobre una llama.
9. Vierta 4 o 5 gotas de colorante sobre el frotis.
10. Mantenga por un minuto.
11. Lava el exceso de tinte.
12. Seque.
13. Coloque el portaobjetos en la platina del microscopio.
14. Observe primero a baja potencia, es decir, con un objetivo de 10x.
15. Ajuste el diafragma al diámetro más grande, permitiendo que pase la mayor cantidad
de luz.
16. Ajuste la perilla de ajuste grueso hasta que la muestra esté enfocada.
17. Ajuste el enfoque fino.
18. Observa la imagen.
19. Luego ajuste el diafragma para obtener la mejor iluminación. Comience con la mayor
cantidad de luz y disminuya gradualmente hasta que la imagen de la muestra tenga
un contraste claro y nítido.
20. Observa la imagen formada.
21. Gire la pieza de la nariz al objetivo 40x. (Lente con la banda azul).
22. Luego ajuste el diafragma para obtener la mejor iluminación. Comience con la mayor
cantidad de luz y disminuya gradualmente hasta que la imagen de la muestra tenga
un contraste claro y nítido.
23. Observa la imagen formada.
24. Gire parcialmente la punta para que los objetivos de 40x y 100x se coloquen a
horcajadas sobre la muestra.
25. Coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área
iluminada.
26. Gire la boquilla para que el objetivo de inmersión en aceite de 100x toque el aceite.
27. Enfoque sólo el ajuste fino.
28. Identifica la forma de la bacteria dada y escribe la respuesta.
29. Elija la otra muestra y continúe con el procedimiento.
ESCENARIO DE EXPERIMENTO REAL
MATERIALES NECESARIOS
 Portaobjetos de vidrio limpio.
 Microscopio óptico.
 Cultivo bacteriano.
 Asa de inoculación.
 Mechero bunsen.
 Cualquiera de los tintes básicos (cristal violeta, fucsina de carbol o azul de metileno).
 Cuentagotas.
 Botella de lavado.
PROCEDIMIENTO
1. Limpie el portaobjetos con agua y jabón. Seca el portaobjetos con la ayuda de un
pañuelo de papel.
2. Tome la muestra de cultivo.
3. Se coloca una gota de agua en el portaobjetos.
4. Caliente el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo. Y se deja enfriar lo
suficiente.
5. Sostenga la placa de Petri con la mano izquierda, ábrala y elija una colonia aislada.
6. Mezclar con el agua del portaobjetos.
7. La mancha se seca al aire. Y fije la mancha agitándola sobre una llama.
8. Vierta 4 o 5 gotas de cristal violeta (o la tinción seleccionada) sobre el frotis.
9. Mantener durante un minuto (el período de tiempo varía según el tinte utilizado).
10. El exceso de tinte se lava.
11. Seque.
12. El portaobjetos se coloca en la platina del microscopio.
13. Observe a 10x, 40x y 100x.
DIFERENCIAENCONTRADAEN UN LABORATORIO REAL
En un entorno de laboratorio real, hay ciertos pasos importantes que no son
necesariamente aplicables en un laboratorio virtual:
1. Al inocular medios de agar (placas y agar inclinados), asegúrese de no perforar ni
rasgar la superficie del agar con el asa.
2. Etiquete siempre el portaobjetos y las placas con:
 El nombre del organismo
 El tipo de medio
 Sus iniciales
 La fecha
3. Asegúrese de colocar las placas de agar boca abajo en la incubadora. Esto evita que
la condensación de agua gotee sobre la superficie del agar y se extienda por las
colonias. Esto también evitará la contaminación y ayudará en la formaciónde colonias
aisladas.
4. Ajuste correctamente la llama del mechero Bunsen. La llama adecuada es un
pequeño cono azul; no es un penacho grande, ni es anaranjado.
5. Mientras flamea el aro (o la aguja), asegúrese de que cada segmento de metal brille
de color naranja/al rojo vivo antes de mover el siguiente segmento hacia la llama. Ten
cuidado; el metal se calentará mucho.
6. Una vez que haya flameado el asa (o la aguja), no la acueste, no la sople, no la toque
con los dedos ni toque ninguna superficie que no sea el inóculo o el medio estéril. Si
toca la punta con otra superficie o la sopla, tendrá que volver a flamear el asa antes
de continuar con la inoculación.
7. Deje que el asa o la aguja se enfríen antes de intentar recoger su organismo. Si
recoge el organismo con una herramienta caliente, sus células morirán. Para enfriar
rápidamente el asa o la aguja, colóquela en una sección de agar que no esté
inoculada o que al menos sea diferente del área de la que extraerá las células.
8. Vuelva a verificar el nombre del organismo en el cultivo madre del que está
recolectando sus inóculos.
9. Cuando retire las tapas de los tubos, siempre manténgalas en la mano. Nunca los
coloque sobre la mesa, ya que podrían recoger contaminantes.
10. Manipule siempre los tubos abiertos en ángulo; nunca permita que apunten
directamente hacia arriba, ya que organismos en el aire o en otros ambientes podrían
caer dentro del tubo y causar contaminación. Además, mantenga la tapa sobre un
plato cuando retire el inóculo, ya que esto ayudará a prevenir la contaminación
ambiental.
11. Siempre flamee el borde de un tubo de cultivo cuando lo abra y antes de volver a
colocar la tapa.
12. Tan pronto como termine de inocular, flamee el asa o la aguja. Nunca coloque una
herramienta contaminada en su banco de trabajo.
13. Deseche todos los materiales contaminados correctamente y devuelva sus
suministros a los lugares de almacenamiento adecuados y limpie su área de trabajo.
14. Siempre desinfecte su área de trabajo cuando haya terminado.
 AUTOEVALUACIÓN:
 ANIMACIÓN:
Entramos a la animación y escogemos la estructura que vamos a observar.
 Primero revisamos la célula procariota.
1. Se lava el portaobjetos.
2. Se seca el portaobjetos con un pañuelo de papel.
3. Colocar una gota de agua en el portaobjetos
4. Calentar el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo y dejar que se enfrié.
5. Se abre el disco Petri con cuidado como se muestra.
6. Elige una colonia como muestra.
7. Mezcle con una gota de agua en el portaobjetos de tal manera que el asa de
inoculación pueda arrastrarse con movimientos circulares uniformes para
obtener un frotis delgado.
8. Pasamos la muestra sobre la llama.
9. Coloque el portaobjetos sobre el baño de arena. Vierta 4 o 5 gotas de colorante
violeta cristal sobre el frotis. Guárdelo por un minuto.
10. Lave el exceso de tinte de la muestra.
11. Secar.
12. Encender el microscopio y colocar el portaobjetos en la platina del microscopio.
13. Gire la pieza de la nariz a la lente del objetivo 10x (lente con la banda amarilla).
14. Observar a través de la lente ocular.
15. Ajuste el diafragma al diámetro total más grande, permitiendo que pase la mayor
cantidad de luz establecida.
16. Gire parcialmente la punta para que los objetivos de 40x y 100x se coloquen a
horcajadas sobre la muestra. Coloque una pequeña gota de il en el portaobjetos
en el centro del área iluminada. Gire la boquilla para que el objetivo de inmersión
en aceite de 100x toque el aceite.
17. Abra completamente el iris del diafragma.
18. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x
cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite.
19. El portaobjetos se sumerge en agua jabonosa para limpiarlo.
20. Se llegó a observar en el microscopio las siguientes muestras de una célula
procariota.
 Revisamos la célula eucariota.
Hay dos muestras de células de cebolla y células de la mejilla.
CÉLULAS DE CEBOLLA
1. Encendemos el microscopio y ajustamos la luz
2. Saque una capa interna de media cebolla cortada.
3. Pela una fina capa exterior roja con unas pinzas.
4. Mantenerlo en el portaobjetos de vidrio.
5. Se agrega una gota de agua en la muestra de las células de cebolla.
6. Del mismo modo, agregue dos gotas de solución de yodo al portaobjetos que
contiene células de cebolla. Luego se cubre con el cubreobjetos.
7. Se coloca el portaobjetos en la platina del microscopio.
8. Se observa la muestra en el microscopio en los diferentes objetivos, se ajusta la
perilla grande de ajuste aproximado hasta que la muestra esté enfocada. Ahora,
podemos ver una imagen borrosa cada vez más clara. Pero no muy claro.
9. Ahora, coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área
iluminada.
10. Gire la pieza de la nariz al objetivo 100x. Tocará la diapositiva.
11. Ajuste el diafragma del iris para permitir el paso de la mayor cantidad de luz.
12. Ajuste el enfoque fino para que la imagen sea más clara.
13. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x
cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite.
CÉLULAS DE LA MEJILLA
1. Tome un poco de solución salina con un gotero.
2. Vierta una gota de la solución en el portaobjetos de vidrio.
3. Tome un palillo de dientes esterilizado.
4. Raspe suavemente el revestimiento interno de su mejilla con un palillo como se
muestra.
5. Agregue de 2 a 3 gotas de azul de metileno al portaobjetos que contiene las células
de la mejilla con un gotero.
6. Coloque un cubreobjetos y elimine el exceso de tinte que pueda salir por los lados
del cubreobjetos con un papel secante.
7. Encender el microscopio y colocar el portaobjetos en la platina del microscopio.
8. Se observa en los diferentes objetivos, en el objetivo 40x, se ajusta la perilla grande
de ajuste aproximado hasta que la muestra esté enfocada. Ahora, podemos ver una
imagen borrosa cada vez más clara. Pero no muy claro.
9. Ahora, coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área
iluminada.
10. Gire la pieza de la nariz al objetivo 100x. Tocará la diapositiva.
11. Ajuste el diafragma del iris para permitir el paso de la mayor cantidad de luz.
12. Ajuste el enfoque fino para que la imagen sea más clara.
14. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x
cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite.
 SIMULACIÓN:
En la simulación podemos observar células procariotas.
 ASIGNACIÓN:
1. ¿Qué otra estructura puedes observar a través del microscopio de luz? ¿Se
utiliza alguna técnica de tinción específica para este propósito?
2. ¿Observar varios cultivos de bacterias y describir su morfología? Clasifica
estos organismos según su forma.
3. ¿Cómo aparecerá Escherichia coli en la tinción de Gram?
4. Si le dan dos muestras, una de cultivo de Bacillus subtilis y otra de
Pseudomonas, ¿qué técnica de tinción elegirá para identificar estas bacterias
si conoce su morfología, propiedad de la pared celular y capacidad de
producción de endosporas?

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Organización celular procariotas eucariotas

  • 1. UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA FACULTAD INGENIERÍA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA PROFESIONAL MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA TEMA: LACÉLULA.ORGANIZACIÓNCELULARYESTRUCTURASUBCELULAR (PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS) ESTUDIANTE: GIOMAR TACA CHIPANA Arequipa, 2022
  • 2.  INTRODUCCIÓN: La vida se caracteriza por una serie de propiedades que emergen en el nivel de organización celular. La célula es la unidad de vida más pequeña. Es la unidad anatómica y fisiológica de todos los seres vivos. Dos científicos alemanes el botánico Mattias Schleiden (1804-1881) y el zoólogo Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en señalar que "Los cuerpos de las plantas y de los animales están compuestos por células y por productos celulares" enunciando el postulado inicial de la Teoría Celular. CARACTERÍSTICAS DE LAS CÉLULAS Todas las células están cubiertas por una membrana externa, llamada membrana plasmática,que las separa de otras células y del medio circundante con el cual intercambian materia y energía. Este intercambio está altamente regulado y es selectivo. De esta forma la membranaplasmática debe actuar no sólo como límite celular sino también comobarrera selectiva. Por lo tanto, la célula mantiene una composición química muy ordenada y diferente a la del entorno. Las células, almacenan en forma de ADN, ácido desoxirribonucleico, la información necesaria para controlar sus actividades (reproducción, metabolismo), y para establecer su propia estructura.El ADN, es un polímero formado por una secuencialineal, de monómeros, llamados nucleótidos. Las células deben captar alimento y otros materiales a través de su membrana plasmática y deben eliminar los productos de desecho, generados en las distintas reacciones metabólicas rápidamente antes de que estos se acumulen hasta niveles tóxicos para la supervivencia celular. Por lo tanto, las células son pequeñas, de modo que en ellas las moléculas recorren distancias cortas, lo que acelera las actividades celulares. CÉLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS: Todas las células se parecen y responden a un patrón común por más diversas que sean. Las células de organismos pluricelulares son diferentes en su función, por ser distintas estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrón común. Por ejemplo, aquellas especializadas en la síntesis de lípidos, tendrán mayor desarrollo del retículo endoplasmático liso y serán distintas de las neuronas especializadas en la transmisión del impulso nervioso, cuya especialización es tan grande que pierden su capacidad de reproducirse. A pesar de las semejanzas y diferencias entre las células y que todas cumplen con los postulados de la Teoría Celular, se distinguen dos grandes tipos de células: PROCARIOTAS (sin núcleo verdadero) y EUCARIOTAS (con núcleo). Principales características comunes entre células eucariotas y procariotas.  En ambos tipos celulares el ADN es el material genético.  Ambos tipos celulares poseen membranas plasmáticas como límite celular  Poseen ribosomas para la síntesis proteica.  Poseen un metabolismo básico similar.  Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.  OBJETIVOS:  Estudiar el paso de preparación de muestras para una célula procariota.  Estudiar el procedimiento de tinción simple.
  • 3. El examen al microscopio óptico de las células requiere la fijación y tinción de las células antes de la observación. Estos procesos pueden aumentar la visibilidad y claridad de la celda bajo estudio.  MARCO TEORICO: FIJACIÓN La fijación es el proceso mediante el cual se conservan las estructuras internas y externas de una célula. La célula no debe sufrir ningún cambio en su estado durante el proceso de tinción y observación. Para garantizar esto, es necesario endurecer la celda y detener cualquier reacción química que pueda tener lugar dentro de la celda, es decir, la celda debe fijarse en su estado actual. Según el método de fijación, un portaobjetos microscópico puede usarse durante un período de tiempo más largo o más corto o usarse como portaobjetos temporales o permanentes. Incluso cuando se tiene mucho cuidado para reparar las celdas correctamente, a veces se pueden producir artefactos. Por lo tanto, el paso de fijación debe ser estandarizado. El procedimiento de fijación varía según el fijador y el tipo de tejido o célula en estudio. Hay 2 tipos de fijación.  Fijación por calor: Esto ayuda a preservar la morfología general de una célula. Esto se usa comúnmente en la preparación de frotis y la preparación de portaobjetos temporales.  Fijación química: en este método se utilizan productos químicos para preservar las subestructuras celulares finas y la morfología de microorganismos más delicados. Los productos químicos utilizados para la fijación se conocen como fijador. Un fijador podría detener cualquier proceso bioquímico interno que tenga lugar dentro de una célula, proteger la célula de daños externos o aumentar la resistencia mecánica y la estabilidad. Los fijadores químicos se utilizan comúnmente en la preparación de portaobjetos permanentes. TINCIÓN La muestra bajo examen se llama espécimen. La preparación de muestras es un paso importante en el examen microscópico de luz de una muestra dada. La microscopía de luz puede revelar mejores detalles si se da un color diferente a las diferentes partes de la célula. Este proceso de colorear una célula se denomina tinción y los compuestos que se utilizan para colorear las células se denominan tinciones o colorantes. La tinción generalmente se realiza para mejorar el contraste de una célula. Esto ayuda a resaltar la estructura bajo el estudio de interés. La técnica de tinción utilizada en microscopía óptica variará según el objetivo del estudio. Si el objetivo del estudio es observar la estructura y el tamaño de la célula, será suficiente teñir la célula con cualquier colorante que absorba la célula. Pero si el objetivo es estudiar una estructura celular en particular, entonces, según el requisito, se pueden usar dos o más tinciones para diferenciar
  • 4. la estructura del citoplasma circundante. La técnica de tinción que usa una sola tinción se llama tinción simple y la que usa más de una tinción se llama tinción diferencial. Los compuestos que se utilizan como tinción contienen dos características importantes. 1. Un cromóforo que da color al compuesto. 2. El tinte que se une a la célula ya sea a través de enlaces covalentes o enlaces iónicos o a través de enlaces hidrofóbicos. Los tintes ionizables se clasifican en; 1. Colorante básico (que tiene grupos con carga positiva que se unen a la estructura con carga negativa). Por ejemplo: azul de metileno. 2. Colorante ácido (que tiene un grupo cargado negativamente que se une a las estructuras celulares cargadas positivamente). Ej.: Eosina, fucsina ácida. La efectividad de estos colorantes varía con el pH. Un ejemplo de colorante que se tiñe debido a la formación de un doble enlace es el reactivo de Schiff que se une covalentemente a la desoxirribosa. La tinción se puede realizar simplemente sumergiendo la muestraen la mancha. El proceso de tinción real implica sumergir la muestra en un tinte, seguido de un enjuague y observación. A veces, es posible que se requiera un paso adicional, como el calentamiento. Muchos tintes requieren el uso de un mordiente. Los mordientes son compuestos químicos que forman un precipitado insoluble con la mancha. Estos químicos se utilizan principalmente para intensificar el color que le da la célula. Tinciones de uso común para estudiar la célula procariota:  Cristal violeta: para estudiar el tamaño y la morfología celular.  Safranina: para estudiar el tamaño celular y la morfología celular.  Verde malaquita: para observar la endospora.  Azul de metileno: para estudiar el tamaño celular y la estructura celular.  Tinción de Albert (azul de toluidina, ácido acético glacial verde malaquita 95% de alcohol y agua destilada) - gránulos metacromáticos de tinción.  Tinta china: para observar la cápsula que se ve como un halo sin mancha alrededor del organismo. PASOS INVOLUCRADOS EN LA PREPARACIÓN DE MUESTRAS El paso principal involucrado en la preparación de muestras es la preparación y tinción de frotis bacterianos. El frotis bacteriano es una preparación seca de células bacterianas en un portaobjetos de vidrio. El propósito de hacer frotis bacterianos es fijarlos en el portaobjetos de vidrio. Se prepara un frotis bacteriano en un portaobjetos de vidrio limpio y se prepara a partir de bacterias que han crecido en un medio de agar nutritivo. Luego, estos se fijan con calor en llamas para que las células bacterianas se adhieran al portaobjetos de vidrio y no se corran junto con el tinte cuando se lava el exceso de tinte. El frotis no debe ser muy grueso ya que los frotis más gruesos son más difíciles de observar y tardan más tiempo en secarse. El frotis no debe ser demasiado delgado ya que un frotis más delgado no contendrá suficiente cantidad de bacterias para examinar bajo el microscopio. El frotis debe ser parejo. De lo contrario, las células se agruparán en una parte del frotis y en la otra parte no habrá células suficientes para la observación. Solo debe haber un frotis por
  • 5. portaobjetos de vidrio. Es más fácil preparar un frotis a partir de una muestra sólida que a partir de una muestralíquida. El frotis se adhiere al portaobjetos de vidrio cuando se fija con calor, lo que se hace agitándolo sobre una llama. La fijación por calor solo debe realizarse después de secarcompletamenteel frotis al aire. Demasiadocalentamiento puede provocar daños en la pared celular. Luego se coloca la mancha requerida en el frotis y se lava después de un período de tiempo adecuado de exposición. A veces, se puede agregar un mordiente para mejorar el color de la celda. Al estudiar ciertas estructuras celulares, es posible que se requiera un paso adicional, como el calentamiento, para facilitar la entrada de la tinción en ese componente en particular. El experimento ilustrado aquí en esta sección es una tinción simple. La tinción simple es uno de los procedimientos de tinción más fáciles y se realiza principalmente para estudiar la morfología, la disposición y el aspecto de las células bacterianas. El principio detrás de la tinción simple es muy simple. Los tintes básicos como el cristal violeta, el azul de metileno tienen una carga positiva y pueden teñir muy fácilmente las células cargadas negativamente. Según el tinte utilizado, se debe variar el tiempo de exposición al tinte. Azul de metileno - 1 minuto, Cristal violeta -1 minuto, Carbol fucsina - 20 segundos. A continuación, se lava el exceso de colorante, se seca y se observa al microscopio. ESTRUCTURAS DE CÉLULAS PROCARIÓTICAS QUE SON VISIBLES A TRAVÉS DEL MICROSCOPIO ÓPTICO El aumento máximo que se puede obtener de un microscopio óptico es de 1000x o 1500x y la resolución máxima es de 0,2 μm. Por lo tanto, solo se pueden observar muy pocos detalles. El uso de diferentes técnicas de tinción ayuda a identificar y observar diferentes componentes de las células. El tamaño y la forma de las células se pueden determinar fácilmente con la ayuda de microscopía óptica. TAMAÑO Y MORFOLOGÍADE LAS BACTERIAS: Morfología: La morfología bacteriana es muy diversa. Los dos tipos principales de bacterias según su morfología son: A. Coccus. B. Bacilo. Además de estas formas, también se encuentran bacterias de forma cuadrada y rectangular. Algunas bacterias se encuentran en una variedad de formas y carecen de una única forma característica. Estos se llaman pleomórficos. Cocinero: Los cocos son células aproximadamente esféricas. Pueden existir como células individuales o estar agrupadas. En algunos casos, como en el género Neisseria, las células se pueden encontrar en pares. Tal par de cocos se conoce como diplococos.
  • 6. Neisseria A veces se pueden encontrar unidos entre sí como en cadenas. Este tipo de morfología la muestran los géneros Streptococcus, Enterococcus y Lactococcus. Estreptococo En ciertos géneros como Staphylococcus, las células se agrupan como uvas. Estafilococo Bacilos: Los bacilos son bacterias en forma de bastón. Varios bacilos pueden variar en la relación de largo a ancho. Hay ciertas bacterias que son tan pequeñas que se asemejan a cocos y se denominan cocobacilos.
  • 7. bacilos La forma del extremo de la varilla puede ser plana, en forma de cigarro o circular. Algunas de las bacterias tienen curvas distintivas y se conocen como vibriones. Vibrión. Algunas bacterias tienen forma de varillas largas retorcidas en espirales o hélices y se llaman espirilos. Espirilla Tamaño de las bacterias: Las células bacterianas se encuentran en varios tamaños. La bacteria más pequeña perteneciente al género Mycoplasma tiene solo 0,3 μm de diámetro. El tamaño de la mayoría de las bacterias cae en el rango de 1-5 μm. La bacteria más grande es Thiomargarita namibiensis. Estos son generalmente de 0,1 x 0,3 mm (100 x 300 μm) de
  • 8. ancho. La especie fue descubierta por Heide N. Schulz y otros en 1997, en los sedimentos costeros de Walvis Bay (Namibia). Thiomargarita namibiensis Además de la estructura celular y la morfología celular, se pueden identificar y observar otras estructuras celulares usando microscopía óptica. Se emplean técnicas especiales de tinción para observar estas estructuras. La mayoría de las veces, estas técnicas de tinción se denominan tinción diferencial. Algunos ejemplos de tinción diferencial son: 1. Tinción de Grams: diferenciar células gram negativas y gram positivas. 2. Tinción de endosporas: para identificar endosporas. (Una endospora es una estructura no reproductiva, resistente y latente producida por ciertas bacterias. Estas estructuras son extraordinariamente resistentes al estrés ambiental, como la radiación ultravioleta, la radiación gamma, el calor, los desinfectantes químicos y la desecación). Una preparación teñida de Bacillus subtilis que muestra la endospora en verde y la célula vegetativa en rojo 1. Tinción de Albert: para identificar gránulos metacromáticos.
  • 9. 2. Tinción capsular: para observar la cápsula alrededor de la bacteria. La mancha utilizada es tinta china. Aunque no es posible estudiar completamente la estructura bacteriana completa, la microscopía óptica proporciona una técnica simple y eficiente para proporcionar datos primarios de una muestra. PROCEDIMIENTO EN LÍNEA 1. Elija cualquier muestra A o B. 2. Limpie el portaobjetos con agua y jabón. Seca el portaobjetos con la ayuda de un pañuelo de papel. 3. Tome la muestra de cultivo. 4. Coloque una gota de agua en el portaobjetos. 5. Caliente el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo. Deje que se enfríe lo suficiente. 6. Sostenga la placa de Petri con la mano izquierda, ábrala y elija una colonia aislada. 7. Mezclar con el agua del portaobjetos. 8. Seca al aire el lugar. Y fije la mancha agitándola sobre una llama. 9. Vierta 4 o 5 gotas de colorante sobre el frotis. 10. Mantenga por un minuto. 11. Lava el exceso de tinte. 12. Seque. 13. Coloque el portaobjetos en la platina del microscopio. 14. Observe primero a baja potencia, es decir, con un objetivo de 10x. 15. Ajuste el diafragma al diámetro más grande, permitiendo que pase la mayor cantidad de luz. 16. Ajuste la perilla de ajuste grueso hasta que la muestra esté enfocada. 17. Ajuste el enfoque fino. 18. Observa la imagen. 19. Luego ajuste el diafragma para obtener la mejor iluminación. Comience con la mayor cantidad de luz y disminuya gradualmente hasta que la imagen de la muestra tenga un contraste claro y nítido. 20. Observa la imagen formada. 21. Gire la pieza de la nariz al objetivo 40x. (Lente con la banda azul). 22. Luego ajuste el diafragma para obtener la mejor iluminación. Comience con la mayor cantidad de luz y disminuya gradualmente hasta que la imagen de la muestra tenga un contraste claro y nítido.
  • 10. 23. Observa la imagen formada. 24. Gire parcialmente la punta para que los objetivos de 40x y 100x se coloquen a horcajadas sobre la muestra. 25. Coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área iluminada. 26. Gire la boquilla para que el objetivo de inmersión en aceite de 100x toque el aceite. 27. Enfoque sólo el ajuste fino. 28. Identifica la forma de la bacteria dada y escribe la respuesta. 29. Elija la otra muestra y continúe con el procedimiento. ESCENARIO DE EXPERIMENTO REAL MATERIALES NECESARIOS  Portaobjetos de vidrio limpio.  Microscopio óptico.  Cultivo bacteriano.  Asa de inoculación.  Mechero bunsen.  Cualquiera de los tintes básicos (cristal violeta, fucsina de carbol o azul de metileno).  Cuentagotas.  Botella de lavado. PROCEDIMIENTO 1. Limpie el portaobjetos con agua y jabón. Seca el portaobjetos con la ayuda de un pañuelo de papel. 2. Tome la muestra de cultivo. 3. Se coloca una gota de agua en el portaobjetos. 4. Caliente el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo. Y se deja enfriar lo suficiente. 5. Sostenga la placa de Petri con la mano izquierda, ábrala y elija una colonia aislada. 6. Mezclar con el agua del portaobjetos. 7. La mancha se seca al aire. Y fije la mancha agitándola sobre una llama. 8. Vierta 4 o 5 gotas de cristal violeta (o la tinción seleccionada) sobre el frotis. 9. Mantener durante un minuto (el período de tiempo varía según el tinte utilizado). 10. El exceso de tinte se lava. 11. Seque. 12. El portaobjetos se coloca en la platina del microscopio. 13. Observe a 10x, 40x y 100x. DIFERENCIAENCONTRADAEN UN LABORATORIO REAL En un entorno de laboratorio real, hay ciertos pasos importantes que no son necesariamente aplicables en un laboratorio virtual: 1. Al inocular medios de agar (placas y agar inclinados), asegúrese de no perforar ni rasgar la superficie del agar con el asa. 2. Etiquete siempre el portaobjetos y las placas con:  El nombre del organismo
  • 11.  El tipo de medio  Sus iniciales  La fecha 3. Asegúrese de colocar las placas de agar boca abajo en la incubadora. Esto evita que la condensación de agua gotee sobre la superficie del agar y se extienda por las colonias. Esto también evitará la contaminación y ayudará en la formaciónde colonias aisladas. 4. Ajuste correctamente la llama del mechero Bunsen. La llama adecuada es un pequeño cono azul; no es un penacho grande, ni es anaranjado. 5. Mientras flamea el aro (o la aguja), asegúrese de que cada segmento de metal brille de color naranja/al rojo vivo antes de mover el siguiente segmento hacia la llama. Ten cuidado; el metal se calentará mucho. 6. Una vez que haya flameado el asa (o la aguja), no la acueste, no la sople, no la toque con los dedos ni toque ninguna superficie que no sea el inóculo o el medio estéril. Si toca la punta con otra superficie o la sopla, tendrá que volver a flamear el asa antes de continuar con la inoculación. 7. Deje que el asa o la aguja se enfríen antes de intentar recoger su organismo. Si recoge el organismo con una herramienta caliente, sus células morirán. Para enfriar rápidamente el asa o la aguja, colóquela en una sección de agar que no esté inoculada o que al menos sea diferente del área de la que extraerá las células. 8. Vuelva a verificar el nombre del organismo en el cultivo madre del que está recolectando sus inóculos. 9. Cuando retire las tapas de los tubos, siempre manténgalas en la mano. Nunca los coloque sobre la mesa, ya que podrían recoger contaminantes. 10. Manipule siempre los tubos abiertos en ángulo; nunca permita que apunten directamente hacia arriba, ya que organismos en el aire o en otros ambientes podrían caer dentro del tubo y causar contaminación. Además, mantenga la tapa sobre un plato cuando retire el inóculo, ya que esto ayudará a prevenir la contaminación ambiental. 11. Siempre flamee el borde de un tubo de cultivo cuando lo abra y antes de volver a colocar la tapa. 12. Tan pronto como termine de inocular, flamee el asa o la aguja. Nunca coloque una herramienta contaminada en su banco de trabajo. 13. Deseche todos los materiales contaminados correctamente y devuelva sus suministros a los lugares de almacenamiento adecuados y limpie su área de trabajo. 14. Siempre desinfecte su área de trabajo cuando haya terminado.  AUTOEVALUACIÓN:
  • 12.  ANIMACIÓN: Entramos a la animación y escogemos la estructura que vamos a observar.  Primero revisamos la célula procariota. 1. Se lava el portaobjetos.
  • 13. 2. Se seca el portaobjetos con un pañuelo de papel. 3. Colocar una gota de agua en el portaobjetos 4. Calentar el asa de inoculación hasta que esté al rojo vivo y dejar que se enfrié. 5. Se abre el disco Petri con cuidado como se muestra. 6. Elige una colonia como muestra.
  • 14. 7. Mezcle con una gota de agua en el portaobjetos de tal manera que el asa de inoculación pueda arrastrarse con movimientos circulares uniformes para obtener un frotis delgado. 8. Pasamos la muestra sobre la llama. 9. Coloque el portaobjetos sobre el baño de arena. Vierta 4 o 5 gotas de colorante violeta cristal sobre el frotis. Guárdelo por un minuto. 10. Lave el exceso de tinte de la muestra. 11. Secar.
  • 15. 12. Encender el microscopio y colocar el portaobjetos en la platina del microscopio. 13. Gire la pieza de la nariz a la lente del objetivo 10x (lente con la banda amarilla). 14. Observar a través de la lente ocular. 15. Ajuste el diafragma al diámetro total más grande, permitiendo que pase la mayor cantidad de luz establecida. 16. Gire parcialmente la punta para que los objetivos de 40x y 100x se coloquen a horcajadas sobre la muestra. Coloque una pequeña gota de il en el portaobjetos en el centro del área iluminada. Gire la boquilla para que el objetivo de inmersión en aceite de 100x toque el aceite.
  • 16. 17. Abra completamente el iris del diafragma. 18. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite. 19. El portaobjetos se sumerge en agua jabonosa para limpiarlo. 20. Se llegó a observar en el microscopio las siguientes muestras de una célula procariota.
  • 17.  Revisamos la célula eucariota. Hay dos muestras de células de cebolla y células de la mejilla. CÉLULAS DE CEBOLLA 1. Encendemos el microscopio y ajustamos la luz 2. Saque una capa interna de media cebolla cortada.
  • 18. 3. Pela una fina capa exterior roja con unas pinzas. 4. Mantenerlo en el portaobjetos de vidrio. 5. Se agrega una gota de agua en la muestra de las células de cebolla. 6. Del mismo modo, agregue dos gotas de solución de yodo al portaobjetos que contiene células de cebolla. Luego se cubre con el cubreobjetos.
  • 19. 7. Se coloca el portaobjetos en la platina del microscopio. 8. Se observa la muestra en el microscopio en los diferentes objetivos, se ajusta la perilla grande de ajuste aproximado hasta que la muestra esté enfocada. Ahora, podemos ver una imagen borrosa cada vez más clara. Pero no muy claro. 9. Ahora, coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área iluminada. 10. Gire la pieza de la nariz al objetivo 100x. Tocará la diapositiva. 11. Ajuste el diafragma del iris para permitir el paso de la mayor cantidad de luz.
  • 20. 12. Ajuste el enfoque fino para que la imagen sea más clara. 13. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite. CÉLULAS DE LA MEJILLA 1. Tome un poco de solución salina con un gotero. 2. Vierta una gota de la solución en el portaobjetos de vidrio.
  • 21. 3. Tome un palillo de dientes esterilizado. 4. Raspe suavemente el revestimiento interno de su mejilla con un palillo como se muestra. 5. Agregue de 2 a 3 gotas de azul de metileno al portaobjetos que contiene las células de la mejilla con un gotero. 6. Coloque un cubreobjetos y elimine el exceso de tinte que pueda salir por los lados del cubreobjetos con un papel secante.
  • 22. 7. Encender el microscopio y colocar el portaobjetos en la platina del microscopio. 8. Se observa en los diferentes objetivos, en el objetivo 40x, se ajusta la perilla grande de ajuste aproximado hasta que la muestra esté enfocada. Ahora, podemos ver una imagen borrosa cada vez más clara. Pero no muy claro. 9. Ahora, coloque una pequeña gota de aceite en el portaobjetos en el centro del área iluminada. 10. Gire la pieza de la nariz al objetivo 100x. Tocará la diapositiva.
  • 23. 11. Ajuste el diafragma del iris para permitir el paso de la mayor cantidad de luz. 12. Ajuste el enfoque fino para que la imagen sea más clara. 14. Retire el portaobjetos y limpie el objetivo de inmersión en aceite 100x cuidadosamente con papel para lentes para eliminar todo el aceite.  SIMULACIÓN: En la simulación podemos observar células procariotas.
  • 24.  ASIGNACIÓN: 1. ¿Qué otra estructura puedes observar a través del microscopio de luz? ¿Se utiliza alguna técnica de tinción específica para este propósito? 2. ¿Observar varios cultivos de bacterias y describir su morfología? Clasifica estos organismos según su forma. 3. ¿Cómo aparecerá Escherichia coli en la tinción de Gram? 4. Si le dan dos muestras, una de cultivo de Bacillus subtilis y otra de Pseudomonas, ¿qué técnica de tinción elegirá para identificar estas bacterias si conoce su morfología, propiedad de la pared celular y capacidad de producción de endosporas?