laboratorio

1. célulascélulascélulascélulascélulascél
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Preparación y observación
con microscopio de células
vegetales y animales
Cálculo de aumentos
Elena Blanco de Tena-Dávila
1ºD Bachillerato
14 de Diciembre de 2012
Biología

2. 1

3. 2
Índice
Contenido
1. Resumen....................................................................................................................................................3

4. 3
2. Fundamento teórico...........................................................................................................................4
3. Materiales................................................................................................................................................10
3.1.Reactivos........................................................................................................................................10
3.2.Materiales......................................................................................................................................11
4. Datos y conclusiones .......................................................................................................................11
MUESTRA 1) Epidermis de cebolla........................................................................................11
MUESTRA 2) Epidermis de lirio...............................................................................................12
MUESTRA 3) Parénquima de reserva de patata y súber..........................................14
MUESTRA 4) Epitelio bucal........................................................................................................16
5. Evaluación..............................................................................................................................................17
5. Propuestas de mejora......................................................................................................................19
6. Bibliografía y webgrafía................................................................................................................20
1. Resumen
El primer objetivo de esta práctica era aprender y practicar las
técnicas histológicas básicas para así preparar muestras de tejido
biológico observables en el microscopio óptico. Para ello, hemos
preparado siete muestras (epidermis de cebolla, epitelio bucal,
parénquima de reserva de patata y súber, virutas de lápiz, piel de
mandarina, epidermis de lirio y parénquima clorofílico y tejido
conductor de lirio) y posteriormente las hemos observado a través de
un microscopio óptico.

5. 4
El segundo objetivo de esta práctica era observar, estudiar e
identificar las características de los tejidos y células vegetales o
animales presentes en las muestras preparadas.
El tercer y último objetivo de la práctica era calcular los
aumentos de las fotografías de las muestras estudiadas.
Los resultados de esta práctica nos permiten afirmar que
 las técnicas histológicas, como la microtomía, la tinción,
la fijación o el aclaramiento de la muestra, son
fundamentales para la observación de tejidos biológicos
en el microscopio óptico,
 las células y tejidos animales o vegetales que forman
parte de todos los seres vivos poseen características
comunes y diferencias,
 es fundamental determinar el número de aumentos que
posee la fotografía de una muestra microscópica para así
poder conocer su tamaño real.
2. Fundamento teórico
Para la preparación de muestras de tejido biológico y su
posterior estudio gracias al microscopio deben tenerse en cuenta unas
determinadas técnicas histológicas. Las técnicas histológicas son una
serie de operaciones gracias a las cuales un tejido biológico puede
llegar a convertirse en un corte extremadamente delgado y coloreado
que puede ser observable con un microscopio óptico.

6. 5
Las técnicas histológicas básicas que han sido estudiadas y
puestas en práctica en esta experiencia son las siguientes:
 Microtomía. La microtomía consiste en la obtención de
cortes extremadamente finos que puedan ser observados
como muestras en el microscopio óptico. Estos cortes
pueden ser realizados con instrumentos específicos, como
el microtomo, o con otros instrumentos menos precisos,
como un bisturí (utilizado en esta práctica). El corte nunca
deberá sobrepasar los 10 µm de espesor con el fin de que
la luz que proviene del foco del microscopio pueda
atravesarlo.
 Tinción. La tinción consiste en la adición de unas gotas de
colorante a la muestra que va a ser observada. Los
colorantes reaccionan y tiñen determinadas zonas del
tejido biológico, ocasionando que el contraste de la
muestra aumente. La utilización de colorantes es
fundamental para preparar una muestra que pueda ser
fácilmente observada con un microscopio óptico.
 Aclaramiento. El aclaramiento consiste en un ligero
lavado de la muestra con el fin de eliminar el exceso de
colorante. Este lavado puede llevarse a cabo con agua y un
cuentagotas, tal y como hemos hecho en esta práctica.
 Fijación. La fijación se debe llevar a cabo para inmovilizar
la muestra y para que los cambios post-morten del tejido o
sus deformaciones no sean observables. Para ello, la
muestra se bañará en sustancias fijadoras como el

7. 6
formaldehido, el etanol o el osmio. Una muestra también
puede ser fijada siendo colocada unos segundos sobre una
fuente de calor (método utilizado en esta práctica).
Las células que forman los tejidos que hemos observado en
esta práctica poseen formas, estructuras y funciones muy diferentes. El
proceso que posibilita la aparición de estas células tan distintas es la
diferenciación celular. La diferenciación celular permite que diferentes
células, con un origen común (célula huevo o zigoto), se especialicen
para llevar a cabo un determinada función. Estas células especializadas
sólo poseen activados aquellos genes que les permiten presentar la
forma y la estructura más adecuada para desempeñar su función de
manera eficaz.
Los tejidos observados en esta práctica poseen características
comunes y diferencias. Así mismo, las células que daban lugar a estos
tejidos poseían similitudes y también variaciones de forma, función y
estructura.
A continuación, explicaré en profundidad las características
de cada uno de estos tejidos y células y estableceré las principales
similitudes y diferencias que existen entre ellos.
En primer lugar, estudiaré las características de la epidermis
de cebolla. La epidermis está formada por células eucariotas vegetales
muy cohesionadas debido a las uniones celulares que tienen lugar
gracias al glucocálix. Tienen forma hexagonal y alargada. Estas células
se encuentran muy unidas con el fin de formar un tejido difícilmente

8. 7
penetrable y resistente para poder proteger las diferentes capas de la
cebolla. Además, la forma poligonal permite un mayor
aprovechamiento del espacio y facilita su unión.
Estas células vegetales se caracterizan por su pared celular
rica en celulosa, que les aporta rigidez y soporte, así como por la
presencia de cloroplastos capaces de realizar la fotosíntesis y sus
enormes vacuolas, en las que almacena pigmentos, enzimas, sustancias
de desecho, agua, etc. Las células eucariotas vegetales también poseen
núcleo definido que contiene ADN, similar al de las células animales,
así como membrana plasmática y citoplasma. También poseen otros
orgánulos, como el Aparato de Golgi, los ribosomas, el retículo
endoplasmático (liso y rugoso) y las mitocondrias. Debemos recordar
que la pared celular y los cloroplastos son orgánulos exclusivos de las
células vegetales. También debemos recordar que, a diferencia de las
células eucariotas animales, las vegetales no poseen centriolos ni
lisosomas.
La epidermis de la cebolla es característica de plantas
monocotiledóneas. Las células poseen una forma alargada y más o
menos hexagonal y se distribuyen de manera más o menos ordenada.
Están cubiertas por una delgada capa de cutina, ceras y polisacáridos,
que impiden la pérdida de agua y le pueden otorgar a la planta un
cierto brillo.
La epidermis reviste la parte interior y exterior de las
múltiples capas de la cebolla y las protege frente a determinados
microorganismos, frente a la desecación y frente al daño mecánico.

9. 8
También puede regular el intercambio de gases y la transpiración de la
planta.
En segundo lugar, estudiaré las características de la
epidermis de lirio, que posee unas características muy similares a la
epidermis de la cebolla. La epidermis del lirio está formada por células
eucariotas vegetales y también posee las características de la epidermis
de las plantas monocotiledóneas.
Las células vegetales de la epidermis del lirio poseen una
pared celular más gruesa que las de la cebolla, lo que le confiere al
tejido una mayor rigidez y estabilidad. Además, en este tejido
epidérmico podemos observar fácilmente unos pequeños poros
conocidos como estomas. Los estomas son unos orificios cuya principal
función es intercambiar gases entre la planta y el medio. A través de
los estomas entra el CO2, sale el O2 y se regula la emisión de otros
gases, como el vapor de agua. Los estomas están formados por dos
células oclusivas (forma arriñonada) cuya función es delimitar el
tamaño de un espacio central llamado ostiolo.
La estructura de la epidermis del lirio es muy similar a la de
la cebolla. Las células tienen una forma poligonal y alargada y se
distribuyen de manera ordenada. La epidermis protege al lirio frente a
las agresiones externas, los golpes, la deshidratación y regula el
intercambio de gases mediante los estomas.
En tercer lugar, estudiaré las características del parénquima
de reserva de la patata y el súber. El súber, también conocido como

10. 9
falema, es una capa que protege el interior vivo de la patata frente a la
desecación, los daños externos, los golpes, algunos animales, etc. El
súber está formado por células vegetales muertas cuyas paredes poseen
suberina, un polímero similar a la cutina, que protege a la planta frente
a agresiones térmicas y los golpes.
El parénquima de reserva es un tejido formado por células
vegetales cuya función es acumular sustancias de reserva en sus
vacuolas, plástidos o paredes celulares. Para poder llevar a cabo esta
función, estas células se han especializado y poseen unas vacuolas de
gran tamaño para poder almacenar la mayor cantidad de sustancia
posible. El parénquima de reserva es propio de tubérculos como las
patatas, rizomas, raíces napiformes como la zanahoria y algunas frutas.
En cuarto y último lugar, estudiaré las características del
tejido epitelial bucal. Las células epiteliales analizadas han sido
obtenidas con un simple raspado de la parte interior del carrillo. La
gran mayoría de las células obtenidas están muertas o en proceso de
desecación.
El epitelio bucal está formado por células eucariotas
animales. Estas células, tal y como he explicado antes, no poseen pared
celular ni tampoco cloroplastos, puesto que son heterótrofas. El hecho
de que no posean una pared vegetal rígida, provoca que las células
animales tengan una forma más irregular y no una forma poligonal.
Las células animales poseen un núcleo definido, retículo
endoplasmático (liso y rugoso), centriolos, aparato de Golgi, ribosomas,
vacuolas, mitocondrias y lisosomas. El contenido del citoplasma de la

11. 10
célula queda delimitado por la membrana plasmática. Puesto que la
función de estas células no es de reserva, sus vacuolas son muy
pequeñas.
El epitelio bucal es de tipo plano pluriestratificado. Recubre
la cara interna de la boca, la protege y posee algunas terminaciones
nerviosas que pueden captar estímulos como el dolor.
El tercer objetivo de esta práctica era calcular los aumentos
de las fotografías realizadas. Es fundamental expresar el número de
aumentos que posee una fotografía tomada con un microscopio. Si la
fotografía no incluye una escala o bien un número de aumentos, nos
resultará imposible conocer la medida real de la muestra fotografiada.
Para calcular el número de aumentos de una fotografía, debemos
multiplicar el número de aumentos que proporciona el ocular por el
número de aumentos del objetivo. Por ejemplo, en una fotografía
tomada con un microscopio con un ocular de 10 aumentos y un
objetivo de 40 aumentos, el número total de aumentos será 400.
Puesto que el ocular del microscopio utilizado poseía 15
aumentos y los objetivos poseían 4, 10 y 45 aumentos respectivamente,
llegamos a la conclusión de que los aumentos que nos proporcionar el
microscopio en cada caso serán 60, 150 y 675 aumentos totales.
3. Materiales
3.1. Reactivos

12. 11
 Lugol
 Azul de metileno
 Verde de metilo
3.2. Materiales
 10 portas
 10 cubres
 Microscopio óptico
 Bisturí
 Pinzas
 Mandarina
 Cebolla
 Epitelio bucal
 Lápiz
 Hoja de lirio
 Patata
4. Datos y conclusiones
MUESTRA 1) Epidermisdecebolla
IMAGEN 1: Epidermis de cebolla. Ana Victoria Rojo.
En esta imagen podemos observar la epidermis de la cebolla a 150 aumentos y sus principales partes.

13. 12
En la Imagen número 1, podemos observar la epidermis de
cebolla a 150 aumentos. Podemos distinguir en esta foto las principales
partes de una célula eucariota vegetal. Las zonas que delimitan la
célula, teñidas de un azul intenso, son las paredes celulares. Las zonas
más claras son el citoplasma. Los orgánulos no son apreciables. Los
pequeños círculos azules que se encuentran en el interior de cada
célula, son los núcleos. El nucléolo no es apreciable.
Tras analizar esta foto, llegamos a varias conclusiones. La
primera de ellas es que, efectivamente, este tejido epitelial está
formado por células.
En segundo lugar, observamos que las células son vegetales
porque poseen pared celular, citoplasma y núcleo. Además observamos
que son alargadas, su forma es más o menos hexagonal, y se
encuentran ordenadas y muy cohesionadas.
En tercer lugar, llegamos a la conclusión de que los
orgánulos celulares y los nucléolos no son apreciables en una
fotografía con 150 aumentos. Necesitaremos una fotografía con un
mayor número de aumentos para observar la forma de los orgánulos.
MUESTRA 2) Epidermisdelirio

14. 13
En la Imagen 2 observamos la epidermis del lirio a 675
aumentos. Podemos distinguir las principales partes de una célula
vegetal en esta foto. Las zonas que delimitan la célula, teñidas de verde
oscuro, son las paredes celulares. Las zonas más claras son el
citoplasma. Los orgánulos no son apreciables. Los pequeños círculos
verdes que se encuentran en el interior de cada célula, son los núcleos.
El nucléolo no es apreciable. En la zona de la muestra fotografiada los
estomas no son apreciables.
Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusión de que
este tejido epitelial está formado por células.
La segunda, es que las células que forman el tejido epitelial
del lirio son células vegetales, pues poseen pared celular, núcleo y
citoplasma. Observamos que las células son poligonales, hecho que
confirma nuestra teoría.
La tercera conclusión es que los orgánulos y el nucléolo de
las células tampoco son apreciables en una imagen a 675 aumentos.
IMAGEN 2: Epidermis de lirio. Elena Blanco de Tena-Dávila.
En esta imagen podemos observar la epidermis del lirio a 675 aumentos y sus principales partes.

15. 14
Necesitaremos un microscopio con más aumentos para poder
apreciarlos.
MUESTRA 3) Parénquimadereservadepatataysúber
En la Imagen 3 podemos observar el súber de la patata a 150
aumentos. Podemos comprobar que está formado por células muertas
que no poseen citoplasma, sino que está rellenas de aire. Los puntos
oscuros son almidón que acaba de reaccionar con lugol.
Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusión de que el
súber de la patata está formado por células vegetales, pues poseen
pared celular.
En segundo lugar, observamos que las células están muertas
porque no poseen citoplasma ni núcleo, sólo están repletas de aire.
En tercer lugar, llegamos a la conclusión de que el lugol
sólo está presente en las células vivas. Podemos observar que en las
IMAGEN 3: Súber de patata. Elena Blanco de Tena-Dávila.
En esta imagen podemos observar el súber de patata a 150 aumentos y sus principales partes.

16. 15
células del súber no hay almidón, sino que se encuentra en el
parénquima de reserva.
En la Imagen 3 podemos observar el parénquima de reserva
de patata. Observamos débilmente la pared celular de las células. El
núcleo y los orgánulos no aparecen. Las grandes manchas negras son
almidón que acaba de reaccionar con lugol. Son las vacuolas las que
contienen ese almidón.
Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusión de que la
parénquima de patata está formada por células. Sin embargo, puesto
IMAGEN 4: Parénquima de reserva de patata. Elena Blanco de Tena-Dávila.
En esta imagen podemos observar el parénquima de reserva de patata a 675 aumentos y sus principales partes.

17. 16
que la muestra no está teñida, estas paredes caso no son visibles, al
igual que el núcleo. Nuestra segunda conclusión es, por lo tanto, que es
fundamental llevar a cabo una tinción del tejido biológico que se
quiera observar al microscopio para poder distinguir claramente sus
partes (pared celular, núcleo, citoplasma).
En tercer lugar, llegamos a la conclusión de que,
efectivamente, las células vegetales poseen una gran cantidad de
vacuolas de gran tamaño en las que pueden almacenar almidón.
MUESTRA 4) Epiteliobucal
En la Imagen 5 podemos observar el epitelio bucal humano
IMAGEN 5: Epitelio bucal. Elena Blanco de Tena-Dávila.
En esta imagen podemos observar el epitelio bucal a 150 aumentos y sus principales partes.

18. 17
a 150 aumentos. Observamos de color rosado el citoplasma de las
células, la membrana plasmática de color marronáceo y, de morado, el
núcleo. Las células no tienen forma poligonal, sino que son irregulares.
Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusión de que el
epitelio bucal está formado por células animales, pues estas células no
son poligonales, sino irregulares. Esto significa que no poseen pared
celular y que, por lo tanto, son células animales.
La segunda conclusión a la que llegamos es que, cuando el
tejido tiene origen animal (humano en este caso), las células que lo
conforman serán eucariotas animales. Tal y como hemos comprobado
en las anteriores experiencias, si las células provienen de plantas
pluricelulares (cebolla, patata, lirio), sus células serán eucariotas
vegetales.
5. Evaluación
Las conclusiones extraídas en esta práctica son, en algunos casos,
generalizaciones. En esta práctica de laboratorio hemos trabajado con
cinco tejidos diferentes: la epidermis de la cebolla, la epidermis del
lirio, el parénquima de reserva de patata, el súber de patata y el epitelio
bucal humano. Tras tratar y observar estos tejidos, hemos llegado a la
conclusión, por ejemplo, de que los tejidos que proceden de animales
están formados por células animales y las plantas están formadas por
células vegetales. A pesar de que esta afirmación puede parecer obvia,

19. 18
si queremos asegurar que es verdadera, deberíamos observar más
tejidos de diferentes clases y orígenes.
En esta práctica, he estudiado y observado cinco tejidos. Sin
embargo, el tiempo del que dispusimos para realizar la práctica fue
muy pequeño en comparación con el número de muestras que
debíamos observar. El guión de práctica de debemos seguir cada vez
que trabajamos en el laboratorio, establecía que las muestras que
debíamos observar eran siete. Las muestras observadas han sido cinco,
dos menos de las previstas.
En esta práctica hemos aprendido algunas técnicas citológicas e
histológicas básicas (microtomía, tinción, aclaramiento, fijación).
Hemos aplicado estas técnicas en todas las muestras observadas y las
hemos llevado a cabo correctamente. La observación en el microscopio
ha sido muy buena.
Las muestras preparadas gracias a las técnicas histológicas se
observaban muy bien en el microscopio. Ha sido sencillo identificar las
diferentes partes del tejido, así como el tipo de células que lo
componían.
El cálculo de aumentos ha supuesto un pequeño problema.
Debemos tener en cuenta que las fotos presentadas en este trabajo han
sido realizadas con una cámara digital ajustada al objetivo del
microscopio. Por lo tanto, no debemos tener en cuenta tan sólo los
aumentos que nos proporciona el microscopio, sino que también
deberíamos tener en cuenta los que proporciona la cámara. Sin

20. 19
embargo, olvidé apuntar cuáles eran los aumentos que la cámara nos
proporcionaba y, en esta práctica, he tenido en cuenta sólo los
aumentos propios del microscopio.
Por otra parte, he de comentar que el trabajo de laboratorio ya se
desarrolla sin incidencias y con un gran aprovechamiento del tiempo.
Tanto yo como mi compañera de laboratorio hemos aprendido a
compenetrarnos y a trabajar en equipo durante las prácticas de
Biología.
5. Propuestas de mejora
En primer lugar, creo que para poder obtener más y mejores
conclusiones, debemos analizar un mayor número de muestras de
diferente tipo y origen (tejidos procedentes de más animales, amebas,
algas, bacterias). De este modo, habríamos podido estudiar más
profundamente las diferencias y similitudes de diferentes células y
tejidos.
En segundo lugar, opino que deberíamos haber dedicado algo
más de tiempo para realizar esta práctica. El tiempo del que dispusimos
para crear las siete muestras y observarlas fue muy limitado. Por este
motivo, propongo dedicar por lo menos dos clases a este tipo de
prácticas en el futuro.
Mi tercera propuesta de mejora es utilizar material de mayor
precisión a la hora de obtener los cortes finos que serán observados
posteriormente con el microscopio. En esta práctica, utilizamos un
bisturí y los resultados obtenidos han sido buenos. Sin embargo, si
utilizamos instrumentos como el micrótomo, la observación será más
sencilla y las partes del tejido serán más fácilmente identificables.

21. 20
Por último, he de decir que será importante no cometer los
errores cometidos en esta práctica en las próximas experiencias en el
laboratorio. Deberemos recordar que la cámara aumenta la imagen de
la muestra que nos da el microscopio. Las soluciones a este problema
serán utilizar una cámara propia de microscopio (en las que se indica
los aumentos que proporcionan a la fotografía) o bien anotar y añadir
los aumentos que proporciona la cámara a los aumentos totales del
microscopio.
6. Bibliografía y webgrafía
 Autor anónimo: Célula animal. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_animal, 19 de
Diciembre de 2012.

22. 21
 Autor anónimo: Célula vegetal. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_vegetal, 20 de
Diciembre de 2012.
 Autor anónimo: Células de la epidermis de la cebolla.
http://www.juntadeandalucia.es,
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~14008068/biologiayg
eologia/practicas%20biolog%EDa/celulas%20de%20la%20epid
ermis%20de%20cebolla.htm, 18 de Diciembre de 2012.
 Autor anónimo: Epitelio. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Epitelio, 19 de Diciembre de 2012.
 Autor anónimo: Parénquima reservante. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Par%C3%A9nquima_reservante, 20
de Diciembre de 2012.
 Autor anónimo: Súber. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/S%C3%BAber, 20 de Diciembre de
2012.
 Autor anónimo: Técnica histológica. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_histol%C3%B3gica
, 15 de Diciembre de 2012.
 Autor anónimo: Tejido epidérmico. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Tejido_epid%C3%A9rmico, 20 de
Diciembre de 2012.
 MAGARIÑOS, Gabriel: Técnica histológica.
http://www.dermato101.com.ar,
http://www.dermato101.com.ar/tecnica.pdf, 15 de Diciembre de
2012.

23. 22