1. Folio: 010
Fecha: 26/04/21
Práctica 10: Aplicación de los conceptos fundamentales de polaridad a la separación de
compuestos por medio de cromatografía en papel.
Objetivos
● Comprender los efectos de la polaridad y apolaridad en la separación de compuestos
mediante la cromatografía en papel.
Materiales y equipos
● 1 cámara de cromatografía
● 1 hoja blanca de papel
● 1 lápiz
● 1 pinzas
● 1 regla
● 1 tijeras
● 1 vasos de precipitado de 1 L
● 1 vidrio de reloj que pueda tapar el
vaso de 1 L
● 2 papel filtro Whatman del número
# 1
● 3 vasos de precipitado de 50 mL
● Marcadores de diferentes colores
de base agua
● 2 g de cristales de yodo
● 40 mL de acetona (C3H6O)
● 40 mL de ácido clorhídrico (HCl) 1
M
● 40 mL de etanol (C2H5OH)
Datos de seguridad de los reactivos
Yodo (I)
● H302+H312+H332 Nocivo en caso de ingestión, contacto con la piel o inhalación.
● H315 Provoca irritación cutánea.
● H319 Provoca irritación ocular grave.
● H335 Puede irritar las vías respiratorias.
● H372 Provoca daños en los órganos (tiroides) tras exposiciones prolongadas o
repetidas (en caso de ingestión).
● H400 Muy tóxico para los organismos acuáticos.
Acetona (C3H6O)
2. ● H225 Líquido y vapores muy inflamables.
● H319 Provoca irritación ocular grave.
● H336 Puede provocar somnolencia o vértigo.
Ácido clorhídrico (HCl)
● H290 Puede ser corrosivo para los metales.
Líquido incoloro o ligeramente amarillo; peligroso, corrosivo e higroscópico. Puede
ocasionar severa irritación al tracto respiratorio o digestivo, con posibles quemaduras. Puede
ser nocivo si se ingiere. Produce efectos fetales de acuerdo con estudios con animales
Etanol (C2H5OH)
GHS02, GHS07
Inflamable. Si se inhalan altas concentraciones puede causar somnolencia, tos, irritación de
los ojos y el tracto respiratorio, dolor de cabeza y síntomas similares a la ingestión.
Si se ingiere hay sensación de quemadura. Al principio resulta estimulante seguido de
depresión, dolor de cabeza, visión borrosa, somnolencia e inconsciencia. Grandes cantidades
afectan el aparato gastrointestinal. Si es desnaturalizado con metanol, puede causar
ceguera.Si entra en contacto con la piel causa resequedad y en los ojos causa irritación,
enrojecimiento, dolor, sensación de quemadura. A largo plazo produce efectos narcotizantes,
afecta el sistema nervioso central, irrita la piel (dermatitis) y el tracto respiratorio superior. La
ingestión crónica causa cirrosis en el hígado.
3. Metodología
Cromatografía en papel
1. Cortar tres tiras de papel filtro de 6 cm de ancho y una altura poco menor a la de la
cámara de cromatografía para que no se doble cuando se coloque la tapa de la cámara.
2. Dibujar en las tiras una línea con lápiz a 1 cm del borde inferior (línea de origen) y
una a 2 cm del borde superior.
3. Marcar la posición donde se colocarán las muestras sobre la línea inferior. Asignar el
espacio de acuerdo al número de muestras.
4. Las muestras serán los marcadores de colores solubles en agua. La muestra deberá de
ser del tamaño de un círculo de 0.1 cm.
5. Colocar la solución de HCl 1M en la cámara de cromatografía que será el primer
eluente.
6. Colocar el papel sin que el disolvente llegue a la línea de origen.
7. Dejar que el disolvente corra a través del papel hasta llegar a la línea superior.
8. Retirar y marcar el recorrido del eluente. Poner a secar.
9. Repetir el mismo procedimiento con el etanol y la acetona.
Yodo revelador universal
1. Colocar la palma de la mano sobre una hoja de papel blanco. De preferencia que la
palma esté sudada.
2. Colocar los cristales de yodo en un vaso de precipitado de 1L para que se sublimen.
3. Colocar la hoja dentro del vaso y taparla con el vidrio de reloj para concentrar los
vapores de yodo.
4. Apreciar la huella dactilar después de unos minutos.
Cuestionario Prelaboratorio
1. Defina: Eluente: solvente o solución utilizada en el proceso de elución, como ocurre
en una cromatografía en columna. Fase estacionaria: una sustancia que muestra
afinidades diferentes para los distintos componentes en una mezcla de la muestra en
una separación de la mezcla por cromatografía. Fase móvil: Es un fluido que penetra a
través o a lo largo del lecho estacionario, en una dirección determinada. Puede ser un
líquido (cromatografía de líquidos) o un gas (cromatografía de gases) o un fluido
supercrítico (cromatografía de fluidos supercríticos). Cromatograma: es un gráfico u
otra representación de la respuesta del detector, de la concentración del analito en el
efluente o de otra magnitud utilizada para medir una propiedad del efluente frente al
volumen de efluente o tiempo. Revelador: sustancia utilizada para poder visualizar los
componentes de la muestra si ésta no es coloreada.[1],[2],[3],[4]
2. ¿Por qué al realizar la cromatografía en papel no debe aplicarse una muestra muy
grande? Ya que para la retención de nuestra muestra es necesaria la distribución del
soluto entre la fase móvil y estacionaria, debemos colocar una muy pequeña cantidad
de muestra para que estas dos fases lleguen a un equilibrio. [5]
4. 3. ¿Por qué debe utilizarse lápiz de grafito para marcar la placa o el papel y no tinta? El
grafito está formado por moléculas de carbono que no son solubles en los solventes
utilizados en este tipo de prácticas. La tinta es solubilizada en agua por lo que los
solventes polares disuelven la tinta. [6]
Resultados
Para llevar a cabo esta práctica se utilizaron marcadores de agua de color rojo, verde y azul.
Una vez que se hubo secado el eluente en cada uno de los papeles utilizados se midieron las
distancias alcanzadas por el compuesto por influencia del eluente en cada uno de los casos
con cada uno de los marcadores. Los resultados se pueden ver en la siguiente tabla.
Tabla 1. Distancias alcanzadas por los distintos compuestos por influencia de los disolventes.
Disolvente Marcador Rojo Marcador Verde Marcador Azul
Etanol (C2H5OH) 2.9 cm 2.9 cm 2.9 cm
Acetona (C3H6O) 3.1 cm 0.2 cm Punto de aplicación
Ácido clorhídrico (HCl) 1.7 cm 1.7 cm 1.7 cm
Las mediciones anteriores se realizaron con la finalidad de obtener el Rf o factor de retención
de cada una de las muestras. Para esto es necesario tener los datos de las distancias recorridas
por los disolventes además de las distancias recorridas por los compuestos. Sin embargo, el
dato de la distancia recorrida por el disolvente no fue proporcionado por lo que se decidió
tomar el valor como 4.5 cm. Con este dato se procedió a obtener el Rf de cada uno de los
colores en diferentes disolventes.
Los resultados fueron los siguientes:
Marcador rojo:
● Etanol: 0.64
● Acetona: 0.68
● Ácido clorhídrico: 0.37
Marcador verde:
● Etanol: 0.64
● Acetona: 0.04
● Ácido clorhídrico: 0.37
Marcador azul:
● Etanol: 0.64
● Acetona: 0
5. ● Ácido clorhídrico: 0.37
Observaciones experimentales
● De acuerdo con los datos plasmados en la tabla anterior podemos ver que tanto el
etanol como el ácido clorhídrico tuvieron interacciones constantes. Puede que al hacer
el experimento con ácido clorhídrico, los compuestos hayan interactuando un poco
más con la fase estacionaria que con la fase móvil por lo que fueron retenidos más
abajo que en el caso del etanol.
● Si observamos las interacciones de la acetona podemos ver que varían bastante. Esto
pudo deberse al grado de interacción que tuvieron los distintos colores con la fase
móvil y estacionaria. Podemos ver que el color rojo fue más afín a la acetona y por lo
tanto se desplazó una mayor distancia. En el caso del color azul, éste fue
completamente retenido por la fase estacionaria.
También hay varias observaciones pertinentes que apoyan a la realización de la práctica para
que sea más eficiente.
● Se recomienda utilizar guantes y pinzas para sujetar el papel o las placas para no dejar
rastros de grasa en ellos ya que pueden aparecer manchas si es que revelamos con
yodo.
● Es muy importante mantener la placa o el papel totalmente vertical para que el
disolvente corra de manera homogénea y el proceso de separación sea más eficiente.
Referencias
[1] “Eluente”. Diccionario Mosby Medicina, Enfermería y Ciencias de la Salud. Recuperado
de https://buho.guru/dict/medicina/eluente
[2] “Fase estacionaria”. Glosario de Química. Recuperado de
https://glosarios.servidor-alicante.com/quimica/fase-estacionaria
[3] “Definiciones básicas”. Sociedad Española de Cromatografía y Técnicas Afines.
Recuperado de https://www.secyta.es/es/node/10
[4] “Cromatografía de capa fina (CCF)”. (2021). Recursos Educativos de Química.
Recuperado de https://www.dequimica.info/cromatografia-ccf
[5] “Técnicas Cromatográficas”. (2007). Universidad Nacional Autónoma de México:
Facultad de Química. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
[6] “Cromatografía: Principios Generales”. Recuperado de
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf