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INTRODUCCION
La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar
análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica potente no requiere de ningún tipo
de equipamiento. La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de
papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la
disolución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase móvil
se hace ascender por capilaridad. La separación se realiza en función de la afinidad de
los solutos con las dos fases, las más solubles en agua se quedarán cerca del punto
donde se aplicó la muestra, y las menos solubles en agua y más solubles en el
disolvente llegarán más lejos. Las sustancias separadas se identifican mediante
diversos procedimientos físicos o químicos.
La cromatografía en papel es una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo,
permite llevar a cabo la separación e identificación de iones, trabajando con cantidades
mínimas de sustancia. Pertenece al tipo de “Cromatografía de partición” se fundamenta
en que las sustancias problema, pueden tener diferentes coeficientes de reparto en dos
disolventes de inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en la superficie del papel “fase
estacionaria” generalmente en agua, la fase móvil constituida generalmente por una
mezclade disolventes parcialmente miscibles en ella. Hay varios tipos de cromatografía,
la ascendente (papel hacia arriba), descendente (papel invertido), radial y de separación
de zonas y sectores manchas características sobre el papel, generalmente, estas no
son coloreadas y se revelan con una lámpara fluorescente, los contornos se marcancon
lápiz. Como medida en cromatografía sobre papel se emplea el Rf (Retention factor), el
cual se define como el cociente de dividir el recorrido de la sustancia por el disolvente,
esto es, la distancia media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por
la distancia que media desde el origen hasta el frente del disolvente (S). 𝑅𝑓=𝑋𝑆 [1] En
la cromatografía en papel se utiliza como fase estacionaria una hoja de papel de
celulosa de elevada pureza recubierta de una capa de agua asociada a las fibras de
celulosa. La fase móvil, en la que irá disuelta la muestra, se forma por disolventes cuya
naturaleza se elige en función de los componentes que se pretenden separar.
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CROMATOGRAFIA EL PAPEL
OBJETIVOGENERALES:
Conocer la cromatografía como técnica de separación de mezclas de sustancias,
sus características y los factores que en ella intervienen.
Estudiar la incidencia del coeficiente de reparto entre la fase móvil y la fase
estacionaria.
Analizar la influencia del solvente en la separación cromatografía.
Observar las diferentes características de la placa en la cromatografía.
OBJETIVOSESPECIFICOS:
Medir la distancia recorrida por el absorbente en el papel.
Calcular los RF para cada una de las sustancias separadas.
Separar los componentes de una mezcla.
CROMATOGRAFIAEN PAPEL
La cromatografía en papel es a técnica de separación de identificación de sustancias
químicas en la cual la fase estacionaria es el gua absorbida y adsorbida que hay en el
papel (papel filtro hecho de celulosa) y el soporte es el mismo papel. La fase móvil es
una solución que consiste en un disolvente de una mezcla de varios líquidos que
contiene agua.
La palabra cromatografía proviene de kromatos (color) y graphos (escrito). El nombre
de la técnica deriva de los primeros ensayos d los que se separaron pigmentos de
plantas como la clorofila, los cuales tienen colores definidos. Estos primeros pasos los
dio el botánico Ruso de origen Italiano Mijail Tswett cuando separo diversos pigmentos
en las plantas.
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MATERIALES Y REACTIVOS
Papel filtro de 22cm. de lardo por 13cm.de ancho
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Horno de Secado
Lápiz
Capilares (4 unidades)
Pinza
Rociador para cromatografía
Tubo de ensayo
Cubeta para cromatografía
Solución de Fenol
Ninhidrina
Alanina
Glutamato
Acido malónico
Succinato de sodio al 0.2M
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PROCEDIMIENTODE LACROMATOGRAFÍA
En un papel filtro de 22 x 13 cm, trazamos una línea superior a 2.5 cm (que será
nuestra línea de referencia del corrido cromatográfico), en la parte inferior
trazamos otra línea a 1.5 cm de la base (en donde colocaremos las muestras)
ubicamos las muestras de Alanina y Glutamato en ambos extremos.
Luego enrollamos el papel y lo grapamos en ambos extremos sin sobreponerlo
(sino juntándolo solo en los extremos) y lo ponemos sobre la solución de fenol
con agua.
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Luego esperamos que las muestras migren hasta la línea de referencia y de ahí
ponemos a secar en la estufa a 80° C por 1 minutos, luego retiramos.
Una vez secado el papel procedemos a realizar el revelado con la sustancia
reveladora: Ninhidrina, rociándola suavemente hasta cubrir el papel hasta donde
se ha realizado la migración. Después de esto volvemos a poner a secar en la
estufa a 80° por 10 minutos.
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Luego del segundo secado procedemos a retirar las grapas del papel y observaos
las manchas que se han producimos y procedemos a realizar el barrido
cromatográfico utilizando la formula siguiente:
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RESULTADOS
Alanina
GlutamATO
Conclusión
De acuerdo con los resultados obtenidos, llegamos a la conclusión que el
aminoácido como la Alanina tiene un RF de 0.50 y el Glutamato tiene un
RF de 0.26, por lo tanto afirmamos que el desplazamiento es mayor en la
Alanina, lo que nos quiere decir que tiene un menor peso molecular, al
contrario del Glutamato, eso nos quiere decir que su desplazamiento es
RF= 4.8 =0.50
9.5
RF= 2.5 = 0.26
9.5
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menor por poseer mayor peso molecular y que las soluciones no se
rebelan ante la ninhidrina por no ser aminoácidos.
WEBGRAFÍAS
http://www.slideshare.net/honey61187/cromatografa-de-papel#btnNext