Este documento describe un procedimiento de laboratorio para separar e identificar colorantes artificiales en alimentos utilizando cromatografía en capa delgada. El objetivo es aplicar esta técnica cromatográfica para separar los diferentes colorantes presentes en varias muestras. Se detallan los materiales, procedimiento experimental que incluye marcar tiras de papel con tintas de plumas y colorantes alimenticios, y analizar los resultados mediante el cálculo de valores Rf. La conclusión es que la cromatografía en capa delgada produjo

1. Instituto Tecnológico de Sonora
Departamento de Biotecnología
Laboratorio de Análisis Instrumental
PRACTICA 9. SEPARACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE
COLORANTES ARTIFICIALES EN ALIMENTOS, POR
CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA
M. En C. Roberto García Rodríguez
Martes/ 10:00am – 1:00pm
Equipo #4:
Jesús Córdova 163563
Hildeliza Vega Vega 166037
David Fragozo 159144
Marisol Badilla 164898
Bernardo Flores 165174
Ana Cárdenas

2. Objetivo
Conocer la técnica de separación de cromatografía en
capa delgada y aplicarla para separar los colorantes
artificiales presentes en varios compuestos.

3. Introducción
Las técnicas cromatográficas constituyen una herramienta
fundamental en los laboratorios analíticos y de investigación, por
lo que su conocimiento es de trascendental relevancia.

4. Cromatografía en Capa Fina
La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y
sencilla que nos permite, comparar muestras o determinar el grado de
pureza de un compuesto.
Es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas
relativamente pequeñas.
Está técnica deriva de los trabajos del farmacéutico alemán Egon Stahl,
que presentó en 1956.

5. Esta técnica de separación consta de un sistema de dos fases, una solida (fase
estacionaria) que se aplica en forma de capa delgada, esta capa es fijada a una
placa de vidrio que actúa como soporte, y una fase liquida o solvente (fase
móvil).
Placa de
vidrio
Fase
estacionaria
Fase móvil
Fases

6. Los dos absorbentes mas
utilizados son el gel de
Silice (SiO2) y la alúmina
(Al2O3)
El sustrato a analizar se coloca cerca del borde del papel o
de la superficie absorbente en forma de una pequeña
mancha circular.
Los disolventes más
comúnmente empleados son:
Hexano, tetraclorometano,
cloroformo, diclorometano,
acetato de etilo, acetona,
metanol y agua.
Fases

7. 1. Acetona
2. Silica gel G60
3. Metanol
4. Serie patrón de colorantes
5. Solución de desarrollo: Fenol- agua (70-30)
6. Colorantes alimentarios
7. Tinta de plumas
8. Tiras de papel
9. 3 vasos de precipitado
10. Cubeta de desarrollo
11. Estufa
Materiales y reactivos

8. Procedimiento
Cortar 3 tiras de papel y sobre cada una de ellas
hacer marcas con diferentes colores de pluma.
Marcar 3 vasos de precipitado como: agua, agua
+ metanol, agua+ metanol + acetona.
Agregar la cantidad suficiente de cada uno de los
reactivos a cada vaso de precipitado
Depositar cada una de las tiras de papel en cada
vaso y dejar reposar para observar el
desplazamiento de los colores

9. Procedimiento
Limpiar una placa e vidrio de 20 cm por lado de 6-8 mm
de espesor, lavar con agua y enjuagar con acetona.
Pesar 8 gramos de silica gel G y mezclar con 16 ml de
agua destilada.
Agitar durante 1 minuto y verter la mezcla sobre la placa
de vidrio. Con una pipeta extender la mezcla de silica gel
lo mas uniformemente posible.
Dejar secar la placa al aire y después “activar” en una
estufa a 105°C durante media hora
Dividir la placa cubierta de silica gel en 8 columnas y cada una de
ellas se distribuye una porción de cada colorante mediante un
capilar, procurando que cada mancha no forme un circulo de mas
de 5 mm de diámetro.

10. Procedimiento
Dejar evaporar el solvente de la muestra sobre la placa y
se procede a efectuar el corrimiento, colocando la placa
dentro de una cámara de desarrollo previamente saturado
con la solución de fenol-agua.
Conservar la placa dentro hasta que el liquido llegue a la
línea limite de corrimiento.
Retirar la placa de la cámara y dejar que escurra el
liquido.
Una vez seca la placa se observa el numero de colorantes
que presenta la muestra problema y se mide la distancia
recorrida por el liquido de desarrollo y la recorrida por
cada mancha coloreada.

11. Resultados
La relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el
eluyente desde el origen de la placa se conoce como Rf.
Para calcular el Rf se aplica la siguiente
expresión:
Rf = distancia recorrida por el compuesto
(X) / distancia recorrida por el eluyente (Y)

12. Resultados
Distancia recorrida por
el eluyente
1 2 3 4 5 6 7 8
Rf 1: 5/7 = 0.71
Rf 2: 4/7 = 0.57
Rf 3: 4/7 = 0.57
Rf 5: 3/7 = 0.42
Rf 4: 4/7 = 0.57
Rf 6: 4/7 = 0.57
Rf 7: 5/7 = 0.71
Rf 8: 4/7 = 0.57

13. Resultados
Tinta: Pluma (BIC) Colorantes alimentarios (Mccormick)

14. Conclusión
Se realizó la cromatografía de capa fina para separar los componentes de
colorantes artificiales.
En la cromatografía en papel no hubo menor separación de colores con la
tinta de pluma en comparación con los colorantes artificiales.
Los tintes de pluma no hubo separación pero si desplazamiento, con
excepción del verde disuelto en acetona. En cambio los colorantes
artificiales se separaron en su colores primarios y en ocasiones un color
más que podría ser el responsable de producir el tono específico del color.
La técnica en capa fina produjo mejores resultados. La mayoría de los
colorantes también se separaron en los colores primarios que los
componen, sin embargo, su desplazamiento fue mayor. Los colorantes 1 y 7
se desplazaron mejor (Rf de 0.71) por lo que son más disolubles en fenol-
agua.

15. Bibliografía
https://es.slideshare.net/MateoSepulvedaSanchez/cromatografa-de-
capa-fina
Guarnizo, A. Martínez, P. Experimentos de Química Orgánica con
enfoque en ciencias de la vida. Capitulo 11: Separación de
pigmentos por cromatografía de capa fina.
Walton, H. Reyes, J. 2005. Análisis Químico e Instrumental moderno.
Capitulo 11: Cromatografía en papel y capa fina. Editorial
Reverté. Boulder, Colorado.