Este documento resume los principales aspectos de la técnica reproductiva de transferencia de embriones. Describe los métodos de colecta, procesamiento, criopreservación y transferencia de embriones, así como el manejo de las vacas donantes y receptoras. La transferencia de embriones permite mejorar la calidad genética del ganado y aumentar el número de crías por medio del transporte de embriones entre hembras.
2. ANTECEDENTES
La primera transferencia de un embrión
bovino se informó en 1949.
La primera cría de la transferencia de
embriones en 1951.
3. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
La transferencia de embriones es una técnica que permite transferir un embrión de
una hembra donante a una receptora.
VENTAJAS
MEJORA GENETICA
• Transporte de razas con
facilidad.
• También es posible fomentar el
número de partos gemelares
transfiriendo, a los 7-8 días
postservicio
4. SANITARIO: Impedir contagio enfermedades infecciosas
INVESTIGADOR: Esta técnica es imprescindible para poder plantear nuevas
tecnologías.
7. COLECTA DE EMBRIONES
Area de trabajo.
La sujeción de la donante.
El equipo de recolección.
Los medios a usar.
8. Materiales
Sonda tipo Foley
Catéter extensible telescópico
Sistema de recogida embriones IMV 3 vías
Medio de colecta de embriones
Medio flushing.
Filtro en copa
Filtro EZ para sondas Foley
9. MÉTODOS DE RECOLECCIÓN:
- Circuito cerrado con flujo continúo
- Circuito cerrado con flujo discontinuo
- Circuito abierto con flujo discontinuo
10. CIRCUITO CERRADO CON FLUJO CONTINÚO
Este método se emplea catéteres de 3 vías, rígidos o flexibles
11. CIRCUITO CERRADO CON FLUJO DISCONTINUO
Con este método se usa el catéter de 2 vías, una jeringa de 50-60 ml, una válvula
automática o manual, una unión de vidrio o plástico en forma de T o Y y las
12. CIRCUITO ABIERTO CON FLUJO DISCONTINUO
Inyección y recolección con una jeringa.
13. PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO
Grados de calidad de los embriones
Grado 1. Excelente o bueno
Grado 2. Regular
Grado 3. Pobre
Grado 4. Degenerados
14. PROCEDIMIENTO PARA EL AISLAMIENTO DE
LOS EMBRIONES
Preparación del equipo de manipulación
de embriones:
Termostato 36.5°C.
Lavado del filtro de embriones
Empezar el lavado en la parte donde está
malla del filtro a una inclinación de 45° y
colocar el medio con los embriones en la
caja petri.
Usar una jeringa de 20 mL para lavar el
filtro utilizando el medio de lavado SBF al
1% con agua hipodérmica.
Hacer de dos a tres lavados en el filtro de
embriones
15. Búsqueda de embriones
Usar la caja petri grande de búsqueda a
temperatura de 37°C.
Clasificación de embriones
Colocar la caja sobre una lupa
estereoscópica para realizar la
Clasificar los embriones en grados en una
escala de 1 a 4 siendo el grado 1 el de
mejor calidad y el grado 4 de calidad
degenerado
16. Mantenimiento de embriones
Método de limpieza o mantenimiento de
embriones: realizar varios pasos seriados 5
por medio Holding y dos pases de tripsina
para eliminar cualquier agente
contaminante o infeccioso durante 30-60
seg. cada paso.
Llenado de pajuela
Usar jeringas de 1 mL desechables para
llenar pasillos.
Primero llenar la pajuela con etilenglicol,
luego dejar un espacio de aire, seguido
del etilenglicol con el embrión
17. Sellar pajillas
El sellado debe hacerse del extremo de la
pájilla donde no se encuentra el algodón
dentro.
Para sellar se hace con una máquina
selladora con calor.
18. ETAPAS DE LA CRIOPRESERVACIÓN
En esta primera etapa hay una suspensión de los embriones en donde a las soluciones se
ha agregado crio protectores.
En la segunda etapa hay enfriamiento en condiciones en donde evitara que se formen
cristales intracelulares, cuando se sumergen los embriones a nitrógeno líquido a -196° C.
En la tercera etapa habrá entibiamiento de los embriones a temperaturas similares a la
corporal para continuar su función.
En la cuarta y última etapa habrá retiro de los crioprotectores dependiendo
del criopreservante que se haya utilizado.
19. Crioprotectores
Un crio protector es un compuesto químico que permite la mantención de un tejido
de células.
Protector permeable o intracelular.
Protector impermeable o extracelular.
20. CONSERVACIÓN DE LOS EMBRIONES
Los embriones de bovinos mantenidos en un medio no nutritivo por un largo
y a temperatura ambiente decrecen ampliamente su capacidad de desarrollo, este
desarrollo puede ser preservado si los embriones se refrigeran de 0 a 4 ºC por no más
24 horas técnica denominada refrigeración la cual se efectúa vehiculizando los
embriones en PBS envasados en pajuelas de 0.25 ml y colocadas en un refrigerador
21. PREPARACIÓN DEL EQUIPO DE CONGELAMIENTO
Se utiliza alcohol etílico al 70% para el proceso de congelado ya que su punto de
congelamiento es a -50°C. Al momento de preparar el equipo se debe tener un punto
partida donde se empieza a congelar las pajillas y un punto final con un rango de
descenso de -0.53°C por minuto aquí tenemos los siguientes puntos:
Punto de partida -0.60°C
Punto final -34.0°C
22. DESCONGELACIÓN DE LOS EMBRIONES
La descongelación se debe de hacer lo más rápido posible en agua a 37°C. Cuando
los embriones son criopreservados en un mismo medio, el agente crioprotector se
usar glicerol este debe ser removido de las células del embrión, esto se logra lavando 4
6 veces sucesivas en soluciones de concentración decreciente del crioprotector.
Seguido de esto se hace una evaluación de los embriones, los que son aptos para la
transferencia se colocan en pajillas de 0.5 o 0.25 mL y se transfieren directamente
23. HEMBRA RECEPTORA.
La selección de receptoras requiere de varios aspectos y procedimientos a
Alojamiento
Las vacas receptoras son alojadas en grupos de 20 a 30 animales por corral.
24. Sanidad
Todas las vacas receptoras que vayan a realizarles un tratamiento de T.E. deben
un registro.
Nutrición
Las vacas que se va a realizar el tratamiento, deben tener una condición corporal
3.0 a 3.5. La alimentación de las receptoras debe ser equilibrada.
25. MANEJO
El manejo que se le da a las receptoras en el momento que se va a realizar el
tratamiento es un chequeo por palpación para determinar el estado del sistema
reproductor y la factibilidad de uso.
Sincronización de celo
Cuando la T.E. es en fresco las receptoras al momento de sincronizar deben estar
celo el mismo día que las donadoras, para que al momento de transferir coincida la
misma secuencia de ovulación y favorecer la preñez para las vacas receptoras una vez
haya sido transferido el embrión.
Cuando el embrión es congelado, las vacas receptoras se sincronizan solo para que
entren en celo y esperar 7 días para transferir el embrión.
27. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Cuando las receptoras entran en celo son llevadas a la manga y son chequeadas
determinar en qué ovario está presente el C.L, porque es allí en el cuerno ipsilateral al
C.L. en donde se va a transferir el embrión.
Los catéteres y pistolas son más largos, ya que son introducidos hasta el cuerno
28. PROCEDIMIENTOS PARA LA TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Traslado de vacas receptoras de las pasturas a la manga:
Evaluación de la receptora
Armado de la pistola de transferencia
Preparación de la vaca receptora una vez está en la manga
Identificación de la vaca transferida