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Practica No. 1 Determinación de la longitud de onda máxima
absorbancia.
Análisis instrumental (Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo)
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Practica No. 1 Determinación de la longitud de onda máxima
absorbancia.
Análisis instrumental (Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo)
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Universidad michoacana de
san Nicolás de hidalgo.
Facultad de Ingeniería Química.
Laboratorio de Análisis
Instrumental.
M. en C.
Práctica #1
Determinación de la longitud de onda
máxima absorbancia.
----------------------------------------------------
Semestre: Sección:
Ciclo escolar
13/Mayo/
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lOMoARcPSD|9943823
OBJETIVO:
Determinar la longitud de onda a la cual un compuesto presenta la máxima absorción de
energía.
INTRODUCCIÓN:
La espectrofotometría es uno de los métodos de análisis más usados, y se basa en la relación
que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y su concentración. Cuando
se hace incidir luz monocromática (de una sola longitud de onda) sobre un medio homogéneo,
una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y otra transmitida, como consecuencia
de la intensidad del rayo de luz sea atenuada desde Po a P, siendo Po la intensidad de la luz
incidente y P la intensidad del rayo de luz transmitido. Dependiendo del compuesto y el tipo
de absorción a medir, la muestra puede estar en fase líquida, sólida o gaseosa. En las regiones
visibles y ultravioleta del espectro electromagnético, la muestra es generalmente disuelta para
formar una solución.
Espectrofotometría ultravioleta visible. Ley de Lambert-Beer.
Los métodos espectroscópicos de análisis están basados en la medida de la radiación
electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia. En función de ello se
clasifican fundamentalmente en:
- Métodos de absorción: Se basan en la disminución de la potencia de un haz de radiación
electromagnética al interaccionar con una sustancia.
-Métodos de emisión: Se basan en la radiación que emite una sustancia cuando es excitada
previamente por medio de otro tipo de energía (térmica, eléctrica…). -Métodos de
fluorescencia: Se basan en la radiación que emite la sustancia cuando es excitada previamente
por un haz de radiación electromagnética.
Otras clasificaciones de los métodos espectroscópicos se establecen en función de la región
del espectro electromagnético que interviene en la técnica. Así, pueden utilizarse regiones
como rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En la Figura 1 pueden verse
las regiones del espectro electromagnético, en función de los valores de la longitud de onda
(λ) de cada radiación:
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MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS:
-Espectrofotómetro UV-VIS
-Solución de KMnO4
-Celadas de vidrio
PROCEDIMIENTO:
Pasos 1: Se nos ensayó como prender y calibrar el equipo (Espectrofotómetro UV-VIS), se
calibro con agua destilada.
Paso 2: Se configura el Espectrofotómetro a una longitud de onda inicial de 420nm.
Paso 3: Después de que se calibro se llenó una celda con solución de KMnO4 y se midió la
absorbancia y transmitancia
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Paso 4: Se volvió a calibrar el equipo y se midió ahora la absorbancia y transmitancia de
dicromato de potasio (K2Cr2O7).
*Se hicieron estos pasos aumentando cada vez 10 unidades hasta llegar a 600nm.
Los datos obtenidos fueron:
A: Absorbancia
T: Transmitancia
KMnO4
λ (nm) 420 430 440 450 460 470 480 490 500
A 0.1 0.121 0.182 0.291 0.442 0.731 1.040 1.514 2.074
T 79 75.7 65.8 51.2 36.1 18.6 9.15 3.06 0.84
λ
(nm)
510 520 530 540 550 560 570 580 590
A 2.405 2.986 2.866 3 2.676 1.833 1.672 0.860 0.425
T 0.39 0.10 0.13 0.09 0.22 1.47 2.13 13.8 37.6
λ
(nm)
600 610 620
A 0.335 0.295 0.269
T 46.3 50.7 53.9
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K2Cr2O7
λ (nm) 420 430 440 450 460 470 480 490 500
A 3 3 3 1.986 1.831 0.898 0.565 0.334 0.190
T 0 0 0 1.06 4.16 12.6 27.3 46.3 64.5
λ
(nm)
510 520 530 540 550 560 570 580 590
A 0.102 0.046 0.018 0.003 0 0 0 0 0
T 79.1 90.0 96.1 99.2 100.6 101.0 101.3 101.3 101.2
λ
(nm)
600 610 620
A 0 0 0
T 101.2 101.1 101.0
1. Realizar las gráficas con los valores de absorbancia y transmitancia obtenidos contra
longitud de onda para cada compuesto y marcar en las gráficas la λ max
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
Absorbancia
λ (nm)
Avsorvancia vs. λ (nm)
KMnO4
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0
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30
40
50
60
70
80
90
420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
Trasmitancia
λ (nm)
Trasmitancia Vs. λ (nm)
KMnO4
-0.5
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
Absorvancia
λ (nm)
Absorvancia Vs λ (nm)
K2Cr2O7
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2. Identificar la longitud de onda a la cual la absorbancia es la máxima para cada
compuesto.
Longitud de onda máxima:
Asertividad de 3
KMnO4 : 540 nm
K2Cr2O7: 420,430,440 nm
CONCLUSIÓN
La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la
concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma
lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro,
en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir
la cantidad de luz absorbida por la misma.
Cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. La
materia absorbe radiación de diversas regiones del espectro electromagnético. Pero esas
absorciones pueden originar diferentes tipos de interacciones entre la materia y la radiación
electromagnética.
-20
0
20
40
60
80
100
120
420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
TTrasmitancia
λ (nm)
Trasmitancia Vs λ (nm)
K2Cr2O7
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BIBLIOGRAFÍA
- Ley debouguer-lambert-beer (2014), obtenida en:
https://www.uv.mx/personal/aherrera/files/2014/05/L.-Ley-de-Bouguer-Lambert-
Beer-0.pdf
- Espectrofometría: Espectros de absorción, obtenido
en:https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf
- Transmitancia, absorbancia y ley de lambert-beer, obtenido
en:http://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/Miguel_
Angel_Sogorb/Wimba/Espectroscopia_05.htm
- Bolívar Gabriel, Ley de Beer-Lambert: aplicaciones, obtenido
en:https://www.lifeder.com/ley-de-beer-lambert/
- Baeza Alejandro, Fuentes de desviación causal a la ley de Lambert-Beer (2017),
obtenido
en:http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Documento_de_Apoyo:_Precision
_en_espectrofotometria_2598.pdf
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  • 2. Universidad michoacana de san Nicolás de hidalgo. Facultad de Ingeniería Química. Laboratorio de Análisis Instrumental. M. en C. Práctica #1 Determinación de la longitud de onda máxima absorbancia. ---------------------------------------------------- Semestre: Sección: Ciclo escolar 13/Mayo/ Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 3. OBJETIVO: Determinar la longitud de onda a la cual un compuesto presenta la máxima absorción de energía. INTRODUCCIÓN: La espectrofotometría es uno de los métodos de análisis más usados, y se basa en la relación que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y su concentración. Cuando se hace incidir luz monocromática (de una sola longitud de onda) sobre un medio homogéneo, una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y otra transmitida, como consecuencia de la intensidad del rayo de luz sea atenuada desde Po a P, siendo Po la intensidad de la luz incidente y P la intensidad del rayo de luz transmitido. Dependiendo del compuesto y el tipo de absorción a medir, la muestra puede estar en fase líquida, sólida o gaseosa. En las regiones visibles y ultravioleta del espectro electromagnético, la muestra es generalmente disuelta para formar una solución. Espectrofotometría ultravioleta visible. Ley de Lambert-Beer. Los métodos espectroscópicos de análisis están basados en la medida de la radiación electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia. En función de ello se clasifican fundamentalmente en: - Métodos de absorción: Se basan en la disminución de la potencia de un haz de radiación electromagnética al interaccionar con una sustancia. -Métodos de emisión: Se basan en la radiación que emite una sustancia cuando es excitada previamente por medio de otro tipo de energía (térmica, eléctrica…). -Métodos de fluorescencia: Se basan en la radiación que emite la sustancia cuando es excitada previamente por un haz de radiación electromagnética. Otras clasificaciones de los métodos espectroscópicos se establecen en función de la región del espectro electromagnético que interviene en la técnica. Así, pueden utilizarse regiones como rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En la Figura 1 pueden verse las regiones del espectro electromagnético, en función de los valores de la longitud de onda (λ) de cada radiación: Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 4. MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS: -Espectrofotómetro UV-VIS -Solución de KMnO4 -Celadas de vidrio PROCEDIMIENTO: Pasos 1: Se nos ensayó como prender y calibrar el equipo (Espectrofotómetro UV-VIS), se calibro con agua destilada. Paso 2: Se configura el Espectrofotómetro a una longitud de onda inicial de 420nm. Paso 3: Después de que se calibro se llenó una celda con solución de KMnO4 y se midió la absorbancia y transmitancia Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 5. Paso 4: Se volvió a calibrar el equipo y se midió ahora la absorbancia y transmitancia de dicromato de potasio (K2Cr2O7). *Se hicieron estos pasos aumentando cada vez 10 unidades hasta llegar a 600nm. Los datos obtenidos fueron: A: Absorbancia T: Transmitancia KMnO4 λ (nm) 420 430 440 450 460 470 480 490 500 A 0.1 0.121 0.182 0.291 0.442 0.731 1.040 1.514 2.074 T 79 75.7 65.8 51.2 36.1 18.6 9.15 3.06 0.84 λ (nm) 510 520 530 540 550 560 570 580 590 A 2.405 2.986 2.866 3 2.676 1.833 1.672 0.860 0.425 T 0.39 0.10 0.13 0.09 0.22 1.47 2.13 13.8 37.6 λ (nm) 600 610 620 A 0.335 0.295 0.269 T 46.3 50.7 53.9 Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 6. K2Cr2O7 λ (nm) 420 430 440 450 460 470 480 490 500 A 3 3 3 1.986 1.831 0.898 0.565 0.334 0.190 T 0 0 0 1.06 4.16 12.6 27.3 46.3 64.5 λ (nm) 510 520 530 540 550 560 570 580 590 A 0.102 0.046 0.018 0.003 0 0 0 0 0 T 79.1 90.0 96.1 99.2 100.6 101.0 101.3 101.3 101.2 λ (nm) 600 610 620 A 0 0 0 T 101.2 101.1 101.0 1. Realizar las gráficas con los valores de absorbancia y transmitancia obtenidos contra longitud de onda para cada compuesto y marcar en las gráficas la λ max 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 Absorbancia λ (nm) Avsorvancia vs. λ (nm) KMnO4 Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 7. 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 Trasmitancia λ (nm) Trasmitancia Vs. λ (nm) KMnO4 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 Absorvancia λ (nm) Absorvancia Vs λ (nm) K2Cr2O7 Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 8. 2. Identificar la longitud de onda a la cual la absorbancia es la máxima para cada compuesto. Longitud de onda máxima: Asertividad de 3 KMnO4 : 540 nm K2Cr2O7: 420,430,440 nm CONCLUSIÓN La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma. Cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. La materia absorbe radiación de diversas regiones del espectro electromagnético. Pero esas absorciones pueden originar diferentes tipos de interacciones entre la materia y la radiación electromagnética. -20 0 20 40 60 80 100 120 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 TTrasmitancia λ (nm) Trasmitancia Vs λ (nm) K2Cr2O7 Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823
  • 9. BIBLIOGRAFÍA - Ley debouguer-lambert-beer (2014), obtenida en: https://www.uv.mx/personal/aherrera/files/2014/05/L.-Ley-de-Bouguer-Lambert- Beer-0.pdf - Espectrofometría: Espectros de absorción, obtenido en:https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol- mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf - Transmitancia, absorbancia y ley de lambert-beer, obtenido en:http://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/Miguel_ Angel_Sogorb/Wimba/Espectroscopia_05.htm - Bolívar Gabriel, Ley de Beer-Lambert: aplicaciones, obtenido en:https://www.lifeder.com/ley-de-beer-lambert/ - Baeza Alejandro, Fuentes de desviación causal a la ley de Lambert-Beer (2017), obtenido en:http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Documento_de_Apoyo:_Precision _en_espectrofotometria_2598.pdf Downloaded by Leslie yamilet Verá Pérez (leslieperez271102@gmail.com) lOMoARcPSD|9943823