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Métodos foto colorimétricos y espectrocolorimétricos
 Ley de Beer y Lambert
Cuando un rayo de luz
monocromática pasa a través de
un medio absorbente, su
intensidad disminuye
exponencialmente a medida que
aumenta la concentración de la
sustancia absorbente en el medio
 La radiación electromagnética es una combinación de
campos eléctricos y magnéticos oscilantes, que se propagan
a través del espacio transportando energía de un lugar a
otro.
 La fracción de luz absorbida en una longitud de onda
específica se denomina ADSORTIVIDAD o COEFICIENTE DE
EXTINCIÓN
C
Po P
b
Transmitancia: Es la fracción de radiación incidente trasmitida
Absorbancia: La cantidad de radiación absorbida
T=
P
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C= concentración de la disolución
b= recorrido a través de la disolución
La potencia disminuye geométricamente
y exponencialmente con la concentración
y la distancia recorrida, entonces tenemos
Beer
T=10
-K.C
Lambert
T=10
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-log T= a.b.cK= Constantes de proporcionalidad
a= Constante de absortividad
• Toda sustancia que permita atravesar o absorber radiaciones
que luego se puedan comparar a través de un análisis óptico
en donde se estudie las diferentes longitudes electromagnéticas
resultantes.
• En donde se aplica?
• Laboratorios de investigación en análisis cualitativos y cuantitativos
• Estandarización de colores en diversos materiales como plásticos y
pinturas
• Detección de niveles de contaminación en aire y agua
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• EN EL CAMPO DE LA ELECTROMEDICINA LA
ESTUDIAREMOS EN LA RAMA DE MUESTRAS
BIOLÓGICAS
Analizador de Hematología
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•Analizador de electrolitos
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221
 Fotocolorimetria
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Tipos de Espectrofotometría
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Filtros de vidrio
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A,B,C-Lente proyector
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 Celdas fotovoltaicas
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Los componentes esenciales de un
espectrofotómetro son :
 Una fuente estable de energía radiante
 Un sistema de lentes, espejos y aberturas (Slits ), que definan, colimen
(hagan paralelo) y enfoquen el haz de radiación y un monocromador
que separe la radiación de bandas estrechas de longitud de onda.
 Un componente transparente a la radiación que contenga la muestra
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radiación electromagnética y la convierte en una señal eléctrica de
magnitud proporcional a la intensidad de la radiación recibida.
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mucho mayor a la señal recibida
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sistema de dígitos o una computadora, que transforme la señal
eléctrica en una señal que el operador pueda interpretar.
Espectrofotómeto TURNER
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Ajuste de cero mecánico
Porta
muestra
Filtro
Ajuste de
la L
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Lámpara
A,B,C-Lente proyector
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COBAS 221 de empresas ROCHE
Dispositivos del cooxímetro
Dispositivo COOXIMETRO realiza
la medición
de los derivados de la
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principio de Espectrofotometría,
un conjunto de dispositivos
realizan el calculo de los
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calibra con luz UV cada 3 meses
con ampolla calibrador s del
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Convencional
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PHOTODIODO
Mediciones de Conductividad
Eléctrica
El agua pura no es conductora de la electricidad, sin embargo, cuando
ciertas sustancias son adicionadas al agua se conduce la corriente eléctrica.
Estas substancias son conocidas electrolitos y forman iones negativos y
positivos que transportarán la corriente eléctrica. El flujo de la corriente
depende de la magnitud del potencial aplicado y de la resistencia de la
solución entre los electrodos. Resultado de esta conducción se puede
caracterizar el comportamiento electroquímico, determinar constantes iónicas
de disociación, determinar la movilidad iónica, medir el contenido iónico de
soluciones, determinar el punto final de titulaciones conductimétricas,
detectar la elución de especies cargadas en cromatografia iónica y
monitorear vapores de soluciones.
Dichas mediciones de resistancia o conductancia se realizan
tradicionalmente con un puente de Wheatstone y de manera general se
obtiene a partir de ellas la medición de la conductividad de electrolitos tales
como sales, ácidos y bases en soluciones acuosas.
Principio de medida del pH
Potenciométrico
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 programados por el usuario para asegurar ajuste idéntico y libre
de error cada vez.
 Entre sus características se tiene:
 Fácil lectura digital de longitud de onda y datos en
absorbancia, % transmitancia y concentración.
 La característica de autocero ahorra tiempo con un rápido
ajuste automático del cero de absorbancia.
 "Go to Wavelength" ("vaya a longitud de onda") permite
cambiar de longitud de onda en 3 segundos.
 Límites definidos por el usuario señalan inmediatamente lecturas
fuera de tolerancia.
 Teclado sellado y a prueba de salpicaduras y superficies ópticas
cubiertas para protección en ambientes corrosivos.
 Interfase serial RS-232C para permitir manejo, recolección y
documentación de datos.
 Amplio compartimiento de muestras para usar un gran rango de
accesorios de muestreo.
SPECTRONIC 421 de Milton Roy
 332992
 332918
Filtro de amplio rango (400 a
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espectrofotómetro Spectronic
20
Filtro infrarrojo (600 a 950 nm)
para espectrofotómetro
Spectronic 20
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Sample Types Serum, Plasma, Urine, CSF, Hemolysate
Sample
Input/Output
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Sample Container
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Primary tubes: 5 to 10ml; 16 x 100, 16 x 75, 13 x 100, 13 x 75
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Types
Codabar (NW 7), Interleave 2 of 5, Code 39, Code 128
Reagents
Reagents
ISE: Na+, K+, Cl-
Onboard capacity: average 20 photometric tests
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Reaction cells semi-disposable
Control Unit
Data Processing LCD Touch-screen monitor
System Interfaces RS 232 C serial interface, bi-directional
Technical Specs
Spectrophotometer
12 wavelenghts, 340 – 800 nm,
monochromatic and bichromatic measurement
Analysis Modes
end-point, end-point with sample blanking, double end-point, end-point and kinetic, kinetic, double
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Equipos de Laboratorio Clínico

  • 1. Métodos foto colorimétricos y espectrocolorimétricos
  • 2.
  • 3.  Ley de Beer y Lambert Cuando un rayo de luz monocromática pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que aumenta la concentración de la sustancia absorbente en el medio
  • 4.  La radiación electromagnética es una combinación de campos eléctricos y magnéticos oscilantes, que se propagan a través del espacio transportando energía de un lugar a otro.  La fracción de luz absorbida en una longitud de onda específica se denomina ADSORTIVIDAD o COEFICIENTE DE EXTINCIÓN
  • 5. C Po P b Transmitancia: Es la fracción de radiación incidente trasmitida Absorbancia: La cantidad de radiación absorbida T= P Po C= concentración de la disolución b= recorrido a través de la disolución La potencia disminuye geométricamente y exponencialmente con la concentración y la distancia recorrida, entonces tenemos Beer T=10 -K.C Lambert T=10 -K´.b -log T= a.b.cK= Constantes de proporcionalidad a= Constante de absortividad
  • 6. • Toda sustancia que permita atravesar o absorber radiaciones que luego se puedan comparar a través de un análisis óptico en donde se estudie las diferentes longitudes electromagnéticas resultantes. • En donde se aplica? • Laboratorios de investigación en análisis cualitativos y cuantitativos • Estandarización de colores en diversos materiales como plásticos y pinturas • Detección de niveles de contaminación en aire y agua • Determinación de impurezas en alimentos y en reactivos • EN EL CAMPO DE LA ELECTROMEDICINA LA ESTUDIAREMOS EN LA RAMA DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
  • 7. Analizador de Hematología Analizador de química clínica Analizador de gases en sangre •Analizador de electrolitos Analizador de orina Analizador de termoluminiscencia Hormonas
  • 9. 221
  • 12.
  • 13.
  • 14. Control Del dial Dial Indicador Del galvanómetro Ajuste mecánico del galvanómetro Ajuste eléctrico Del galvanómetro Porta muestra Encendido del galvanómetro Encendido del equipo
  • 15.
  • 17.
  • 18.
  • 19.
  • 20.
  • 21.
  • 22. Tipos de Espectrofotometría  La espectrofotometría de absorción de infrarrojos  La espectrofotometría por resonancia magnética nuclear (RMN)  La espectrofotometría de fluorescencia.  La espectrofotometría de emisión atómica  La espectrofotometría absorción atómica  La espectrofotometría de masas  La espectrofotometría de fluorescencia de rayos X  Y otros que invito a investigar
  • 23.  Fuente de radiación  Filtro  Detector  Indicador
  • 24.  Lámpara de Tungsteno  Lámpara de Deuterio  Llama  y otros que invito a investigar
  • 26.
  • 27.
  • 28.
  • 29.
  • 30. Filtros de vidrio Filtros de interferencia Monocromadores
  • 31.
  • 32.
  • 33.
  • 34.
  • 35. Lámpara A,B,C-Lente proyector G-Ranura colimador F-Filtro 1-Ranura de entrada R- Rejilla de reflección 2-Ranura de salida
  • 36.
  • 37.
  • 38.
  • 39.
  • 40.  Celdas fotovoltaicas  Celdas foto conductivas  Fototubos  Fotodiodos  Diodos Array
  • 41.
  • 42.
  • 43.
  • 44.
  • 45.
  • 46. ON-0ff 0% T Ajuste 100% T Selector Longitud de onda Porta muestra Luz encendido Display
  • 47. Los componentes esenciales de un espectrofotómetro son :  Una fuente estable de energía radiante  Un sistema de lentes, espejos y aberturas (Slits ), que definan, colimen (hagan paralelo) y enfoquen el haz de radiación y un monocromador que separe la radiación de bandas estrechas de longitud de onda.  Un componente transparente a la radiación que contenga la muestra  Un detector de radiación o transductor que recibe la señal de radiación electromagnética y la convierte en una señal eléctrica de magnitud proporcional a la intensidad de la radiación recibida.  Un sistema amplificador que produzca o genere una señal eléctrica mucho mayor a la señal recibida  Un sistema de lectura tal como: Una escala de aguja, un registrador, un sistema de dígitos o una computadora, que transforme la señal eléctrica en una señal que el operador pueda interpretar.
  • 48.
  • 49.
  • 50.
  • 51.
  • 52. Espectrofotómeto TURNER On-off Ajuste 0% T Ajuste de 100% T Ajuste de cero mecánico Porta muestra Filtro Ajuste de la L Display
  • 53. Lámpara A,B,C-Lente proyector G-Ranura colimador F-Filtro 1-Ranura de entrada R- Rejilla de reflección 2-Ranura de salida
  • 54.
  • 55. COBAS 221 de empresas ROCHE
  • 56.
  • 58. Dispositivo COOXIMETRO realiza la medición de los derivados de la Hemoglobina y Bilirrubina, por el principio de Espectrofotometría, un conjunto de dispositivos realizan el calculo de los derivados de tHb, una luz incidente se emite sobre la cubeta de la muestra, la luz absorbida es transmitida directamente dentro del polycromador (66 longitudes de onda de 450-700nm y un array de diodos 512) y cada 24hrs se calibra con luz UV cada 3 meses con ampolla calibrador s del cooxímetro
  • 60. Panel de diodos ARRAY PHOTODIODO
  • 61.
  • 62.
  • 63.
  • 64.
  • 65.
  • 66.
  • 67.
  • 68.
  • 69.
  • 70.
  • 71.
  • 72.
  • 73.
  • 74.
  • 75.
  • 76.
  • 77.
  • 78.
  • 79.
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  • 83.
  • 84.
  • 85.
  • 86.
  • 87.
  • 88.
  • 89.
  • 90. Mediciones de Conductividad Eléctrica El agua pura no es conductora de la electricidad, sin embargo, cuando ciertas sustancias son adicionadas al agua se conduce la corriente eléctrica. Estas substancias son conocidas electrolitos y forman iones negativos y positivos que transportarán la corriente eléctrica. El flujo de la corriente depende de la magnitud del potencial aplicado y de la resistencia de la solución entre los electrodos. Resultado de esta conducción se puede caracterizar el comportamiento electroquímico, determinar constantes iónicas de disociación, determinar la movilidad iónica, medir el contenido iónico de soluciones, determinar el punto final de titulaciones conductimétricas, detectar la elución de especies cargadas en cromatografia iónica y monitorear vapores de soluciones. Dichas mediciones de resistancia o conductancia se realizan tradicionalmente con un puente de Wheatstone y de manera general se obtiene a partir de ellas la medición de la conductividad de electrolitos tales como sales, ácidos y bases en soluciones acuosas.
  • 91. Principio de medida del pH Potenciométrico Principio de medida del PO2 Amperimétrico Principio de medida Hematocrito por conductividad
  • 92.
  • 93.
  • 94.
  • 95.
  • 96.
  • 97.
  • 98.
  • 99.
  • 100.
  • 101.
  • 102.
  • 103.
  • 104.
  • 105.  programados por el usuario para asegurar ajuste idéntico y libre de error cada vez.  Entre sus características se tiene:  Fácil lectura digital de longitud de onda y datos en absorbancia, % transmitancia y concentración.  La característica de autocero ahorra tiempo con un rápido ajuste automático del cero de absorbancia.  "Go to Wavelength" ("vaya a longitud de onda") permite cambiar de longitud de onda en 3 segundos.  Límites definidos por el usuario señalan inmediatamente lecturas fuera de tolerancia.  Teclado sellado y a prueba de salpicaduras y superficies ópticas cubiertas para protección en ambientes corrosivos.  Interfase serial RS-232C para permitir manejo, recolección y documentación de datos.  Amplio compartimiento de muestras para usar un gran rango de accesorios de muestreo.
  • 106. SPECTRONIC 421 de Milton Roy
  • 107.  332992  332918 Filtro de amplio rango (400 a 750 nm) para espectrofotómetro Spectronic 20 Filtro infrarrojo (600 a 950 nm) para espectrofotómetro Spectronic 20 $71 $68
  • 108. Sample Sample Types Serum, Plasma, Urine, CSF, Hemolysate Sample Input/Output 35 primary or secondary tubes on sample disk Barcode reading Sample Container Types Primary tubes: 5 to 10ml; 16 x 100, 16 x 75, 13 x 100, 13 x 75 Sample cup: 2,5ml Micro Cup: 1,5ml Cup on tube: Cup on 16 x 75/100mm tube Sample Volume 2 to 50 µl, ISE indirect 15 µl Sample Barcode Types Codabar (NW 7), Interleave 2 of 5, Code 39, Code 128 Reagents Reagents ISE: Na+, K+, Cl- Onboard capacity: average 20 photometric tests (36 reagent positions) Reaction cells semi-disposable Control Unit Data Processing LCD Touch-screen monitor System Interfaces RS 232 C serial interface, bi-directional
  • 109. Technical Specs Spectrophotometer 12 wavelenghts, 340 – 800 nm, monochromatic and bichromatic measurement Analysis Modes end-point, end-point with sample blanking, double end-point, end-point and kinetic, kinetic, double kinetic, fixed-time kinetic, antigen excess check Electrical Requirements 110 Volts AC +/- 10%, 230 Volts AC +/- 10% 50Hz or 60 Hz +/- 0,5%, consumption 1,5kVA Physical Dimensions Width: 72cm Depth: 72cm Height: 109cm Weight: 200kg Water Requirements Up to 15 liter per hour, de-ionized or distilled Certification GS, CE, UL, C-UL