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Tema 2: Técnicas de estudio de la célula:
bases de la microscopía óptica y
electrónica. Fraccionamiento celular y
ultracentrifugación diferencial. Técnicas
de coloración en biología. Tipos de
tinción. Colorantes histológicos más
comunes.
Docente:
Mg: CASTRO GALVEZ KEILA
Trujillo, 26 de SEPTIEMBRE de 2022
Universidad Nacional de Trujillo
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Asignatura Biología Molecular y Celular
HISTORIA DEL MICROSCOPIO
MICROSCOPÍA ÓPTICA
PROPIEDADES
AMPLIFICACION:
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PODER DE RESOLUCION
distintas imágenes en 2
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MICROSCOPIA ELECTRÓNICA
 primer microscopio
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obteniéndose una
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nm, unas 100 veces mayor
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microscopio óptico.
- Haz de electrones acelerado, que pasa a
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celular, virus, compartimentos
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- Resolución 0,2 nm
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Microscopía electrónica de transmisión (TEM)
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TIPOS DE TINCIÓN
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según retenga o no el cristal violeta utilizado en la tinción.
 células Gram positivas, capa gruesa de peptidoglucano con enlaces
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 células Gram negativas, capa de peptidoglucano es más delgada.
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN O ÁCIDO RESISTENTE
Mycobacterium tuberculosis
Micobacterias están cubiertas por un material grueso, ceroso.
Resisten la decoloración debido al ácido micólico que se encuentra
presente
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ésta emplea una solución colorante en la cual el cromógeno es ácido, la cual
repele a la célula cargada negativamente, por lo que dicha célula permanece sin
teñir contra un fondo coloreado.
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 tinción policromática.
 desarrollada por el patólogo James
Homer Wright en 1902
 El reactivo, está compuesto por eosina
y azul de metileno, cuando éste se
oxida se conoce como azur B a una
concentración de 0.8 g/L empleando
como solvente alcohol metílico.
 Alberts, B. (2008). Biología Molecular de la Célula. España: Omega.
 Alters, S. y Alters, B. (2006). Biology: understanding life. USA: John Wiley & Sons.
 Karp, G. (2014). Biología Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos. México: Mc Graw
Hill.
 Lodish, H., Berk, A., Zipursky, S.L., Matsudaira, P., Baltimore, D. & Darnell, J. (2002).
Biología celular y molecular (4a ed.). México: Panamericana.
 Madigan, M.T., Martinko, J.M. & Parker J. (2004). Brock-biología de los microorganismos
(10a ed.). México: Pearson.
 Mathews, C.K., Van Holde, K.E., Appling, D.R. y Cahill, S.R.A. (2012). Biochemistry. USA:
Prentice Hall.
 Solomon, E. P., Berg L. R. y Martin D. W. (2013). Biología. México: Cengage Learning.
26
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  • 1. Tema 2: Técnicas de estudio de la célula: bases de la microscopía óptica y electrónica. Fraccionamiento celular y ultracentrifugación diferencial. Técnicas de coloración en biología. Tipos de tinción. Colorantes histológicos más comunes. Docente: Mg: CASTRO GALVEZ KEILA Trujillo, 26 de SEPTIEMBRE de 2022 Universidad Nacional de Trujillo Facultad de Farmacia y Bioquímica Asignatura Biología Molecular y Celular
  • 2.
  • 4.
  • 6. PROPIEDADES AMPLIFICACION: Relación tamaño imagen PODER DE RESOLUCION distintas imágenes en 2 puntos cercanos PODER DE DEFINICIÓN Nitidez
  • 7. MICROSCOPIA ELECTRÓNICA  primer microscopio electrónico se construyó en 1931.  haz de electrones, obteniéndose una resolución normal en los objetos biológicos de 2 nm, unas 100 veces mayor que el anterior microscopio óptico.
  • 8. - Haz de electrones acelerado, que pasa a través de un espécimen muy fino. - Permite el estudio de la ultraestructura celular, virus, compartimentos subcelulares, proteínas. - Resolución 0,2 nm - Tetraoxido de osmio - Informa la estructura y la morfología Microscopía electrónica de transmisión (TEM)
  • 9. El haz de electrones se enfoca formando una línea muy fina que barre el espécimen. - Se recubre con platino - Resolución 10 nm - Profundidad de foco de 10mm - Proporciona imágenes tridimensionales - Proporciona tamaño y forma de la célula Microscopía electrónica de barrido (SEM)
  • 11.
  • 12.
  • 13. TÉCNICAS DE COLORACIÓN EN BIOLOGÍA
  • 14. CLASIFICACIÓN DE LOS COLORANTES
  • 15. CLASIFICACION DE LOS COLORANTES
  • 16.
  • 17. TINCION HEMATOXILINA - EOSINA TIPOS DE TINCIÓN
  • 18. TINCIÓN GRAM según retenga o no el cristal violeta utilizado en la tinción.  células Gram positivas, capa gruesa de peptidoglucano con enlaces cruzados de ácido teicoico  células Gram negativas, capa de peptidoglucano es más delgada.
  • 19.
  • 20. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN O ÁCIDO RESISTENTE Mycobacterium tuberculosis Micobacterias están cubiertas por un material grueso, ceroso. Resisten la decoloración debido al ácido micólico que se encuentra presente
  • 21.
  • 22. Tinción de cápsula TINCIÓN DE TINTA CHINA: ésta emplea una solución colorante en la cual el cromógeno es ácido, la cual repele a la célula cargada negativamente, por lo que dicha célula permanece sin teñir contra un fondo coloreado.
  • 23. TINCIÓN DE SCHAEFER FULTON Bacterias esporuladas. Las endosporas representan un estado latente en el ciclo de crecimiento del microorganismo . TINCIÓN DE ESPORAS
  • 24. TINCIÓN DE WRIGHT  tinción policromática.  desarrollada por el patólogo James Homer Wright en 1902  El reactivo, está compuesto por eosina y azul de metileno, cuando éste se oxida se conoce como azur B a una concentración de 0.8 g/L empleando como solvente alcohol metílico.
  • 25.
  • 26.  Alberts, B. (2008). Biología Molecular de la Célula. España: Omega.  Alters, S. y Alters, B. (2006). Biology: understanding life. USA: John Wiley & Sons.  Karp, G. (2014). Biología Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos. México: Mc Graw Hill.  Lodish, H., Berk, A., Zipursky, S.L., Matsudaira, P., Baltimore, D. & Darnell, J. (2002). Biología celular y molecular (4a ed.). México: Panamericana.  Madigan, M.T., Martinko, J.M. & Parker J. (2004). Brock-biología de los microorganismos (10a ed.). México: Pearson.  Mathews, C.K., Van Holde, K.E., Appling, D.R. y Cahill, S.R.A. (2012). Biochemistry. USA: Prentice Hall.  Solomon, E. P., Berg L. R. y Martin D. W. (2013). Biología. México: Cengage Learning. 26 Referencias bibliográficas