Este documento describe un estudio sobre la oxidación bacteriana del antimonio (III) con oxígeno o nitrato por bacterias aisladas de sedimentos de minas contaminadas. Los investigadores aislaron dos cepas bacterianas, IDSBO-1 e IDSBO-4, de los sedimentos y demostraron su capacidad para oxidar el antimonio (III). La cepa IDSBO-1 de Herbaspirillum taeniospiralis fue capaz de oxidar antimonio (III) acoplado a la reducción de nitrato de forma anaerobia, mientras que la cepa
1. DOCENTE: SOTO GONZALES,
HEBERT HERNAN
ALUMNO: SERRANO POLLOQUERI
MILTON ABAD
CURZO:BIOTECNOLOGIA
CICLO:VII
AÑO:2020
ILO-PERÚ
UNIVERSIDAD NACIONAL
DE MOQUEGUA
OXIDACIÓN MICROBIOLÓGICA DE ANTIMONIO (III) CON OXÍGENO O
NITRATO POR
BACTERIAS AISLADAS DE SEDIMENTOS DE MINAS CONTAMINADOS
2. OXIDACIÓN MICROBIOLÓGICA DE ANTIMONIO (III) CON
OXÍGENO O NITRATO POR
BACTERIAS AISLADAS DE SEDIMENTOS DE MINAS
CONTAMINADOS
RESUMEN
La oxidación bacteriana del arsenito [As (III)] es una vía biogeoquímica
importante y bien estudiada que influye directamente en la movilidad y
toxicidad del arsénico en el medio ambiente.
INTRODUCCIÓN
El antimonio (Sb) es un metaloide traza tóxico sensible a la oxidación
que es una preocupaciónambiental creciente en todo el mundo,
particularmente en áreas donde se extrae para su uso en una
variedad de productos, incluidos semiconductores, retardadores de
fuego, baterías, municiones, forros de frenos de automóviles ,
revestimiento de cables y soldaduras.
MATERIALES Y MÉTODOS
ZONA DE
ESTUDIO Y
RECOGIDA DE
MUESTRAS.
•Aislamos bacterias de los sedimentos que se recolectaron en el área minera de Stibnita /
Pino amarillo altamente contaminada con As y Sb en Idaho durante julio de 2012. La
extracción de antimonio, oro y tungsteno desde principios de 1900 hasta finales de 1990
ha resultado en minerales de desecho y los relaves de la mina se depositan en
aproximadamente el 50% del sitio de la mina Stibnite de 3,000 acres.
MICROCOS
MOS DE
SEDIMENTO
S
•Se preparo microcosmos para evaluar la capacidad de la comunidad microbiana
sedimentaria para oxidar As (III) o Sb (III). Se prepararon microcosmos (volumen total de
30 ml) con medio de agua dulce artificial SeFr1 ( 35 ) modificado a 2 mM As (III) (añadido
como NaAsO ) o Sb (III) .
CULTURAS DE
ENRIQUECIMIE
NTO
•Se inocularon alícuotas (0,1 ml) de microcosmos vivos que oxidan As (III) y Sb (III) en
tubos de cultivo preparados con 13 ml de medio SeFr1 modificado a 2 mM de As (III)
(añadido como NaAsO ) o Sb (III). ) (añadido como C H K O Sb · 3H O 1 mM ) y tapado
con tapones de espuma permeable.
AISLAMIENT
O DE ISDBO-
1 E IDSBO-4.
• Se obtuvo cultivos puros de organismos oxidantes de As (III) y Sb (III) esparciendo los
enriquecimientos secundarios en placas de agar preparadas con medio libre de extracto
de levadura modificado con bicarbonato de sodio 1,4 mM, vitaminas ( 36 ), agar al 2% y
Como 2 mM (III) o 1 mM C H K o Sb · 3H O..
Por lo tanto, este estudio expande nuestra comprensión de las vías
bacterianas para la oxidación de Sb (III) y contribuye a nuestra
imagen emergente del ciclo redox biogeoquímico que controla el
comportamiento ambiental de Sb.
AUTORES
Lee R. Terry
Thomas R. Kulp
Heather Wiatrowski
Laurence G. Miller
Ronald S.
Oremland
3. CONDICIO
NES DE
CRECIMIE
NTO
•Los aislamientos que crecieron en agar modificado con As (III) aparecieron como colonias irregulares,
incoloras, en forma de láminas, mientras que las placas modificadas con Sb (III) produjeron colonias
circulares elevadas de color amarillo blanquecino.
EXPERIME
NTOS CON
RADIOISÓT
OPOS
•Los experimentos con radioisótopos con [ C14] bicarbonato (H CO3 ) se realizaron utilizando métodos
similares a los detallados por Oremland et al. Se prepararon tubos de cultivo que contenían 10 ml de
medio SeFr2 estéril, sin extracto de levadura.
ANALÍTICO
•El arsénico (III) y el As (V) se midieron mediante cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC)
utilizando un cromatógrafo líquido de alto rendimiento Dionex Ultimate3000 con detección UV (210
nm) y dos columnas de intercambio iónico en línea (Bio-Rad Aminex HPX- 87H seguido de Hamilton
PRP X300) con 0,016 eluyente NH SO fluyendo a 0,6 ml /min.
ANÁLISIS
GENÓMICO
S
•El ADN bacteriano se extrajo usando el kit de aislamiento de ADN microbiano Mo Bio Ultraclean (Mo
Bio Laboratories, Inc., Carlsbad, CA). Los genes de ARNr 16S se amplificaron utilizando los
cebadores 27F y 1492R descritos por Polz y Cavanaugh.
NÚMEROS DE
ACCESO A LA
SECUENCIA
DE
NUCLEÓTIDO
S.
•Los números de acceso del NCBI para los genes de ARNr 16S parciales para la cepa IDSBO-1 de H.
taeniospiralis y la cepa IDSBO-4 de V. paradoxus son KM199760 y KM199761 , respectivamente. Las
longitudes de las secuencias de ARNr 16S parciales de las cepas IDSBO-1 e IDSBO-4 fueron 1400 y
1454 nucleótidos, respectivamente.
CONCLUSIONES
Este estudio demuestra una nueva vía para la oxidación
microbiológica Sb (III) que se ha descrito anteriormente para
la oxidación de As (III), a saber, la oxidación anaerobia de
Sb (III) acoplado a la reducción de nitrato por nuestro
aislado de H . teniospiralis cepa IDSBO-1.
demuestran la incorporación celular de [14 C] bicarbonato
durante la oxidación aeróbica de Sb (III) por la cepa IDSBO-
4 de V. paradoxus sugieren la posibilidad de
quimioautotrofia basada en Sb (III) en ese organismo, un
proceso metabólico que es conocido importancia ambiental
con respecto al ciclo de As.
Comparación filogenética de proteínas AioA de la cepa IDSBO-1 de H.
taeniospiralis y la cepa IDSBO-4 de V.
Análisis evolutivos basados en secuencias de
ARNr 16S. Los nombres de las cepas y los
números de acceso de NCBI.
Losmicrocosmosdesedimentosmodificadosconarsénicooxidaron2,5
mMdeAs(III)(triángulosabiertos)aAs(V)(triánguloscerrados)en
microcosmosvivos(líneascontinuas
CUADROS