Este documento describe los procedimientos de diagnóstico y vigilancia epidemiológica de enfermedades inmunoprevenibles por vacunas en Perú. Detalla los indicadores de laboratorio, la red de laboratorios a nivel nacional e internacional, y los procedimientos para el envío y análisis de muestras para enfermedades como la poliomielitis, el sarampión, la rubeola, la hepatitis B, la tos ferina, la fiebre amarilla y el rotavirus.

1. “EVALUACION DE LA VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA DE LAS
ENFERMEDADES INMUNOPREVENIBLES POR VACUNAS”
DIAGNOSTICO e INDICADORES DE LABORATORIO
RED DE LABORATORIORED DE LABORATORIO
ULTIMO CASO POLIO AÑO 1991ULTIMO CASO POLIO AÑO 1991
DEPARTAMENTO :JUNINDEPARTAMENTO :JUNIN
PROVINCIA DE PICHANAKIPROVINCIA DE PICHANAKI

2. *
*
*
*
*
InDRE
INS
CDC
CAREC
INH
IEC
FIOCRUZ
MALBRAN
*
*
*
*
*
*
1 Global Specialized Lab
2 Regional Reference Lab
5 National Laboratories
2 Sub-Regional Labs
*
*
*
* 1 Sub-National Lab
ISP
IPK
*
NML
RED MUNDIAL DE LABORATORIOS DE POLIOMIELITIS
144 LABORATORIOS EN 100 PAISES
REGION DE LAS
AMERICAS
10 - ITD laboratory
4 - sequencing laboratory

3. AISLAMIENTO
VIRAL
NEGATIVO
CASO DESCARTADOCASO DESCARTADO
SEGUNDO PASE EN LINEAS CELULARES
(Algunas muestras requieren un tercer pase en
células) x 5 días
POLIOVIRUS
TIPO 1, 2 o
3
PRIMER PASE EN LINEAS CELULARES
DIFERENTES (RD y L20B) x 5 días
AISLAMIENTO
VIRAL
POSITIVO EN
CELLS L20B y RD
RT-PCR (GRUPO Enterovirus),
POLIOVIRUS, SEROTIPO 1, 2 Y 3, Y
SABIN)
AISLAMIENTO
VIRAL
POSITIVO SOLO
EN RD (ENP)
Envío al CDC para
caracterización
genotípica (qPCR /
secuencia genómica)
CONFIRMA
POLIOVIRUS
SALVAJE o VDPV
o SABIN- LIKE
NUEVO ALGORITMO PARA DIAGNOSTICO Celulas L20B y RD

4. INDICADORES DE LABORATORIO
1.- PORCENTAJE DE AISLAMIENTO VIRAL =
10% de aislamiento del total de las muestras
CALIDAD DE ENVIO DE LACALIDAD DE ENVIO DE LA
MUESTRAMUESTRA
ADECUADA DEFINICIONADECUADA DEFINICION
DE CASODE CASO
V A R I A B L E
2.- PORCENTAJE DE MUESTRAS ADECUADAS
Mayor 80%

5. 5
TIPO DE MUESTRA
Heces
10 g de heces obtenidas en los 14 días siguientes
al inicio de la parálisis*
(*) Se puede estimular la evacuación (sin usar enema) Son validas las deposiciones líquidas o diarreicas
MATERIAL DE OBTENCIÓN
Envase de plástico (polipropileno) estéril de boca ancha y con tapa hermética
(tapa rosca).
En caso de fallecimiento: obtener muestra de tejido (medula espinal,
sustancia gris, bulbo raquídeo protuberancia anular , cerebro, placas de Peyer
y contenido de los intestinos dentro de las 24 horas de fallecido y usar hielo.
PARALISIS FLACIDA AGUDA

6. CONTROL DE CALIDAD PORCENTAJE DE MUESTRAS
ADECUADAS
Fuente:Laboratorio de Enterovirus-FIO CRUZ
8-10gr <2g ~3 - 7gr
44muestras 13 muestras 77 muestras
SUFICIENTE INSUFICIENTE LIMITE
CLASIFICACION DEL LABORATORIO
REGIONAL
32.8%
9.7%
57.5%
0
20
40
60
80
100
%MUESTRAS
SUFICIENTE INSUFICIENTE LIMITE
Porcentaje Control de Calidad de muestras

7. LOGISTICA PARA EL ENVIO DE MUESTRAS PFALOGISTICA PARA EL ENVIO DE MUESTRAS PFA
OPSOPS
DGEDGE
INSINSLRLRLAB.LAB.
LOCLOC

8. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
1. El equipo de investigación del caso ( epidemiología ,
laboratorio y establecimiento de salud ) deben procurar la
obtención de la muestra en cantidad (10gr) y calidad
adecuada
2. El Laboratorio de Referencia Regional debe realizar el
control de calidad exhaustivo de las muestras.
3. Se debe obtener 2 muestras de heces dentro de los 14 días,
en aquellos pacientes que se dificulta la obtención de esta
muestra
4. El país se encuentra a la espera de la visita de evaluación de
la Comisión Regional-OMS/OPS para el reinicio del
diagnóstico de Poliovirus en el INS

9. SARAMPION – RUBEOLA
TIPO DE MUESTRA:
1.SUERO¨: Del 1ro al 30 avo día de contacto con el
caso
cantidad: 5 cm de sangre.
centrifugar: 2500 rpm
separar 2ml de suero conservar en cadena
de frío
Tiempo de envío: máximo 5 día.
2. ORINA : Del 1ro al 5to día de la rupción
Cantidad: 50 ml.
Tiempo de envío dentro de las 24 horas en
cadena de frío.
1.HISOPADO NASAL Y FARINGEO :del 1 al 3er día de
erupción , en medio de transporte viral.

10. HEPATITIS “B”
TIPO DE MUESTRA : SUERO 2 ml.
Obtenida al inicio de los síntomas.
Mantener en cadena de frío.
Enviar de inmediato máximo dentro de
las 24 horas.
Resultado es en Elisa Directa.

11. Bordetella
pertussis
(Tos ferina)

12. Diagnóstico de Laboratorio
•Cultivo
•Fluorescencia directa
•Pruebas moleculares
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ
Secuencia de inserción ISI 481

13. Muestra
 Aspirado nasofaríngeo *
 Hisopado nasofaríngeo
* Mayor cantidad de positivos en el
aspirado
• Tipo de muestra :
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ
…continuación

14. …continuación
 Etapa de la enfermedad
 Antes de la administración de antibióticos
 Tipo de muestra
 Uso de hisopo adecuado
• Condiciones de una muestra
adecuada :
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ

15. 15
• Hisopo con punta de alginato de
calcio con varilla de aluminio, para
uso pediátrico
• Hisopo con punta de dacrón con
varilla de aluminio (sólo para la
prueba de IFD)
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ
…continuación
• Material de obtención :

16. …continuación
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ
• Procedimiento :
 Sentar al paciente, si es un niño
sujetarlo adecuadamente.
 Introducir el hisopo suavemente
en una fosa nasal, paralelamente al
paladar hasta llegar a la nasofaringe,
rotar el hisopo
 Retirar el hisopo rápidamente

17. 17
• Preparación de Frotis para Prueba de IFD :
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ
…continuación
Realizar un extendido sobre una lámina porta-objetos limpia,
desengrasada y sin ralladuras, de tal manera que ocupe un espacio de
8 mm de diámetro.
 Dejar secar a T° ambiente.
Añadir sobre el frotis 1 mL de etanol 96°, dejar durante 1´, eliminar
el exceso.
Dejar secar a T° ambiente

18. FIEBRE AMARILLA
MUESTRA: SUERO 2ml
SEROLOGIA : a partir del 6to día de iniciado el
cuadro.
CULTIVO: Del 1ro al 5to día de iniciado el cuadro.
Fallecimiento: muestra de tejidos máximo a 10 horas de
fallecido
Cantidad: 2 cm
Para CULTIVO: conservar los tejidos sin formol en
cadena de frio en hielo seco.
Para PATLOGIA: Conservar los tejidos con formol
a temperatura ambiente.
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ

19. ROTAVIRUS
Muestra: solo Heces al 5to día de
iniciado la diarrea
Cantidad: 5 gr. (serología)
Transportar en cadena de frío
teniendo como máximo 4 días
para llegar al laboratorio.
Considerar los datos completos
en la ficha.
Instituto Nacional
de Salud
Centro Nacional de Salud
Pública
Ministerio
de Salud
PERÚ

20. Conservación y envío de
muestras en casos fatales de
ESAVIS

21. AÑO EDAD VACUNACION INICIO
DE
SINTOMA
S
PERIODO PARA
EL
FALLECIMIENTO
200
9
1 mes BCG - HBV 1 hora 2 días
201
0
4
meses
PENTAVALENTE (Difteria,
Pertusis, Tétanos, Hepatitis B,
Haemophilus Influenzae) –
ANTIPOLIO - ROTAVIRUS
Inmediat
o
1 hora
2
meses
NO SE INDICA NO SE
INDICA
NO SE INDICA

22. Separación de un
tejido
Eventos metabólicos
Pérdida de la irrigación
sanguínea
AUTOLISIS

23. La rapidez de la descomposición de los
tejidos y órganos es proporcional a:
Actividad metabólica
Acción bacteriana
Temperatura ambiente.

24.  Requisitos de la muestra
Tiempo
≤ 24 horas – temperatura ambiente
Hasta 48 horas - refrigeración
Tamaño
Modalidad de obtención
Tiempo
Relación de volúmenes
muestra/tejido

25.  Requisitos del envío
Envase
Identificación de la muestra
Datos del paciente
Requisitos administrativos
(necropsias de ley)

26. Las muestras, serán obtenidas antes de transcurridas las
24 horas de fallecido el paciente salvo excepciones se
podría considerar hasta las 72 horas manteniendo en
cadena de frio. ( +2+8 0
C)
Las muestras remitidas al laboratorio serán de 1 a 1.5
cm3, preferentemente de todos los órganos. En caso de
realizarse una necropsia parcial, las muestras serán de los
órganos mas comprometidos (según la macroscopía) o,
dependiendo del tipo de vacuna, según el tropismo de la
vacuna
Las muestras serán introducidas inmediatamente de
obtenidas en formol al 10% (en un volumen equivalente
a 10 veces el volumen de la muestra)
Los envases para remisión de las muestras, deben ser de
boca ancha y estar rotulados indicando el nombre del
paciente y el órgano de donde proviene la muestra.