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1. FACULTAD DE ZOOTECNIA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE
CIENCIA ANIMAL
CURSO : BIOLOGIA GENERAL
PROFESORA : Blgo. CHUQUILIN BUSTAMANTE, Edilberto
ALUMNOS : ALANIA GARCIA, Mishella
ALDAVA PARDAVE, uriel
AQUINO VARA, Roger A.
AREVALO DIAZ, Diana del C.
AREVALO GARCIA, Max.
ASCENCIO MALPARTIDA, Yerson.
BALDEON VALLES, Antonio.
BARRIOS SANTOS, Karen
BUSTILLOS BENANCIO, Romer A.
CACHIQUE PUJAY, Alba
CANCHANYA LOAYZA, Carlos
SEMESTRE : 2006 – I
GRUPO : M1A
TINGO MARIA – PERU 2006.
INTRODUCCION
Todas las actividades de la célula, tanto a nivel molecular como a nivel
superior están controladas y determinadas directa o indirectamente por una sola clase de
COLORACIONES MICROSCOPICAS

2. substancias (ADN). Estas moléculas maestras son, por naturaleza, las responsables de la
transferencia e información de una generación de células a otra (Herencia).
El tamaño de las células es muy variable algunas son grandes otras pequeñas, el color
que poseen y el contraste muchas veces impiden observarlas bien por el microscopio
óptico por lo cual el medio más simple de aumentar su contraste es utilizando colorantes
tiñendo así su morfología, para lo cual se emplean dos métodos:
Preparados en fresco: para observar células vivas. En este método no se utiliza ningún
colorante. Las células que se observan se encuentran en su propio medio u otro similar y
el índice de refracción de estas es muy similar al medio que lo rodea, al no existir un
contraste suficiente que los haga claramente visibles.
Preparados en seco: para observar células muertas y teñidas. Para la correcta
observación del material celular, mediante este método, requiere una serie de pasos
previos como extensión, fijación y tinción de este material. Este método permite
observar y diferenciar claramente tanto varios tipos morfológicos de células y los
siguientes objetivos son:
- Observar correctamente un preparado en fresco y en seco.
- Conocer métodos de observación de las células y técnicas de coloración más comunes.
- Reconocer los microorganismos existentes en el agua estancada
- Conocer las distintas formas y tipos de células que componen en los tejidos animales
II. REVISION DE LITERATURA
2.1. CELULA
La célula es la unidad más pequeña de la materia viva, capaz de llevar a cabo
todas las actividades necesarias para el mantenimiento de una vida. Tiene todos los

3. componentes físicos y químicos necesario para su propio mantenimiento, crecimiento y
división, cuando cuentan con los nutrientes necesarios y un medio adecuado. Ningún
componente celular es capaz de sobrevivir fuera de la célula. (VILLE, 1992).
2.1.1. Formas celulares
La forma de una célula se relaciona con la función y que está realiza, algunas células
como la ameba y los leucocitos pueden hacer variar su forma durante su trayectoria, los
espermatozoides tienen una cola larga, en forma de látigo que ayuda en la locomoción,
y las células nerviosas poseen extremos delgados y largos que les permiten transmitir
mensajes a través de grandes distancias, otras células como las epiteliales asumen una
forma casi rectangular y se unen a otras como si fuesen ladrillos, hasta formar
estructuras laminadas, célula circulares, etc. (VILLE, 1992).
Los organismos pueden clasificarse en dos grupos fundamentalmente diferentes, según
la estructura y complejidad de sus células.
2.2. Células procariotas
Son aquellos que carecen de núcleo y generalmente son más pequeñas que los
eucarióticas, el ADN de las células procarióticas esta confinado a una o más regiones
nucleares, que a veces se le denominan nucleoides, los nucleoides no están limitados
por una membrana independiente
2.3. Células eucariotas
Son aquellos que contienen una estructura llamado núcleo, que se encuentran limitado
por una membrana nuclear y varios organelos membranosos complejos, con las
mitocondrias.
2.3.1. Estructura celular de las células eucariota.
Estructura celular Función Célula vegetal
Célula
animal

4. Membrana celular
Contiene al citoplasma, regula el
paso de materiales hacia adentro y
fuera de la célula, ayuda a
mantener la forma celular,
comunica a la Célula con otras.
Presente Presente
Pared celular
Protección contra los agentes
mecanismos, evita la dilatación
excesiva provocada por la presión
interna del citoplasma.
Presente:
Contiene
celulosa
Ausente
Lisosomas
Contiene enzimas que degradan
material ingerido, las secreciones y
desperdicios celulares
Generalmente
ausente
Suelen estar
presentes
Ribosomas Síntesis de polipéptidos Presente Presente
Aparato de Golgi
Modifica, empaca y distribuye
proteínas a vacuolas y otras
organelos
Presente Presente
Vacuolas
Transporta y almacena material
ingerido, desperdicios y agua.
Generalmente
presente
Pequeñas o
ausente
Retículo endoplasma
tico
Sitio de síntesis de lípidos y de
proteínas de membrana
Presente Presente
Plastidios
La clorofila captura energía
luminosa, se producen ATP y otros
compuestos energéticos que
después se utilizan en la
conversión de CO en glucosa
Presente Presente
Cromosomas
Contiene genes (unidades de
información hereditaria que
gobiernan la estructura y actividad
celular)
Formados por
ADN y
proteínas
lineales
Formados por
ADN y
proteínas
lineales
Fuente: (ville, 1992)
2.4. TEJIDO
Es un conjunto de células especializadas de forma similar entre si, y de sustancia
intercelular, que se asocian para realizar una función especifica o un grupo de funciones
(VILLE, 1992).

5. 2.5. Tejido animal
Un tejido esta formado por varias células, estrechamente asociadas entre si, y se
clasificas en:
2.5.1. Tejido epitelial
Está formado por células acopladas, formando una capa o láminas continúas, que
cubren la superficie o algunas cavidades del cuerpo. Otra superficie de esta capa se une
al tejido subyacente, mediante una membrana basal, compuesta por fibras muy
delgadas, de un material formando por polisacáridos producidos por las células
epiteliales. Además de la capa externa de la piel, las membranas de los sistemas
digestivas y respiratorias, y tubulos renales, son ejemplo de tejido epitelial.
Las funciones de los tejidos epiteliales son de protección, absorción, secreción y
sensación (VILLE, 1992).
Características
- Sus células están íntimamente unidas por uniones celulares.
- Sus células adoptan formas geométricas.
- Dichas células se apoyan sobre la membrana basal.
- Presentan abundantes terminaciones nerviosas.
- El tiempo de vida de las células epiteliales es limitada de modo que hay procesos
de renovación celular constante.
2.5.2. Tejido conectivo
La principal función de los tejidos conectivos es la unión de otras tejidos, pues también
dan soporte al cuerpo, sus estructuras y protegen a los órganos subyacentes (VILLE,
1992).
2.5.3. Tejido cartilaginoso.
El esqueleto de soporte de los vertebrados consta de cartílagos. El cartílago esta
presente en el esqueleto de las fases embrionarias de todos los vertebrados, aunque en
adulto es reemplazado por huesos (excepto en el caso de tiburones y rayas).

6. La estructura de sostén del pabellón de la oreja, los anillos de soporte de las paredes de
vías respiratorias y la punta de la nariz son ejemplo claros de estructura cartilaginosa en
el ser humano (VILLE, 1992).
2.5.4. Tejido muscular estriado
Son tejidos con células especializadas en la contracción, sus células se denomina fibras
musculares o miocitos. Este tejido es responsable del movimiento del cuerpo.
Las fibras del músculo estriado pueden contraerse rápidamente pero no pueden
permanecer contraídas. Una fibra de músculo estriado debe relajarse y descansar
momentáneamente antes contraerse de nuevo las fibras del músculo estriado por lo
general se encuentra bajo control voluntario (VILLE, 1992).
2.5.5. Tejido nervioso
El tejido nervioso está compuesto por neuronas, células especializadas en la conducción
de impulsos electroquímicos, y células líales, que dan soporte y nutrición a las neuronas.
Algunas neuronas reciben señales del medio interno y externo y la transmisión a la
medula espinal y al cerebro, otras prolongaciones de las células nerviosas procesos y
almacenan información. Esta es la base celular en los complejos funciones de
conciencia, memoria, pensamiento y movimiento dirigido (VILLE, 1992).
El tamaño y forma de las neuronas es variable, pero generalmente cada una posee un
cuerpo celular, que contiene al núcleo del cual se proyectan dos prolongaciones con
forma de pelo.
Las dendritas son fibras especializadas para recibir impulsos de los estímulos
ambientales o de otras células (VILLE, 1992).
El axón sencillo se especializa en la conducción de impulsos fuera del cuerpo de la
célula. Los axones generalmente son largos y lisos, pero en ocasiones pueden
ramificarse (VILLE, 1992).
2.5.6. Tejido sanguíneo

7. La sangre, que el líquido que corre por las arterias y venas, esta formada por glóbulos
rojos, blancos y plaquetas, todos suspendidos en el plasma, que es la parte a otra del
cuerpo. Algunos de esas sustancias se disuelven simplemente en el plasma, mientras que
otras van fijas a proteínas como albúminas.
Casi todos los biólogos clasificas a la sangre entre los tejidos conectivos; sin embargo,
otros consideran que la sangre es un tipo especial de tejido ya que las células del tejido
conectivo secretan su matriz circundante y las células de la sangre no secretan el plasma
(VILLE, 1992).
2.6 Tejido vegetal
Clasifican a los tejidos vegetales, algunas células parecen en contraste en situación
intermedia entre los tipos celulares, asimismo, hay células que cambian de aspecto
durante su vida.
No obstante, en general los tejidos pueden ser asignados a una de los categorías
principales: tejidos meristemáticos formados por células inmaduros en proceso de
división celular y los tejidos permanentes, integrados por células maduras diferenciadas
(VILLE, 1992).
2.6.1. Clasificación de los tejidos vegetales
Los tejidos vegetales se clasifican en los siguientes tipos:
Meristemos.- Constituidos por células proliferantes que causan el crecimiento y
desarrollo de la planta.
Parénquima.- Formando por células más diferencias que realizan funciones
fotosintéticos o de almacén de sustancias nutritivas, como agua almidón, etc.
De sostén.- Tejidos de células especializadas, con paredes muy engrosadas para cumplir
esa misión lo constituyen la colénquima y esclerenquima. También contribuyen la
sostén de las plantas. Los vasos, sobre todos los leñosos.

8. Vasculares o conductores.- Constituyen el sistema circulatorio de la planta. Son el
leño o xilema y el liber o floema.
Protectoras.- Protegen de la perdida de agua y de la acción de
agentes externos son la epidermis y la peridermis.
Secretoras.- Hay tejidos secretores formando parte de la epidermis, como las
glándulas, pelos, o coloraciones
Son compuestos, orgánicos y otros internos, como las células que forman los conductos
resiníferos que contienen radicales cromóforos esto es que producen color y grupo de
anxocromos que forman sales los grupos nitrito (-NO2) y azo (-N = N) son cromóforos.
Los radicales hidroxilo (-OH) y amino (-NH2) son grupos anxocromos. Los cromóforos
imparten la propiedad cromógena al colorante y los anxocromos permiten que el
colorante se una con la fibra o tejido. (Ville, 1988).
2.7. COLORACIONES
Son compuestos, orgánicos que contienen radicales cromóforos esto es que producen
color y grupo de anxocromos que forman sales los grupos nitrito (-NO2) y azo (-N = N)
son cromóforos. Los radicales hidroxilo (-OH) y amino (-NH2) son grupos anxocromos.
Los cromóforos imparten la propiedad cromógena al colorante y los anxocromos
permiten que el colorante se una con la fibra o tejido. (Ville, 1988).
2.7.1. Coloración Bacteriana
Entes de la tinción las bacterias suelen encontrarse en agua o en otro
líquido en un porta objeto limpio y son extendido en una película uniforme y delgada.
Se deja que la película seque en el aire y los microorganismos son fijados por sustancias
químicas o por el calor moderado. (Ville, 1988).
Tinciones: Es un método utilizado para estudiar microorganismos. (No vivos); en estas
tinciones se observa morfología, estructura y agrupamientos de microorganismos.
(Ville, 1988).

9. 2.8TIPOS DE COLORANTES
2.8.1 Colorantes básicos
- Verde de metilo (verde).
- Azul de metileno (azul).
- Pironina G (rojo)
- Azul de toluidina (azul)
- Reaccionan con los grupos de aniónicos de los componentes estúrales que son los
grupos fosfato de los ácidos nucleicos (DNA, RNA) los grupos sulfato de los
glucosaminoglucanos y los grupos carboxilo de las proteínas. (Sherman, 1994)
- Los tres grupos se ionizan y quedan disponibles para la reacción con el colorante
básico por medio de uniones electrostáticas; a un pH ligeramente ácido o neutro.
(Sherman, 1994)
- Hematoxilina no es colorante básico en sentido estricto. (Sherman, 1994)
- Hematoxilina se presta para aquellos procedimientos tintoriales no los que a ella le
sigue la eosina u otros colorantes ácidos. (Sherman, 1994)
- Los colorantes básicos verdaderos no suelen usarse en secuencias en donde el
colorante básico es seguido por un ácido por que la anilina básica tiene a disociarse
del tejido durante los lavados posteriores en soluciones acuosas. (Sherman, 1994)
2.8.2 Colorantes Ácidos
- Fucsina ácida (rojo)
- Azul de anilina (azul)
- Eosina (rojo)
- Naranja G (naranja)
- Se unen primariamente a los componentes estúrales por medio de enlaces
electrostáticos de manera similar pero opuesta a la de los colorantes básicos. (Otto,
1993).

10. - Las anilinas ácidas reaccionan con grupos cationicos, como son los grupos Aminos
ionizados de las proteínas. Aunque el enlace electrostático constituye el principal
factor en la unión primaria del colorante con el tejido. (Otto, 1993).
- En la técnica de MALLORY se usan tres colorantes ácidos, azul de anilina,
fucsina ácida, y naranja G. Estos tiñen con selectividad el colágeno, el citoplasma en
general y los eritrocitos, respectivamente. (Otto, 1993).
- La fucsina ácida también tiñe los núcleos. (Otto, 1993).
- En otras técnicas con anilinas ácidas múltiples se emplea la hematoxilina para
teñir los núcleos primero y luego se aplican los colorantes ácidos con el fin de teñir
selectivamente el citoplasma y las fibras extracelulares. (Otto, 1993).
- Los colorantes básicos también pueden emplearse combinados, pero estas
combinaciones no son de uso tan extendido como las de los colorantes ácidos.
2.9. TINCION GRAM
Es un extendido bacteriano fijado al calor sobre un portaobjetos se trata con el colorante
básico, violeta de cristal. Todos los organismos toman este colorante, luego se cubre el
extendido con la solución yodada de gram. Después de un enjuague con agua y una
decoloración con acetona, se lava el preparado minuciosamente en agua y se contratiñe
con un colorante rojo, generalmente saframina. El preparado teñido se enjuaga entonces
con agua, se seca y se examina bajo el microscopio.
Las bacterias pueden diferenciarse con esta tinción en dos grupos, según lo
implementara a comienzo del siglo XVIII el bacteriólogo danés Cristian Gram.
a). Microorganismos Gram.-positivos
Estos microorganismos se tiñen de color azul o violeta intensa

11. b). Microorganismos Gram.-negativos
Estos microorganismos pierden el cristal violeta y se vuelven a teñir con la
saframina, apareciendo el color rojo.
2.10. NUEVO COLORANTE DE CÉLULAS
La técnica de tinción celular o coloración de las células facilita el estudio de la
composición y estructura microscópica de tejidos orgánicos. El proceso consiste en teñir
una muestra del tejido a observar y cuando éste tiene contacto con el colorante o
pigmento, los núcleos y el citoplasma de las células resaltan, con lo que se simplifica la
localización de cualquier tipo de daño. (Sanboh, 1996).
En la estructura celular de los seres vivos es posible observar y detectar la existencia de
anomalías o patologías, que generalmente se relacionan con enfermedades. Este método
ha permitido a los científicos localizar padecimientos múltiples
III. MATERIALES Y METEDOS.

12. 3.1 Lugar y fecha de ejecución de la práctica.
Esta practica fue realizada el 19 junio y el 26de julio del 2004, en el laboratorio de la
UNAS, que se encuentra ubicado en el distrito de Rupa Rupa, provincia de Leoncio
Prado, Departamento de Huanuco, con una temperatura promedio de 24 C, con una
altitud de 660m.s.n.m.; con una precipitación anual de 3100mm, con una humedad
relativa aproximada de 85% en promedio.
Materiales.
- Mucosa labial.
- Laminas de porta y cubre objetos.
- Eosina.
- Fucsina.
- Cristal violeta.
- Aceite de cedro.
- Lugol.
- Mechero.
- Agua destilada.
- Azul de metileno.
- Microscopio compuesto,
- frotis sanguíneo.
- Agua estancada.
- Lamina porta y cubre objetos.
- Gotero.
- Bisturí.
-Testículo de animal
-Estiletes
-Espermatozoide humano
Equipos
-Microscopio compuesto
Metodología
La práctica fue visual-experimental, se empezó poniendo las muestras en los
portaobjetos, luego se tiñeron dichas muestras para ser observadas en el microscopio.

13. .
3.2. Procedimiento.
a) Observación de la mucosa labial
-
Se usa un solo colorante puede ser acido o base (azul de metileno)
- En este tipo de preparado se uso como muestra la mucosa labial, para observar
en el microscopio su morfología, y para ello se siguió los siguientes pasos.
- Se coloco la mucosa labial en una lámina porta objeto, luego con otra lámina se
hizo un frotis, para extenderla sobre la primera lamina.
- Una vez extendida se hizo una fijación, flameándole sobre el fuego de manera
vaivén, para que la fijación sea uniforme y rápida para matar a las células.
- Después de la fijación pasamos a la coloración de la muestra, en nuestra mesa
usamos el colorante azul de metileno; también se puede usar otros colorantes
como son: Eosina, Fucsina, Cristal violeta, Verde de metileno, etc.
- Después de una pequeña tinción se paso al lavado para quitar el exceso de
colorante y para que se visualice, mejor en el microscopio.
- Luego se observo al microscopio en 10X y 40X, dependiendo de la muestra, para
una mejor visualización de la mucosa labial..
b) Preparado de la cebolla
- Hacer un raspado con bisturí y sacar la catafila de la cebolla de una a quince
centímetros
- Toma una pequeña porción de muestra y colocarla en el centro de un
portaobjeto limpio
- Extender una muestra mediante movimiento concéntrico hasta una capa fina y
uniforme
- Después echar una gota de alcohol con un gotero teñir la extensión fijada
cubriéndola con azul metileno
- Después poner el cubreobjeto y ver en el microscopio 10x y 40x
c). Tejido sanguíneo
- Se limpio el brazo de una persona con alcohol.
- Con una lancetilla se hizo una punción en el brazo, eliminándolo la primera
gota que salga.

14. - Luego se coloco la sangre en la lámina portaobjeto y se coloreo con azul
metileno
- Se lavo y se dejo secar a temperatura de ambiente
- Luego se hecho aceite de cedro y se le puso el cubreobjeto
- Colocar en la platina del microscopio una lámina con frotis sanguíneo teñido
(coloración Wright).
- Observar.
- Se observó que el tejido sanguíneo tenía pequeños círculos y alrededor una
coloración roja continua llamado plasma.
d) Agua estancada
- En este proceso se uso agua estancada o de charco para ello se siguió los
siguientes pasos
- Se saco con un gotero una gota y se puso la muestra, en una lamina de porta
objeto.
- Luego se cubrió la muestra con una lamina de cubre objeto.
- Luego se llevo al microscopio para observar, de manera directa, se observo a
10X y a 40X,
e) Muestra de semen
- Extraer con el gotero una gota de semen
- Colocar la gota del semen en el portaobjeto
- Hacer un frotis y luego agregar solución de salina para que este emulsione
- Colocar el cubreobjeto y observar a 10x y 40x
g). Observación de tejido nervioso
-Colocar la platina del microscopio una lámina montada con corte
Histológico de medula.
- Observar con el objetivo 40x.

15. - Se observó que la forma de la célula era estrellada, habían abundantes células
estrelladas.
h) Tejido muscular estriado
- Colocar en la platina del microscopio una lámina montada un corte histológico
de músculo estriado (lengua).
- Observar
- Se observó que la forma de las células eran rectangulares y alargaciones en
abundante.
- Se observó que las células estaban delimitadas por pequeños espacios, por ende
no estaban plegadas entre sí.
i) Tallo de begonia
j) Modulo de ratón
k) Coloración Doble.-
Se usa dos clases de colorantes (Coloración Gram.).
- Azul de metileno.
- Saframina (color rojo).
- Se usa la misma muestra y procedimiento que el anterior
IV. RESULTADOS

18. V. DISCUSIÓN
Según Ville (1988) y Otto (1993), nos mencionan de que para realizar el tipo de
coloración o preparado en fresco cumple con lo que se realizo en la practica; también
menciona que para el preparado en seco, también cumple con lo realizado a la practica,
solo con la inferencia de algunos colorantes
En la muestra de tejido sanguíneo, según la guía nos dice que debemos usar aceite de
inmersión para el objetivo de 10 x y 100 x. por lo tanto no se usó este material ya que de
ello nos habría permitido una mayor visualización.
Según Vázquez Urday (1992), existe una pequeña comparación de la mucosa labial y de
la laga vista y existe cierta relación, por lo tanto la práctica realizada fue un éxito.
Las laminas montadas, teñidas están lista para la observación, pero nosotros no lo
hemos visualizado como era el proceso de realizar una lamina montada y como se
realiza en tejido y también no pudimos observar tejidos vegetales.
En la observación de células del Lycopersicum esculentum en mayor aumento objetivo
40x no se pudo observar claramente los pigmentos carotenoides.
Las muestras puestas en diferentes microscopios de igual aumento no se pudo observar
la uniformidad de células presentes en un mismo material (Lycopersocum esculentum).

19. VI. CONCLUSIONES
- Se pudo realizar los preparados en fresco y en seco, conforme a lo establecido
por la práctica.
- Se conoció las técnicas más comunes de coloración que son coloración simple
y compuesto.
- Se pudo observar los pigmentos carotenoides
- Se pudo observar la morfología que presenta la célula.
- Se realizo las muestras establecidas (Lycopersicum esculentum y agua
estancada) conforme lo establecido en la practica
-Se observó los diferentes tejidos animales vegetales
-Se observó el tejido muscular estriado con una claridad y se pudo observar la
forma de células que estaban ordenados.

20. VII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
VILLE, C. 1988. Biología. 7ª edic. Edit. Interamericana. S.A. México. 875p.
OTTO, J.Y.A. TOWLE. 1993. Biología Moderna. 11ª edic. Edit McGraw – Hill, S.A
México. 621p. .
SANBOH LEE, H-Y Lee, I-F Lee, C-Y. 1996. Teeng. Ink diffusion in water. Eur. J. .
Phys. 25. (2004) pp. 331-336
SHERMAN, I. Y V. SHERMAN. 1994. Biología. 3ra
edic. Edit. Mc Graw-Hill,.
S.A. México. 704p
GERARD. J. Tortora. Introducción a la Microbiología. Editorial Acribia S.A.
Zaragoza - España. 792p
Botánica general I: Teoría y práctica. Facultad de recursos naturales renovables-UNAS.
Tingo María.
NASON, A. 1968. Biología. 1ra
Edición. Edit. Limusa S.A. México. 726p.
VILLE, C. 1992. Biología. 2da
Edición. Edit. Interamericana. S.A. México. 1404p.